9、載脂蛋白B標準操作規(guī)程(APOB)

1、 標準操作程序項 目：載脂蛋白B方 法：免疫比濁法前 言為使臨床檢驗操作規(guī)范化，指導檢驗人員嚴格按規(guī)程進行正確的常規(guī)操作，保證檢驗質量，特制定本操作規(guī)程。本規(guī)程的編寫遵循了ISO 15189醫(yī)學實驗室關于質量和能力的特殊要求及WS/T 227-2002 臨床檢驗操作規(guī)程編寫要求的有關規(guī)定并結合產品實際情況制訂，作為本產品的標準操作程序。本規(guī)程從2007年5月2日起實施，每2年復審1次。本規(guī)程由浙江伊利康生物技術有限公司編制。本規(guī)程起草單位：伊利康生物技術有限公司技術部。本規(guī)程主要起草人：蒙 凱、蔡其浩。本規(guī)程首次起草。 目  錄1 檢驗申請32 標本采集與處理33 試劑及成

2、份 44方法原理.45 儀 器.46 校準液及校準模式47質控品與室內質控規(guī)則 48標本檢測步驟.59 結果計算510 操作性能 511試劑使用的注意事項.512參考范圍及醫(yī)學決定水平.513檢驗結果的報告及范圍.514臨床意義.615結果審核分析以及相關項目的聯(lián)系.616威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定. .617有關引用程序與文件.618參考文獻附錄A XXX型全自動生化分析儀參數(shù)載脂蛋白B測定標準操作規(guī)程1.檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清載脂蛋白B（Apolipoprotein B；,縮寫ApoB）測定；組合項目申請：血脂測定，血清載脂蛋白測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。2.標本采集與

3、處理 2.1 受檢者的準備： 采血前2周保持平時的飲食習慣，3d內避免高脂飲食，24h內不飲酒，空腹12h后采集標本。體檢對象抽血前應有兩周的正常狀況記錄。注意有無應用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應做相關記錄，因為樣本中各項目的含量有季節(jié)性變動，為了前后比較應在每年同一季節(jié)檢驗。應囑體檢對象在抽血前24小時內不做劇烈運動。2.2標本采集2.2.1除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的黃

4、色蓋子SST真空采血管，如為急診標本，使用淺綠色蓋子PST試管。 2.2.2檢驗申請單和血標本試管上統(tǒng)一且唯一的標識符。 2.2.3標本采集后，在檢驗申請單上填寫標本采集時間，如為急診標本，加上急查標識。2.2.4標本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負責標本的接收并記錄標本的狀態(tài)，對不合格標本予以拒收。 2.2.5下列標本為不合格標本 2.2.5.1標本量不足：少于0.3ml的全血標本，或少于0.1ml的血清或血漿。 2.2.5.2對反應吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血、黃疸和渾濁的標本。 2.2.5.3對無法確認標本與申請單對應關系的。 2.2.5.4其他如標識涂改、標本試管破裂

5、等。 2.3標本處理 2.3.1接收標本在室溫放置30min45min后離心分離血清或血漿。吸出血清/血漿。處理樣品時要將其當成生物污染品。2.3.2標本保存時間：室溫（1525）下可穩(wěn)定1d，普通冰箱中（28）穩(wěn)定7d。-20可保存數(shù)月；-70至少保存半年；避免反復凍溶。為避免標本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1d的標本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.3.3已完成測試的標本保持完整的識別號，置28冰箱內保存7d。 2.4標本的注意事項 2.4.1不建議采集抗凝標本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。 2.4.2妊娠后期各項血脂都會增高，應在產后或終止哺乳后3個月查血才能反映基本血脂水平。

6、 2.4.3采血前最好停用影響血脂的藥物（如調脂藥、避孕藥、某些降壓藥、激素等）數(shù)天或數(shù)周，否則應記錄用藥情況。2.4.4血清標本出現(xiàn)溶血、脂血、黃疸或抗壞血酸的干擾情況參見抗干擾能力。3.試劑及成份3.1試劑本科使用的載脂蛋白B檢測試劑盒，由浙江伊利康生物技術有限公司生產，產品貨號為:XXX，試劑為液體雙試劑，其組份如下：試劑組成主要成份濃度R1三羥甲基氨基甲烷緩沖液100mmol/L聚乙二醇40g/LR2羊抗人APOB抗體適 量疊氮鈉適 量 3.2試劑盒保存及效期未啟封試劑盒在28保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內穩(wěn)定30d。開蓋后避免污染。當試劑變混濁，或者未開蓋的液

