技能點19實驗室常用儀器的使用

1、技能點19 實驗室常用儀器的使用 實訓(xùn)目標(biāo) 了解微生物實驗室重要儀器的構(gòu)造，熟悉儀器的使用方法和注意事項。 儀器及材料 電熱恒溫培養(yǎng)箱、電熱干燥箱、高壓蒸汽滅菌器、電冰箱、電動離心機、電熱恒溫水浴箱。 方法與步驟一、電熱恒溫培養(yǎng)箱 電熱恒溫培養(yǎng)箱又稱溫箱，主要由箱體、電熱絲、溫度調(diào)節(jié)器等構(gòu)成(實圖1)。溫箱主要用于細(xì)菌的培養(yǎng)、某些血清學(xué)試驗及有關(guān)器皿的干燥。 1使用方法 插上電源插頭，開啟電源開關(guān)，綠色指示燈明亮，表明電源接通。然后把溫控儀上的調(diào)節(jié)旋鈕旋至所需溫度刻度處，此時紅燈亮，箱內(nèi)開始升溫，待紅綠指示燈交替發(fā)亮?xí)r，工作室內(nèi)溫度達到設(shè)定狀態(tài)，進入正常工作。（應(yīng)注意，近幾年銷售的溫箱有的紅燈

2、亮表示通電及恒溫，綠燈亮表示升溫。） 2注意事項 (1)溫箱必須放置于干燥及平穩(wěn)處。 (2)使用時，隨時注意溫度計的指示溫度是否與所需溫度相同。 (3)除了取放培養(yǎng)物開啟箱門外，盡量減少開啟次數(shù)，以免影響恒溫。(4)工作室內(nèi)隔板放置試驗材料不宜過重、過密，以防影響熱空氣對流。底板為散熱板，其上切勿直接放置試驗物品。(5)培養(yǎng)箱內(nèi)禁止放入易揮發(fā)性物品，以免發(fā)生爆炸事故。二、電熱干燥箱 電熱干燥箱又稱干熱滅菌箱，其構(gòu)造和使用方法與溫箱相似，但所用溫度較高。主要用于玻璃器皿和金屬制品的干熱滅菌。滅菌時箱內(nèi)放置物品要留空隙，保持熱空氣流動，以利徹底滅菌。常用滅菌溫度160，維持12h。滅菌時，關(guān)門加熱

3、應(yīng)開啟箱頂上的活塞通氣孔，使冷空氣排出，待升至60時，將活塞關(guān)閉，為了避免玻璃器皿炸裂，滅菌后箱內(nèi)溫度降至60時，才能開啟箱門取物品。若僅需達到干燥目的，可一直開啟活塞通氣孔，溫度只需60左右即可。 滅菌過程中如遇溫度突然升高，箱內(nèi)冒煙，應(yīng)立即切斷電源，關(guān)閉排氣小孔，箱門四周用濕毛巾堵塞，杜絕氧氣進入，火則自熄。三、高壓蒸汽滅菌器高壓蒸汽滅菌器(實圖2)是應(yīng)用最廣、效率最高的滅菌器，有手提式、立式、橫臥式三種，其構(gòu)造和工作原理基本相同。高壓蒸汽滅菌器為一鍋爐狀的雙層金屬圓筒，外筒盛水，內(nèi)筒有一活動金屬隔板，隔板有許多小孔，使蒸汽流通。滅菌器上方或前方有金屬厚蓋，蓋上有壓力表、安全閥和放氣閥。蓋

4、的邊緣附有螺旋，借以緊閉滅菌器，使蒸汽不能外溢。 在標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下，水的沸點是100，這個溫度能殺死一般細(xì)菌的繁殖體，要殺死芽孢則需要很長時間。如果人為地加大壓力，則水的沸點可以升高。因高壓蒸汽滅菌器是一個密閉的容器，因此，加熱時蒸汽不能外溢，所以鍋內(nèi)壓力不斷增大，使水的沸點超過121。 1使用方法 (1)加適量水于滅菌器外筒內(nèi)，使水面略低于支架，將滅菌物品包扎好放入內(nèi)筒篩板上。(2)器蓋蓋上時，必須將器蓋腹側(cè)的放氣軟管插入消毒內(nèi)筒的管架中，然后對稱扭緊六個螺栓，檢查安全閥、放氣閥是否處于良好的可使用狀態(tài)，并關(guān)閉安全閥，打開放氣閥。通電后，待水蒸汽從放氣閥均勻冒出時，表示鍋內(nèi)冷空氣已排盡，然后關(guān)

