尿11項(xiàng)檢測(cè)干化學(xué)測(cè)定的原理.

1、干化學(xué)測(cè)定的原理干化學(xué)法尿 pH 檢查的原理是采用酸堿指示劑法，其測(cè)試膜塊區(qū)含有甲基紅(pH4.66.2)和溴麝香草酚藍(lán)(pH6.07.6)。兩種酸堿指示劑 適量配合可反映尿pH4.59.0的變異范圍。二、干化學(xué)法檢查尿 pH 的注意事項(xiàng)(1) 檢測(cè)時(shí)尿標(biāo)本必須新鮮，放置過久細(xì)菌分解尿液成分可導(dǎo)致 pH 改變，大多數(shù)細(xì)菌如變形 等，分解尿素產(chǎn)生氨，可使尿液呈堿性；但在少數(shù)情況下，細(xì)菌也分 解尿液成分產(chǎn)生酸性物質(zhì)，使尿 q 偏酸。(2) 當(dāng)腎臟分泌的尿液含有過多的碳酸氫鹽和碳酸緩沖對(duì)時(shí)，如果 尿液放置時(shí)間過久，尿液中 ?氧化碳會(huì)自然擴(kuò)散到空氣中，使尿pH增高。3) 在測(cè)定過程中， 應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定的

2、時(shí)間將試劑帶浸泡尿液標(biāo)本中， 浸尿時(shí)間過長(zhǎng)，尿 pH 呈減低4) 在使用多項(xiàng)試劑帶進(jìn)行測(cè)定時(shí)，要認(rèn)真閱讀使用說明，嚴(yán)格按 說明書進(jìn)行操作， 試劑帶上不能浸量的尿液標(biāo)本， 防止試劑帶相互之 間的“溢出"(runover)現(xiàn)象，影響尿pH測(cè)定。5) 尿液 pH 主要反映腎臟在維持血漿和細(xì)胞外液正常氫離子濃度 方面的能力，而干化學(xué)法測(cè)定只4半定量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此在臨床 觀察結(jié)果時(shí)，不要單從尿 pH 測(cè)定值分析，要結(jié)合臨床其他資料駐數(shù) 據(jù)，綜合分析才能得出正確的判斷。方法原理：干化學(xué)法尿pH檢查的原理是采用酸堿指示劑法，其測(cè)試 膜塊區(qū)含有甲基紅（pH4.66.2）和溴麝香草酚藍(lán)（pH6.07

3、.6）。兩種酸堿 指示劑適量配合可反映尿pH4.59.0的變異范圍。臨床意義：1、尿pH檢測(cè)了解體內(nèi)酸堿平衡情況在代謝性酸中毒、痛風(fēng)、糖尿病、腎結(jié)石、W型腎小管酸中毒、 白血病和壞血病時(shí)，常有強(qiáng)酸性尿。堿中毒及原發(fā)性醛固酮增多癥、 腎小管酸中毒（I、H、皿型）、泌尿系變形桿菌感染時(shí)，可呈堿性尿。2、觀察尿pH變化，指導(dǎo)臨床用藥，預(yù)防腎結(jié)石的形成和復(fù)發(fā)，減 輕泌尿系微生物的感染研究證明，某些腎結(jié)石的形成與尿pH變化密切相關(guān)，如在尿pH 降低時(shí)容易形成酸性結(jié)石；而在尿 PH增加時(shí)容易形成堿性結(jié)石。因 此，臨床對(duì)于某些患者有形成酸性結(jié)石（如尿酸和胱氨酸結(jié)石）傾向S 時(shí)如果給藥使尿pH保持堿性或至少尿

4、pH在6.5以上，就不會(huì)形成 酸性結(jié)石。相反，臨床對(duì)于某些患者有形成堿性結(jié)石 （如磷酸鈣結(jié)石） 傾向時(shí)，如果給藥使尿pH保持酸性，也就不會(huì)形成堿性結(jié)石。此外， 堿性尿可促進(jìn)某些微生物的生長(zhǎng)發(fā)育，同樣使尿液呈酸性也可預(yù)防細(xì) 菌的生長(zhǎng)，減少泌尿系統(tǒng)的感染。尿pH檢測(cè)不僅可了解體內(nèi)酸堿平衡情況，還可監(jiān)控尿pH變化對(duì) 其他膜塊區(qū)反應(yīng)的干擾作用，如尿蛋白測(cè)定、尿比重檢查受尿pH影響很大，因此，當(dāng)尿pH明顯升高或減低時(shí)，要考慮同時(shí)檢測(cè)尿比重、 尿蛋白結(jié)果：是否可靠或用其他方法進(jìn)行檢測(cè)。第二節(jié) 尿比重 （比密 ）測(cè)定尿液比重（比密）（specificgravity , SG）是指尿液與純水的重量之 比，是尿

5、中溶解物質(zhì)濃度的指標(biāo)。溶解于尿液中的固體物質(zhì)，主要是 尿素和氯化鈉， 前者反映食物中的蛋白質(zhì)含量， 后者反映食物中的含 鹽量，在正常生理情況下，尿比重與排出的水分、鹽類和尿量有關(guān)。尿比重測(cè)定可以估計(jì)腎臟濃縮功能。由于尿比重還受年齡、飲水 量、出汗等因素的影響， 故多次測(cè)定比單次測(cè)定更能反映腎臟濃縮功 能。尿比重測(cè)定在臨床使用的方法較多，如稱重法、浮標(biāo)法 （尿比重計(jì) 法 ）、液滴落下法、超聲波法、折射儀法，于化學(xué)試劑帶法，等等。 由于干化學(xué)試劑帶法具有簡(jiǎn)便、 快速，測(cè)定尿比重不受非離子成分如 葡萄擾，且同時(shí)給出多項(xiàng)尿液參數(shù)結(jié)果，現(xiàn)已廣泛使用。但由于試驗(yàn) 結(jié)果劃分范圍跨度大， 敏感性較比學(xué)法測(cè)比重

6、只能用于健康人及初診 病人篩選試驗(yàn)。根據(jù)美國(guó) NCCLS 文件，折射儀法為尿比重檢測(cè)的參 考方法。一、干化學(xué)法測(cè)試的原理 。干化學(xué)試劑帶法測(cè)定尿比重的膜塊中主要含有兩種成分 （表 3 2） ： 一 種 是 電 解 質(zhì) 共 聚 體 ， 即 甲 氧 乙 面 丁 烯 二 酸 （methoxyethylenemaleic acid）共聚合體（圖3 1）;另一種是酸堿指示劑 溴麝香草酚藍(lán)（PH6.07. 6）。除這兩種物質(zhì)外，還含有其他物質(zhì)如 緩沖劑等。其測(cè)試原理模式見圖 32。、干化學(xué)法尿比重檢查注意事項(xiàng)(1) 尿液標(biāo)本必須新鮮，不能含有強(qiáng)堿、強(qiáng)酸等物質(zhì) (如奎寧、嘧啶等 藥物 )，這些物質(zhì)的存在都會(huì)

7、直接影響試劑帶測(cè)定尿比重。當(dāng)尿液pH> 7. 0時(shí)，應(yīng)該在干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果的基礎(chǔ)上增加0. 005作為由強(qiáng)堿尿損失的補(bǔ)償。其補(bǔ)償機(jī)理是：當(dāng)尿液 pH >7. o時(shí)，尿液必將存 在著氫氧根離子 (OH ) ，它的存在會(huì)中和掉由尿液離子成分使電解質(zhì) 聚合體釋放出來(lái)的氫離子(H ')，導(dǎo)致氫離子不與酸堿指示劑反應(yīng)， 結(jié)果偏低。在強(qiáng)酸性尿液時(shí)，干化學(xué)法測(cè)定尿比重結(jié)果明顯偏高，但 在一般情況下尿液不可能呈強(qiáng)酸性，所以影響不如堿性尿那么直接。 表 33 顯示不同尿 pH 對(duì)尿比重的影響。(2) 尿比重計(jì)法、折射儀法和干化學(xué)法是采用不同的原理測(cè)定尿液比 重，測(cè)定的結(jié)果必將有一定的定鮑差距

