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1、遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告PTC 味盲基因頻率的分析劉樂樂生計(jì)11.3 2013 年 12 月 2 日一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、通過對(duì) PTC 味盲基因頻率的分析,了解群體基因頻率測(cè)算的一般方法;2、理解遺傳平衡定律,了解改變?nèi)后w平衡的因素。二、實(shí)驗(yàn)原理PTC 即苯硫脲,是一種無毒無副作用的化合物,人體對(duì)苯硫脲(PTC 嘗味的能力是由一對(duì)等位基因 ( T)所決定的遺傳性狀,其中T 對(duì) t 為不完全顯性。在不同人群中對(duì)該物質(zhì)的嘗味能力不同。利用這一原理,將 PTC 配制成各種濃度的溶液,由低濃度到高濃度逐步測(cè)試嘗味能力,由此可區(qū)分出味盲(隱性純合體)、高度敏感(顯性純合體)和介于的人(雜合體)。據(jù)此可對(duì)人群中味盲基
2、因的頻率進(jìn)行分析。二者之間正常嘗味者的基因型為TT, 能嘗出 1/750,000 ?1/6,000,000的 PTC 溶液的苦味;具有基因 Tt 的人嘗味能力較低,只能嘗出1/48,000 ?1/380,000的 PTC 溶液的苦味;基因型為 tt 的人只能嘗出 1/24,000 的 PTC 溶液的苦味,甚至對(duì)PTC 的結(jié)晶物也嘗不出苦味來,在遺傳學(xué)上被稱為味盲。哈迪一溫伯格定律也稱遺傳平衡定律,是由英國(guó)數(shù)學(xué)家哈迪(G.H.Hardy )和德國(guó)醫(yī)生溫伯格分別于1908 年和1909 年各自提出的。兩個(gè)等位基因的哈迪一溫伯格定律的公式為:( p+q )2=p2+2pq+q2=1。其中 p 代表一
3、個(gè)等位基因(如A)的頻率, q 代表另一個(gè)等位基因(如 a)的頻率 ,p2 代表一個(gè)等位基因純合子(如AA )的頻率, q2 代表另一個(gè)等位基因純合子(如 aa )的頻率, 2pq 代表雜合子(如Aa )的頻率。三、實(shí)驗(yàn)材料PTC 溶液的配制1、原液:取PTC 結(jié)晶 l.3g ,加蒸餾水1000ml ,在室溫 ( 20 C 左右 )下 1-2 日即完全溶解。2、原液的PTC濃度約為1/750,原液稀釋1 倍為2 號(hào)液,2 號(hào)液稀釋1 倍為3 號(hào)液,以此類推,直至配成14 號(hào)液,濃度為1/6,144,000。3、將配好的14 種 PTC 溶液分別置于消毒好的滴瓶中(見表一)ifi號(hào)配制方送濃 m
4、ol/L1號(hào)1 3gPT?+S?水 lOOWI1/7502號(hào)(號(hào)液 lOOif蒸憎水 100ml1/15003號(hào)2昌液 lOOnZ蒸搐水 100ml1/3000?號(hào)普號(hào)液 tOOnl + ta水 100ml1/60005 號(hào)4 號(hào)液 IDOnZ 蒸(8 水 100ml1/12000呂號(hào)液 lOOnl+STM水 100ml1/24000丁號(hào)庁號(hào)液 100H“蒸幗水 lOOni*1/480008號(hào)7號(hào)液水 10511/960009 號(hào)8號(hào)液 100nl+K|水 100ml1/19200010號(hào)9 號(hào)液 100wil+5EtS水 lOOnd1/38400011號(hào)10 號(hào)液 100M+ 蒸慣水 WOn
5、l1/76800012號(hào)討號(hào)港10011+蒸謂水 IDOml1/153600013號(hào)1? 號(hào)液10011*蒸 iff 水 100ml1/30720001住13號(hào)港10 加 1*藍(lán)儲(chǔ)水 WOrJ1/6144000表 1 各組 PTC 的濃度及對(duì)應(yīng)的基因型四、實(shí)驗(yàn)步驟基因型ttitttttttttTtTtTtTtnTTTTTT1、用滴管滴4? 5 滴溶液于受試者舌根部,讓受試者品味,然后用蒸餾水作同樣的試驗(yàn)。初始濃度不能太高。2、詢問受試者能否鑒別此兩種溶液的味道,若不能鑒別或鑒別不準(zhǔn)確,則依次用更高濃度溶液重復(fù)試驗(yàn),直至能明確鑒別出PTC 的苦味為止。3、 當(dāng)受試者鑒別出某一號(hào)溶液時(shí),應(yīng)當(dāng)再用此
6、號(hào)溶液重復(fù)嘗味三次,三次結(jié)果相同時(shí),才是可靠的。4、測(cè)定時(shí)應(yīng)將PTC 溶液與蒸餾水反復(fù)交替給受試者,且不能讓受試者知道溶液濃度,排除心理暗示作用以免影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。五、結(jié)果分析對(duì)全班同學(xué)的同學(xué)基因型進(jìn)行分析,根據(jù)哈代溫伯格定律計(jì)算出T 及 t 的基因頻率,假設(shè)班級(jí)群體是一個(gè)遺傳平衡群體,計(jì)算出平衡群體中的tt、 Tt、 TT 的理論基因頻率,并進(jìn)行 x 2 檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)結(jié)果見表2。TTTttt總計(jì)實(shí)際頻數(shù) ( 0)1518基因頻率pT= 68.6% qt=31.4%235理論頻數(shù) (C)Np 2 =16.5N2pq=15(O-Cf/C0.0730.6002N=35Np2=3.50.6431.316表 2PTC 味盲基因頻率的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總及結(jié)果分析查表可以知道,在自由度為2 的情況下, x 0.05 =5.99 , 而我們班中x =1.316 。故 x < x 0.05 ,說明實(shí)際頻數(shù)和理論頻數(shù)之間有關(guān)聯(lián)性,即在a =
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