7、體有沉淀時，表明試劑已變質，不能繼續(xù)使用。新打開試劑不宜與已用過的試劑混合在一起,否則易造成試劑穩(wěn)定性下降。3.3試劑盒準備液態(tài)試劑型，即開即用，無特殊準備。4.方法原理4.1測定方法：終點法。4.2原理：樣品中ApoB抗原與試劑中相應的ApoB抗體在溶液中相遇，立即形成抗原抗體復合物，并形成一定濁度。該濁度的高低在一定量抗體存在時與抗原的含量成正比。通過與同樣處理的校準液比較，計算樣品中的ApoB含量。5.儀器XXX型全自動生化分析儀器。6.校準品與校準模式 6.1校準品：使用試劑盒附送的同批號APOB標準液。其中包含APOB的定值。6.2標準類型和校準點數(shù)目：多點非線性模式(Logit-4

8、P或Spline)，5個校準點。6.3校準周期：全點定標：更換試劑批號或出現(xiàn)質控漂移時；儀器進行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后；均須需要全點定標。 7.質控品與室內質控規(guī)則7.1質控品采用由XXX公司提供的兩個不同水平定值質控血清。7.2質控液重建方法：用XXX.00ml蒸餾水溶解，輕輕混勻，20min后即可使用。7.3質控品測定：在每一批標本中測定至少兩個水平質控血清各一次。7.4質控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。7.5如出現(xiàn)失控情況，按室內質控標準操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認重新回復到控制狀態(tài)后開始標本檢測。8.標本檢測步驟 裝

9、載試劑 進行校準進行質控輸入標本檢測項目加載標本標本測定結果復核報告。9.結果計算ApoB（g/L）= CS × AT/AS（g/L）式中：AT以空白管吸光度作對照的樣品管吸光度值AS以空白管吸光度作對照的校準管吸光度值C S 校準液中ApoB的濃度10.操作性能10.1精密度：批內CV 4.0，批間相對極差CV8.0。 10.2 準確度：測量結果在質控血清靶值±2SD范圍內。不同方法學試劑的質控結果之間會存在差異，使用時請確保質控選擇與試劑的方法學保持一致。10.3線性范圍：0.052.00 g/L10.4方法的有限性及干擾因素：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽

10、紅素濃度598mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6 mmol/L時對測定結果有干擾。11.試劑使用的注意事項11.1本試劑僅應用于體外診斷。11.2扔棄廢物應符合當?shù)氐姆ㄒ?guī)要求。12.參考范圍及醫(yī)學決定水平 參考范圍： 0.61.1 g/L。13.檢驗結果的報告及范圍13.1結果的報告13.1.1結果經審核確認準確無誤后發(fā)出報告。13.1.2報告單上標明結果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學信息。13.1.3如收到標本的質量可能對測定結果有影響的也在報告單上指出。13.2報告范圍：血清與試劑用量之比為1:100時，測定上限為

11、2.0g/L。超過此范圍的結果報告時必須附有證明該結果準確可靠的文字說明，并經上級主管技師審核后報告。14.臨床意義 14.1血清中的apoB絕大部分存在于低密度脂蛋白LDL中，在IDL、VLDL和脂蛋白（a）中也各有一分子apoB，故血清apoB水平主要反映LDL水平，與LDL-C呈明顯的正相關。 14.2流行病學與臨床研究結果已確認，高濃度apoB是冠心病的危險因素，且apoB是各項血脂指標中較好的動脈粥樣硬化標志物。 14.3冠心病高apoB血癥的藥物干預實驗結果表明，降低apoB水平可以減少冠心病發(fā)病及促進粥樣斑塊的消退。目前的研究結果表明：冠心病患者一般具有比較低的APO A1水平和比較高的APO B水平。15.結果審核分析以及相關項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負責檢驗結果的審核。15.2審核者認真審核每一個測定結果，對發(fā)出報告結果的可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關項目：審核與血脂其他指標和載脂蛋白等的關系，apoB一般與LDL-C呈正相關。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應分析與查找原因。16.威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定通常無威脅生命的“緊急值”。17.有關引