尿核基質(zhì)蛋白22在膀胱移行細(xì)胞癌診斷及術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用

1、    尿核基質(zhì)蛋白22在膀胱移行細(xì)胞癌診斷及術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用            作者：蘇大軍，宋力時(shí)間：2007-11-22 11:37:00                     【摘要】  目的： 探討尿核基質(zhì)蛋白

2、22（NMP22）檢測(cè)對(duì)膀胱移行細(xì)胞癌診斷及術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值. 方法：采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)45例膀胱癌、30例非膀胱癌泌尿系疾病、20例健康志愿者尿中NMP22水平并進(jìn)行比較. 結(jié)果： 膀胱癌組NMP22平均為38.7×103U/L高于非膀胱癌泌尿系疾病組（8.7×103U/L）和健康志愿者組（7.1×103U/L, P<0.05)，復(fù)發(fā)病例（30.7×103U/L）高于未復(fù)發(fā)患者(6.1×103U/L, P<0.05). 結(jié)論： 尿NMP22對(duì)膀胱移行細(xì)胞癌具有高靈敏度和無創(chuàng)傷性，是檢測(cè)膀胱移行細(xì)胞癌的有效標(biāo)志

3、物，并可用于判斷術(shù)后有無復(fù)發(fā). 【關(guān)鍵詞】  尿核基質(zhì)蛋白22；癌，移行細(xì)胞；膀胱腫瘤；診斷；復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)0引言膀胱移行細(xì)胞癌是我國泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其中70%為淺表腫瘤，且有易復(fù)發(fā)的特征，5 a內(nèi)復(fù)發(fā)的可能性為50%70%，大多數(shù)腫瘤在1 a復(fù)發(fā)1. 早期發(fā)現(xiàn)，定期術(shù)后隨訪，檢測(cè)復(fù)發(fā)是膀胱腫瘤成功治療的關(guān)鍵. 目前臨床上常用的診斷及復(fù)查方法為膀胱鏡檢查、尿脫落細(xì)胞檢查及B超檢查. 膀胱鏡檢查具有侵襲性，許多患者難以接受；尿脫落細(xì)胞檢查及B超檢查雖非侵入性，但靈敏度不高2. 近年來隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，尿核基質(zhì)蛋白22（NMP22）成為臨床研究較多的指標(biāo)之一3. 我們對(duì)自膀胱移行

4、細(xì)胞癌患者進(jìn)行了尿NMP22的檢查，并進(jìn)行手術(shù)后的復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)的動(dòng)態(tài)觀察.1對(duì)象和方法1.1對(duì)象200401/200512收治膀胱癌組患者45例，男35例，女10例；年齡2981（平均55.7）歲. 其中行膀胱部分切除術(shù)12例，TURBT32例. 膀胱癌術(shù)后隨診3 mo2 a. 術(shù)后20例復(fù)發(fā)，25例未復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率44.4%. 均有血尿，行膀胱鏡檢+活檢診斷為膀胱移行細(xì)胞癌，所有復(fù)發(fā)病例均經(jīng)病理證實(shí). 非膀胱癌泌尿系疾病30例，男16例，女14例. 年齡3085（平均47.8）歲. 其中尿石癥10例，泌尿系感染（單純）6例，前列腺增生伴出血8例，前列腺癌1例，腎癌4例，尿道狹窄1例. 健康志愿

5、者20例，男13例，女7例，年齡3569（平均53.5）歲.1.2方法所有尿樣均在行膀胱鏡檢、導(dǎo)尿等腔內(nèi)操作前于08:0012:00一次性收集. 標(biāo)本分2份： 1份查NMP22，1份行尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查. 查NMP22的尿樣標(biāo)本收集后避光保存，立即轉(zhuǎn)入含有防腐劑的尿樣收集瓶500 r/min離心15 min后取上清夜轉(zhuǎn)入塑料試管中320保存. 實(shí)驗(yàn) NMP22試劑盒由美國Matritech公司生產(chǎn)，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作，采用雙抗體夾層免疫酶標(biāo)法用酶標(biāo)儀測(cè)得吸光度，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，取得樣品NMP22的測(cè)定值（單位U/L）.    統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：參照文獻(xiàn)以10.0

6、5;103 U/L為NMP22檢測(cè)臨界值，所有數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件包處理. 尿NMP22各組之間比較采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn). P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.2結(jié)果2.1NMP22含量45例膀胱癌NMP22為7.9×103158.0×103U/L，非膀胱癌泌尿系疾病MP22為2.1×10317.1×103U/L，健康志愿者NMP22為1.4×10310.3×103U/L，膀胱癌患者尿中NMP22濃度高于非膀胱癌泌尿系疾病和健康志愿者（P<0.05）.2.2NMP22與尿脫落細(xì)胞學(xué)以10.0×103U/L為NMP22檢

7、測(cè)陽性臨界值，NMP22與尿脫落細(xì)胞學(xué)診斷膀胱癌的敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值有一定差異（表1），NMP22敏感性高于尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查（P<0.01），但特異性稍低.表1NMP22和尿脫落細(xì)胞學(xué)敏感性、特異性、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值（略）2.3NMP22在膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)中的檢測(cè)45例膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)20例患者尿 NMP22中位數(shù)為30.7×103U/L，25例未復(fù)發(fā)患者尿 NMP22中位數(shù)為6.1×103U/L（P<0.01）. 以10.0×103U/L為最適臨界值，復(fù)發(fā)病例NMP2210.0×103U/L者15例，NMP22<

