分子可能考的問(wèn)答題

1、1.原核和真核DNA復(fù)制過(guò)程有哪些共同點(diǎn)？與原核相比，真核DNA復(fù)制有哪些特殊之處。1、相同點(diǎn)：半保留復(fù)制；半不連續(xù)合成；有復(fù)制的起始點(diǎn)與方向；都需要DNA聚合酶，解旋酶等在原核生物中復(fù)制起始點(diǎn)常位于染色體的一個(gè)特定部位，即只有一個(gè)起始點(diǎn)。真核生物的染色體在幾個(gè)特定部位進(jìn)行DNA復(fù)制，有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。2、與原核生物DNA的復(fù)制特點(diǎn)相比，真核生物DNA的復(fù)制特點(diǎn)（即不同處)有：(1）真核生物中復(fù)制進(jìn)行的速度約為50個(gè)核苷酸秒，僅為原核生物的110，但真核生物染色體上DNA復(fù)制起始點(diǎn)有多個(gè)，因此可以從幾個(gè)起始點(diǎn)上同時(shí)進(jìn)行復(fù)制。（2）真核生物DNA復(fù)制過(guò)程中的引物及岡崎片段的長(zhǎng)度均小于原核生物。真核

2、長(zhǎng)約100-200個(gè)核苷酸，原核長(zhǎng)約1000-2000個(gè)。（3）真核生物DNA的復(fù)制有DNA聚合酶及多種蛋白質(zhì)因子參與，DNA聚合酶也有多種類(lèi)型。其中DNA Pol及DNA Pol在細(xì)胞核內(nèi)DNA的復(fù)制中起主要作用。DNAPol催化前導(dǎo)鏈及隨從鏈的合成，PCNA參與其作用。真核和原核生物在DNA復(fù)制起始的比較相似性：第一步都是起始子蛋白對(duì)復(fù)制器的識(shí)別。通過(guò)起始子蛋白以及解旋酶裝載器將解旋酶募集到復(fù)制器上。解旋酶產(chǎn)生單鏈DNA區(qū)域，作為RNA引物合成的模板。復(fù)制的調(diào)節(jié)機(jī)制完全不同：復(fù)制調(diào)節(jié)中的最嚴(yán)謹(jǐn)步驟不同，細(xì)菌是DnaA起始蛋白與DNA的結(jié)合；真核生物是MCM解旋酶和DNA的最初結(jié)合上 ?？焖?/p>

3、分化的細(xì)菌在一次細(xì)胞周期中可以多次起始復(fù)制。2.細(xì)胞中參與DNA修復(fù)的聚合酶為什么比參與DNA復(fù)制的聚合酶要多，你如何看待這一事實(shí)。DNA突變有哪些類(lèi)型，討論一下突變可能產(chǎn)生哪些遺傳效應(yīng)。作為一種能決定生命狀態(tài)存在和延續(xù)的生物大分子，DNA在遺傳過(guò)程中必需保持高度的精確性和完整性，而且這種性能是細(xì)胞中任何一種分子都無(wú)法與之相比的。盡管如此，在DNA復(fù)制過(guò)程中，仍難免會(huì)存在少量未被校正的差錯(cuò)。DNA 復(fù)制具有不準(zhǔn)確性（ 10-7 的出錯(cuò)率）。此外，DNA還會(huì)受到各種物理和化學(xué)因素的損傷。這些差錯(cuò)和損傷如果不被修復(fù)，將會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的細(xì)胞學(xué)后果，因?yàn)镈NA分子本身是無(wú)法替代的，一個(gè)細(xì)胞通常只有1-2套

