夾心法雙對(duì)數(shù)向平滑曲線的轉(zhuǎn)換

1、夾心法雙對(duì)數(shù)向平滑曲線的轉(zhuǎn)換前面提到回歸擬合要求指標(biāo)，2必須大于0.9。這是一個(gè)最基本的要求，尸2越接近于1,表示濃度與吸光值的線性關(guān)系越好，標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性越好。我們的出廠指標(biāo)要求在0.99以上。最基本的擬合方式是雙對(duì)數(shù)擬合方式與logit擬合方式。這都是直線擬合的。但有時(shí)侯推薦的擬合方式并不是最適用的。本節(jié)講的是利用曲線回歸方式來(lái)改善檢測(cè)結(jié)果。夾心法實(shí)驗(yàn)一般采用log-log雙對(duì)數(shù)直線模型。如下面AFP例子所示。標(biāo)準(zhǔn)品SoSiS2S3S4S5S6濃度ng/ml010204080160320吸光值0.0050.1260.2060.3590.6881.0541.879按照第一種模型-雙對(duì)數(shù)

2、直線模型進(jìn)行計(jì)算。點(diǎn)擊“回歸/擬合”查看方程參數(shù)，點(diǎn)擊“回歸方程”。rA2二0.99805,擬合效果非常好。標(biāo)準(zhǔn)品SoSiS2S3S4S5S6但由于實(shí)驗(yàn)室條件差異，有些實(shí)驗(yàn)室會(huì)出現(xiàn)吸光值偏高。標(biāo)準(zhǔn)品吸光值如下表:濃度ng/ml010204080160320吸光值0.0100.1960.3680.6151.0281.8542.379回歸方以合模型以 |直線回歸三）繳據(jù)列賃據(jù)列|對(duì)黔1 0為幾二|柝?cái)?shù)（K內(nèi)）1二|如果仍按照上面的雙對(duì)數(shù)直線方程進(jìn)行擬合，會(huì)出現(xiàn)下面的曲線:ELISACalc回歸/擬合廿算程序-g1觀察曲線，S5,S6處有點(diǎn)平，似乎略呈S形。檢查方程參數(shù)，rA2=0.98921。如果

3、標(biāo)本吸光值為0.6,計(jì)算濃度為40.99ng/mlo標(biāo)本吸光值為1.8時(shí)，計(jì)算濃度為180.6ng/ml。我們可以采用曲線擬合方式來(lái)改善結(jié)果。首先選用logistic曲線lo這時(shí)左側(cè)“X數(shù)據(jù)列”及“Y數(shù)據(jù)列”處要改作不轉(zhuǎn)換。如果查看回歸方程參數(shù)，可以發(fā)現(xiàn)rA2=0.99883。這一曲線相關(guān)性非常好，標(biāo)本吸光值為0.6時(shí)，計(jì)算濃度41.5ng/ml,標(biāo)本吸光值為1.8時(shí),計(jì)算濃度為154.7ng/ml。我們可以看到,高吸光值的標(biāo)本濃度變化較大，而低吸光值區(qū)的標(biāo)本濃度變化較小。這是因?yàn)槲覀兩厦娴幕c(diǎn)S5,S6屬于高濃度區(qū)。ELISA Calc回歸/擬合計(jì)緯程序f 0.區(qū)回歸卅以合槨型M廠使用kgi朋：的一般簾式國(guó)P含有常數(shù)頊I）數(shù)'加BJrirr熔血e：J:.復(fù)用IJ©L1rmi：退出（Q）ri幫助（Hk回歸方程舊）由Yv+MX由X計(jì)宜略差一些。同樣也可以采用logistic曲線2（四參數(shù)）來(lái)進(jìn)行擬合。效果差不多。rA2=0.99715。但用logistic曲線擬合3（五參數(shù)）時(shí)，計(jì)算出錯(cuò)，未能形成曲線。ELISA