貓延髓內(nèi)臟帶的細(xì)胞構(gòu)筑

1、貓延髓內(nèi)臟帶的細(xì)胞構(gòu)筑    作者：葛煦 ，趙志敬，饒志仁 ，楊志軍    【關(guān)鍵詞】 延髓內(nèi)臟帶 關(guān)鍵詞: 延髓內(nèi)臟帶;細(xì)胞構(gòu)筑;貓    摘 要:目的 證明延髓內(nèi)臟帶（MVZ）在哺乳類存在的普遍性，為進(jìn)一步的機(jī)能探討提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ). 方法 冰凍切片、石蠟切片行Nissl染色，觀察貓MVZ的細(xì)胞構(gòu)筑. 結(jié)果 該帶在貓存在于從錐體交叉至閂以上2.9mm，吻尾長(zhǎng)約7.0mm，腦干橫切面上寬0.42.5mm的弧形帶狀區(qū)，由背內(nèi)側(cè)的迷走孤束復(fù)合體和最后區(qū)、腹外側(cè)的疑核和延髓腹外側(cè)區(qū)

2、，以及位于二者之間的中間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所構(gòu)成. 結(jié)論 貓也有類似大鼠的延髓內(nèi)臟帶結(jié)構(gòu)，在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為一獨(dú)立結(jié)構(gòu)，參與內(nèi)臟活動(dòng)的調(diào)節(jié).    Cytoarchitecture of the medullary visceral zone of the cat    Abstract:AIM To prove the universality of existence of the medullary visceral zone（MVZ）in mammals and provide the morphological ev

3、idence for further physiological studies.METHODS Cytoarchitecture of the MVZ of the cat was ex-amined by using Nissl staining method on the frozen sections and paraffin sections.RESULTS The MVZ was an arc band with width of0.42.5mm on cross section of medulla ob-longata and the rostro-caudal length

4、was about7.0mm from the level of pyramid decussation to the level of2.9mm rostral to the obex，which consisted of dorsomedial vagal-solitary complex and area postrema，ventrolateral medulla and nucleus ambiguous，intermediate reticular formation.CONCLUSION MVZ，as a morphologically independent structure

5、，exists in the cat as well as in the rat，and might be involved in the modulation of the visceral activities.    0 引言    在大鼠延髓中尾段（閂尾側(cè)0.8mm錐體交叉平面至閂吻側(cè)1.8mm）的橫切面上，存在一條從背內(nèi)側(cè)至腹外側(cè)的弧形帶狀區(qū)，寬0.61.3mm，孤束核（NTS）、迷走神經(jīng)背運(yùn)動(dòng)核（dmnX）、疑核（Am）、腹外側(cè)網(wǎng)狀核（VLRt）等位于此區(qū)內(nèi)1 .免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)2 證明，許多神經(jīng)遞質(zhì)或

6、神經(jīng)調(diào)質(zhì)，如乙酰膽堿（Ach）、單胺類（兒茶酚胺類、吲哚胺類）神經(jīng)肽P物質(zhì)（SP）、腦啡肽（ENK）、神經(jīng)肽Y（NPY）、血管活性腸多肽（VIP）、垂體腺苷酸激活肽（PCAP），在大鼠該區(qū)中均有密集分布，且與周圍結(jié)構(gòu)區(qū)別明顯.其他學(xué)者在貓3 、猴4 、人胎兒4 的延髓中也有類似發(fā)現(xiàn).此外，多種機(jī)能實(shí)驗(yàn)，如高血壓、低血壓、失重、心肌缺血、口唇腳掌疼痛刺激、LPS ip等，也在此帶狀區(qū)中觀察到密集的Fos表達(dá).內(nèi)臟、軀體感覺(jué)和免疫刺激在該區(qū)的會(huì)聚，以及神經(jīng)遞質(zhì)的選擇性分布說(shuō)明此帶狀區(qū)與內(nèi)臟感覺(jué)的傳遞和內(nèi)臟活動(dòng)的調(diào)節(jié)關(guān)系密切，為一相對(duì)獨(dú)立的機(jī)能結(jié)構(gòu)區(qū).饒志仁等5 首先發(fā)現(xiàn)并將該區(qū)命名為延髓內(nèi)臟帶（M