4、基因組DNA，而不像蛋白質(zhì)和RNA分子那樣，能利用DNA中的遺傳信息不斷產(chǎn)生新的分子來(lái)替代受損傷的分子。所以維護(hù)DNA遺傳信息的穩(wěn)定性對(duì)生物細(xì)胞來(lái)說(shuō)是極其重要的。在漫長(zhǎng)的生命進(jìn)化過(guò)程中，生物體不僅演化出能糾正復(fù)制錯(cuò)誤的“校正”系統(tǒng)，而且在細(xì)胞中形成了多種多樣的DNA修復(fù)系統(tǒng)，能對(duì)各種DNA的損傷進(jìn)行修復(fù)，以保持每個(gè)世代遺傳信息的穩(wěn)定性。而且這些修復(fù)系統(tǒng)都離不開(kāi)修復(fù)DNA損傷的酶，所以細(xì)胞中含有大量用于修復(fù)DNA損傷的酶。極少數(shù)不能修復(fù)的DNA損傷將會(huì)導(dǎo)致基因的突變，其中一部分突變將有利于物種的進(jìn)化，而另一部分突變將導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生變異和死亡。（1）點(diǎn)突變的類(lèi)型：1）同義突變（cosense mut

5、ation）：由于遺傳密碼具有簡(jiǎn)并性，當(dāng)點(diǎn)突變發(fā)生在密碼子第3位堿基，大多不會(huì)影響摻進(jìn)蛋白質(zhì)中的氨基酸。同義突變不會(huì)造成蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的變化，但可形成基因多態(tài)性。 除此之外，如果突變發(fā)生在DNA的非編碼區(qū)或非調(diào)節(jié)區(qū)，則該突變也將是沉默突變，而且群體中許多沉默及非致死突變的積累會(huì)產(chǎn)生遺傳多態(tài)性。2）錯(cuò)義突變（missense mutation）：當(dāng)點(diǎn)突變發(fā)生在密碼子的第1或第2位堿基上，導(dǎo)致某密碼子改變，編碼另一種氨基酸。 錯(cuò)義突變有可導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的變化，也可能僅有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化，而對(duì)其功能影響甚微。 錯(cuò)義突變的效應(yīng)取決于突變的氨基酸是否位于蛋白結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵部位。3）無(wú)義突變（no

6、nsense mutation）：指基因編碼序列中堿基置換使氨基酸密碼子轉(zhuǎn)變?yōu)榻K止密碼子的突變。 這種突變導(dǎo)致mRNA的轉(zhuǎn)錄及翻譯過(guò)程提前終止，產(chǎn)生比原肽鏈截短并缺失了C末端的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。 無(wú)義突變常對(duì)編碼蛋白質(zhì)的活性有嚴(yán)重影響，容易產(chǎn)生突變體表型。4）終止密碼子突變（mutation of termination codon）：指基因的終止密碼子發(fā)生堿基置換轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N氨基酸密碼子，致使轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程不能正常終止，結(jié)果形成一種比原肽鏈延長(zhǎng)的異常蛋白質(zhì)的突變。5）起始密碼子突變（mutation of initiation codon）：指基因中起始密碼子被置換，導(dǎo)致不能正常轉(zhuǎn)錄和翻譯，無(wú)表達(dá)產(chǎn)

7、物的突變。大部分發(fā)生在基因編碼序列中的點(diǎn)突變，可引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變，但一般不影響基因的表達(dá)，少數(shù)情況下可伴有基因表達(dá)水平的降低。（2） 缺失和插入突變：（deletion and insertion mutation） 指在DNA編碼區(qū)內(nèi)丟失或增加3或3的倍數(shù)個(gè)核苷酸而導(dǎo)致的基因突變。這類(lèi)突變的效應(yīng)是使基因翻譯至突變處時(shí)丟失或增加1個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸，而突變位點(diǎn)后的氨基酸序列并無(wú)改變。如果插入或缺失涉及的核苷酸數(shù)目不等于3的倍數(shù)，將會(huì)造成突變點(diǎn)后全部密碼子閱讀框架移位，進(jìn)而翻譯產(chǎn)生的氨基酸序列與正常蛋白質(zhì)完全不同，或者使肽鏈合成提前終止或延長(zhǎng)，產(chǎn)生無(wú)正常功能的異常蛋白質(zhì)，這種基因突變稱(chēng)為移碼突變。

