丙二醇_月桂氮_酮_胰島素傳遞體體外透皮吸收的研究

1、科研簡(jiǎn)報(bào)丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體體外透皮吸收的研究郭偉英,王佩琪,王曉紅,錦州121001)微孔濾膜除菌,得胰島素的傳遞體溶液。取1mL做透皮給藥實(shí)驗(yàn)。2.3 丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體的制備按上述方法制備胰島素傳遞體,體積先稀釋到4mL,超聲處理后,按總體積5mL加入10%丙二醇,再分別加入不同量的月桂氮2.4 丙二醇/月桂氮察酮,最后再由緩沖液稀釋到5mL,取1mL做透皮實(shí)驗(yàn)。酮 胰島素傳遞體的形態(tài)觀盧靜華(錦州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系,遼寧中圖分類號(hào):R943 43 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-2494(2005)03-0231-02胰島素的透皮吸收效率是目前研究的主攻方向,而高效

2、的透皮吸收促滲劑系統(tǒng)是胰島素透皮吸收制劑的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)篩選了多種促滲劑組成了復(fù)合促滲劑胰島素傳遞體系統(tǒng),確立體外最佳滲透系統(tǒng),獲得了較為滿意的效果。1 藥品與儀器昆明種小鼠(體重1822g,本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心);胰島素原料藥(28IU mg-1,江蘇萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司,批號(hào)020602);大豆磷脂酰膽堿(上海金伴藥業(yè)有限公司,批號(hào)20020904);去氧膽酸鈉(上?；瘜W(xué)制劑供應(yīng)站);其他試劑均為分析純。TP-3型智能透皮擴(kuò)散儀(南京新聯(lián)電子設(shè)備有限公司);放射免疫計(jì)數(shù)器(西安核儀器廠FJ-2008 免疫計(jì)數(shù)器);微孔濾膜(0.45 m,大連依利特科學(xué)儀器有限公司);PHS-3C型酸度計(jì)(上

3、海偉業(yè)儀器廠);125I 胰島素放射免疫試劑盒(濰坊開(kāi)發(fā)區(qū)三維生物工程有限公司,3V 20030110版)。JEM-1200EX透射電鏡(日本)。2 實(shí)驗(yàn)方法2 1 胰島素放射免疫分析工作曲線的建立以B/B0% logC做標(biāo)準(zhǔn)曲線。B/B0%為不同濃度的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品存在下125I標(biāo)記胰島素 抗體復(fù)合物的放射計(jì)數(shù)占最大結(jié)合的I標(biāo)記胰島素 抗體復(fù)合物的放射計(jì)數(shù)的百分比。C為胰島素標(biāo)準(zhǔn)品的濃度( U mL-1)。2.2 胰島素傳遞體的制備參照文獻(xiàn)報(bào)道的方法,稱取8mg胰島素,加入352mg大豆磷脂酰膽堿,48mg去氧膽酸鈉,0.4mL乙醇,用0.01mol L-1三乙醇胺 HCl緩沖液(pH=6 2

4、)稀釋到5mL?；鞈乙航?jīng)超聲波粉碎處理后用基金項(xiàng)目:遼寧省教育廳科研項(xiàng)目(9805211048)1253%磷鎢酸鈉,使用前用1mol L-1NaOH調(diào)pH=6.5左右,將其滴加到蠟板上,另將原濃度的樣品滴加到銅網(wǎng)正面,用濾紙吸去過(guò)多的樣品液,負(fù)染色10min,用濾紙吸去過(guò)多的染液,晾干,在透射電鏡下觀察并照相。2.5 丙二醇/月桂氮測(cè)定酮 胰島素傳遞體包封率的用粒徑為100300 m的Sephedex G50于蒸餾水中溶脹后填充為凝膠柱(25cm 0.8cm),在室溫下進(jìn)行色譜,洗脫液為0.01mol L-1三乙醇胺 HCl緩沖液,取1.0mL丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體上柱,緩慢加入保持液

5、面平移,流速0.5mL min-1,每2.0mL收集一次,用放射免疫分析法測(cè)定游離胰島素的量。包封率=(W總-W游)/W總 100%。W總表示胰島素總量,W游表示游離胰島素量。2.6 皮膚制備取小鼠背部皮膚,除毛,剝離脂肪層,生理鹽水浸泡,洗凈,置-200C以下冷凍保存,備用。2.7 透皮給藥實(shí)驗(yàn)方法剪取適當(dāng)形狀大小的備用皮夾于直立式擴(kuò)散池兩室間,面積為(2.5!0.2)cm2,接受池充滿生理鹽水,定時(shí)取樣時(shí)將其全部取出,并補(bǔ)充全量生理鹽水,放射免疫測(cè)濃度。樣品和對(duì)照均平行做6次。3 結(jié)果與討論3.1 丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體的形態(tài)酮 胰島素從電鏡照片可見(jiàn),丙二醇/月桂氮傳遞體的形態(tài)為球

