額葉底部腦挫裂傷后血清BDNF濃度變化及意義

1、額葉底部腦挫裂傷后血清BDNF濃度變化及意義        【摘要】     目的 探討額葉底部挫裂傷患者血清中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)濃度變化及其臨床意義。方法 用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)50例健康人和52例輕、中度額葉底部腦挫裂傷患者血清中BDNF濃度在傷后12 h內(nèi)、3天、7天、1個(gè)月的變化規(guī)律并結(jié)合傷情進(jìn)行比較分析。結(jié)果 52例額葉底部腦挫裂傷患者血清BDNF濃度在傷后12 h內(nèi)已較正常對(duì)照組升高;第3天顯著升高，達(dá)所測(cè)時(shí)間點(diǎn)的高值;第7天所測(cè)濃度已

2、降低，但仍高于正常對(duì)照組;1個(gè)月與正常對(duì)照組濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;不同受傷程度的患者其血清BDNF濃度差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 BDNF在額葉底部腦挫裂傷后的含量變化與損傷時(shí)間、損傷程度具有相關(guān)性，可以作為臨床額葉底部損傷時(shí)間、損傷程度、發(fā)現(xiàn)隱匿型額葉底部挫裂傷、及時(shí)發(fā)現(xiàn)挫裂傷加重情況及評(píng)估其治療效果的指標(biāo)。     【關(guān)鍵詞】  額葉底部腦損傷;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子    Variation of lever of BDNF in serum and its clinical sig

3、nificance in patients with frontal bottom lacerationDAI Wei-chuan,CHEN Jun-yan,GAO Hong-zhi,et al.Department of Neurosurgery,Fujian Medical University Second Hospital,Quanzhou 362000,ChinaAbstract Objective To explore the variation of the lever of BDNF in the serum and its clinical significance in f

4、rontal bottom laceration patients.Methods Using the way of ELISA determines the lever of BDNF in the serum on the third hour，the third day，the seventh day，the first month in 68 patients ground and 50 cases of normal controls.Results The lever of BDNF has statistical significance between the grounds

5、and the normal controls，beginning to rise on the third hours，at the peak on the third day，declining on the seventh day，decreasing to norm after the first month.The differences of the lever of BDNF have statistical significance in different degree of injury patients.There is the correlation between t

6、he variation of the lever of BDNF and the injury time and damage degree.Conclusion The lever of BDNF can be used as indicators of injury time and damage degree and prognostic in frontal bottom laceration patients.Key words laceration of frontal bottom;BDNF隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)和交通等的發(fā)展，我國(guó)顱腦傷發(fā)生率和致死致殘率呈逐年增加趨勢(shì)，其中中-重型顱腦

7、損傷所占的比例也逐漸升高;額葉底部腦挫裂傷是臨床常見(jiàn)腦損傷類型，其損傷程度的定量評(píng)估及預(yù)后的早期評(píng)價(jià)一直受到科研及臨床研究的廣泛重視，本試驗(yàn)采用ELISA法檢測(cè)血清中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)濃度，觀察其濃度的變化規(guī)律。1 資料和方法1.1 一般資料 本試驗(yàn)研究對(duì)象為2007年8月至2009年8月因額葉底部挫裂傷收住我科的52例患者，所有病例均經(jīng)頭顱CT、MRI顯示為額葉底部挫裂傷，影像學(xué)資料顯示挫裂傷主要位于額葉底部，以雙側(cè)或單側(cè)額葉的內(nèi)側(cè)明顯。52例中，男36例，女16例;年齡1953歲，平均32.8歲;致傷原因:車禍傷45例，墜落傷4例，打擊傷3例;其中對(duì)沖傷15例，直接損傷37例;

8、入院GCS評(píng)分：912分24例，1315分28例;47例保守治療，5例手術(shù)治療;無(wú)死亡病例;并排除以下情況：(1)既往有顱腦外傷史及腦血管意外史或其他顱內(nèi)占位病史、腦炎史等;(2)有精神病史或吸毒，長(zhǎng)期嗜酒史;(3)年齡<18歲或>55歲;對(duì)照組為來(lái)我院體檢的健康人群;對(duì)照組及試驗(yàn)組均取得患者或家屬的配合，并得到倫理委員會(huì)許可。1.2 方法 (1)試驗(yàn)儀器及設(shè)備：采用ELISA測(cè)定BDNF濃度，BDNF的ELISA試劑盒購(gòu)自美國(guó)Promega公司，檢測(cè)的靈敏度最小值為15.6 ng/L，批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為3.1%和3.6%。檢測(cè)儀器采用Bio-rad酶標(biāo)儀、自動(dòng)洗板機(jī)、紫外分

