IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)尿有形成分結(jié)果誤判分析及對(duì)策

1、IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)尿有形成分結(jié)果誤判分析及對(duì)策    【摘要】  目的 分析IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)尿有形成分的影響因素，尋找導(dǎo)致其結(jié)果誤判的原因及解決對(duì)策。方法 采用IQ-200尿沉渣分析儀和尿沉渣鏡檢對(duì)600例臨床尿液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)尿中RBC、WBC、CAST、上皮細(xì)胞等檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，分析引起IQ-200尿沉渣分析儀結(jié)果誤判的原因，建立復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果 IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞假陽(yáng)性率為20.9%，白細(xì)胞假陽(yáng)性率為11.3%，上皮細(xì)胞假陽(yáng)性率為8.2%，管型假陽(yáng)性率、假陰性率分別為24.5%、3.5%，結(jié)晶假陽(yáng)性

2、率為8.7%。一定量的結(jié)晶、細(xì)菌和酵母樣菌易被儀器誤報(bào)告為紅細(xì)胞，小圓上皮細(xì)胞、大量細(xì)菌和非晶形結(jié)晶是引起白細(xì)胞誤判的主要原因，黏液絲是引起管型誤判的最主要原因。討論 多種因素可以影響尿沉渣分析儀對(duì)尿液有形成分的檢測(cè)結(jié)果，因此應(yīng)用 IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)尿液有形成分只能作為一種初步篩查方法，當(dāng)尿液病理成分檢測(cè)結(jié)果提示增多，同時(shí)上述干擾成分亦呈陽(yáng)性或增多時(shí)，尿沉渣鏡檢十分重要。 【關(guān)鍵詞】  IQ-200  尿沉渣分析儀  尿沉渣鏡檢  結(jié)果誤判         

3、;               前 言         尿沉渣檢查是檢測(cè)尿液有形成分的主要手段，對(duì)診斷腎臟疾病的病情進(jìn)展和預(yù)后判斷具有極其重要的意義，也是對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病做出診斷和鑒別的主要方法之一。尿沉渣檢查又稱尿有形成分檢查，尿液有形成分檢查經(jīng)典的方法是在顯微鏡下進(jìn)行人工判別。人工鏡檢最大的問(wèn)題是速度慢，在當(dāng)前臨床檢查的尿液標(biāo)本不斷增加的大醫(yī)院，每份尿都進(jìn)行人工鏡檢難以做到。  

4、60;      近些年，隨著檢驗(yàn)技術(shù)的飛速發(fā)展，全自動(dòng)的尿沉渣分析儀逐漸在各大醫(yī)院檢驗(yàn)科中得以應(yīng)用。由于全自動(dòng)尿沉渣分析儀去除了繁瑣的離心方法，具有操作規(guī)范化、檢測(cè)的自動(dòng)化、速度快、重復(fù)性好、一次可以檢測(cè)多個(gè)參數(shù)等優(yōu)點(diǎn)，被臨床廣泛應(yīng)用。我院引進(jìn)了IQ-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀，其采用數(shù)字成像和自動(dòng)粒子識(shí)別（APRTM）軟件來(lái)分類和定量12大類尿液有形成分。其定量報(bào)告包括：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、透明管型、病理管型、鱗狀上皮細(xì)胞、非鱗狀上皮細(xì)胞、細(xì)菌、結(jié)晶和精子等，可同時(shí)給出直觀、清晰的各種有形成分的圖像信息。但由于尿液成分的多樣性、復(fù)雜性以及儀器本身

5、檢測(cè)的局限性，常導(dǎo)致某些檢測(cè)項(xiàng)目存在一定程度的結(jié)果誤判，即假陽(yáng)性、假陰性。如果不予以及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正將會(huì)誤導(dǎo)臨床對(duì)疾病的診斷和治療1。因此，我們將IQ-200尿沉渣分析儀與顯微鏡鏡檢法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比觀察，統(tǒng)計(jì)儀器的誤判率，分析IQ-200檢測(cè)結(jié)果的影響因素，提出結(jié)果誤判的解決對(duì)策，確定復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性具有重要價(jià)值。            1  材料和方法         1.1標(biāo)本來(lái)源 &

6、#160;       標(biāo)本來(lái)自蘇大附二院住院患者，用一次性清潔尿杯采集晨尿共900例。         1.2儀器與試劑         1.2.1儀器、器材         IRIS IQ-200全自動(dòng)尿沉渣分析儀，OLYMPUS顯微鏡，離心機(jī)，尿沉渣離心管，玻片、蓋玻片等。     

