檢測(cè)生物組織中的還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)

1、 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)鑒定物質(zhì)試劑試劑實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)淀粉淀粉 碘碘 藍(lán)色藍(lán)色 l實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)材料的選擇實(shí)驗(yàn)材料的選擇材料的選擇材料的選擇材料的處理材料的處理還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定脂肪的鑒定脂肪的鑒定含還原糖高，色淺含還原糖高，色淺如蘋果和梨如蘋果和梨含脂肪多，色淺含脂肪多，色淺如花生如花生浸泡浸泡34小時(shí)小時(shí)/蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定含蛋白質(zhì)多，色淺含蛋白質(zhì)多，色淺黃豆或雞蛋清黃豆或雞蛋清黃豆需浸泡黃豆需浸泡1-2天，天，雞蛋清要先稀釋雞蛋清要先稀釋淀粉

2、的鑒定淀粉的鑒定含淀粉多，色淺，含淀粉多，色淺，如馬鈴薯如馬鈴薯/白色或近白色，避免顏色的干擾白色或近白色，避免顏色的干擾選材選材l實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程(步驟步驟)1.可溶性還原糖可溶性還原糖 制備組織樣液：制備組織樣液：制漿：去皮、切塊、研磨，制漿：去皮、切塊、研磨，過濾：（用單層紗布）過濾：（用單層紗布）取液：取液：（mL）顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 現(xiàn)象：現(xiàn)象： (用前混勻用前混勻)5065.C水浴水浴加熱加熱2min還原糖的檢測(cè)和觀察：還原糖的檢測(cè)和觀察：還原糖的檢測(cè)結(jié)果還原糖的檢測(cè)結(jié)果2.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材：花生種子（浸泡取材：花生種子（浸泡h），去皮，將子葉削成薄片），去皮，將子葉削成薄

3、片 制片：制片：選取選取最薄的最薄的薄片移至載玻片中央薄片移至載玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹) 染液染液2 3滴，滴，染色染色min滴加體積分?jǐn)?shù)為滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴，洗滴，洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹 )吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時(shí)裝片臨時(shí)裝片顯微觀察：顯微觀察： 先低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察先低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察現(xiàn)象：現(xiàn)象：有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪的檢測(cè)結(jié)果脂肪的檢測(cè)結(jié)果脂肪微粒脂肪微粒3.蛋白質(zhì)

4、的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液：組織樣液：黃豆組織樣液（或雞蛋蛋清稀釋液）黃豆組織樣液（或雞蛋蛋清稀釋液）顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)現(xiàn)象：現(xiàn)象：無色無色紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供提供Cu2+)蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果4.淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材：馬鈴薯勻漿取材：馬鈴薯勻漿檢測(cè)：檢測(cè)：碘液碘液2滴滴現(xiàn)象：現(xiàn)象： 搖勻后變成藍(lán)色搖勻后變成藍(lán)色比較項(xiàng)比較項(xiàng)目目試劑及成試劑及成分分原理原理溶液濃度溶液濃度方法方法加熱加熱與否與否結(jié)結(jié)果果可溶還可溶還原糖的原糖的鑒定鑒定斐林試劑斐林試劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4磚磚紅紅色色沉沉淀淀蛋白質(zhì)蛋白

5、質(zhì)的鑒定的鑒定雙縮脲試雙縮脲試劑劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合，而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL，然，然后后再加再加CuS044滴，搖勻。滴，搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí)，為什么要留出、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí)，為什么要留出一部分樣液？一部分樣液？作對(duì)照作對(duì)照2、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能過量？過量？ 過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會(huì)與試劑會(huì)與試劑A A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久