8、， 如尿液中非離子型化合物 (如 葡萄糖、造影劑等 )，可導(dǎo)致比重計(jì)和折射法測(cè)定結(jié)果偏(3) 尿蛋白濃度增高時(shí)，由于蛋白分子本身是兩性電解質(zhì)，即本身既有電荷又有固體量，所以對(duì)三下按都有影響，以干化學(xué)法最為明顯， 折射儀法次之，。比重計(jì)法影響最小。 教科書規(guī)定， 每增加 logL 質(zhì)， 折射儀法應(yīng)在原測(cè)定值的基礎(chǔ)上減去 o. 005，比重計(jì)法碎去 0. 003。 尿蛋白干擾干化學(xué)法測(cè)定原指示劑呈現(xiàn)顏色而使結(jié)果偏高。表35顯示不同濃度尿蛋白對(duì)尿比重的影響。(4) 干化學(xué)法不宜用于新生兒尿比重檢查，這可能是由于新生兒尿比 重太低，僅在1. 002004之間的緣故。(5) 由于干化學(xué)法所測(cè)尿比重結(jié)果間

9、隔較大，不能反映較小的比重變化，因此只能用于過高或過低汞比重病人的篩選， 對(duì)于病理性特別是 系統(tǒng)觀察的病例仍以折射儀法更為理想。NCCLS 建議以折射儀法作為干化學(xué)法測(cè)定尿比重的參比方法， 浮標(biāo)法(比重計(jì)法 )測(cè)定尿比重不再使用。折射儀法可用去離子水或蒸 餾水和已知濃度溶液監(jiān)測(cè)其測(cè)量結(jié)果是否準(zhǔn)確，如蒸餾水比重應(yīng)為 000；0513mol 兒氯化鈉溶液，比重應(yīng)為 1015；0856mol 兒氯 化鈉溶液，比重應(yīng)為 1022'；263mol 兒蔗糖溶液，比重應(yīng)為 1034。三、尿比重檢查的臨床意義尿比重的參考值在 10151025 之間，早晨第一次尿標(biāo)本的 比重最高，通常 >1020

10、；在多次隨機(jī)尿標(biāo)本中，尿比重在 1025 以上，提示腎濃縮功能正常。(1)尿比重的高低主要取決于腎臟的濃縮功能，它與尿內(nèi)所含溶質(zhì) 的多少成正比，而與尿量成反比，并與尿液的顏色深淺平行。 尿比重增高：表示尿液濃縮，見于急性腎炎、蛋白尿、糖尿病、 高熱、大量出汗、脫水、心功能不全、流行性出血熱少尿期等。 尿比重減低： 表示腎臟濃縮機(jī)能減退， 見于尿崩癥、 慢性腎炎、 精神性多飲多尿癥、 原發(fā)性醛固酮增多癥、 流行性出血熱多尿期及恢 復(fù)期。 尿比重比較固定：尿比重變化不大，一般固定在 1. 010左右， 呈等張尿，表示腎實(shí)質(zhì)有嚴(yán)重?fù)p害。(2)用尿比重和尿量的動(dòng)態(tài)變化來(lái)監(jiān)測(cè)腎結(jié)石病人的尿物理變化，可用

11、于指導(dǎo)病人飲食習(xí)慣，預(yù)防病人結(jié)石的再次形成。（3）尿比重的高低不僅直接反映腎臟濃縮功能，而且還能監(jiān)測(cè)全自 動(dòng)尿沉渣分析儀對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)析是否受尿比重的影響（尿比重偏低,可使紅細(xì)胞形態(tài)由均一性向多形性轉(zhuǎn)變）。第三節(jié)尿蛋白測(cè)定一.測(cè)定原理尿液蛋白質(zhì)的測(cè)定方法采用的是指示劑蛋白質(zhì)誤差法，即在一定的條件下（PH為3 .2時(shí)），溴酚藍(lán)產(chǎn)生出陰離子，與帶陽(yáng)離子的蛋 白質(zhì)（主要是白蛋白）結(jié)合發(fā)生顏色變化。二、干化學(xué)法測(cè)定尿蛋白的注意事項(xiàng)干化學(xué)法測(cè)定尿蛋白操作簡(jiǎn)單快速、敏感性高，但該法是利用尿蛋白與某些染料相結(jié)合而產(chǎn)生的歹色變化來(lái)測(cè)定蛋白含量，因此在使用中，無(wú)論用哪一種方法進(jìn)行尿蛋白定性檢查， 都必須重視下列問

12、 題。（一）尿液pH尿液標(biāo)本必須新鮮，變質(zhì)的尿液會(huì)使尿 pH發(fā)生變化，或者尿 液本身過酸、過堿都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)吳當(dāng)病人服用奎寧、 奎寧丁和嘧啶 等藥物時(shí)，引起尿液呈強(qiáng)堿尿（pH>9. o）,超過了試劑帶本身的緩沖 耄力，會(huì)使干化學(xué)法出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；而用磺基水楊酸法和加熱乙酸 法作尿蛋白定性時(shí)，因尿液過堿，遠(yuǎn)熏蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)出現(xiàn)假陰性結(jié) 果。鑒別方法是用稀醋酸將尿液 pH調(diào)至56后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，借以 區(qū)爺是否由于強(qiáng)堿尿而導(dǎo)致干化學(xué)法的假陽(yáng)性， 或磺基水楊酸法和加 熱乙酸法的假陰性。同樣，當(dāng)尿滯 pH<30 時(shí)，也會(huì)引起尿蛋白定 性試驗(yàn)的假陰性。表 38顯示不同 pH 值對(duì)尿蛋白測(cè)定結(jié)果的

13、影響。（二）尿液所含蛋白成分 不同的尿蛋白測(cè)定方法對(duì)病人尿液內(nèi)不同類型蛋白質(zhì)檢測(cè)的 敏感性不同，測(cè)定結(jié)果也不相同：三擻娟教授等經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，尿中球 蛋白濃度為 4000mg 兒以下時(shí)，干化學(xué)法蛋白定性為陰性，只有當(dāng)其 芝譬達(dá) 5 500mgL 時(shí)，才出現(xiàn)可疑反應(yīng)；白、球蛋白比值為1： 2的蛋白尿，蛋白濃度高達(dá)2000mg兒芝會(huì)出現(xiàn)陽(yáng)性（+）反應(yīng)，干化學(xué) 法測(cè)量球蛋白的敏感性僅為白蛋白的 1 /1001 / 50。磺基水楊酸定 性三卅球蛋白反應(yīng)的靈敏度亦較白蛋白低，濃度同時(shí)為 2 000mg 幾 時(shí)，白蛋白出現(xiàn)陽(yáng)性 （+）反應(yīng)，球蛋三， ：勺囚性 （+）反應(yīng)；在白、球 蛋白尿中，球蛋白比例增大，則

14、陽(yáng)性程度減弱。加熱乙酸定性法和雙 縮脲定量三可以對(duì)白蛋白、球蛋白顯示同樣的敏感性，表39 顯示同一份標(biāo)本不同測(cè)定方法測(cè)定尿蛋白的差異程蔓： 加熱乙酸法對(duì)于單 純球蛋白尿具有特殊反應(yīng)，即濃度從 500mg兒到5 500mg兒濃度的 尿液，此法車表現(xiàn)為大小不等的凝塊狀而尿液本底并不顯現(xiàn)明顯混 濁，從而提示本法可能為高度非選擇性蛋白尿F:篩試驗(yàn)。因此在進(jìn)行腎病患者尿蛋白測(cè)定時(shí)， 特別是在疾病發(fā)展過程中需要系統(tǒng)觀察 尿蛋白含量的振例，最好使用磺基水楊酸法 （或加熱乙酸法 ）和雙縮脲 法進(jìn)行定性、定量實(shí)驗(yàn)。 標(biāo)本編號(hào)干化學(xué)法 （mg 兒）雙縮脲法 （mg 兒）（三）尿液中的干擾物研究證明，多種物質(zhì) （多

15、為藥物 ）可使尿蛋白不同檢查方法呈現(xiàn)出 假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。 叢玉隆等曾凝； 了了多種抗生素對(duì)尿蛋白測(cè)定 影響的研究， 發(fā)現(xiàn)青霉素族藥物對(duì)其有明顯的干擾作用。 為了證明這 一筆者對(duì)大劑量青霉素靜脈注射患者用藥前后進(jìn)行了尿蛋白的檢測(cè)， 結(jié)果表明：尿液內(nèi)青霉素濃度罐：立 4萬(wàn)U/ ml時(shí)，對(duì)干化學(xué)法 測(cè)定尿蛋白產(chǎn)生假陰性，而對(duì)磺基水楊酸法測(cè)定尿蛋白產(chǎn)生假陽(yáng)性 （表）。靜脈滴注青霉素240萬(wàn)U組2h內(nèi)，320萬(wàn)U組3h內(nèi)，480 萬(wàn)U組5h內(nèi)，尿中青霉素濃度可達(dá)到影響尿蛋白測(cè)定水平 （表3 11 和表 312），可對(duì)磺基水楊酸法產(chǎn)生假陽(yáng)性， 對(duì)干化學(xué)法產(chǎn)生假陰 因 此，對(duì)于含蛋白尿的患者使用青霉素治