7、    1.2.2試劑         IQ-200使用原裝試劑，陽(yáng)性質(zhì)控物，陰性質(zhì)控物，校準(zhǔn)物和調(diào)焦物。         1.3 方法         1.3.1 IQ-200檢測(cè)         IQ-200尿沉渣分析儀按儀器操作規(guī)程要求進(jìn)行操作，每日工作前對(duì)IQ-200分析儀進(jìn)行Fo

8、cus調(diào)焦并同時(shí)運(yùn)行陰性、陽(yáng)性質(zhì)控（儀器配套），質(zhì)控后進(jìn)行標(biāo)本的檢測(cè)（共600例），記錄各有形成分的測(cè)定值。         1.3.2顯微鏡檢測(cè)         取另一管尿液標(biāo)本，以相對(duì)離心力400g離心5min，然后手持離心管4590°吸棄上清液，保留0.2mL沉渣量，輕輕搖勻，用一次性滴管取1滴(20L)置于清潔載玻片上，加蓋玻片，于高倍鏡下連續(xù)計(jì)數(shù)至少10個(gè)視野中紅、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞數(shù)，于低倍鏡下連續(xù)計(jì)數(shù)至少20個(gè)視野中管型數(shù)，分別取其平

9、均值，所有操作在2h內(nèi)完成2。         1.3.3計(jì)算、分析         根據(jù)兩種方法的測(cè)定結(jié)果，統(tǒng)計(jì)IQ-200檢測(cè)各有形成分的假陽(yáng)性率、假陰性率。對(duì)尿沉渣分析儀法與顯微鏡法測(cè)定結(jié)果不符的標(biāo)本，再用顯微鏡復(fù)查尿沉渣，分析影響儀器檢測(cè)尿液有形成分的影響因素，建立IQ-200復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)。         1.3.4 統(tǒng)計(jì)復(fù)檢率     &#

10、160;   另隨即抽取300份住院患者的尿液標(biāo)本，用IQ-200尿沉渣分析儀進(jìn)行分析，根據(jù)以上所建立的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)IQ-200檢測(cè)尿液有形成分的復(fù)檢率。         2  結(jié)果         2.1 參考值范圍            （1）IQ-200由Iris公司提供：RBC 017/l，WBC 028/l

11、，透明管型 01/l，鱗狀上皮028/l，高于此范圍視為陽(yáng)性。（2）尿沉渣鏡檢結(jié)果參照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程2;RBC 03個(gè)/HP，WBC 05個(gè)/HP，管型 0偶見(jiàn)/LP。陽(yáng)性結(jié)果以顯微鏡法為標(biāo)準(zhǔn)，即IQ-200判為陽(yáng)性，而鏡檢為陰性的則認(rèn)為是假陽(yáng)性，IQ-200判為陰性，而鏡檢為陽(yáng)性的則認(rèn)為是假陰性。         2.2 IQ-200與顯微鏡法檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比分析         IQ-200尿沉渣分析法和顯微鏡法對(duì)300例臨床尿液標(biāo)本尿沉渣檢測(cè)結(jié)果

12、見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，IQ-200檢測(cè)各有形成分存在著一定的結(jié)果誤判，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、上皮細(xì)胞的假陽(yáng)性率分別為20.9%、11.3%、24.5%、8.2%。其中管型的假陽(yáng)性率最高，其次為紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞；儀器檢測(cè)的假陰性率較低，但管型的假陰性率最高，容易漏檢。         表1   IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)結(jié)果的誤判率              &

13、#160;   2.3 尿沉渣分析儀假陽(yáng)性、假陰性標(biāo)本的原因分析         IQ-200、UF-1000尿沉渣分析儀假陽(yáng)性、假陰性的標(biāo)本，再用顯微鏡法復(fù)查尿沉渣，結(jié)果見(jiàn)表2。         表2  IQ-200檢測(cè)600例尿液標(biāo)本產(chǎn)生假陽(yáng)性、假陰性的影響因素              

14、60;  2.4 結(jié)果誤判的解決對(duì)策、復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)的建立         IQ-200尿沉渣分析儀：（1）當(dāng)儀器測(cè)定與干化學(xué)檢測(cè)結(jié)果不一致時(shí)，鏡檢解決RBC和WBC的假陽(yáng)性、管型的假陰性問(wèn)題；（2）人工修飾應(yīng)瀏覽所有圖片包括NCLS庫(kù)，當(dāng)出現(xiàn)可疑成分應(yīng)顯微鏡觀察后報(bào)告；（3）對(duì)于未分類成分中有大量異形紅細(xì)胞和草酸鈣結(jié)晶時(shí)定量不準(zhǔn)確，需人工鏡檢；（4）由于管型數(shù)量少，且受拍攝圖片的有限易漏檢，或者只能拍到管型的某個(gè)片段，且形態(tài)不宜辨認(rèn)，因此對(duì)于所有圖片中有類管型的物質(zhì)必須人工鏡檢后報(bào)告；（5）對(duì)于所有圖片中見(jiàn)到非鱗上皮及

