熒光原位雜交操作規(guī)程_第1頁(yè)
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熒光原位雜交FISH 操作規(guī)程一、主要試劑1變性液 20SSC 4mlddH 2O 8ml甲酰胺28ml 2PBD 液 1000ml 20SSC 中加入1.25gTween20 二、操作流程1 硅化玻片切片烤片60過(guò)夜 2 脫蠟入水斜置切片空干 32SSC 洗滌三次每次5min下簡(jiǎn)寫(xiě)為35 4 0.2M HCl 處理室溫10接步驟3 5 0.25mg/ml 蛋白酶K 處理室溫1530接步驟3 6 切片入20梯度酒精脫水各2空干 7 切片入85變性液8 8 迅速入20梯度酒精脫水各2空干 9雜交液85變性5冰浴10滴加至切片加蓋玻片 37過(guò)夜10 反應(yīng)體系中加入等體積的甲酰胺4510 11 2SSC 洗滌405min2SSC 洗滌375min 12 PBD 洗滌切片32 13滴加異硫氫酸熒光素標(biāo)記的親和素Avidin FITC , 塑膜封 片3730min 14 洗滌同步驟12 15滴加抗親和素Anti Avidin, 3730min 16 重復(fù)步驟121312 17滴加DAP/I(二脒基二苯基吲哚/碘化丙啶 直接封片熒光 鏡檢 上海閃晶分子生物科技有限公司 地址：上海市宜山路7

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