16、療時(shí)， 使用不同的測(cè)定尿蛋白 方法需要考慮不同的干擾作主 即磺基水楊酸法使結(jié)果增強(qiáng)或出現(xiàn)假 陽(yáng)性，干化學(xué)法測(cè)試使結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性。除此之外，尿等有 高濃度有機(jī)碘造影劑 （如膽影葡胺、泛影葡胺、碘番酸 ）及尿酸鹽時(shí)， 磺基水楊酸法可呈假陽(yáng)性，而化學(xué)法和加熱乙酸法影響較小。（四）。尿液存放時(shí)間及污染 尿液存放時(shí)間過久而致細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖， 或尿液受其他分泌物如陰道分 泌物污染，或含有較多細(xì)胞成屢渣試劑帶測(cè)試原理及注意事項(xiàng)分時(shí)， 也可出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。但這種蛋白尿絕非泌尿系統(tǒng)病變所致。四、尿蛋白測(cè)定的臨床意義（一）參考范圍 尿蛋白定性試驗(yàn)一般為陰性。（二）生理性蛋白尿或無(wú)癥狀性蛋白尿 生理性蛋白尿，

17、指泌尿系統(tǒng)并無(wú)器質(zhì)性病變， 而是由于各種體內(nèi) 環(huán)境因素只怔常機(jī)體的影響所導(dǎo) 2的尿蛋白含量增多， 可分為功能性 蛋白尿和體位性 （直立性 ）蛋白尿。1功能性蛋白尿 功能性蛋白尿是指機(jī)體劇烈運(yùn)動(dòng)、發(fā)熱、低溫刺激、精神緊張、 交感神經(jīng)興奮等所致的，暫時(shí)性、輕度白尿。其形成機(jī)理可能是由于 上述諸因素使腎血管痙攣或充血， 導(dǎo)致腎小球毛細(xì)血管壁的通透性增 一旦誘發(fā)因素消失， 尿蛋白也迅速消失， 此類蛋白尿定性試驗(yàn)一般不 超過陽(yáng)性（牛），定量試驗(yàn).5g/24h尿，多見于青少年。2體位性蛋白尿 體位性蛋白尿又稱直立性蛋白尿，是指由于直立位或腰部前突時(shí) 引起的輕度或中度蛋白尿。其特點(diǎn) ZI 司尿蛋白定性為陰性

18、，起床活 動(dòng)若干時(shí)間后出現(xiàn)蛋白尿，再平臥后又轉(zhuǎn)為陰性。常發(fā)生于青少年， 一直年齡增長(zhǎng)而消失。 此種蛋白尿的發(fā)生機(jī)理尚不完全明了， 可能與 直立時(shí)前突的脊柱壓迫腎靜脈； 直才由于腎向下移動(dòng)， 腎靜脈被動(dòng)扭 曲，而使腎臟處于暫時(shí)瘀血狀態(tài)，與淋巴血流受阻有關(guān)。此類蛋白尿 £試驗(yàn)陽(yáng)性可達(dá)什，甚至卅，但臥床休息后可消夫。（三）病理性蛋白尿病理性蛋白尿指泌尿系統(tǒng)因器質(zhì)性病變， 尿內(nèi)持續(xù)出現(xiàn)蛋白而盲 導(dǎo)致蛋臼尿的原因很多，通?？傻鬄橐韵?5 種。1腎小球性蛋白尿 腎小球性蛋白尿是由于腎小球?yàn)V過膜受損而使通透性增加，濾出 較多的血漿蛋白，超過了腎小管重工能力。此型蛋白尿最為常見，蛋 白尿以白蛋白為主

19、， 也含有一些分子量較大的球蛋白， 分子量 4 萬(wàn)以 吁蛋白質(zhì)含量極少。2腎小管性蛋白尿 腎小管性蛋白尿是由于炎癥或中毒引起近曲小管對(duì)低分子量蛋白 質(zhì)的重吸收障礙而導(dǎo)致的以低分曼蛋白質(zhì)為主的蛋白尿。 此類的特點(diǎn) 是以p:微球蛋白、溶菌酶等增多為主，白蛋白正?；蜉p度增多。3混合性蛋白尿 混合性蛋白尿是由于腎病同時(shí)累及腎小球和腎小管而產(chǎn)生的蛋白 尿。此類特點(diǎn)是白蛋白和pz微球三司時(shí)增多。4溢出性蛋白尿 溢出性蛋白尿主要是血循環(huán)中出現(xiàn)低分子量蛋白質(zhì) （如游離血紅 蛋白、肌紅蛋白 ）或本周氏蛋白過寄小球?yàn)V過及腎小管重吸收功能 均正常而溢出尿液中。 此類主要見于骨髓瘤、 骨骼肌嚴(yán)重創(chuàng)傷及大嘰 梗塞等。5

20、組織性蛋白尿 組織性蛋白尿是指在尿液形成過程中，腎小管代謝產(chǎn)生的和腎組 織破壞分解的蛋白質(zhì)，以及炎癥或嚴(yán)刮激泌尿系統(tǒng)分泌的蛋白（如Tatum Horsfall 糖蛋白等 )上述蛋白尿可分為腎前性、腎性及腎后性蛋白尿。本周蛋白 尿、血紅蛋白尿、肌紅蛋白尿、溶菌酶尿籬哥前性蛋白尿。腎性蛋白 尿見于腎小球或腎小管疾病，可因炎癥、血管病 （高血壓病 ）、中毒（藥 物、重曝車 ）等原因引起。腎后性蛋白尿則見于腎盂、輸尿管、膀胱、 尿道的炎癥、腫瘤、結(jié)石。動(dòng)態(tài)觀察尿蛋尋，對(duì)上述疾病的診斷、病 情觀察、判斷療效和及時(shí)了解是否出現(xiàn)藥物副作用等均有一定意義。（四）蛋白尿的分類至白尿可按尿中蛋白含量的多少分為輕、

21、中、重三類。輕度 蛋白尿：尿蛋白含量0. 5g/24h,可見苷.，管及腎小球病變的非活 動(dòng)期、腎盂腎炎、體位性蛋白尿等；中度蛋白尿：尿蛋白含量在0.5 4;乙除腎炎外，見于高血壓腎動(dòng)脈硬化、多發(fā)性骨髓瘤等；重度 蛋白尿：尿蛋白4g/24h,可見于瞪蘭腎小球腎炎及紅斑狼瘡性腎炎、 腎病綜合征等。以上分類是相對(duì)的，當(dāng)病變同時(shí)累及腎小球及腎虧； 乙低分子量、高分子量蛋白質(zhì)均增多，此時(shí)動(dòng)態(tài)觀察24h尿蛋白量有 助病程觀察及療效判斷。（五）蛋白尿的選擇性叫。年 Blainly 等首先提出了蛋白尿選擇性的概念作為判斷腎小球 損傷嚴(yán)重程度的指標(biāo)。 選擇性學(xué)法測(cè)定尿中的中分子量蛋白質(zhì)和高分 子量蛋白質(zhì)的比值來(lái)

22、確定的。 有關(guān)選擇性蛋白尿、 非選擇性蛋白尿及 選擇性蛋白尿指數(shù)（SPI）將在以下章節(jié)介紹。第四節(jié) 尿糖測(cè)定嚴(yán)格地說，尿糖測(cè)定應(yīng)該是尿葡萄糖測(cè)定。正常人尿內(nèi)可有 微量葡萄糖，尿內(nèi)含糖量為0. 565mmol/24h,定性試驗(yàn)為陰性。 尿糖定性試驗(yàn)常用班氏法、葡萄糖氧化酶法和干化學(xué)法。一、干化學(xué)法測(cè)試的原理 干化學(xué)試劑帶法測(cè)定尿糖的膜塊中主要含有葡萄糖氧化酶、 過氧化物酶和色源及其他物質(zhì)。不同家采用色源有異 （表 3 13），主 要有兩類：采用碘化鉀作色源（如美國(guó)Ames公司的Clinitek “200 型.采用聯(lián)甲苯胺作色源（如德國(guó)寶靈曼公司的 MiditronR型）。測(cè) 定尿糖的原理是：膜塊