15、不能確定的成分時(shí)均應(yīng)鏡檢；（6）對(duì)于高濃度標(biāo)本，由于大量結(jié)晶、雜質(zhì)的干擾導(dǎo)致計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確，應(yīng)鏡檢后以顯微鏡結(jié)果報(bào)告。            2.5 復(fù)檢率         按照以上標(biāo)準(zhǔn)，IQ-200尿沉渣分析儀的復(fù)檢率為27.3%（82/300）。         3  討論      &#

16、160;  目前全自動(dòng)尿沉渣分析儀中美國(guó)的Yellow IRIS尿沉渣分析技術(shù)，IRIS iQ200是其最新型，其主要特點(diǎn)是采用高速頻閃光源（stroboscopic lamp）（24次/s）和電視攝像（video camera）的光學(xué)系統(tǒng)，每個(gè)檢測(cè)標(biāo)本由動(dòng)力學(xué)液流進(jìn)樣到一個(gè)流動(dòng)的標(biāo)本室，在位相差顯微鏡下，由數(shù)碼相機(jī)拍攝 500個(gè)高倍視野照片，再由計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像分析等技術(shù)，對(duì)尿中有形成分的大小、對(duì)比度、形狀、質(zhì)地特征進(jìn)行提取，運(yùn)用形態(tài)識(shí)別軟件和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)進(jìn)行有形成分的分類和定量報(bào)告。每種成分均可在熒光屏上顯示其形態(tài)，并可任意選取可疑的成分進(jìn)行人工復(fù)核，是一種全新的分析技術(shù)，國(guó)外文獻(xiàn)近幾

17、年對(duì)其性能及檢測(cè)結(jié)果均有較高評(píng)價(jià)3-5。IQ-200尿液分析儀檢測(cè)時(shí)尿液無(wú)需離心，可以實(shí)現(xiàn)尿液分析的全自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化，具有高效、簡(jiǎn)便快速、無(wú)攜帶污染和結(jié)果較為準(zhǔn)確的性能。然而，IQ-200尿沉渣分析儀仍存在一些不足。對(duì)雜質(zhì)含量較少的標(biāo)本其分析結(jié)果均比較準(zhǔn)確，但對(duì)含雜質(zhì)多，如結(jié)晶、非結(jié)晶型鹽類多的標(biāo)本，其出現(xiàn)假陽(yáng)性的比例比較高6。IQ-200測(cè)定尿液有形成分時(shí)有諸多的影響因素，現(xiàn)分析如下:         3.1 紅細(xì)胞的檢測(cè)         IQ-200尿

18、沉渣分析儀紅細(xì)胞的假陽(yáng)性通常由脫落的霉菌孢子、圓形草酸鈣結(jié)晶、細(xì)菌引起。特別是尿液放置時(shí)間過(guò)久后，草酸鈣結(jié)晶會(huì)呈啞鈴型，其形態(tài)與RBC形態(tài)很相似，此時(shí)一定要仔細(xì)審核紅細(xì)胞的分類圖像。由于小圓形草酸鈣結(jié)晶、脫落的霉菌孢子、細(xì)菌和酵母菌的大小、對(duì)比度及材質(zhì)和RBC類似，自動(dòng)微粒識(shí)別軟件分析時(shí)得不到準(zhǔn)確的信息，即使是人工審核修飾以后，由于圖像清晰度的限制仍可能導(dǎo)致RBC的結(jié)果假陽(yáng)性。IQ-200檢測(cè)陰性而尿沉渣鏡檢陽(yáng)性的標(biāo)本，由于大量異形RBC會(huì)漏檢到未分類成分中，而引起假陰性。         3.2 白細(xì)胞的檢測(cè)  