5、閉放氣閥繼續(xù)加熱，待滅菌器內(nèi)壓力升至約0.105MPa(121.3),維持2030min（如果高壓鍋不是全自動的，則需要通過控制電源維持）,即可達到滅菌的目的。滅菌時，鍋內(nèi)冷空氣應(yīng)完全排凈，滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時，壓力與溫度的關(guān)系見實表-1。實表-1 滅菌鍋留有不同分量空氣時，壓力與溫度的關(guān)系壓力數(shù)全部空氣排出時的溫度/2/3空氣排出時的溫度/1/2空氣排出時的溫度/1/3空氣排出時的溫度/空氣全不排出時的溫度/MPakg/cm21b/in20.030.355108.81009490720.070.7010115.6109105100900.101.0515121.311511210910

6、00.141.4020126.21211181151090.171.7025130.01261241211150.212.1030134.6130128126121 (3)滅菌完畢，停止加熱，待壓力表指針自動降至零位，才能打開放氣閥開蓋取物。 (4)高壓蒸汽滅菌器滅菌之后，可放出器內(nèi)之水，并擦干凈。 2注意事項 (1)螺栓必須對稱均勻旋緊，以免漏氣。 (2)內(nèi)筒中需滅菌的物品，不可堆壓過緊，以免妨礙蒸汽流通，影響滅菌效果。 (3)凡能耐熱和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、敷料、病原微生物等都可應(yīng)用此法滅菌。(4)為了達到徹底滅菌的目的，滅菌時間和壓力必須準(zhǔn)確可靠，操作人員不能擅自離開。(5)注

7、意安全，在高壓滅菌密封液體時，如果壓力驟降，可能造成物品內(nèi)外壓力不平衡而炸裂或液體噴出。 四、電冰箱 電冰箱主要由箱體、制冷系統(tǒng)、自動控制系統(tǒng)和附件四大部分構(gòu)成。實驗室中常用以保存培養(yǎng)基、藥敏片、病料以及菌種、疫苗、診斷液等生物制品。其使用方法及注意事項如下： 1電冰箱應(yīng)放置在干燥通風(fēng)處，避免日光照射，遠(yuǎn)離熱源，離墻10cm以上，以保證對流，利于散熱。 2電冰箱電源的電壓一般為220V，如不符合，須另裝穩(wěn)壓器穩(wěn)壓。 3通電檢查箱內(nèi)照明燈是否明亮，機器是否運轉(zhuǎn)。 4使用時，于冷凍室放置冰盒盛水3/4處，將溫度調(diào)節(jié)器調(diào)至一定刻度(冷凍室0以下，冷藏室溫度410)。 5調(diào)節(jié)溫度時不可一次調(diào)得過低，以

8、免凍壞箱內(nèi)物品。應(yīng)作第二次、第三次調(diào)整。 6冷凍室冰霜較厚時，按化霜按鈕或切斷電路，進行化霜，融化后清潔整理。 7箱內(nèi)存放物品不宜過擠，以利冷空氣對流，使箱內(nèi)溫度均勻。 8箱內(nèi)保持清潔干燥，如有霉菌生長，斷電后取出物品，經(jīng)福爾馬林熏蒸消毒后，方可使用。 五、電動離心機 實驗室常用電動離心機沉淀細(xì)菌、血細(xì)胞、蟲卵和分離血清等，用的較多的是低速離心機，轉(zhuǎn)速可達4000r/min。常用的為傾角電動離心機，其中管孔有一定傾斜角度，使沉淀物迅速下沉。上口有蓋，確保安全，前下方裝有電源開關(guān)和速度調(diào)節(jié)器，可以調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。其使用方法及注意事項如下： 1. 先將盛有材料的兩個離心管及套管放天平上平衡，然后對稱放入

9、離心機中,若分離材料為一管,則對側(cè)離心管放入等量的其他液體。 2. 將蓋蓋好,接通電路,慢慢旋轉(zhuǎn)速度調(diào)節(jié)器到所需刻度，保持一定的速度,達到所需的時間(一般轉(zhuǎn)速2000r/min,維持520min),將調(diào)節(jié)器慢慢旋回“0”處,停止轉(zhuǎn)動方可揭蓋取出離心管。 3. 離心時如有雜音或離心機震動，立即停止使用，進行檢查。六、電熱恒溫水浴箱 為鍍鎳的銅或不銹鋼制成的水浴箱，電熱管在箱內(nèi)夾水中間，加熱快耗電省，箱前有“電源”和“加熱”指示燈（一紅一綠），并裝有溫度調(diào)節(jié)器，自37100可以調(diào)節(jié)定溫,箱側(cè)有一水籠頭,供放水用。水浴箱主要用于蒸餾、干燥、濃縮、溫漬化學(xué)藥品及血清學(xué)試驗用。 使用時必須先加水于箱內(nèi)，通電后電源指示燈(綠燈)即亮，再順時針方向旋轉(zhuǎn)溫度調(diào)節(jié)器，綠燈滅，使加熱指示燈(紅燈)亮，即接通內(nèi)部電熱絲，使之加溫。如水溫達到所需溫度，再逆時針方向微微調(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)器，使紅綠指示燈忽亮忽滅，經(jīng)3060min觀察，水溫恒定不變即達