6、形,較為規(guī)整,粒徑基本在200nm以下,見(jiàn)圖1。同法觀察未加丙二醇和月桂氮酮的胰島素傳遞體。大部分也為球形或近球形,只是規(guī)整性稍差,有些粒徑大于200nm。見(jiàn)圖2。作者簡(jiǎn)介:郭偉英,男,教授,研究生導(dǎo)師 Tel:(0416)4673196 E mail:wyinguo40期2005February,40 3加藥物的溶解度,提高藥物的經(jīng)皮滲透量,丙二醇單獨(dú)應(yīng)用效果往往不佳,但如果與其他促進(jìn)劑合用,則可在起到增加藥物及促滲劑溶解度的同時(shí)發(fā)揮協(xié)同作用。因此,本實(shí)驗(yàn)在傳遞體的基礎(chǔ)上又嘗試加入了滲透促進(jìn)劑月桂氮酮和丙二醇。由于高濃度的丙二醇可能對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激和損害,同時(shí),我們也發(fā)現(xiàn)高濃度丙二醇可使傳遞體

7、膜增加溶解性導(dǎo)致藥物圖1 丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體透射電鏡照片的滲漏,因此我們采用10%的丙二醇,改變?cè)鹿鸬臐舛?結(jié)果表明,月桂氮酮在2%8%濃度下促滲作用均很強(qiáng),超過(guò)10%作用下降。3.5 丙二醇,月桂氮酮 胰島素傳遞體穩(wěn)定性觀察固定丙二醇和月桂氮酮濃度分別為10%和6%下,按2 3#方法制備復(fù)合促滲劑 胰島素傳遞體,置于溫度10下,分別于當(dāng)天,第1,2,3,4,5,7天進(jìn)行透皮吸收實(shí)驗(yàn),測(cè)定滲透量。結(jié)果表明,3d內(nèi)8h累積滲透量都可達(dá)到8%9%,3d后滲透量Fig1 Transmissionelectronphotomicrographoftransfersulinsys tem

8、withAzoneand1,2propanediol圖2 胰島素傳遞體透射電鏡照片F(xiàn)ig2 Transmissionelectronphotomicrographoftransfersulinsys tem則明顯降低。這比傳統(tǒng)的胰島素傳遞體需當(dāng)天配制當(dāng)天使用,放置時(shí)間有所延長(zhǎng),可能是該復(fù)合促滲劑系統(tǒng)對(duì)傳遞體的穩(wěn)定性提供了一定的有利條件或促進(jìn)作用。此外,有報(bào)道pH=6.5脂質(zhì)體最穩(wěn)定,本實(shí)驗(yàn)采取的pH=6.2緩沖液也許對(duì)傳遞體的穩(wěn)定酮 胰島素傳性有所幫助。4 結(jié) 論丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體經(jīng)皮給藥系統(tǒng)可進(jìn)一步提高胰島素傳遞體的體外透皮滲透效率,同時(shí),傳遞體的穩(wěn)定性也有所提高。(收稿日期:2

9、003 12 16)3.2 丙二醇/月桂氮定結(jié)果酮 胰島素傳遞體包封率測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,丙二醇/月桂氮遞體的出峰體積為1420mL,游離胰島素的出峰體積為2642mL,游離胰島素柱回收率為(98.95!1.95)%,丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體的包封率為(29.25!2.35)%(n=5),包封率還有待于進(jìn)一步提高,這主要是由于胰島素的親水性所致。3.3 胰島素傳遞體的透皮吸收加入胰島素傳遞體后,胰島素的透皮吸收大為增加,為不加傳遞體的11倍,累積經(jīng)皮滲透量(Q)達(dá)3%以上,給藥23h左右濃度可達(dá)最大,而后趨于平穩(wěn),作用時(shí)間較長(zhǎng),證明了傳遞體在胰島素經(jīng)皮轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用。3.4 丙二醇和月桂氮收的影響月桂氮酮對(duì)胰島素傳遞體透皮吸超濾法測(cè)定龍膽苦苷的血漿蛋白結(jié)合率王長(zhǎng)虹,王崢濤*(上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所,上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心,上海201203)中圖分類號(hào):R917 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-2494(2005)03-0232-03胰島素傳遞體溶液加入了丙二醇和不同濃度的酮,累積經(jīng)皮滲透量Q。比不加促滲劑的胰島素傳遞體增加滲透量23倍。月桂氮酮作為吸收促進(jìn)劑應(yīng)用較為廣泛。丙二醇屬低級(jí)醇類,能溶脹和提取角質(zhì)層中的類脂,增基金項(xiàng)目:上海市科學(xué)技術(shù)發(fā)展基金(02DZ19142)作者簡(jiǎn)介:王長(zhǎng)虹