骨髓細(xì)胞DNA含量測(cè)定對(duì)白血病的診斷價(jià)值

1、    骨髓細(xì)胞DNA含量測(cè)定對(duì)白血病的診斷價(jià)值         關(guān)鍵詞白血??；DNA含量；像分析中分類號(hào)R733.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1001-7399(2000)02-0168-01我們應(yīng)用像定量分析技術(shù)觀察了30例白血病細(xì)胞DNA含量的變化及倍體分布規(guī)律，旨在探討其對(duì)白血病的臨床診斷價(jià)值。1材料與方法選取被光鏡及臨床確診的白血病患者的骨髓穿刺涂片標(biāo)本30例。按FAB分型：急性淋巴細(xì)胞型白血病21例，急性非淋巴細(xì)胞型白血病9例。另選10例正常骨髓涂片細(xì)胞作為對(duì)照。涂片分

2、別作HE及DNA染色。采用CMIAS-B像分析儀測(cè)定細(xì)胞核DNA相對(duì)含量及DNA指數(shù)(DI)。依二倍體細(xì)胞DNA上限值，計(jì)算機(jī)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)分析出2C、3C4C、5C和>5C細(xì)胞各自占該例測(cè)量細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)及DNA倍體直方。將5C細(xì)胞作為高倍異倍體細(xì)胞(也稱非整倍體細(xì)胞)。2結(jié)果DI值按正常骨髓細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞型白血病急性非淋巴細(xì)胞型白血病的順序逐漸增高。急性淋巴細(xì)胞型白血病及急性非淋巴細(xì)胞型白血病與正常骨髓細(xì)胞比較差異均有非常顯著性(P<0.01，表1)。表1正常骨髓和30例白血病DI分析結(jié)果類別nDI(<"0 (881 bytes)" src="/m

3、ed/cano/201003/20100318200613352" 12 14>±s)P值正常骨髓涂片101.06±0.05急性淋巴細(xì)胞型白血病211.52±0.36<0.01急性非淋巴細(xì)胞型白血病91.94±0.79     在急性淋巴細(xì)胞型白血病和急性非淋巴細(xì)胞型白血病中，高倍異倍體細(xì)胞明顯增多，5C細(xì)胞分別占69.12%和76.20%；而正常骨髓細(xì)胞主要以2C細(xì)胞為主，2C細(xì)胞占72.96%(表2)。表2DNA倍體率結(jié)果比較類別n細(xì)胞數(shù)(%)2C3C4C5C正常骨髓涂片1072.9627

4、.040.00急性淋巴細(xì)胞型白血病217.6923.1969.12急性非淋巴細(xì)胞型白血病95.4818.3276.20     正常骨髓細(xì)胞DNA倍體直方主峰主要分布在2C處，為低倍體分布模式；而白血病細(xì)胞DNA倍體直方主峰主要位于5C處，且分布較彌散，呈多峰型，為高倍異倍體分布模式。 3討論腫瘤的細(xì)胞遺傳學(xué)已證實(shí)，惡性腫瘤的染色體在數(shù)目和結(jié)構(gòu)上都有很高的畸變率，因而DNA含量必將出現(xiàn)改變，測(cè)定病變細(xì)胞核DNA含量和倍體水平可作為直接反映腫瘤增殖能力的重要生物學(xué)指標(biāo)1。15%80%的惡性白血病有DNA含量的異常，它比其他惡性細(xì)胞標(biāo)記(如細(xì)胞表面抗原)更穩(wěn)

5、定2。以往國內(nèi)外對(duì)白血病DNA含量的研究多采用流式細(xì)胞術(shù)3，4，但應(yīng)用像分析技術(shù)測(cè)定白血病細(xì)胞DNA含量的報(bào)道較少。本文采用該技術(shù)對(duì)30例白血病細(xì)胞DNA含量進(jìn)行了測(cè)定，30例白血病細(xì)胞隨其惡性程度的增加，DNA含量逐漸增高，DNA倍體直方明顯右移，且分布較彌散，高倍異倍體細(xì)胞明顯增多，在急性淋巴細(xì)胞型白血病中，5C細(xì)胞占69.12%，急性非淋巴細(xì)胞型白血病中，5C占76.20%；而正常骨髓細(xì)胞DNA倍體主要以2C細(xì)胞為主，DNA倍體直方主峰主要分布在2C處，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。從而說明對(duì)DNA倍體含量和直方進(jìn)行分析，可以作為鑒別良、惡性血液病的輔助診斷指標(biāo)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道5，惡性腫瘤經(jīng)治療后，其DN

6、A含量發(fā)生變化，用6-巰基嘌呤和氫化潑尼松結(jié)合治療急性白血病后，腫瘤的DNA含量明顯降低。我們對(duì)5例急性淋巴細(xì)胞型白血病化療前、后的DI值進(jìn)行了動(dòng)態(tài)觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化療前5例急性淋巴細(xì)胞型白血病DI均值為1.56±0.25；經(jīng)化療后，DI均值變?yōu)?.04±0.06。結(jié)果證實(shí)，隨著臨床治療的進(jìn)展，白血病細(xì)胞的DI值逐漸降低。說明像分析技術(shù)可以動(dòng)態(tài)觀察白血病患者化療中的變化，所測(cè)定的參數(shù)可作為白血病療效判定的標(biāo)準(zhǔn)之一。作者單位：田玉旺（北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科）韓玲霞（檢驗(yàn)科100700）丁華野（北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科）黃曉南（北京軍區(qū)總醫(yī)院病理科）參考文獻(xiàn)1，Barthel B,

7、Benjamin D, Johannes S et al. Celluar DNA content as a marker of neoplasia in man. Am J Med,1980;69:1952，Watte AJ, Niedermayer W. Aneupldy as a marker of minimal residual disease in leukemia. Cancer Detect Prev,1985;8:3034，Andreeff M. Discrimination of human leukemin subtypes by flow cytometric analysis of cellul