中藥養(yǎng)胃散對大鼠胃腸粘膜中前列腺素生長抑素胃動素含量的影響

1、    中藥養(yǎng)胃散對大鼠胃腸粘膜中前列腺素 生長抑素胃動素含量的影響        摘要：目的：從生物分子學方面探討?zhàn)B胃散的治療機理，觀察用藥后胃腸粘膜中前列腺素(PG)、生長抑素(SS)、胃動素(MTL)的變化規(guī)律。方法：SD大白鼠為實驗動物，消炎痛損傷胃粘膜后，再給予中藥養(yǎng)胃散10d，用放射免疫法測定胃、腸粘膜中的PG、SS、MTL的變化規(guī)律。結(jié)果：養(yǎng)胃散能明顯增加消炎痛損傷后的胃腸粘膜中的PG(249.42±89.35ng.L-1)、SS(2.02&

2、#177;0.83ng.L-1)、MTL(98.82±29.31ng.L-1)的含量，與消炎痛組相比有顯著性差異(P0.01)。結(jié)論：中藥養(yǎng)胃散能增加胃腸粘膜內(nèi)PG、SS、MTL的分泌，是其增強胃粘膜屏障功能的機理之一。主題詞：胃粘膜/藥物作用；養(yǎng)胃散/治療應用；胃腸激素類/分析；大鼠中分類號：285.5文獻標識碼：A文章編號：1007-3213(2000)0330-02Effects of Yangwei Powder on Prostaglandin, Somatostatin and Motilin Content in Rat Gastrointestinal MucosaS

3、UN Guihua,HUANG Xiaorang,HUANG Xiaoghun,ZHOU Lan,SONG Hong,XU Benfa，ZHAN Chunlie,ZHOU Meihua(Dept. of Internal Medicine for Diseases of Digestive System, General Military Hospital of Guangzhou, Guangzhou 510010, China)Abstract:Yangwei Powder is an effective formula for chronic gastritis and peptic u

4、lcer. To explore its therapeutic mechanism at the level of molecular biology, the contents of prostaglandin (PG), somatostatin (SS) and motilin (MTL) in rat gastrointestinal mucosa were detected by radioimmunoassay. Thirty SD rats were allocated to three groups: normal control group (n=10), indometh

5、acin group (n=10) and Yangwei Powder group (n=10). Rat model with gastrointestinal mucosal injury was induced by administration of indomethacin for 2 days. Yangwei Powder was given for 10 days after the establishment of rat model. The results showed that Yangwei Powder significantly increased the co

6、ntents of PG (249.42±89.35?ng.L-1), SS(2.02±0.83?ng.L-1) and MTL (98.82±29.31?ng.L-1), the differences being significant (P0.01) as compared with indomethacin group. It is indicated that increase of PG, SS and MTL secretion may be one of the mechanisms of Yangwei Powder for the improv

7、ement of barrier action of gastrointestinal musoca. Key words: GASTRIC MUCOSA/drug effects; YANGWEI POWDER/ther. use;GASTROINTESTINAL HORMONES/analysis；RATS我們以健脾、益氣、養(yǎng)胃、活血化瘀為原則組成養(yǎng)胃散方，用于治療慢性胃炎、消化性潰瘍等常見的胃腸疾病，臨床用藥已10余年時間，收到了良好的治療效果。為了從胃腸激素方面闡明養(yǎng)胃散在保護粘膜屏障方面的作用，從分子生物學方面論闡述養(yǎng)胃散的治療機理。我們以大白鼠為實驗動物，測定養(yǎng)胃散灌胃后，胃腸粘膜

8、中前列腺素(PG)、生長抑素(SS)、胃動素(MTL)的含量。1實驗材料1.1實驗動物選用SD大白鼠，由第一軍醫(yī)大學動物實驗中心提供。共30只，雌雄各半，體重120240g/只。1.2實驗用藥及劑量實驗用單味中藥購于廣東省藥材公司。養(yǎng)胃散的處方為：干姜2g、丹參10g、黨參10g、石斛10g、炙甘草3g、九里香10g、山楂6g，各藥用水浸泡后，加水煎至50mL。消炎痛的用藥劑量按標準動物等效劑量折算法，計算出大白鼠用量，即每100g體重用中藥養(yǎng)胃散1mL，消炎痛0.02mg。1.3PG、SS、MTL標準放免藥盒PG、SS、MTL各標準藥盒分別購于：北京東亞放免技術(shù)研究所，海軍放免技術(shù)中心和解放

9、軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所。2實驗方法2.1動物分組及各組處理方法實驗用30只大鼠禁食12h，按體重隨機分為3組，分別為養(yǎng)胃散(消炎痛加養(yǎng)胃散組)，消炎痛組(消炎痛損傷組)和空白對照組。每組10只。養(yǎng)胃散組：按規(guī)定劑量給予消炎痛灌胃，每日2次，共2d；第3天起給予養(yǎng)胃散灌胃，每日2次，共10d。消炎痛組：按中藥組相同方法和劑量給予消炎痛，第3天起給予等劑量的生理鹽水灌胃，每日2次，共10d。空白對照組：給予相同劑量的生理鹽水灌胃，每日2次，共12d。2.2標本采集實驗結(jié)束后，禁食12h，處死，立即剖腹，分別留取胃粘膜(胃竇部)、十二指腸末段粘膜各約0.5cm×0.5cm，立即置于液氮