23、內(nèi)葡萄糖氧化酶（GOD）作用于尿液中葡萄糖， 使其形成葡萄糖醛酸和過氧化氫 （H20： ），后者再被過氧化氫酶 （POD） 售化釋放出0，后者使色源呈現(xiàn)不同的顏色變化。三、尿糖測(cè)定的臨床意義 尿糖一般是指尿液中葡萄糖而言，其來(lái)源于血液中的葡萄糖。正 常人腎臟的腎糖閾值是 90180mg/ d1）。一般情況下血糖濃度相對(duì) 比較恒定，空腹血糖為4. 446. 66mmol/L ,進(jìn)食必一 9. 99mmo 兒，由腎小球?yàn)V過的葡萄糖幾乎全部可被腎小管重吸收， 只有極微量 部分由尿北為0. 561. 67mmol，濃度為0. 280. 83mmol/L , 用任何常規(guī)性檢查均不能測(cè)出。 葡萄糖是否會(huì)出

24、現(xiàn)于尿中， 一是要看 血糖濃度，二是要看腎小管重吸收的能力，即腎糖閾值。尿中是否出現(xiàn)葡萄糖取決于三個(gè)因素： C 動(dòng)脈血液由葡萄糖濃 度；每分鐘流經(jīng)腎小球的血漿量；近端腎小管上皮細(xì)胞重吸收葡 萄糖的能力， 即腎糖團(tuán)： 弩糖團(tuán)可隨腎小球?yàn)V過率和腎小管葡萄糖重 吸收率的變化而變化。當(dāng)腎小球?yàn)V過率減低時(shí)，可導(dǎo)致腎糖闊提 高；而腎小管重吸收率減少時(shí)，則可引起腎糖閾降低。葡萄糖尿除可 因血糖濃度過高引起外， 也可因腎小管重吸收能力降低引起， 后者血 糖可正常。（一）生理性糖尿 生理性糖尿?yàn)橐贿^性糖尿，是暫時(shí)性的，排除生理因素后恢復(fù)正 常。1飲食性糖尿 短時(shí)間內(nèi)食用大量糖所致，糖的同化存在著個(gè)體差異，但健

25、康人一次進(jìn)食葡萄糖 200g 以上即可產(chǎn)生糖尿。，2應(yīng)急性糖尿 又稱一過性糖尿。原因是顱腦外傷、腦血管意外、情緒激動(dòng)等 情況下，延腦血糖中樞受刺激， 導(dǎo)致腎上腺素、 胰高血糖素大量釋放， 因而可出現(xiàn)暫時(shí)性高血糖和糖尿。3妊娠性糖尿以妊娠中末期多見，由于腎小球?yàn)V過增加，腎小管的重吸收相對(duì)減少； 另外， 妊娠末期和哺乳期間可因乳腺產(chǎn)生乳糖過多而至乳糖 尿。（二）病理性糖尿1真性糖尿 真性糖尿是由于胰島素絕對(duì)或相對(duì)不足，血糖濃度超過腎糖閾 值而從尿中排出所致。 尿糖檢查不僅是診斷糖尿病的重要依據(jù)， 也是 指導(dǎo)臨床醫(yī)生胰島素使用量的依據(jù)之一，判斷療效的主要指標(biāo)之一。 但如果并發(fā)腎小球硬化癥，則腎小球?yàn)V

26、過減少，腎糖閾升高，此時(shí)血 糖雖已超過十般的腎糖閾值，尿糖卻表現(xiàn)為陰性。但于進(jìn)食后2h由于負(fù)載增加，則可見血糖升高，尿糖陽(yáng)性。對(duì)于此類糖尿病患者，不 但需同時(shí)做空腹血糖、尿糖檢查，進(jìn)食后 2h 尿糖檢查，還需進(jìn)一步 做糖耐量試驗(yàn)等檢查，以明確診斷。2. 腎性糖尿。腎性糖尿是由于腎小管對(duì)葡萄糖的重吸收功能減退，腎糖閾 降低而引起的糖尿。如家族性糖尿 （先天性近曲小管重吸收功能缺 陷），無(wú)明顯癥狀。新生兒糖尿是因近曲小管功能尚未完善。以上均 應(yīng)與真性糖尿病相區(qū)別， 其鑒別要點(diǎn)為腎性糖尿時(shí)空腹血糖及糖耐量 試驗(yàn)結(jié)果均正常。3. 其他糖尿生長(zhǎng)激素、甲狀腺素、腎上腺素、皮質(zhì)醇、胰高血糖素都可 使血糖濃度

27、上升而引起糖尿。 甲狀腺功能亢進(jìn)， 甲狀腺素分泌過多， 使消化道腸壁的血流加速和糖的吸收增快， 因而在飯后血糖增高， 出 現(xiàn)糖尿；肢端肥大癥，可因生長(zhǎng)激素分泌旺盛而致血糖升高，出現(xiàn) 糖尿；嗜鉻細(xì)胞瘤，可因腎上腺素和去腎上腺素大量分泌，致使磷酸化酶活性增強(qiáng)，促使肝糖原降解為葡萄糖，引起血糖升高而出現(xiàn)糖 尿；興氏(Cushing)綜合征，可因皮質(zhì)醇分泌增多，使糖原異生旺盛, 抑制己糖激酶和對(duì)胰島素作用，因而二理糖尿。此外，肝功能障礙時(shí) 血糖升高也可見糖尿。第五節(jié)尿酮體的測(cè)定。一、千化學(xué)法測(cè)定的原理二、千化學(xué)法測(cè)定尿酮體的注意事項(xiàng)(1) 由于尿酮體中的丙酮和乙酰乙酸都具有揮發(fā)性，乙酰乙酸 更易受熱分

28、解成丙酮，尿液被細(xì)菌污誕虧，酮體消失。因此，尿液必 須新鮮，及時(shí)送檢，以免因酮體的揮發(fā)或分解，出現(xiàn)假陰性結(jié)果或偏 低籌吳：干化學(xué)法對(duì)乙酰乙酸的敏感性為 50100mg/ L,對(duì)丙酮的 敏感性為400 700mg/L,不與p羥三鬟發(fā)生作用。但各大廠家生 產(chǎn)的試劑帶存在差異，對(duì)酮體測(cè)定成分不同，應(yīng)加以注意。注意干化 學(xué)法與酮體粉法的敏感度差異，同一病理標(biāo)本，兩種方法可能出現(xiàn)截 然不同的結(jié)果，分析結(jié)果時(shí)應(yīng)特別注意。（3）不同病程酮體成分的變化會(huì)給檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)差異。不同病因引 起的酮癥其酮體的成分可不同，即使同一病人在不同病程也可有差 異。在糖尿病酮癥酸中毒早期，酮體的主要成分是伊羥丁酸，乙酰乙 酸很

29、少或缺乏， 此時(shí)測(cè)量可導(dǎo)致對(duì)總酮體量估計(jì)不足； 在糖尿病酮癥 酸中毒癥狀緩解之后， 乙酰乙酸含量反而比急性期初始含量高。 因此 檢驗(yàn)人員必須注意病程發(fā)展，與臨床醫(yī)生共同分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠 性，這就是分析后質(zhì)控的重要內(nèi)容。三、尿酮體測(cè)定的臨床意義 正常情況下，由肝臟產(chǎn)生的酮體經(jīng)血液運(yùn)送到其他組織，氧 化成二氧化碳和水并產(chǎn)生能量。 當(dāng)糖代謝發(fā)生障礙時(shí)， 脂肪的分解代 謝增多，這時(shí)肝內(nèi)酮體產(chǎn)生的速度超過肝外組織利用的速度， 血中酮 體增加，稱酮血癥；過多的酮體從尿排出，稱酮尿，可大概分為以下 4 種情況。（一）糖尿病酮癥酸中毒 由于糖利用減少，分解脂肪產(chǎn)生酮體增加而引起酮癥。未控 制或治療不當(dāng)?shù)奶悄?/p>