7、VZ）.為驗(yàn)證MVZ存在的普遍性，我們從形態(tài)學(xué)的角度對(duì)貓MVZ的核團(tuán)分布和細(xì)胞構(gòu)筑進(jìn)行了探討，為MVZ內(nèi)神經(jīng)元功能和相互聯(lián)系提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ).    1 材料和方法    貓5只（本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），體質(zhì)量1.13.6kg，雌雄不拘，隨機(jī)分為兩組，A組冰凍切片（n=3），B組石蠟包埋后切片（n=2），隨后行常規(guī)Nissl染色.全部動(dòng)物在10g L-1 戊巴比妥鈉麻醉下（40mg kg-1 ）開(kāi)胸，經(jīng)左心室至主動(dòng)脈插管，先用500mL生理鹽水快速?zèng)_洗血液，繼之用含40g L-1 多聚甲醛的0.1mol L-1 磷酸

8、鹽緩沖液（PB，pH7.4）1000mL先快后慢灌流固定.A組延髓取出后置于300g L-1 蔗糖中4至沉底，然后于恒冷箱切片機(jī)內(nèi)切制連續(xù)冠狀切片（片厚30m），間隔4張切片貼片1張.B組延髓后固定過(guò)夜，上行梯度乙醇脫水后，于二甲苯中至組織透明，浸蠟包埋，石蠟切片機(jī)切片（片厚6m），切片方向與A組相同，展片臺(tái)貼片，間隔10張切片貼片1張.干燥后入二甲苯脫蠟.兩組切片均浸入10g L-1 克紫溶液中行Nissl染色1020min，700mL L-1 乙醇分色.常規(guī)脫水透明，DPX封片，光鏡觀察.    2 結(jié)果    

9、;在貓延髓中尾段的冠狀切面上，MVZ呈現(xiàn)為一從背內(nèi)側(cè)至腹外側(cè)延伸的弧形帶狀區(qū)，帶凹向內(nèi)側(cè)，寬0.42.5mm，可分為背內(nèi)側(cè)區(qū)、中間帶和腹外側(cè)區(qū)三部分.吻尾方向上，MVZ見(jiàn)于錐體交叉至閂以上2.9mm的范圍內(nèi)，全長(zhǎng)約7.0mm.根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的相似性，我們又將MVZ分為錐體交叉（Fig1A）、最后區(qū)（Fig1B）、閂（Fig1C）以及閂以上2.9mm（Fig1D）4個(gè)平面加以敘述.    2.1 MVZ的背內(nèi)側(cè)區(qū)（DM）    此部分包括NTS，dmnX，AP.腹側(cè)為舌下神經(jīng)核，胞體巨大，胞內(nèi)可見(jiàn)粗大的Nissl顆粒

10、;背側(cè)為薄束核及薄束、楔束核及楔束、前庭核蔟及第四腦室等結(jié)構(gòu).沿吻尾方向DM中所含核團(tuán)的形態(tài)大小、神經(jīng)元的數(shù)量各不相同.在錐體交叉平面，迷走孤束復(fù)合體范圍較小.左右兩側(cè)的NTS借助聯(lián)合亞核（cNTS）相互連接，細(xì)胞較分散，Nissl顆粒細(xì)小.最后區(qū)平面最典型的特征為富含血管的AP的出現(xiàn)，尾側(cè)AP為一個(gè)整體，位于中央管背側(cè)，接近閂平面時(shí)分為左右兩部分，彼此分離，分別位于第四腦室的左、右外側(cè)壁上，細(xì)胞體積小.迷走孤束復(fù)合體范圍增大，NTS可劃分為內(nèi)側(cè)亞核（mNTS）、膠狀質(zhì)亞核（gNTS）、背側(cè)亞核（dNTS）、腹側(cè)亞核（vNTS）、外側(cè)亞核（lNTS）、束內(nèi)亞核（iNTS）等.閂平面，迷走孤束復(fù)