8、移碼突變的結(jié)果是所翻譯出的蛋白質(zhì)序列從突變點(diǎn)起至C末端都完全被改變了，若此突變發(fā)生在有重要功能的基因中，常可導(dǎo)致生物個(gè)體死亡（3）染色體結(jié)構(gòu)的整體重排(染色體畸變)，可能導(dǎo)致個(gè)體死亡。3.真核基因和原核基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程有什么主要差別？真核mRNA前體的加工事件有哪些？這些加工對(duì)mRNA功能的體現(xiàn)有什么意義？同：都遵從堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則，都需要酶的參與，需要模板需要底物，都是要 經(jīng)過(guò)起始、延伸、轉(zhuǎn)錄、終止階段。異：（1、轉(zhuǎn)錄后的加工修飾不同：真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄時(shí)，是一并轉(zhuǎn)錄編碼區(qū)外顯子內(nèi)含子。因?yàn)閮?nèi)含子所以非編碼序列，所以在形成成熟mRNA時(shí)內(nèi)含子被剪切掉。而原核細(xì)胞是沒(méi)有內(nèi)含子的所以不用別剪切。（2、

9、場(chǎng)所不同，真核細(xì)胞是在細(xì)胞核或者是含DNA的細(xì)胞器內(nèi)轉(zhuǎn)錄的。而原核細(xì)胞是在擬核或者細(xì)胞質(zhì)（質(zhì)粒）轉(zhuǎn)錄的。 （3、原核生物基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯通常是在同一時(shí)間同一地點(diǎn)進(jìn)行的，即在轉(zhuǎn)錄未完成之前翻譯便開(kāi)始進(jìn)行。真核生物基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯具有時(shí)間和空間上的分隔。（4、原核生物一種RNA聚合酶，真核生物三種DNA聚合酶。（5、轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子的差別原核生物 肉 factors，而真核生物是TFI factors TFII factors TFIII factors （6、轉(zhuǎn)錄相關(guān)蛋白的差別（7、原核生物轉(zhuǎn)錄起始原件很少，有肉因子和保守序列。5端加帽，3加尾真核mRNA5'帽子和3'pol(A)的

10、功能5端加帽的作用n 保護(hù)mRNA，防止被降解。n 提高翻譯效率。n 有助于核輸出。n 5端帽子有助于第一個(gè)內(nèi)含子剪接3加尾的作用 與轉(zhuǎn)錄的終止有關(guān)。 多聚腺苷酸化相關(guān)酶的招募與聚合酶的CTD有關(guān) 。 當(dāng)加尾信號(hào)轉(zhuǎn)錄的時(shí)候會(huì)引發(fā)： 對(duì)mRNA的切割；添加poly-A；終止轉(zhuǎn)錄 保護(hù)mRNA：延長(zhǎng)其壽命（半衰期） 提高mRNA的翻譯能力4.與翻譯相關(guān)的結(jié)構(gòu)有哪些？試論述這些結(jié)構(gòu)在翻譯中承擔(dān)的作用。試比較原核和真核蛋白質(zhì)合成機(jī)制的異同點(diǎn)（答案不確定僅供參考）核糖體和氨酰tRNA合成酶在翻譯中的主要作用是什么？答：（1）核糖體只識(shí)別tRNA，而不識(shí)別攜帶的氨基酸。rRNA負(fù)責(zé)核糖體的關(guān)鍵功能：（1肽

11、基轉(zhuǎn)移酶中心完全由rRNA組成。（2 負(fù)載tRNA的反密碼環(huán)和mRNA的密碼子都是和16S rRNA發(fā)生作用，而不與小亞基的核糖體蛋白相互作用。（3 大多數(shù)的核糖體蛋白位于核糖體的周邊。（4 核糖體的核心功能結(jié)構(gòu)域完全或幾乎完全由RNA組成。 現(xiàn)代核糖體很可能是從完全由RNA組成的原始蛋白質(zhì)合成機(jī)器進(jìn)化而來(lái)。mRNA進(jìn)出的通道在核糖體的小亞基上：mRNA通過(guò)小亞基的兩個(gè)狹窄的通道進(jìn)出解碼中心，進(jìn)入通道的寬度只允許不配對(duì)的mRNA通過(guò)。mRNA進(jìn)出通道之間還有一個(gè)tRNA可進(jìn)入的區(qū)域，此處毗鄰的密碼子能夠分別和A、P位點(diǎn)的tRNA結(jié)合。但是兩個(gè)密碼子之間存在明顯的扭結(jié)（kink），有利于維持正確