30、病出現(xiàn)筍中毒或昏迷時(shí)，尿酮體檢查極有價(jià)值。 應(yīng)與低血糖、 心腦疾病酸中毒或高血糖滲透性糖尿病昏迷相區(qū)別。 酮 癥酸中毒時(shí)尿酮體陽(yáng)性， 而后者尿酮體一般不增高。 但應(yīng)注意糖尿病 酮癥者腎功能嚴(yán)重?fù)p傷而腎閾值增高時(shí)， 尿酮體亦可減少， 甚至完全 消失。（二）非糖尿病性酮癥如感染性疾病 （ 肺決、傷寒、敗血癥、結(jié)核等發(fā)熱期 ），嚴(yán)重 嘔吐、腹瀉，長(zhǎng)期饑餓、禁食，全身麻醉后等，均可出現(xiàn)酮癥，這些 情況相當(dāng)常見。婦女孕期因妊娠反應(yīng)嘔吐、進(jìn)食少，體脂降解代謝明 顯增多，發(fā)生酮癥而致酮尿。（三）中毒如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等（四）服用雙胍類降糖藥服用降糖靈時(shí)，由于藥物有抑制細(xì)胞呼吸的作用，可出現(xiàn)血糖正常、

31、尿酮體陽(yáng)性的現(xiàn)象第六節(jié)尿膽紅素、尿膽原檢查膽紅素是血紅蛋白分解代謝的中間產(chǎn)物，是膽汁中的主要成 分，其代謝產(chǎn)物有尿（糞）膽原等。當(dāng)各種原因造成膽紅素產(chǎn)生過多， 或肝細(xì)胞攝取、結(jié)合及排泄等過程發(fā)生障礙時(shí)，均可導(dǎo)致血、尿、糞 便中膽紅素及其代謝產(chǎn)物（尿膽原等）的改變。對(duì)這些物質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn)， 可協(xié)助臨床診斷。一、千化學(xué)法測(cè)定的原理尿膽紅素試劑帶的主要組成見表 319。其測(cè)定原理，是在強(qiáng)酸介質(zhì)中直接膽紅素與二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應(yīng)生成紅色的復(fù) 合物（圖312）;其反應(yīng)過程，是重氮鹽作用膽紅素中央使其裂開， 再結(jié)合形2分子的偶氮膽紅素而呈現(xiàn)顏色變化。尿膽原測(cè)定原理：根據(jù)干化學(xué)試劑帶組成的不同，其測(cè)定方法有

32、 所差異。試劑帶的組成及其特性見。美國(guó) Ames 公司采用，在強(qiáng)酸條 件下尿膽原和對(duì)二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反應(yīng)， 生成櫻紅色縮靶圖 313)；德國(guó)寶靈曼公司采用，在強(qiáng)酸條件下尿膽原和對(duì)甲氧基苯 重氮四氟化硼發(fā)生重氮鹽偶生成胭脂紅色化合物。二、千化學(xué)法測(cè)定的注意事項(xiàng)(1) 標(biāo)本必須新鮮，以免膽紅素在陽(yáng)光照射下成為膽綠素，尿 膽原氧化成尿膽素。(2) 尿液中含高濃度維生素 C 和亞硝酸鹽時(shí)，抑制偶氮反應(yīng)， 使尿膽紅素呈假陰性； 當(dāng)患者接受大劑量氯丙嗪治療或尿中含有鹽酸 苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物時(shí)，可呈假陰性。(3) 尿液中一些內(nèi)源性物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素等，可 使尿膽原檢查結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性，一些藥

33、物 (如吩噻嗪 )也可產(chǎn)生顏色， 干擾實(shí)驗(yàn)。(4) 正常人尿膽原排出量每天波動(dòng)很大，夜間和上午量少，午后則迅速增加，在午后24時(shí)達(dá)最高峰；同時(shí)尿膽原清除率與尿pH, 相關(guān)，pH5. 0時(shí)，清除率為2ml/min, pH8. 0時(shí)，增加至25m1/ m i n 。因此有學(xué)者提倡預(yù)先給患者服用碳酸氫鈉堿化尿液，收集午后 24時(shí)(2h排出量)進(jìn)行測(cè)定，以提高檢出率。(5) 對(duì)于阻塞性黃疸尿膽原減少的病人,不能使用干化學(xué)法進(jìn) 行測(cè)定,因?yàn)榇蠖鄶?shù)尿液試劑帶都沒有設(shè)制檢測(cè)尿膽原陰性這一項(xiàng)。三、尿膽紅素、尿膽原檢查的臨床意義膽色素（bilepigments）是指血紅素的一系列代謝產(chǎn)物，包括膽 紅素、膽綠素、

34、 膽素原族和膽素族化合物。膽素原族和膽素族化合物 種類較多，命名交叉重復(fù)， 臨床上常簡(jiǎn)化為：凡是糞便中的膽素原族 化合物統(tǒng)稱為糞膽原； 其氧化產(chǎn)物膽素族化合物統(tǒng)稱為糞膽素； 存在 于尿液中的同類化合物，則相應(yīng)地稱為尿膽原和尿膽素。膽紅素是血紅蛋白的代謝產(chǎn)物，衰老紅細(xì)胞破壞后釋放出的 血紅蛋白經(jīng)分解產(chǎn)生的膽紅素約占膽紅素總量的80，其余 20來(lái)自其他血紅素蛋白，包括肌紅蛋白、過氧化物酶、過氧化氫酶及大多 數(shù)細(xì)胞色素等的分解代謝。正常成人每天形成250300mg的膽紅素。膽紅素在肝；脾及骨髓的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞中產(chǎn)生。這些細(xì)胞將 衰老的紅細(xì)胞破壞，釋出血紅蛋白，血素與其結(jié)合的珠蛋白分開。在 微粒體血紅素

35、加氧酶系催化下，血紅素原卟啉區(qū)環(huán)上的。次甲基橋從 碳膈子的兩側(cè)斷裂，從而產(chǎn)生相等克分子的CO、鐵及膽綠素區(qū)。這 一步驟是需氧反應(yīng)， 并需有 NADPH 的參刃。 膽綠素進(jìn)一步在可溶性 的膽綠素還原酶（其輔酶亦為NADPH）的催化下，迅速被還原為膽綠 素，老者很快被還原為膽紅素。在生理 pH 條件下，膽紅素是難溶于水的脂溶性物質(zhì)。在網(wǎng) 狀內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)生成的膽紅素進(jìn)入血液乏。 即與血漿清蛋白或。 球蛋白 （以清蛋白為主 ）結(jié)合成復(fù)合體。這種結(jié)合又限制了膽紅素自由透過各 種主物膜， 使其對(duì)組織細(xì)胞不致發(fā)生毒性作用。 正常人每 100ml 血漿 中的血漿蛋白能與 2025mg 膽紅蓑豸合，而正常人血漿膽

36、紅素濃度 只不過110mg兒，所以正常情況下不致有大量游離膽紅素進(jìn)入組 豢而產(chǎn)生毒性作用。咀紅素在血中以膽紅素一清蛋白的形式運(yùn)輸，但因其尚未經(jīng) 過肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化結(jié)合， 故稱為未結(jié)合膽紅囂或游離膽紅素。 此種膽紅素 隨血液循環(huán)至肝臟，很快就被肝細(xì)胞攝取。一旦膽紅素進(jìn)入肝細(xì)胞， 就與韁胞中的膽紅素結(jié)合蛋白質(zhì)結(jié)合， 于是不再返回越出細(xì)胞膜， 從 而促使膽紅素不斷向肝細(xì)胞內(nèi)透入。 進(jìn)殲細(xì)胞內(nèi)的膽紅素主要與葡萄 糖醛酸結(jié)合，生成葡萄糖醛酸膽紅素酯 （在肝內(nèi)主要是 1 分子膽紅素 結(jié)蘭：分子葡萄糖醛酸，形成雙葡萄糖醛酸膽紅素），也有少部分與硫酸根、甲基、乙酰基、甘氨酸或葡萄糖磺萋等相結(jié)合。此種膽紅素 也稱為結(jié)

