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文檔簡介

1、PCR 培訓(xùn)班考試試題一、選擇題(共20 題,每題 2 分)1 、 PCR技術(shù)擴增 DNA,需要的條件是 ( A ) 目的基因引物四種脫氧核苷酸 DNA聚合酶等 mRNA核糖體A、 B 、 C 、 D 、2、鎂離子在 DNA或 RNA體外擴增反應(yīng)的濃度一般為( D )A、0.3-1mmol/L B 、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L3、多重 PCR需要的引物對為( D)A、一對引物B 、半對引物C 、兩對引物 D 、多對引物4、PCR是在引物、模板和4 種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng),其特異性決定因素為(B )A、模板

2、 B、引物 C 、dNTP D 、鎂離子5、在 PCR反應(yīng)中,下列哪項可以引起非靶序列的擴增的擴增( C)A、TaqDNA聚合酶加量過多B 、引物加量過多C、A、B都可D、緩沖液中鎂離子含量過高6、PCR技術(shù)的發(fā)明人是( A)A、Mullis B、史蒂文 . 沙夫 C 、蘭德爾 . 才木7、PCR產(chǎn)物短期存放可在(A )保存。A、4 B 、常溫C、-80 D、高溫8、PCR產(chǎn)物長期儲存最好置于(D )。A、4 B 、常溫C 、16D 、-20 9、PCR的基本反應(yīng)過程包括( A)A、變性、退火、延伸 B 、變性、延伸 C 、變性、退火10、在實際工作中,基因擴增實驗室污染類型包括( D)A、擴

3、增產(chǎn)物的污染 B 、天然基因組 DNA的污染 C 、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明( A)A、1983B、1971C、 1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為(C )A、37B、50-55 C、70-75 D、80-85 13、以下哪種物質(zhì)在 PCR反應(yīng)中不需要( D )A、Taq DNA聚合酶 B、 dNTPs C 、鎂離子 D、 RNA酶14、PCR檢測中,經(jīng)過n 個循環(huán)的擴增,拷貝數(shù)將增加(C )A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因擴增儀最關(guān)鍵的部分是(A、溫度控制系統(tǒng) B 、熒光檢測系統(tǒng)A )C 、軟件系

4、統(tǒng)D 、熱蓋16、以下哪項不是臨床 PCR實驗室設(shè)計的一般原則( A )A、各區(qū)合并 B 、注意風(fēng)向 C 、因地制宜 D 、方便工作17、PCR實驗室一般包括 ( D )A、試劑準(zhǔn)備區(qū) B、標(biāo)本制備區(qū)C 、擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D 、A、B、C 都含18、PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進了檢測細菌和病毒的方法。若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒,你認為可以用 PCR擴增血液中的(D)。A、白細胞 DNA B、病毒蛋白質(zhì) C 、血漿抗體D 、病毒核酸19、如果反應(yīng)體系中加入模板 DNA分子 100 個,則經(jīng)過 30 個循環(huán)后, DNA分子的數(shù)量將達到( D )個。A、100×

5、; 30B 、100×30× 2C、100×302D、100×23020、PCR擴增產(chǎn)物的分析方法主要有(D)A 、凝膠電泳分析法 B 、點雜交法 C 、熒光探針定量 PCR法 D 、A、B、C 都是二、判斷題(共20 題,每題 2 分)1、PCR引物設(shè)計的目的是在擴增特異性和擴增效率間間取得平衡。( )2、在 PCR反應(yīng)中,dATP在 DNA擴增中可以提供能量, 同時作為 DNA合成的原料。( )3、DNA擴增過程未加解旋酶, 可以通過先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵, 使模板 DNA 解旋。( )4、PCR反應(yīng)中,復(fù)性過程中引物與 DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿

6、基互補配對原則完成。( )5、PCR與細胞內(nèi) DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。 ( )6、PCR技術(shù)可用于基因診斷,判斷親緣關(guān)系等。 ( )7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進行。(×)8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細胞中的體液。()9、核酸的復(fù)制是由5 3 方向進行的。()10、配對的堿基總是A 與 T 和 G與 C。()11、HBsAg 轉(zhuǎn)陰性后一段時間才出現(xiàn)可檢測的HBsAb ,此段間隔期稱之為“窗口期”。()12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團Q 基團和報告基團R 基團來標(biāo)記熒光定量PCR的探針。()13、PCR反應(yīng)體系中 Mg2+的作用是促進 Taq DNA 聚合酶活性。()14、

7、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑(如甲醛) , PH、離子強度、 Mg2+等有較大改變都會影響Taq 酶活性。()15、每個子代 DNA 分子中均保留一條親代 DNA 鏈和一條新合成的 DNA 鏈,這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。 ()16、發(fā)生溶血的標(biāo)本對PCR 結(jié)果沒影響。(×)17、“平臺效應(yīng)”是描述PCR 后期循環(huán)產(chǎn)物對數(shù)累積趨于飽和。 ()18、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( reverse transcription-PCR ,RT-PCR)就是在應(yīng)用 PCR方法檢測 RNA病毒時,以 RNA 為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成 cDNA 鏈,然后以 cDNA 為模板進行正常的 PCR 循環(huán)擴增。()19、在定量 PCR 中,72這一步對熒光探針的結(jié)合有影響, 故去除,實際上 55仍可充分延伸,完成擴增復(fù)制。 ()20、PCR 可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測三大方面()三、簡答 ( 共兩題,每題 10 分)1、PCR技術(shù)答: PCR技術(shù)是用一對寡聚核苷酸作為引物(要點1:2 分),通過高溫變性、低溫退火、中溫延伸(要點2:5 分)這一周期的多

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