10、內(nèi)凍存?zhèn)溆谩?.3PG、SS、MTL測定及計算方法PG：取胃竇粘膜稱量后，置于微型勻漿器中，加無水乙醇0.1mL研磨，再加生理鹽水0.9mL，充分研磨制成勻漿，測前4離心(3500r/min，15min)，取上清液。以B/T(標準管計數(shù)/總計數(shù))計算NSB(非特異性結(jié)合率)、S0(標準對照)。結(jié)合百分率，以B/B0即(標準管計數(shù)-空白管計數(shù))/(零標準管計數(shù)-零空白管計數(shù))計算標準及待測樣品結(jié)合百分率，繪制標準曲線查出樣品值。SS、MTL標本處理方法相同，計算方法同PG。即取十二指腸粘膜標本稱量后，加生理鹽水12mL置于水浴鍋中煮沸3min，冷卻后加1mol/L冰醋酸0.5mL，于勻漿器中制成

11、勻漿，再用1mol/L的NaOH0.5mL中和，離心(3000r/min、30min)取上清液。2.4統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)以(<"0 (881 bytes)" src="/med/cano/201003/20100323174921129" 12 14>±s)表示，組間均數(shù)差異采用t檢驗。3結(jié)果各組胃腸激素測定結(jié)果見表1。消炎痛大幅度地降低了粘膜內(nèi) PG(P0.001)、生長抑素(P0.05)、胃動素(P0.01)的含量。中藥養(yǎng)胃散則可對抗之，使其分泌增多。表1各組胃腸激素測定結(jié)果(<"0 (881 bytes)"

12、; src="/med/cano/201003/20100323174921129" 12 14>±s)PG/(ng.L-1)SS/(ng.L-1)MTL/(ng.L-1)養(yǎng)胃散249.42±89.352.02±0.8398.82±29.31消炎痛28.81±5.63*1.79±0.23*37.68±12.5*空白對照組197.2±38.42.96±0.87124.0±45.2     *與空白對照組比P0.05，*P0.01，*

13、P0.001 4討論胃粘膜是PG主要合成場所之一，Robert報告了PG可以抑制胃酸分泌，減輕由消炎痛等刺激物質(zhì)引起的粘膜損傷，并觀察到受損傷的粘膜1h后即有遷移的上皮覆蓋1。因此，前列腺素能削弱攻擊因子對粘膜的損傷，達到保護粘膜屏障的作用。SS存在于胃粘膜的D細胞中，以胃竇和胃體部分含量最高，可視為胃粘膜的一種局部防御因子，其作用機理可能是SS與其受體結(jié)合，抑制腺苷酸活化酶的活性，降低了細胞內(nèi)cAMP濃度；SS能抑制胃酸分泌和可以致肥大細胞釋放組織胺2。李鐵等人發(fā)現(xiàn)，SS能防止損傷細胞內(nèi)基含量的減少和GSH-過氧化酶活性的降低，提高細胞清除自由基的能力。MTL主要由十二指腸遠端及空腸粘膜中M

14、細胞分泌，是一種肽類激素，主要功能是影響胃及腸道的動力，與消化間期綜合肌電(interdigestive myoelectric complex,IMC)密切相關(guān)，具有腸道“清道夫”的功效。還能刺激胃蛋白酶、胰液的分泌，有助于食物消化3，4。養(yǎng)胃散具有健脾、養(yǎng)胃、補中、益氣功效，臨床療效顯著。但從更深入的分子生物學角度了解甚少，為探討?zhàn)B胃散的治療作用與胃腸激素方面的內(nèi)在聯(lián)系，我們設計了本實驗。實驗證實消炎痛口服后，不同程度地降低了粘膜中PG、SS、MTL的含量，而養(yǎng)胃散能對抗消炎痛的這種作用，增強了粘膜屏障功能，因此，對損傷的粘膜起到了重要的保護作用，這可能是養(yǎng)胃散能明顯改善腹痛、腹脹、增進食

15、欲的內(nèi)在機理之一。養(yǎng)胃散為復方制劑，其作用機理可能是多方面的，除本組觀察到的與胃腸道的激素關(guān)系外，其他方面的作用有待進一步研究。作者簡介：孫桂華(1942-)，女，主任醫(yī)師孫桂華（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）黃小讓（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）黃小春（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）周蘭（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）宋鴻（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）許本發(fā)（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）詹純列（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）周梅花（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院消化科，廣州510010）參考文獻：1潘國宗.現(xiàn)代胃腸病學M.北京：科學出版社，1994.342Christofides N D. MotilinM.ln:Gut hormones.2nd Edition.London:Churchill Livingstone, 1981.2733Nillson B I.