37、合膽紅素。結(jié)合膽紅素自肝細(xì)胞釋放至毛細(xì)膽管，成為膽汁的一種特殊 組成成分。 膽紅素隨膽汁排出腸道， 自畫插末端起在腸道細(xì)菌作用下 進(jìn)行水解和還原反應(yīng)， 脫去了葡萄糖醛酸和加氫成無(wú)色的膽素原族化 合櫥包括中膽素原、糞膽素原及尿膽素原等。所形成的膽素原族化 合物基本上隨糞便排出 （正常成人每天入糞便中排出膽素原族化合物 約40280mg），約有10% 20%可被腸粘膜重吸收，再經(jīng)門靜脈轉(zhuǎn) 入肝鱉。構(gòu)成膽素原的腸肝循環(huán)， 僅有極少部分膽素原進(jìn)入體循環(huán)而 由尿排出（正常成人每日從尿中排出尿躚原約 0540mg）。進(jìn)入血液的膽素原族約 80%與血漿蛋白質(zhì)結(jié)合， 僅有一小部 分可以通過腎小球?yàn)V出。 在腎近

38、曲小管中可被重吸收一部分， 在遠(yuǎn)曲 小管中又可排出一部分。尿中膽素原族的排出量與下列因素有關(guān)。1尿液 pH 酸性尿中膽素原族趨于不解離狀態(tài)，具脂溶性，易被腎小管重 吸收，故排出量減少；反之，在堿性尿中膽素原族趨于解離狀態(tài)，水 溶性，不易被腎小管重吸收，故排出量增多。2膽紅素的形成量 當(dāng)膽紅素的來(lái)源增加，如患溶血性黃疸時(shí)，隨膽汁排出的膽 紅素增加， 在腸道形成的膽素原族也增多， 故重吸收并進(jìn)入體循環(huán)而 自尿中排出的膽素原族的量也增多； 而當(dāng)膽紅素形成減少， 如再生障 礙性貧血時(shí)，尿中膽素原族的排出量減少。3肝細(xì)胞功能 由于膽素原族的腸肝循環(huán)中逸入體循環(huán)的量直接取決于肝臟 清除膽素原族的功能， 因

39、此尿中膽素原排出量增多， 可較敏感地反映 肝細(xì)胞損傷。臨床經(jīng)驗(yàn)表明， 在病毒性肝炎早期未出現(xiàn)黃疸之前往往 已可發(fā)現(xiàn)尿中膽素原族增多。4，膽道梗阻'患梗阻性黃疸時(shí)，膽紅素不能順利排入腸腔，膽素原族形成 減少，尿中膽素原族的量也相應(yīng)減少；在膽道完全梗阻時(shí)，尿中膽素 原族完全消失。正常人血漿中膽紅素的總量不超過 10mg 幾，其中未結(jié)合膽紅素占 4 5。膽紅素代謝異常而致體內(nèi)積蓄，遂成黃疸，其特征為 血漿中膽紅素水平升高，皮膚、鞏膜及粘膜黃染。黃疽大致分成三大 類。(1) 肝前性黃疸 或稱溶血性黃疸，系敗血癥、蠶豆病、瘧疾、 異型輸血等使紅細(xì)胞大量破壞，血紅蛋白釋出過多所致。(2) 肝原性黃

40、疸或稱肝細(xì)胞性黃疸，是指在感染(如病毒性肝 炎)、中毒及肝硬化等肝病時(shí)，由于肝細(xì)胞內(nèi)或肝內(nèi)毛細(xì)膽管廣泛性 病變，使肝細(xì)胞對(duì)膽紅素?cái)z取、結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)及排泄障礙所致。(3) 肝后性黃疸 或稱梗阻性黃疸，由于結(jié)石、腫瘤或先天性 膽道閉鎖等原因造成總膽管梗阻所致。(2) 肝原性黃疸 或稱肝細(xì)胞性黃疸，是指在感染(如病毒性肝炎)、 中毒及肝硬化等肝病時(shí)，由于肝細(xì)胞內(nèi)或肝內(nèi)毛細(xì)膽管廣泛性病變， 使肝細(xì)胞對(duì)膽紅素?cái)z取、結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)及排泄障礙所致。第七節(jié)尿亞硝酸鹽測(cè)定干化學(xué)試劑帶法檢驗(yàn)?zāi)蛞簛喯跛猁}是尿液自動(dòng)化分析儀設(shè)置 的多項(xiàng)檢測(cè)之一，主要用于尿路感染的快速過篩試驗(yàn)，方法簡(jiǎn)便易行, 得到廣泛應(yīng)用。一、干化學(xué)法測(cè)定

41、的原理 干化學(xué)試劑帶法測(cè)定尿亞硝酸鹽試劑帶膜塊中，主要含有氨 基磺胺（或氨基苯砷酸）和1, 2, 3, 4四氫并喹啉一3酚（或N 萘基 乙二胺 ）物質(zhì)（表 322），而大多數(shù)尿路感染是由大腸埃希氏菌引起， 正常人尿液中含有來(lái)自食物或蛋白質(zhì)正常代謝產(chǎn)物的硝酸鹽。當(dāng)尿液中有大腸埃希氏菌增加時(shí),可將硝酸鹽還原為亞硝酸 鹽,其可將膜塊中的氨基磺胺 （或氨基苯砷酸 ）重氮化而成重氮鹽,后 者與1, 2, 3, 4四氫并喹啉一 3酚（或 N 萘基乙二胺）偶聯(lián)，使 膜塊產(chǎn)生圖 316、圖 317）,借以診斷患者是否被腸桿菌科細(xì)菌感 染。其檢出敏感度為0. 30. 6mg/L。二、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)（一）尿路感染的

42、病原微生物種類 尿亞硝酸鹽檢查先決條件是尿液中的致病菌必須含有硝酸鹽 還原酶。從尿路感染患者尿液分離出巧病原微生物有： 大腸假單胞菌、 變形假單胞菌、 克雷伯氏桿菌、 糞鏈球菌、葡萄球菌、 綠膿假單胞菌、 厭氧菌（如消化球菌、消化鏈球菌、韋榮氏球菌、擬桿菌 ）、酵母菌 （如 白色念珠菌、圓球擬酵母菌 ）、支原體刃人型支原體、 酵母支原體 ）等。 急性尿路感染單純由大腸桿菌引起者占85,而慢性腎炎由大腸桿菌引起者占 52,有些則是大腸桿菌與其他細(xì)菌 （如葡萄球菌、腸球 菌 ）的混合感染。腸菌科的大腸桿菌、虱大腸桿菌、變形桿菌、產(chǎn)氣 桿菌寧綠膿桿菌及部分厭氧菌皆含硝酸鹽還原酶，可使尿亞硝酸鹽測(cè)定呈

43、陽(yáng)蘭反應(yīng)。 而糞鏈球菌因缺乏此酶可出現(xiàn)陰性反應(yīng)。 用婦女陰道 及宮頸部分離出的多種真菌進(jìn)行了還原適酸鹽實(shí)驗(yàn)研究, 結(jié)果表明短 密青霉菌還原硝酸鹽陽(yáng)性率很高，約為 72 73，五峰霉菌為 67， 65，酵母及假絲酵母屬真菌還原陽(yáng)性率低。白曲霉、土曲霉、黃柄 曲霉、屢地青霉、 產(chǎn)紫青霉及磚紅酵母還原陽(yáng)吃率很高。尿路感染的 病原微生物種類見表 3 23。（二）體內(nèi)適量硝酸鹽的存在 尿液中需有適量硝酸鹽，一是來(lái)源于食物中的硝酸鹽，如加工肉 制品及某些地區(qū)飲水也是硝酸鹽的來(lái)源， 二是來(lái)源于體內(nèi)蛋白質(zhì)正常 代謝產(chǎn)物的硝酸鹽； 三是體內(nèi)可由氨內(nèi)源性合成硝酸鹽。 尿硝酸鹽排 泄增加不是因體內(nèi)硝酸鹽分解代謝降低

44、， 而是加速硝酸鹽的生物合成 所致。體內(nèi)缺乏硝酸鹽，盡管有細(xì)菌也將出現(xiàn)假陰性結(jié)果。（三）尿液標(biāo)本留取的時(shí)間尿液應(yīng)在膀胱停留間隔 4h 以上，使細(xì)菌有充分的作用時(shí)間， 故以早晨留取第一次尿液為宜。 間隔時(shí)間過短，試驗(yàn)易呈假陰性反應(yīng)。 留取尿液樣杯應(yīng)清潔，并應(yīng)盡快檢測(cè)，否則易出現(xiàn)假陽(yáng)性。（四）藥物的影響 使用利尿劑可使尿中硝酸鹽含量不高，本試驗(yàn)呈假陰性；硝 基呋喃可能降低亞硝酸鹽反應(yīng)的靈敏性； 非那吡啶可引起假陽(yáng)性； 使 用抗生素細(xì)菌被抑制時(shí)，可出現(xiàn)假陰性；使用大量維生素 C（250mg L 或以上 ）時(shí)，可出現(xiàn)假陰性結(jié)果等。高比重尿可使本試驗(yàn)敏感性降低；若尿液中含亞硝酸鹽離子W lmg 兒，可出