12、的可讀框。多肽的出口在大亞基上：大亞基上新生多肽離開(kāi)的通道限制了多肽鏈的折疊，僅能形成螺旋。新生多肽的最終三維結(jié)構(gòu)只能在其從核糖體釋放后形成。每一個(gè)tRNA結(jié)合位點(diǎn)都在大亞基和小亞基的交界面形成。結(jié)合的tRNA可以橫跨大亞基的肽基轉(zhuǎn)移酶中心和小亞基的解碼中心。（2）氨酰tRNA的形成是非常精確的：氨酰tRNA合成酶通過(guò)兩步催化形成高能?；?，即氨基酸的腺苷?；蛅RNA負(fù)載。高能鍵的水解釋放的能量推動(dòng)了氨基酸之間肽鍵的形成。氨酰tRNA合成酶識(shí)別同工tRNA的獨(dú)特結(jié)構(gòu)保證正確負(fù)載特異性的表現(xiàn)：（1）識(shí)別針對(duì)特定氨基酸的一組 tRNA; （2）使tRNA正確負(fù)載。tRNA分子上的受體臂和反密碼環(huán)

13、是決定特異性的關(guān)鍵因素。1） 對(duì)于在體積、構(gòu)型和化學(xué)組成上有較大差異的氨基酸來(lái)說(shuō)，氨酰tRNA合成酶通過(guò)側(cè)鏈的特征區(qū)分不同的氨基酸。2） 而對(duì)于側(cè)鏈結(jié)構(gòu)差別不明顯的氨基酸，提高氨酰tRNA合成酶保真度的一個(gè)普遍機(jī)制是對(duì)負(fù)載反應(yīng)的產(chǎn)物進(jìn)行校對(duì)。氨酰tRNA合成酶通過(guò)兩個(gè)活性位點(diǎn)完成高精度的負(fù)載： 催化口袋：氨基酸的腺苷?；庉嬁诖簩?duì)腺苷?；漠a(chǎn)物進(jìn)行校對(duì)3） 對(duì)于Ile和Val在側(cè)鏈上只有一個(gè)亞甲基差異的氨基酸來(lái)說(shuō)，異亮氨酰tRNA合成酶可以對(duì)Val進(jìn)行兩次篩選，保證負(fù)載tRNA的正確。4） tRNA負(fù)載氨基酸離開(kāi)氨酰RNA合成酶以后，就再?zèng)]有其他的鑒別過(guò)程保證tRNA的正確負(fù)載。核糖體利用多

14、種機(jī)制選擇排斥錯(cuò)誤的氨酰tRNA 機(jī)制1：密碼子和反密碼子的正確配對(duì) 機(jī)制2：正確配對(duì)使結(jié)合氨酰tRNA的EF-Tu與因子結(jié)合中心相互作用。 機(jī)制3：正確配對(duì)的氨酰tRNA在肽鍵形成中旋轉(zhuǎn)入位，保證與核糖體的結(jié)合。翻譯機(jī)器主要是依靠氨酰tRNA合成酶的高保真度來(lái)保證每個(gè)mRNA的正確解碼。原核生物和真核生物在翻譯起始的異同答：相同點(diǎn)：都需要tRNA識(shí)別氨基酸并裝載；都需要核糖體大小亞基解離；都需要起始因子,延伸因子，終止因子。不同點(diǎn)：（1起始tRNA攜帶的氨基酸不同，原核是甲酰甲硫氨酸，而真核是甲硫氨酸；（2原核中甲酰甲硫氨酸識(shí)別的起始密碼子有三種AUG/GUG/UUG，而甲硫氨酸只識(shí)別AUG