11、合體向背外側(cè)移動(dòng)，cNTS消失.閂以上平面，迷走孤束復(fù)合體變小，NTS亞核分區(qū)不明顯.核團(tuán)方向由錐體交叉處的水平延伸逐漸過(guò)渡為背內(nèi)-腹外伸展. 圖1 MVZ在四個(gè)不同平面的位置和范圍（虛線示MVZ的范圍） 2.2 MVZ的中間帶（IRt）    IRt的內(nèi)側(cè)尾、吻段分別與延髓腹側(cè)網(wǎng)狀核（Vr）和延髓巨細(xì)胞網(wǎng)狀核（Gi）相接;其外側(cè)分別與延髓背側(cè)網(wǎng)狀核（Dr）和延髓小細(xì)胞網(wǎng)狀核（PCRt）相臨.背內(nèi)側(cè)部與DM相接，過(guò)渡平緩，無(wú)明顯界限.與之相對(duì)應(yīng)，和舌下神經(jīng)核、楔束核等的界限卻十分鮮明.腹外側(cè)部與Am，VLRt相續(xù).IRt在MVZ中表現(xiàn)為一個(gè)彎向內(nèi)側(cè)的弧形

12、帶，細(xì)胞大小介于內(nèi)外側(cè)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)之間，染色較淺，胞體多為梭形或卵圓形，吻尾側(cè)無(wú)明顯區(qū)別.中間帶神經(jīng)元形態(tài)有一顯著特點(diǎn)，即胞體和突起的長(zhǎng)軸多為背內(nèi)-腹外方向排列（Fig2）.而位于其內(nèi)外兩側(cè)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中，細(xì)胞多為無(wú)極性排列，二者差別較明顯.    2.3 MVZ的腹外側(cè)區(qū)（VLM）    內(nèi)側(cè)與網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)及下橄欖核相臨，外側(cè)為三叉神經(jīng)脊束核腹側(cè)部，可分為AM，VLRt，外側(cè)網(wǎng)狀核（LRt）三部分.核團(tuán)大小、形狀和細(xì)胞數(shù)量在吻尾方向上亦呈移形性變化.錐體交叉平面，疑核較小，細(xì)胞散在，Nissl顆粒粗大;LRt范圍較小，可分

13、為內(nèi)側(cè)的巨細(xì)胞部和外側(cè)的小細(xì)胞部?jī)刹糠郑旧^深;VLRt位于二者之間，胞體較小，染色淺.最后區(qū)至閂平面，Am漸增大，細(xì)胞數(shù)量增加;LRt出現(xiàn)三叉神經(jīng)脊束下核，位于小細(xì)胞部和三叉脊束核之間，主要由小細(xì)胞構(gòu)成，VLRt漸增大.閂吻側(cè)2.9mm平面，疑核變小，LRt漸消失，僅余VLRt.VLM中神經(jīng)元形態(tài)多樣，相互間通過(guò)突起密切聯(lián)系.    3 討論    延髓一直被人們視為“基本生命中樞”.心血管活動(dòng)、呼吸、胃腸蠕動(dòng)、排尿生殖、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)以及應(yīng)激反應(yīng)均與之密切相關(guān).Carlton等6 報(bào)道PMNT免疫陽(yáng)性胞體在猴延髓

14、主要分布于NTS，dmnX，背內(nèi)側(cè)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和延髓腹外側(cè)區(qū)，而Legradi7 則發(fā)現(xiàn)PCAP在大鼠延髓中尾段呈背內(nèi)腹外方向弧形帶狀分布.這些結(jié)果都與MVZ的范圍相一致，說(shuō)明MVZ是一個(gè)完整的機(jī)能結(jié)構(gòu)區(qū).    與大鼠相似，貓延髓中尾段也存在MVZ結(jié)構(gòu)，并有其細(xì)胞構(gòu)筑特點(diǎn).主要表現(xiàn)為一條吻尾長(zhǎng)7.0mm，寬0.42.5mm的弧形帶狀區(qū)，與內(nèi)臟感覺(jué)傳導(dǎo)及內(nèi)臟調(diào)控有關(guān)的NTS，dmnX，Am，VLRt等核團(tuán)均位于其中.且DM，IRt，VLM三部分間過(guò)渡平滑，無(wú)明顯界限.IRt中的梭形細(xì)胞沿背內(nèi)-腹外方向伸展，將三部分連為一個(gè)整體.此外，楊志軍等4 在研究猴及人