45、現(xiàn)假陰性。三、尿亞硝酸鹽測(cè)定的臨床意義(1)參考范圍，尿亞硝酸鹽定性試驗(yàn)，一般為陰性。(2)尿亞硝酸鹽陽(yáng)性常見于大腸埃希氏菌引起的泌尿系感染， 其檢出敏感度為0. 30. 6mg/L。同時(shí)符合以下三個(gè)條件：感染 的細(xì)菌含有硝酸鹽還原酶； 食物中含有適量的硝酸鹽； 尿液標(biāo)本 在膀胱停留間隔 4h 以上，并除外藥物等干擾因素。此實(shí)驗(yàn)診斷大腸 埃希氏菌感染的符合率為 80，反之呈陰性結(jié)果。因此，本實(shí)驗(yàn)陰 性并不能排除菌尿的可能； 同樣，亞硝酸鹽陽(yáng)性也不能完全肯定泌尿 系統(tǒng)感染， 標(biāo)本放置過久或污染可呈假陽(yáng)性， 應(yīng)結(jié)合其他尿液檢查結(jié) 果綜合分析，得出正確的判斷。(3) 文獻(xiàn)報(bào)告，單一測(cè)定亞硝酸鹽診斷尿

46、路感染的敏感性比干化學(xué)檢查白細(xì)胞25/PI低，而比白細(xì)胞100/Pl高；按白細(xì)胞100 / P1診斷尿路感染的特異性，比亞硝酸鹽陽(yáng)性及白細(xì)胞 25/ P1要 高；同時(shí)用干化學(xué)法測(cè)定亞硝酸鹽及白細(xì)胞時(shí)，亞硝酸鹽陽(yáng)性+白細(xì)胞251組合方式診斷尿路感染，比亞硝酸鹽陽(yáng)性+白細(xì)胞100/ 山診斷尿路感染可靠性大。用亞硝酸鹽 +白細(xì)胞組合，敏感性和特異 性分別為89. 8%和92. 0%,陰性預(yù)測(cè)值98. 6%,說明陽(yáng)性不能 肯定為菌尿， 但陰性基本可除外菌尿。 檢出革蘭氏陰性桿菌尿優(yōu)于革 蘭氏陽(yáng)性菌尿。當(dāng)白細(xì)胞W 25/弘1時(shí)，亞硝酸鹽反應(yīng)陰性，靈敏度 83. 5%,陰性預(yù)測(cè)值97. 0%。當(dāng)白細(xì)胞50

47、0/P1時(shí)，亞硝酸鹽反 應(yīng)陽(yáng)性,靈敏度 40%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為 100%。在聯(lián)合應(yīng)用亞硝酸鹽 + 白細(xì)胞測(cè)定 5218份尿液,對(duì) 10/m1 的菌尿敏感性為 79. 2%,特異性為81, 0%(4) 亞硝酸鹽+干化學(xué)白細(xì)胞檢查+顯微鏡檢查的組合，靈敏度 和陰性預(yù)測(cè)值100%，此時(shí)的亞硝酸鹽特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值 100%。(5) 亞硝酸鹽+干化學(xué)白細(xì)胞檢查+尿培養(yǎng)用于診斷產(chǎn)科病人的尿路感染，尿培養(yǎng)陽(yáng)性證實(shí)亞硝酸鹽和白細(xì)胞的敏感性分別為43%和77%，特異性為99%和96%，兩個(gè)試驗(yàn)組合的敏感性和特異性為 92%和 95%。(6) 亞硝酸鹽+干化學(xué)白細(xì)胞檢查+蛋白質(zhì)試劑帶檢測(cè)新生兒和嬰兒尿路感染，陽(yáng)性

48、預(yù)測(cè)值很低，陰性預(yù)測(cè)值為99. 4%,男、女性別之間無(wú)差異。由此認(rèn)為，試劑帶有助于嬰兒尿路感染的診斷；可避免進(jìn)行昂貴的培養(yǎng)。綜上所述，亞硝酸鹽可作為尿路感染的過篩試驗(yàn)。但由于亞 硝酸鹽單一試驗(yàn)影響因素較多，如將亞硝酸鹽十干化學(xué)白細(xì)胞檢查組 合觀察，必要時(shí)用未離心尿標(biāo)本直接涂片進(jìn)行革蘭氏染色油鏡檢查， 可大大提高尿路感染診斷的可靠性。第八節(jié) 尿白細(xì)胞、紅細(xì)胞測(cè)定近年來(lái)，干化學(xué)尿液自動(dòng)化分析逐步在國(guó)內(nèi)普及，但不少操作者由于對(duì)干化學(xué)缺乏嚴(yán)格的過篩標(biāo)準(zhǔn)旬質(zhì)量控制措施， 往往造成實(shí)驗(yàn)誤差，甚至延誤疾病的診斷。目前較為突出的是，只看干化學(xué)檢查 的白細(xì)抱、紅細(xì)胞結(jié)果，而忽視顯微鏡檢查的傾向。由于干化學(xué)法檢

49、查與顯微鏡檢查是兩種不同的實(shí)驗(yàn)方法，很雄找出完全對(duì)應(yīng)的關(guān)系， 本節(jié)著重討論檢驗(yàn)工作中常見的一些問題。 一、千化學(xué)法測(cè)定的原理 尿紅細(xì)胞測(cè)定試劑帶膜塊中的主要特性見表 324。其測(cè)試原 理是：尿液中的血紅蛋白或其破壞釋敦的游離血紅蛋白均含有亞鐵血 紅素，后者具有過氧化氫酶樣活性， 可使過氧化物分解釋放出新生態(tài) 氧能使無(wú)色的鄰甲聯(lián)苯胺 （或四甲替聯(lián)苯胺 ） 變成藍(lán)色的鄰甲聯(lián)苯胺 （或四甲替聯(lián)苯胺 ）物質(zhì) （見圖 318）。尿白細(xì)胞試劑帶測(cè)定膜塊中的主要成分 （表 325）是吲哚酚酯、 重氮鹽兩種， 其測(cè)定原理基于粒細(xì)胞胞漿內(nèi)含有酯酶， 此酶可作用于 膜塊中的吲哚酚酯， 使其產(chǎn)生吲哚酚， 后者與重氮

50、鹽反應(yīng)形成紫色縮 合物 （圖 319），其顏色深淺與細(xì)胞的多少呈比例關(guān)系。二、干化學(xué)法檢查注意事項(xiàng)（一）試劑帶的批間差異試劑帶不同而引起同 1 份標(biāo)本測(cè)定結(jié)果的差異。（二）標(biāo)本對(duì)結(jié)果的影響 尿液標(biāo)本必須新鮮，留尿后盡量立即測(cè)定，以免紅、白細(xì)胞破 壞，導(dǎo)致干化學(xué)法與鏡檢法的人為實(shí)驗(yàn)誤差。 干化學(xué)法既可測(cè)定完整 的細(xì)胞成分，又能測(cè)定因細(xì)胞破壞胞漿內(nèi)涵物來(lái)辨別細(xì)胞的有無(wú)（通過特異或非特異性酯酶檢測(cè)白細(xì)胞， 通過血紅蛋白的過氧化物酶樣反 應(yīng)檢測(cè)紅細(xì)胞 ），因此報(bào)告時(shí)要了解臨床診斷，綜合分析，排除相互 結(jié)果的干擾。某些腎病患者的終尿，由于各種原因使細(xì)胞裂解，可導(dǎo) 致儀器壬與目測(cè)法的差異。 筆者認(rèn)為，此類