9、光光度計(jì)及ELISA分析軟件。(2)試驗(yàn)方法：分別抽取額葉底部挫裂傷受試者傷后12 h內(nèi)、3天、7天、1個(gè)月時(shí)空腹肘靜脈血6 ml置于不含抗凝試管中，立即予高速離心機(jī)離心10 min后取血清(離心半徑8 cm，2 500 r/min)，-80 深低溫保存待測(cè)。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，各變量以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，符合正態(tài)分布的連續(xù)型資料采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，方差不齊者均進(jìn)行相應(yīng)的矯正;應(yīng)用多樣本單因素方差分析及SNK-q檢驗(yàn)比較相同時(shí)間點(diǎn)不同程度損傷之間關(guān)系及相同程度損傷不同時(shí)間點(diǎn)之間BDNF濃度的關(guān)系。表1 損傷程度不同的額葉

10、底部挫裂傷受試者不同時(shí)間點(diǎn)血清BDNF水平注：相同時(shí)間點(diǎn)不同程度損傷之間比較，*P<0.05;相同程度損傷不同時(shí)間點(diǎn)之間的比較，P<0.05;損傷程度評(píng)分按Glasgow昏迷評(píng)分法，本組試驗(yàn)組擬設(shè)912分為中型，1315分為輕型圖1 不同程度損傷患者血清BDNF含量(3天) 圖2 傷后不同時(shí)間段BDNF含量(中型)2 結(jié)果額葉底部損傷患者血清BDNF濃度在傷后12 h內(nèi)、第3天、第7天所測(cè)水平均高于正常對(duì)照組的水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);第3天的濃度與12 h內(nèi)、第7天、1個(gè)月時(shí)的濃度差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，出現(xiàn)所測(cè)時(shí)間點(diǎn)的最高值;第7天所測(cè)濃

11、度已降低，但仍高于正常對(duì)照組(P<0.05);1個(gè)月濃度恢復(fù)正常水平，與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。中度損傷額葉底部損傷患者血清BDNF濃度在傷后12 h內(nèi)、第3天、第7天均高于輕度損傷組(P<0.05)。不同程度示不同時(shí)間點(diǎn)額葉底部損傷BDNF變化曲線圖。見(jiàn)圖1，圖2。3 討論額葉底部腦挫裂傷臨床常見(jiàn)腦損傷類型，挫裂傷部位靠近顱底，影像上顯示血腫多位于額葉底部及雙側(cè)額葉內(nèi)側(cè)，出血量不多，早期癥狀可能不明顯，除腦膜刺激征及視乳頭水腫外，無(wú)其他神經(jīng)系統(tǒng)陽(yáng)性體征，但隨著腦水腫加重，病情可能于好轉(zhuǎn)后突然惡化，清醒時(shí)即刻轉(zhuǎn)入昏迷，出現(xiàn)雙瞳孔散大形成腦疝，預(yù)后不

12、良，故及時(shí)發(fā)現(xiàn)隱匿型額葉底部挫裂傷和及時(shí)發(fā)現(xiàn)額葉底部挫裂傷加重的病情變化就顯得相當(dāng)重要。BDNF是由德國(guó)神經(jīng)化學(xué)家Barde于1982年首次從豬腦中分離純化出具有促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)活性的一種堿性蛋白質(zhì)，屬于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素家族1;其主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，在大腦皮質(zhì)尤其是額葉底部中亦大量存在，通過(guò)自分泌或旁分泌途徑分泌至損傷靶神經(jīng)元，再與TrkB受體結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)2，其不僅在抵抗神經(jīng)損傷，促進(jìn)神經(jīng)元的修復(fù)、分化、增殖，加強(qiáng)神經(jīng)功能恢復(fù)等方面發(fā)揮著巨大的作用，而且具有長(zhǎng)時(shí)程營(yíng)養(yǎng)性調(diào)節(jié)功能、調(diào)控神經(jīng)元突觸傳遞活動(dòng)的作用，并在突觸可塑性等方面中扮演著極其重要的角色3。由于BDNF蛋白在是額葉底部的濃度較