8、10.0×103U/L者5例；未復(fù)發(fā)病例NMP2210.0×103U/L者5例，NMP22<10.0×103U/L者20例，敏感性75%，特異性80.0%.3討論核基質(zhì)蛋白（nuclear matrix protein, NMP）是核基質(zhì)的重要組成部分，有多種結(jié)構(gòu)和功能，并且有較強(qiáng)的組織器官特異性4，最早于由Berezney等5報(bào)道. NMP22屬于核基質(zhì)蛋白的一種，又稱為有絲分裂器蛋白. 是構(gòu)成細(xì)胞核網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的一個(gè)組成部分，與DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、RNA合成及基因表達(dá)的調(diào)控有關(guān). NMP22為核有絲分裂裝置蛋白（NuMAP）的一個(gè)亞單位. NuMAP與有絲分

9、裂期間紡錘體的形成有關(guān)，其主要供能為在細(xì)胞有絲分裂末期使染色體正確、均勻地分配到子代細(xì)胞6. 因此，NMP22與細(xì)胞增殖活躍的組織關(guān)系密切. 據(jù)報(bào)道，體外培養(yǎng)的膀胱癌細(xì)胞內(nèi)NMP22濃度較正常膀胱移行上皮細(xì)胞至少增加25倍7. 由于膀胱癌中NMP22在細(xì)胞凋亡中以可溶性復(fù)合物片斷形式隨尿排出，而這個(gè)被釋放的片斷可通過雙單抗酶聯(lián)免疫法予以測(cè)定，檢測(cè)限達(dá)到pg級(jí)，這使得尿的NMP22成為膀胱腫瘤的特有標(biāo)記物. Carpinito等8報(bào)道移行細(xì)胞癌患者組尿中NMP22濃度明顯高于良性泌尿外科組和健康人群，初步認(rèn)為NMP22作為一種篩選膀胱癌的瘤標(biāo)在臨床上是可行的. 我們用同樣的方法檢測(cè)了45例膀胱癌

10、患者尿中NMP22濃度為38.7×103U/L，明顯高于非膀胱癌泌尿系疾病組的8.7×103U/L和正常對(duì)照組的7.1×103U/L，結(jié)果再次證明NMP22是尿液中診斷膀胱移行細(xì)胞癌的良好標(biāo)記物. SanchezCarbayo等9對(duì)187例血尿患者進(jìn)行NMP22檢測(cè)，以10.0×103U/L為最適臨界值診斷膀胱癌的敏感性、特異性分別為61.2%和89.9%，而細(xì)胞學(xué)檢查敏感性為35.4%. 本組NMP22檢測(cè)采用10.0×103U/L為最適臨界值敏感性與文獻(xiàn)報(bào)道相似. 本研究表明NMP22具有較高的敏感性，明顯高于尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查，可作為膀胱鏡

11、檢查的輔助手段，對(duì)膀胱癌患者的篩查十分有利. 但其特異性偏低，其原因可能為某些感染、結(jié)石、異物、創(chuàng)傷等可引起尿路上皮損傷，引起細(xì)胞破損導(dǎo)致尿中NMP22升高，并且以10.0×103U/L這一標(biāo)準(zhǔn)為臨界值亦使特異性有所下降. 因此相對(duì)于傳統(tǒng)的尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查，尿NMP22的檢查具有較高敏感性，但缺點(diǎn)是特異性不如尿細(xì)胞學(xué)檢查，因此在臨床上NMP22檢測(cè)不可能完全替代細(xì)胞學(xué)檢查，但可彌補(bǔ)細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)膀胱癌敏感性過低的不足，二者結(jié)合可提高臨床早期診斷膀胱腫瘤的能力. 目前比較公認(rèn)的臨界值是Soloway等10提出的10.0×103U/L，以這一臨界值監(jiān)測(cè)膀胱腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)敏感性為70

12、.0%，特異性為79.0%. 本試驗(yàn)以10.0×103U/L為臨界值檢測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)結(jié)果與Soloway等10的試驗(yàn)結(jié)果接近. 本研究結(jié)果顯示尿NMP22可作為膀胱腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的常規(guī)監(jiān)測(cè)方法. 根據(jù)膀胱腫瘤術(shù)后高復(fù)發(fā)特點(diǎn)，NMP22>10.0×103U/L者應(yīng)及時(shí)膀胱鏡檢查，避免漏診. NMP22<10.0×103U/L者可協(xié)同B超及尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查密切觀察隨診. 我們研究表明，與尿脫落細(xì)胞學(xué)和膀胱鏡檢查相比尿NMP22測(cè)定具有較高的敏感性和預(yù)測(cè)性，又是定量非侵入性的檢查方法，因此我們認(rèn)為檢測(cè)尿液中NMP22含量可作為膀胱癌診斷及監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)的較好指標(biāo)之一.

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