強(qiáng)直性脊柱炎B27檢測(cè)試劑盒(磁性酶聯(lián)免疫法)

1、強(qiáng)直性脊柱炎B27檢測(cè)試劑盒（磁性酶聯(lián)免疫法）使用說(shuō)明書【產(chǎn)品名稱】通用名稱：強(qiáng)直性脊柱炎B27檢測(cè)試劑盒（磁性酶聯(lián)免疫法）英文名稱：HLA-B27 Assay Kit （Enzyme-Linked Immunomagnetic ）【包裝規(guī)格】 48人份/盒、96人份/盒【簡(jiǎn) 介】 HLA-B27與強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）強(qiáng)相關(guān)。AS在我國(guó)的患病率為0.3%，其中90%-98%的患者HLA-B27陽(yáng)性。所以，B27的檢測(cè)對(duì)排除AS的診斷有輔助作用。本試劑盒提供含有抗HLA-B27抗體的磁性微珠，特異性針對(duì)人白細(xì)胞抗原B27?！绢A(yù)期用途】 本產(chǎn)品主要用于

2、強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）的輔助診斷。【檢驗(yàn)原理】 病人全血樣本（EDTA-K3抗凝）與HRP標(biāo)記的抗細(xì)胞抗體同時(shí)加入含有HLA-B27磁性微珠的微孔中。若白細(xì)胞上有HLA-B27抗原，經(jīng)短時(shí)孵育，磁性微珠與白細(xì)胞結(jié)合，此時(shí)HRP標(biāo)記的抗體連接到細(xì)胞上。洗滌后，微珠、細(xì)胞和酶被保留下來(lái)。若白細(xì)胞上沒(méi)有B27抗原，通過(guò)洗滌，細(xì)胞和酶均被清洗掉。之后加入酶底物液顯色，450nm讀取光密度值?！局饕M成成份】 本試劑盒包含以下10種成分：組 份含 量48人份/盒96人份/盒HLA-B27抗體包被板條6×8孔12×8孔酶稀釋液1×3

3、 ml1×6 mlHRP標(biāo)記的抗細(xì)胞抗體1×60 ul1×120 ul20倍濃縮洗液1×10 ml1×20 ml底物液A1×3 ml1×6 ml底物液B1×3 ml1×6 ml終止液1×3 ml1×6 ml陰性對(duì)照品1×300 ul1×600 ul陽(yáng)性對(duì)照品1×300 ul1×600 ul微孔板板架1個(gè)1個(gè)【儲(chǔ)存條件及有效期】 試劑盒儲(chǔ)存于2-8可保存一年?！具m用儀器】 適用于任何半自動(dòng)、全自動(dòng)免疫分析儀器及手工操作?！緲颖疽蟆?本產(chǎn)品僅使用E

4、DTA-K3抗凝的全血標(biāo)本，已污染的、已溶血的、已凝結(jié)的血液樣本可能引起不一致的測(cè)試結(jié)果，應(yīng)避免使用。不能立即使用的全血樣本應(yīng)靜置保存于2-8ºC，不超過(guò)3天使用?！玖硗庑枰牟牧虾驮O(shè)備】1. EDTA-K3抗凝管2. 可調(diào)微量移液槍0.5-10ul，20-200ul，八道加樣槍和槍頭3. 磁架4. 振蕩器5. 計(jì)時(shí)器 6. 能夠測(cè)量波長(zhǎng)為450nm的微孔板讀數(shù)儀7. 去離子水【檢驗(yàn)方法】1. 取出所有試劑和血樣，平衡至室溫。2. 病人樣本編號(hào)，將病人樣本、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照安排到微孔中。并記錄。3. 取出所需微孔，其余放回密封袋中封好，放入冰箱。4. 按照需使用量將HRP標(biāo)記的抗細(xì)

5、胞抗體與酶稀釋液按1：50比例稀釋（體積比）。5. 充分混勻后，加50ul每一微孔中，輕拍架板，使磁性微珠分散。6. 將抗凝管（EDTA-K3）顛倒混勻數(shù)次， 按記錄單中的安排每孔加入50ul血樣。用加樣槍吹打5-6次，使磁性微珠和血液樣本充分混勻。各加50uL陽(yáng)性、陰性對(duì)照到相應(yīng)微孔中。7. 于室溫下反應(yīng)10分鐘，期間輕拍框架邊緣數(shù)次，使試劑和樣本維持均勻混合。8. 反應(yīng)時(shí)制備洗液，底物液。洗滌按每孔1500ul，用去離子水20倍稀釋。9. 將板架放于磁板上2分鐘，用加樣槍吸出孔內(nèi)液體。10. 每孔加入250ul洗液。利用加入時(shí)的沖擊力使磁性微珠分散，如發(fā)現(xiàn)有聚團(tuán)，請(qǐng)用加樣槍吹散。將板架放于

