酶工程學(xué)-第十一、十二周分子修飾

1、酶工程學(xué)Enzyme Engineering 第六章第六章酶工程學(xué)酶工程學(xué)第十一周 學(xué)習(xí)內(nèi)容 緒論(第一章)第一章第一章酶工程學(xué)酶工程學(xué) 酶的生產(chǎn) 酶的改性 酶的應(yīng)用酶生物合成的基本理論(第二章)酶的生物合成法(第三章)酶的提取與分離純化(第四章)酶改性的基本理論(第五章)酶分子修飾酶分子修飾(第六章)酶固定化(第七章)酶應(yīng)用的基本理論(第八章)酶反應(yīng)器的應(yīng)用(第九章)酶的應(yīng)用領(lǐng)域(第十章)第六章 酶分子修飾通過各種方法使酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的技術(shù)過程稱為酶分子修飾。酶分子側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)修飾：使酶分子的側(cè)鏈基團(tuán)發(fā)生改變，從而改變酶分子的特性和功能的修飾方法。定義

2、：定義：?；噭┛杀恍揎椀陌被釟埢鶄?cè)鏈例如：丹磺酰氯，二甲氨基萘磺酰氯，DNS烷基化試劑可被修飾的氨基酸殘基側(cè)鏈R X：2，4二硝基氟苯，DNFB多肽序列分析法：Sanger N-端序列分析法，1945年Na2S4O6：連四硫酸鈉四硝基甲烷二硫二硝基苯甲酸二硫二硝基苯甲酸4，4二硫二吡啶二硫二吡啶對氯汞苯甲酸對氯汞苯甲酸2氯汞氯汞4硝基苯酚硝基苯酚N-乙基馬來酰亞胺乙基馬來酰亞胺過氧化氫氧化過氧化氫氧化氨基的化學(xué)修飾氨基的化學(xué)修飾乙酸酐乙酸酐246三硝基苯酚三硝基苯酚24二硝基氟苯二硝基氟苯碘代乙酸碘代乙酸還原烷基化還原烷基化丹磺酰氯丹磺酰氯碳二亞胺碳二亞胺硼氟化三甲鋅鹽硼氟化三甲鋅鹽酯化酯

3、化焦炭酸二乙酯焦炭酸二乙酯碘乙酸碘乙酸碘化反應(yīng)碘化反應(yīng)胍基的化學(xué)修飾胍基的化學(xué)修飾丁二酮丁二酮12環(huán)己二酮環(huán)己二酮苯乙二醛苯乙二醛RNADNA2OH脫氧腺苷酸脫氧腺苷酸二、常用的修飾劑右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等右旋糖酐肝素聚蔗糖聚賴氨酸聚乙二醇三、修飾方法修飾酶四、大分子化學(xué)修飾的優(yōu)點(diǎn)四、大分子化學(xué)修飾的優(yōu)點(diǎn)1. 1.通過修飾提高酶的活性通過修飾提高酶的活性核糖核酸酶 Vs 右旋糖酐修飾核糖核酸酶 1 ： 2.25胰凝乳蛋白酶 Vs 右旋糖酐修飾胰凝乳蛋白酶 1 ： 5.12.2.通過修飾增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性通過修飾增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性酶的半衰期t1/2：酶的活力降低到原來活力一半時

4、所經(jīng)過的時間。很多修飾劑分子具有多個活性基團(tuán)，常與酶形成多點(diǎn)交聯(lián)，使酶的空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，特別是使酶活性中心的構(gòu)象得到保護(hù)。舉例：超氧化物岐化酶（舉例：超氧化物岐化酶（SODSOD）O2- + O2- + 2H+ =H2O 2 +O2SOD作用：保護(hù)DNA，蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜SOD藥用：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，白內(nèi)障，膀胱炎，皮膚炎，紅斑狼瘡等。SOD靜脈注射：t1/2=630min右旋糖酐-SOD：t1/2=7h聚乙二醇-SOD：t1/2=35h3.3.通過修飾降低或消除酶的抗原性通過修飾降低或消除酶的抗原性當(dāng)外源蛋白非經(jīng)口進(jìn)入人或動物體內(nèi)后，體內(nèi)血清中就可能出現(xiàn)與此外源蛋白特異性結(jié)合的物質(zhì)，這些物質(zhì)稱為抗體，能引起體內(nèi)產(chǎn)生抗體的物質(zhì)稱為抗原。大分子化學(xué)修飾是降低甚至消除酶抗原性的有效方法之一乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic A