HPLCMS法測定不同產(chǎn)地凍干鮮魚腥草中黃酮類成分的含量

1、HPLCMS法測定不同產(chǎn)地凍干鮮魚腥草中黃酮類成分的含量         09-01-30 15:08:00     編輯：studa20                      作者：孟江,廖華衛(wèi)，董小萍，趙中振    

2、60;    【摘要】  目的 考察不同產(chǎn)地凍干鮮魚腥草黃酮類活性成分的含量。方法 采用HPLCMS法，Alltima C18柱；流動相：體積分數(shù)為0.2%的冰醋酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，梯度洗脫：020 min，5%20% B；2040 min，20%20.5% B；4050 min，20.5%35% B；流速：0.6 mL/min；柱后分流：0.4 mL/min進質譜儀；UV和MS同時檢測。結果 香港產(chǎn)的魚腥草5個黃酮類成分含量都低于四川峨嵋和廣東產(chǎn)地，四川峨嵋產(chǎn)地的蕓香苷、金絲桃苷、槲皮苷含量均高于廣東產(chǎn)的，而廣東產(chǎn)地的槲皮素3OD半乳糖7

3、OD葡萄糖苷和槲皮素3OL鼠李糖7OD葡萄糖苷含量高于四川峨嵋產(chǎn)地。結論 不同產(chǎn)地凍干鮮魚腥草的黃酮類活性成分含量不同。 【關鍵詞】  凍干鮮魚腥草；HPLCMS；黃酮；含量測定Quantitative analysis of flavonoids in freezedried Houttuynia cordata from different habitats by HPLCMSAbstract:Objective  To compare the contents of flavonoids in freezedried Houttuynia cordata from d

4、ifferent habitats. Methods Samples were analyzed by HPLCMS using an Alltima C18 column. The mobile phase consisted of  0.2% acetic acid in water (A) and acetonitrile (B) using a gradient elution program of 20% (B) in 020 min, 20%20.5% (B) in 2040 min, 20.5%35% (B) in 4050 min. The flow rate was

5、 0.6 mL/min. Results The contents of five flavonoids in HongKong were higher than those in Sichuan and Guangdong Province. The contents of rutin, hyperoside and  quercitroside in Sichuan Province were higher than those in Guangdong Province, while the contents of quercetin 3ODgalactopyranosyl7O

6、Dglucopyranoside and quercetin 3OLrhamnopyranosyl7ODglucopyranoside in Guangdong Province were higher than those in Sichuan Province. Conclusion There are great differences in the contents of flavonoids from different habitatsKey words: Houttuynia cordata; HPLCMS; various cultivation locations； quan

7、tity analysis鮮魚腥草為三白草科Saururaceae蕺菜屬植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的新鮮全草1，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的功效。主要用于治療肺膿瘍、痰熱咳嗽、熱痢熱淋、癰瘡腫毒2?，F(xiàn)代藥理研究表明魚腥草中的黃酮類化合物具有抗腫瘤、抗氧化劑、抗誘變和清除自由基等功能3-4。作者曾對鮮魚腥草中黃酮類化合物的分離與鑒定進行了研究5。本文建立HPLCMS法測定凍干鮮魚腥草中黃酮類活性成分的含量方法，并對不同產(chǎn)地黃酮類成分含量進行比較，以期為魚腥草資源及鮮品的合理開發(fā)利用提供理論依據(jù)。1  儀器與試藥1.1  儀器 &

8、#160;  Agilent 1100 LCMS聯(lián)用系統(tǒng)(美國惠普公司)，色譜數(shù)據(jù)處理由Agilent化學工作站完成。MilliQ N，MettlerToledo Group）。1.2  試劑    甲醇(分析純)，冰醋酸、乙腈(色譜純)均由德國 E.Merck 公司提供。    化學對照品：槲皮素3OD半乳糖7OD葡萄糖苷（1），槲皮素3OD鼠李糖7OD葡萄糖苷（2），蕓香苷（3），金絲桃苷（4），槲皮苷（5）均由本實驗室分離純化得到，純度均達到96%以上。1.3  藥材  

9、0; 新鮮魚腥草藥材分別采自四川峨眉，廣東肇慶和香港，采收季節(jié)為8月。經(jīng)香港浸會大學鄔家林教授鑒定為三白草科蕺菜Houttuynia cordata Thunb。    凍干鮮品的處理方法為：新鮮藥材先保存于-20 冰柜中，預凍12  h，然后冷凍干燥48 h。凍干品取出后密閉保存（經(jīng)測定藥材凍干品的含水量約為46%）。干品的處理方法按照中國藥典2005版規(guī)定的常溫干燥法干燥。樣品處理好后，粉碎，過40目篩，保存于4 冰箱備用。2  方法與結果2.1  色譜條件    色譜柱：Alltima C18，5

10、m， 7.5 mm×4.6 mm (保護柱)+4.6 mm×150 mm（分析柱）。柱溫：室溫；流速：0.6 mL/min；柱后分流：0.4 ml/min進質譜儀；流動相：體積分數(shù)為0.2%的冰醋酸溶液為流動相A，乙腈為流動相B，梯度洗脫：020 min，5%20%B；2040 min，20%20.5%B；4050 min，20.5%35%B；檢測條件：UV280 nm，MS同時記錄總離子流（TIC）色譜圖。進樣量：10 L。    質譜條件：離子化方式為電噴霧離子化(ESI)；負離子形式；掃描范圍：130800 amu；干燥氣流速（氮氣）:7

11、 L/min，干燥氣溫度：400 ；霧化氣壓:5 000 V; 聚焦環(huán)電壓: 380 V。    5個對照品的M+1+ (m/z)分別為槲皮素3OD半乳糖7OD葡萄糖苷（1）627，槲皮素3OD鼠李糖7OD葡萄糖苷（2）611，蕓香苷（3）611，金絲桃苷（4）465，槲皮苷（5）449，質譜圖見圖1。A.槲皮素3OD半乳糖7OD葡萄糖苷； B.槲皮素3OD鼠李糖7OD葡萄糖苷； C.蕓香苷； D.金絲桃苷； E.槲皮苷圖1  5個對照品的質譜圖（略）Fig.1  MS chromatograms of five standard substance2.2  標準曲線的制備    分別精密稱取各對照品適量，制成每1 mL含0.2 mg的甲醇溶液。取5個不同濃度的對照品溶液分別進樣10 L，按上述色譜條件測定蜂面積，結果以進