15、胎兒延髓的化學(xué)神經(jīng)解剖學(xué)時(shí)，也證實(shí)了MVZ在猴及人腦中的存在.這些都表明MVZ的存在具有普遍性.它的提出，一改將延髓各個(gè)核團(tuán)獨(dú)立看待的傳統(tǒng)觀念，而從整體上把握其發(fā)展變化，有益于在更深層次理解認(rèn)識(shí)延髓的生命中樞作用.近年來(lái)，MVZ的概念已得到國(guó)際學(xué)術(shù)界的認(rèn)可8，9 .    電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)10 發(fā)現(xiàn)，呼吸及血壓相關(guān)神經(jīng)元分別定位于MVZ的背內(nèi)側(cè)部及腹外側(cè)部，且它們的突起在MVZ中有廣泛的投射.垂體后葉素引起的急性心肌缺血導(dǎo)致MVZ內(nèi)Fos高表達(dá)11 ，而腦出血12 、模擬失重狀態(tài)下血壓降低13 、-刀照射 14 、免 疫刺激15 等亦可誘導(dǎo)MVZ中Fos數(shù)量

16、的大大增加.這些證據(jù)表明，MVZ不僅參與了復(fù)雜的內(nèi)臟感覺(jué)傳導(dǎo)和內(nèi)臟活動(dòng)調(diào)節(jié)，還與內(nèi)臟軀體感覺(jué)的會(huì)聚密切相關(guān).此外盡管MVZ是作為一個(gè)整體出現(xiàn)的，但不同內(nèi)臟刺激引起的延髓反應(yīng)的部位仍有差別，如免疫刺激引起的Fos表達(dá)多集中在MVZ的內(nèi)側(cè)15 ，而軀體傷害性刺激引起的Fos表達(dá)則多集中于MVZ的外側(cè)9 ，這也正驗(yàn)證了機(jī)體機(jī)能結(jié)構(gòu)有序性的一面.當(dāng)然，這種有序性還需進(jìn)一步的深入研究. 參考文獻(xiàn):    1Chen LW，Rao ZR，Yang ZJ.Cytoarchitecture of medullary vis-ceral zone J.Di-si Juny

17、i Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1998;19（3）:244-248.    2Chen LW，Rao ZR，Yang ZJ.Chemical neuroanatomy of the medullary visceral zone in rat J.Jiepou Xuebao（Acta Anatomica Sinica），1996;27（4）:386-390.    3Ge X，Rao ZR，Yang ZJ.Chemical neuroanatomy of the med

18、ullary visceral zone of the cat J.Di-si Junyi Daxue Xue-bao（J Fourth Mil Med Univ），1999;20（7）:570-574.    4Yang ZJ，Rao ZR，Chen LW，Qiu JY.Chemical neuroanatomy of the medullary visceral zone in the monkey and human fetus J.Zhongguo Zuzhi Huaxue Yu Xibao Huaxue Zazhi（Chin J Histoch

19、em Cytochem），1998;7（4）:376-381.    5Rao ZR，Ju G.Morphology of the medullary visceral zone J.Chin Sci Bull，1999;44（1）:1-10.    6 Carlton SM，Honda CN，Denoroy L.Distribution of phenylethanolamine N-methyl transferase cell bodies，axons and terminals in monkey brai

20、n stem:A immunohistochemical map-ping study J.J Comp Neurol，1989;287（3）:273-285.    7Legradi G，Schioda S，Arimura A.Pituitary adenylate cyclase-activiting polypeptide-like immunoreactivity in autonomic regula-tory areas of the rat medulla oblongata J.Neurosci Lett，1994;176（2）:193-

21、196.    8Yang ZJ，Rao ZR，Ju G.Evidence for the medullary visceral zone as a neural station of neuroimmunomodulation J.Neu-rosci Res，2000;38（3）:237-247.    9Li T，Gao W，Rao ZR.Noxious somatic stimulation-induced ex-pression of Fos-like immunoreactivity in catecho

22、laminergic neu-rons with habenular nucleus projection in the medullary visceral zone of rat J.Brain Res，1998;783（1）:51-56.    10Richerson GR，Getting PA.Medullary respiratory neuron in the guinea pig:Location and firing patterns J.Brain Res，1992;591（1）:79-87.   

23、0;11Gao W，Rao ZR.FOS protein expression of catecholaminergic neurons in medullary visceral zone induced by intravenous injec-tion of vasopressin J.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1998;19（4）:377-380.    12Zhang SX，Su CJ，Lin H，Rao ZR.Fos expression in cate-cholaminergic neurons