15、； （3原核中不需要通過(guò)掃描尋找起始密碼子，而真核中需要掃描尋找起始密碼子；（4原核中需要SD序列幫助mRNA與小亞基結(jié)合，而真核沒(méi)有SD序列，需要5端帽子引導(dǎo)兩者結(jié)合；（5原核中起始因子比較簡(jiǎn)單，種類(lèi)少（IF1，IF2，IF3），而真核中起始因子要復(fù)雜的多，種類(lèi)也多（e IF1，e IF2，e IF1A，e IF3等）；（6原核中起始的控制是通過(guò)mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)影響起始和反饋控制，而真核中通過(guò)起始因子磷酸化來(lái)控制。（7原核核糖體為30s和50s,真核為40s和60s.延伸過(guò)程：兩者相似,都包括進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、脫落、移位，都需要延伸因子和GTP，只是延伸因子不同。終止過(guò)程也相似：都需要釋放因子，釋

16、放因子種類(lèi)不同: I類(lèi)釋放因子： 識(shí)別終止密碼，催化多肽鏈從P位點(diǎn)的tRNA中水解釋放出來(lái)。 原核細(xì)胞的：RF1,RF2 真核細(xì)胞的：eRF1 II類(lèi)釋放因子： 在多肽鏈釋放后刺激I類(lèi)因子從核糖體解離出來(lái)。 原核細(xì)胞的：RF3 真核細(xì)胞的：eRF35.你如何理解轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是最為經(jīng)濟(jì)、靈活，又是最為重要、復(fù)雜的調(diào)控？轉(zhuǎn)錄調(diào)控的基本要素有哪些？6. PCR技術(shù)的最顯著優(yōu)勢(shì)是什么？其原理和體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程有何聯(lián)系？ 優(yōu)勢(shì)：該技術(shù)在體外模擬細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程，在數(shù)小時(shí)內(nèi)就可以將極微量的目的基因擴(kuò)增數(shù)十萬(wàn)倍，使目的基因得到大量富集。列表說(shuō)明：PCR技術(shù) DNA生物復(fù)制環(huán)境 體外復(fù)制，

17、 加熱，90攝氏度左右 體內(nèi)，溫和的環(huán)境模板 DNA單鏈，全部解旋 DNA單鏈，邊解旋邊復(fù)制原料 4種脫氧核糖核苷酸 4種脫氧核糖核苷酸酶 主要是TaqDNA聚合酶 DNA解旋酶，DNA聚合酶等引物 需要人工合成的引物 自己合成引物成分步驟 變性95-退火55-延伸75 解旋-起始-延伸-結(jié)束原則 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則7.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)組學(xué)研究的一般流程。蛋白質(zhì)組學(xué)一詞，源于蛋白質(zhì)（protein）與 基因組學(xué)（genomics）兩個(gè)詞的組合，意指“一種基因組所表達(dá)的全套蛋白質(zhì)”，即包括一種細(xì)胞乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究旨在闡明生物體全部蛋白質(zhì)的表達(dá)模式及功能模

18、式，鑒定蛋白質(zhì)的存在方式（修飾形式），研究其結(jié)構(gòu)、功能、定量和相互作用等。一般將蛋白質(zhì)組學(xué)分為結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué)和功能蛋白質(zhì)組學(xué)兩個(gè)部分：結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué)的任務(wù)主要確定的是蛋白質(zhì)的氨基酸序列、三維結(jié)構(gòu)，以及蛋白質(zhì)種類(lèi)和數(shù)量；功能蛋白質(zhì)組學(xué)主要解決的是蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位以及蛋白質(zhì)相互作用問(wèn)題。蛋白質(zhì)完整流程： 1. 蛋白質(zhì)檢體制備（Sample preparation）首先我們將器官或組織打碎，將細(xì)胞打破，加入適當(dāng)?shù)脑噭〉糜治龅牡鞍踪|(zhì)檢體。2、樣本標(biāo)記3、二維電泳分析（Two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）即雙向凝膠電泳技術(shù)分離，首先將欲分析的蛋白檢