19、       IQ-200檢測(cè)時(shí)，腎小管上皮細(xì)胞、裸核EC、鹽類結(jié)晶的析出，精子、滴蟲(chóng)等可造成WBC假性增高。由于白細(xì)胞與腎小管上皮細(xì)胞的大小、核物質(zhì)含量相似，儀器進(jìn)行熒光流式細(xì)胞分析時(shí)難以將其區(qū)分，因此會(huì)影響白細(xì)胞的檢測(cè)。檢測(cè)假陰性的標(biāo)本可能是由于不典型WBC的存在，即使經(jīng)過(guò)人工修飾仍不能辨別;此外低濃度的標(biāo)本，經(jīng)鏡檢發(fā)現(xiàn)有少量的白細(xì)胞團(tuán)和散在的幾個(gè)白細(xì)胞，由于IQ-200拍攝圖片過(guò)少而造成假陰性。            3

20、.3 管型的檢測(cè)         由表1可知，IQ-200檢測(cè)管型的假陽(yáng)性率較假陰性率高。IQ-200會(huì)將尿中黏液絲、包裹的上皮細(xì)胞、類管型物質(zhì)誤認(rèn)為管型，由于儀器對(duì)這些物質(zhì)的形態(tài)大小分析不準(zhǔn)而誤認(rèn)為是管型，引起假陽(yáng)性。IQ-200存在管型的漏檢，因?yàn)閮x器拍攝的圖片數(shù)量有限，對(duì)于低濃度標(biāo)本含管型的數(shù)量少，受拍攝面積的局限就不一定能拍攝到管型成分，或者只能拍到管型的某個(gè)片段，人工修飾時(shí)形態(tài)不宜辨認(rèn)就會(huì)漏檢，所以假陰性較高，本文假陰性率達(dá)3.5%，漏檢率達(dá)32.2%。      

21、   3.4 上皮細(xì)胞的檢測(cè)         IQ-200檢測(cè)上皮細(xì)胞的誤判率較低，該儀器只能分類鱗狀上皮與非鱗狀上皮，對(duì)于異形上皮、腎小管上皮等卻不能分類，由于圖像不清晰導(dǎo)致腎小管上皮、異形上皮難以準(zhǔn)確辨認(rèn)，引起結(jié)果誤判。因此在圖像中見(jiàn)到類小圓的上皮細(xì)胞就應(yīng)該對(duì)NCLS庫(kù)中圖像編輯審核，進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢，以防漏檢。          3.5 結(jié)晶的檢測(cè)       &

22、#160; IQ-200對(duì)于結(jié)晶的檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)可能由于雜質(zhì)的存在，圖像不清晰而誤判為結(jié)晶；其假陰性見(jiàn)于少量的小圓形草酸鈣結(jié)晶被分類到紅細(xì)胞成分中，或者由于拍攝的圖片量有限而漏檢。         綜上所述，盡管IQ-200尿液分析儀能快速、準(zhǔn)確地測(cè)定尿中的多項(xiàng)參數(shù)，但因尿中有形成分種類較多、形態(tài)差異，儀器自身原理的局限性，標(biāo)本的采集、處理等因素均影響尿中有形成分的測(cè)定。IQ-200尿沉渣分析儀優(yōu)點(diǎn)是能給出直觀的尿液有形成分的圖片，一定程度上可以取代顯微鏡觀察，人工還能對(duì)結(jié)果進(jìn)行審核修飾從而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。該儀器主要不足是

23、圖像不夠清晰容易導(dǎo)致形態(tài)的誤認(rèn)；只能拍攝五百?gòu)垐D片容易造成低濃度標(biāo)本的漏檢，因此管型的漏檢率比較高。IQ-200除了有些結(jié)晶和霉菌容易被誤認(rèn)為紅細(xì)胞以外，像腫瘤細(xì)胞、胱氨酸和酪氨酸結(jié)晶、脂肪滴或藥物結(jié)晶以及各類管型的分型等還是需要依靠人工鏡檢3-5。多種因素可以影響尿沉渣分析儀對(duì)尿液有形成分的檢測(cè)結(jié)果，因此應(yīng)用 IQ-200尿沉渣分析儀檢測(cè)尿液有形成分只能作為一種初步篩查方法，當(dāng)尿液病理成分檢測(cè)結(jié)果提示增多，同時(shí)上述干擾成分亦呈陽(yáng)性或增多時(shí)，尿沉渣鏡檢十分重要。我們應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本文提出的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，從而減少誤判率。目前任何自動(dòng)分析儀器仍不能完全替代人工鏡檢。            參 考 文 獻(xiàn)          1姜文玲.尿液自動(dòng)分析.尿沉渣及尿常規(guī)鏡檢對(duì)尿中有形成分的對(duì)比分析J.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)志.2002,12(10):49-53.         2葉應(yīng)嫵，王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程