6、磁板上，2分鐘。11. 用加樣槍在遠(yuǎn)離磁珠的微孔側(cè)壁吸棄上清。取下并輕拍板架，使磁性微珠分散。12. 重復(fù)10、11步驟共5-6次。13. 每孔加入底物A液、B液的混合液100uL。輕拍框架邊緣使之充分混合后，室溫，避光，15分鐘觀察結(jié)果。14. 如需測(cè)量OD值，每孔加入50uL終止液。15. 將板架放于磁板上，使磁性微珠吸于板條側(cè)壁。16. 輕輕取下板架，在波長(zhǎng)450nm下，讀取吸光度值（OD）。【參考值（參考范圍）】1. 陽(yáng)性：樣本 OD值0.7。2. 陰性：樣本 OD值0.4?！緳z驗(yàn)結(jié)果的解釋】OD值在0.4-0.7，請(qǐng)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，必要時(shí)用其它方法驗(yàn)證?！井a(chǎn)品性能指標(biāo)】批內(nèi)差異：15%批間

7、差異：15準(zhǔn)確性：檢測(cè)陰性和陽(yáng)性對(duì)照吸光度，測(cè)試結(jié)果應(yīng)在其允許范圍內(nèi)【注意事項(xiàng)】1. 酶和酶稀釋液在加入微孔前一定要充分混勻。2. 把帶有標(biāo)本的板架放在磁板上時(shí)，一定要等散開(kāi)的磁珠被磁板吸附到底部，然后再抽出清洗液。3. 抽出清洗液后，把板架從磁板上取下，用手輕輕撞擊板架邊緣數(shù)次，看到磁珠散開(kāi)后，再加入清洗液，每次清洗皆如此重復(fù)。4. 建議初次操作該試劑的實(shí)驗(yàn)人員，每次實(shí)驗(yàn)清洗次數(shù)不少于8次。5. 如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果需讀取OD值，微孔內(nèi)的磁珠一定要放到磁板上聚集后再放置酶標(biāo)儀上，否則，微孔內(nèi)散開(kāi)的磁珠會(huì)影響酶標(biāo)儀讀取的結(jié)果?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1. 王娜，劉玉珂等，HLAB27檢測(cè)對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎的診斷價(jià)值，

8、河南科技大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版，2006年 24卷 4期，起止頁(yè)碼：271-2722. Neumuller J. Schwartz DW, DauberE. Mayr WR: Evluation of four monoclonal antibodies against HLA-B27 typing with flow cytometry(FC): comparison with the classic icrolymphocytotoxic test (MLCT). Cytometry,1996 Sep 15:26(3):209-153. .Lingenfelter B, fuller TC, Ha

9、rtung L, Hunter J. Wittwer C: HLA-B27 scrcening by flow cytometry. Cytometry. 1995 Jun15:22(2):146-94. Reydnlds WM. Evans PR. Lanc AC. Howell WM. Wilson PJ. Wong R. Smith JL: Autonmated HLA-B27 testing using the FACSPrep/FACScan system. Cytometry 1994 Jun 15. 18(2):109-155. Hulstaert F, Albrecht J.

10、Hannet I. Lancaster P, Buchner L, Kunz J, Falkenrodt A, Tongio M, De Keyser F, veys EM. Noens L, Mir N, Costello C. Becker R, Strauss k: An optimized method for routine HLA-B27 screening using flow cytometry. Cytometry. 1994 Mar 15; 18(1):21-96. Janssen WC, Rouwen JA, Hoffmann JJ: Improved flow cytometric method for HLA-B27 typing . Ann-Clin-Biochem. 1992 Nov;29(Pt6):663-7【全球銷售及售后服務(wù)企業(yè)】廣州固康生物科技有限公司醫(yī)療器械經(jīng)營(yíng)許可證號(hào)：粵012726地址：廣州科學(xué)城攬?jiān)侣?0號(hào)科技創(chuàng)新基地D區(qū)第三層302-304單元郵編：510663電話真-mail: info【生產(chǎn)企業(yè)】深圳市康乃