19、體以等電點(diǎn)聚焦電泳（Isoelectic focusing , IEF）將蛋白質(zhì)依等電點(diǎn)（pI）進(jìn)行第一維分離，續(xù)將此分離結(jié)果使用SDS-PAGE（依蛋白質(zhì)分子量進(jìn)行第二維分離；由于經(jīng)過(guò)兩種原理分離蛋白質(zhì)分子，因此能夠分析非常微量的蛋白質(zhì)。4、電泳膠片染色及影像掃描（Computer scanning）執(zhí)行電泳后的SDS-PAGE膠片以適當(dāng)?shù)娜玖先旧?，放入高解析度的掃描器中獲得影像。SDS-PAGE膠片也可以轉(zhuǎn)印（Blotting）至Nitrocellulose或PVDF膜上，以免疫化學(xué)方法偵測(cè)出特定的蛋白質(zhì)。5. 影像分析（Image analysis）經(jīng)由高效能影像掃描，再以電腦軟體分析，

20、可以偵測(cè)出蛋白點(diǎn)；也可以與正常或已知的蛋白質(zhì)模組對(duì)照，分析彼此的差異點(diǎn)，選出有意義的標(biāo)的蛋白質(zhì)（Target protein）進(jìn)行探討。6. 蛋白質(zhì)點(diǎn)切割（Spots excision）藉由儀器以機(jī)械手臂將欲探討或有意義的標(biāo)的蛋白質(zhì)點(diǎn)切割下來(lái)，將此蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行蛋白質(zhì)鑑定及胺基酸序列分析。7. 蛋白質(zhì)鑒定（Protein identification）質(zhì)譜儀分析（Mass spectrometry）蛋白質(zhì)鑒定以Edman degradation為基礎(chǔ)，來(lái)定出蛋白質(zhì)的胺基酸組成份。一般可以定出10至40個(gè)胺基酸序列。8. DNA克隆的一般流程是什么？怎樣篩選和鑒定重組DNA分子？流程：1

21、.目的基因的獲得，有化學(xué)合成法、PCR擴(kuò)增法、文庫(kù)篩選法。2. 重組DNA分子的構(gòu)建3.載體和目的基因的連接4.重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞5.含有重組DNA分子的受體細(xì)胞的篩選和鑒定重組DNA分子的篩選和鑒定，一般是根據(jù)重組子的某些特征進(jìn)行的，例如：載體的特征、目的基因序列或者產(chǎn)物的特征等。以載體特征進(jìn)行篩選，在篩選細(xì)菌轉(zhuǎn)化子時(shí)，常使用抗藥性標(biāo)記和-半乳糖苷酶顯色（藍(lán)白斑篩選），其中抗藥性篩選確定的是含有載體的細(xì)菌轉(zhuǎn)化子，藍(lán)白斑篩選則可以確定細(xì)菌轉(zhuǎn)化子中是否為重組載體。以目的基因序列進(jìn)行篩選，重組DNA分子由于在載體上插入了外源DNA片段，與載體分子量相比會(huì)增加。所以一般篩選流程是提取重組DN

22、A，經(jīng)酶切、電泳分離，通過(guò)與線性化的載體比較大小，就可以初步確定重組DNA分子中是否插入的外源DNA是預(yù)期大小的片段，最終通過(guò)DNA測(cè)序確認(rèn)。以目的基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行篩選，如果重組DNA在宿主細(xì)胞中表達(dá)為蛋白質(zhì)，可以根據(jù)免疫化學(xué)的方法篩選出含有重組DNA的菌落或噬菌斑。免疫篩選法的程序和菌落雜交類(lèi)似，但是使用的不是核酸探針，而是抗體來(lái)鑒定含有抗原編碼基因的菌落或噬菌斑。9.基因功能鑒定的策略是怎樣的？目前常用的基因功能鑒定技術(shù)有哪些，原理是什么？策略：1. 基因功能鑒定的策略：功能獲得（gain-of-function）：是為生物的基因組增加一些遺傳信息，并強(qiáng)制性的提高外源遺傳物質(zhì)的表達(dá)水平，從而使生物體獲得新的功能和表型，以此來(lái)確定外源遺傳物質(zhì)的功能；功能缺失（loss-of-function）：采用一定的方法使生物基因組中的某個(gè)基因喪失其生物學(xué)功能，并通過(guò)表型的變化了解這一基因的功能。2. 轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)（tr