51、標(biāo)本最好不使用干化學(xué)法。（三）干擾物對(duì)紅、白細(xì)胞測(cè)定的影響1.對(duì)白細(xì)胞試驗(yàn)的干擾 干化學(xué)法檢查尿內(nèi)白細(xì)胞的原理，是基于粒細(xì)胞漿內(nèi)含有酯酶， 可作用于試劑帶膜塊中的吲哚酚酯， 操作時(shí)應(yīng)注意： 應(yīng)了解此法只 能測(cè)定粒細(xì)胞， 不與淋巴細(xì)胞反應(yīng)， 在腎移植病人發(fā)生排異反應(yīng)尿中 二淋巴細(xì)胞為主時(shí)，會(huì)出現(xiàn)陰性結(jié)果，此類病人不應(yīng)用干化學(xué)法檢驗(yàn)， 應(yīng)該以顯微鏡檢查法為準(zhǔn)。尿液污染甲醛，或高濃度膽紅素，或使 用某些藥物 （如呋喃咀啶 ）時(shí)，可產(chǎn)生假陽(yáng)性；尿蛋白 >5gL ，或尿液 含有大劑量先鋒 IV 、慶大霉素等藥物時(shí)，可使結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰 性。2對(duì)紅細(xì)胞試驗(yàn)的干擾 尿液中含有對(duì)熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白或

52、菌尿，可引起干化學(xué) 法測(cè)定尿紅細(xì)胞的假陽(yáng)性； 易使檢測(cè)紅紐胞出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因主要是 熱不穩(wěn)定過氧化物酶的干擾。筆者對(duì) 690 例尿液進(jìn)行了分析，其中 113例化學(xué)陽(yáng)性，鏡檢陰性，進(jìn)一步用金標(biāo)法抗 Hb 單克隆抗體檢查 也為陰性；但將尿液加熱煮沸后再進(jìn)行一化學(xué)檢查，結(jié)果為陰性，說 明假陽(yáng)性是由于存在不耐熱的過氧化物酶所致。 尿液中大量維生素 C 的存苧，可競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)致使干化學(xué)法產(chǎn)生假陰性，應(yīng)予警惕。為 了探討何種方式用藥可對(duì)試驗(yàn)有干擾，筆舌使用了前述的方法（見第 四節(jié)），發(fā)現(xiàn)靜脈滴注維生素 C5h 后才能達(dá)到不影響尿紅細(xì)胞測(cè)定的 水平。百此靜脈滴注后，原則上在 5h 內(nèi)不要留尿液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)

53、； 不同廠家的儀器和試劑帶對(duì)維生素 C的影碉程度也不同（表326）。 儀器一1的試劑帶中含有破壞維生素 C的酶，尿內(nèi)維生素C濃度高達(dá) 1 OOOmg時(shí)，也不干擾紅細(xì)胞的檢測(cè)；儀器一2、儀器一3及配套試劑 帶則較差，維生素 C 濃度分別在 200mgL 和 omg L 時(shí)即有干擾。 為了避免這個(gè)問題，目前國(guó)外有多種抵抗維生素 C 干擾的試劑帶， 或使用可同時(shí)檢測(cè)維生素 C 的試劑帶，在檢測(cè)尿液病理成分的同時(shí) 監(jiān)測(cè)尿維生素 C 的濃度。（四）細(xì)胞破壞造成的“假陰性”現(xiàn)象 所述“假陽(yáng)性”、“假陰性”現(xiàn)象，是以顯微鏡檢查為基礎(chǔ)的。由于干化學(xué)法是檢測(cè)細(xì)胞胞漿內(nèi)涵物來(lái) Q別細(xì)胞的有無(wú)（通過特異或 非特異性

54、酯酶檢測(cè)白細(xì)胞， 通過血紅蛋白的過氧化物酶樣反應(yīng)檢測(cè)紅 細(xì)墅，在實(shí)際工作中可能存在下列問題：由于尿液在膀胱貯存時(shí) 間過長(zhǎng)或標(biāo)本放置時(shí)間延長(zhǎng)，導(dǎo)致白細(xì)眶破壞，酯酶釋放到尿液中， 造成干化學(xué)法陽(yáng)性、鏡檢陰性的所謂“假陽(yáng)性”現(xiàn)象。腎病患者的 紅細(xì)胞在腎蛀或泌尿道破壞，或尿比重過低、尿 pH 偏高，均易造成 紅細(xì)胞破壞，血紅蛋白放出并出現(xiàn)尿中，造成謂紅細(xì)胞干化學(xué)檢查 的“假陽(yáng)性”現(xiàn)象。因此在干化學(xué)法結(jié)果與顯微鏡下所見出現(xiàn)矛盾時(shí)， 要結(jié)合臨床綜合分析， 甚至要?jiǎng)討B(tài)觀察， 切不可一概否定干化學(xué)法結(jié) 果。（五）鏡檢法與干化學(xué)法的相應(yīng)關(guān)系有作者報(bào)道了干化學(xué)與鏡檢兩種方法檢查尿紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的 對(duì)應(yīng)關(guān)系，發(fā)現(xiàn)這

55、兩種方法雖然結(jié) Q 沒有明顯的對(duì)應(yīng)關(guān)系，但每一 等級(jí)尿分析儀結(jié)果對(duì)應(yīng)鏡檢紅細(xì)胞計(jì)數(shù)有較好的百分比范圍， 特別是 干學(xué)“neg”檔，3/HP占100%，紅細(xì)胞w 10/ 1,鏡檢正 常占99. 82%, 35/HP占0. 18%。鑒于此種現(xiàn)象.筆者認(rèn)為在 排除上述病理或其他干擾因素存在下，儀器結(jié)果為“紅細(xì)胞w 10/PI” 時(shí),可以省略顯微鏡喧查,而其他檔次 （25l、50/P1、1501 和 2 50/ P 1 ）均有較大的交叉,必須鏡檢。由于尿液分析儀白細(xì)胞檢測(cè)與顯微鏡下計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)原理截然不 同,報(bào)告方式是兩種不同的概念,很難找出兩者的對(duì)應(yīng)關(guān)系,迄今還 沒有一種直接的換算方式。 屢有文獻(xiàn)報(bào)道了

56、計(jì)算板計(jì)數(shù)與儀器結(jié)果的 內(nèi)在聯(lián)系, AIwaII 報(bào)道每高倍視野白細(xì)胞數(shù)大約是儀器法報(bào)告 （白細(xì) 胞數(shù)/ FAI）數(shù)的11%; Loosyt等指出，白細(xì)胞/ PI是白細(xì)胞/高倍視 野的 10. 8倍,筆者的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是 8, 7 倍,因此儀器法白細(xì)胞檢查 只是一個(gè)篩選實(shí)驗(yàn),決不可代替顯微鏡檢查。三、千化學(xué)過篩的標(biāo)準(zhǔn)所謂過篩,就是在儀器、試劑帶質(zhì)量合格,檢驗(yàn)人員相對(duì)穩(wěn)定 的條件下制定一個(gè)標(biāo)準(zhǔn),達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)可視為尿沉渣成分在正常范圍 內(nèi),免除進(jìn)一步顯微鏡檢查。一般認(rèn)為,鏡檢結(jié)果白細(xì)胞數(shù)在o5/HP、紅細(xì)胞數(shù)在03/HP和透明管型在01/LP的范圍內(nèi)，為 尿沉渣參考范圍。如果一個(gè)標(biāo)本經(jīng)過兩種方法 檢查,

57、干化學(xué)結(jié)果符合過篩標(biāo)準(zhǔn),鏡檢結(jié)果在正常范圍,說明過篩是 正確的。干化學(xué)結(jié)果不符合過篩標(biāo)準(zhǔn)，鏡檢結(jié)果也異常，說明過篩是 正確的。干化學(xué)結(jié)果異常，鏡檢結(jié)果正常，視為假陽(yáng)性；反之干化學(xué) 結(jié)果正常，鏡檢結(jié)果異常，視為假陰性。由于過篩的目的是篩出正常、 鏡檢病理性標(biāo)本， 因此過篩的原則是不能出現(xiàn)假陰性， 否則就耍漏診。 干化學(xué)結(jié)果假陽(yáng)性的標(biāo)本經(jīng)過鏡檢后即可得到糾正。 雖假陽(yáng)性不如假 陰性那么重要，但假陽(yáng)性結(jié)果過多， 鏡檢量過多，達(dá)不到過篩的目的。為了探討過篩標(biāo)準(zhǔn)，筆者利用雙盲法同時(shí)對(duì) 6349 例尿液標(biāo)本 采用干化學(xué)法 （寶靈曼公司生產(chǎn)的 MiditronR 型尿液分析儀和配套試 劑帶）和顯微鏡檢查方法進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果顯示：如果以