13、高，當(dāng)額葉底部受損時(shí)，BDNF蛋白可釋放至腦脊液中，可通過(guò)血腦屏障進(jìn)入血液循環(huán)，故腦組織與血清中BDNF水平呈正相關(guān)，其血清BDNF濃度能部分反映腦部BDNF水平的變化4。本試驗(yàn)結(jié)果表明中度損傷組相同時(shí)間點(diǎn)所測(cè)BDNF水平均高于輕度損傷組，說(shuō)明額葉底部損傷患者病情越重，BDNF濃度越高，其水平可作為額葉底部腦挫裂傷后損傷程度的測(cè)量指標(biāo)之一，對(duì)判斷損傷程度具有一定的參考價(jià)值;額葉底部損傷不同時(shí)間點(diǎn)BDNF的濃度變化亦有一定規(guī)律，12 h內(nèi)濃度已較正常對(duì)照組升高，第3天時(shí)濃度顯著升高，1個(gè)月恢復(fù)正常水平，傷后12 h內(nèi)BDNF水平上升，BDNF可能已開(kāi)始發(fā)揮保護(hù)和修復(fù)受損神經(jīng)元的作用，第3天隨著水

14、腫的加重，BDNF濃度持續(xù)上升，出現(xiàn)所測(cè)時(shí)間點(diǎn)的高峰，接著病情逐漸好轉(zhuǎn)，BDNF濃度逐漸下降，1個(gè)月時(shí)已降至正常水平，該試驗(yàn)結(jié)果與Mohammad Mehdi Yaghoobi等5動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相仿，可作為損傷時(shí)間判斷的客觀指標(biāo)之一，對(duì)估計(jì)重型昏迷損傷患者或記憶障礙患者的損傷時(shí)間具有一定的參考價(jià)值。額葉底部損傷后BDNF保護(hù)受損神經(jīng)元的具體機(jī)制尚不明確，Lessmann等6通過(guò)動(dòng)物模型的研究推測(cè)其作用機(jī)制可能如下：(1)拮抗興奮性氨基酸毒性，穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度。BDNF可防止細(xì)胞內(nèi)、外鈣的釋放，并且可能通過(guò)誘導(dǎo)鈣結(jié)合蛋白的表達(dá)而穩(wěn)定細(xì)胞Ca2+的濃度，減少興奮性氨基酸及鈣超載引起的損傷。

15、(2)拮抗NO介導(dǎo)的細(xì)胞毒性，增強(qiáng)抗氧化酶活性，減輕自由基損傷，從而使神經(jīng)元免受損傷。(3)抑制細(xì)胞凋亡、壞死的發(fā)生。BDNF能通過(guò)阻止Caspase-3的活性而抑制細(xì)胞凋亡，并通過(guò)調(diào)節(jié)Bcl、Bax蛋白的表達(dá)而抑制細(xì)胞凋亡。(4)阻斷NMDA使蛋白激酶C(PKC)失活。(5)修復(fù)受損神經(jīng)元，并促進(jìn)受損神經(jīng)元再生，本試驗(yàn)的臨床研究成果也許能為進(jìn)一步研究BDNF在額葉底部損傷時(shí)的分子生物學(xué)機(jī)制提供一定的參考價(jià)值。目前，額葉底部的診斷主要依靠影像學(xué)CT和MRI檢查，但這些現(xiàn)代的影像學(xué)技術(shù)尚不適用于某些生命體征不穩(wěn)定或正在使用呼吸機(jī)的危重患者，在某些特殊情況下，往往無(wú)法及時(shí)進(jìn)行上述檢查。因此，檢測(cè)血

16、清BDNF水平可以成為額葉底部損傷嚴(yán)重程度、損傷時(shí)間的客觀指標(biāo)之一，可能對(duì)及時(shí)發(fā)現(xiàn)隱匿型額葉底部挫裂傷、及早發(fā)現(xiàn)挫裂傷加重程度及評(píng)估其治療效果提供一定的幫助，但鑒于本研究樣本量偏小，此結(jié)果有待擴(kuò)大樣本進(jìn)一步研究證實(shí)。    【參考文獻(xiàn)】  1 Lindsay RM，Barde YA，Davies AM，et al.Differences and similarities in the neurotrophic growth factor requirements of sensory neurons derived from neural cr

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