歐亞旋覆花化學(xué)成分的研究

1、歐亞旋覆花化學(xué)成分的研究    【摘要】  目的研究歐亞旋覆花Inula Britannica L.的化學(xué)成分。方法采用多種分離技術(shù)對歐亞旋覆花乙醇提取物的正丁醇部位分離純化，根據(jù)其理化常數(shù)測定和光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從歐亞旋覆花中分得8個化合物，經(jīng)鑒定為 蘆丁（）、小檗堿()、萬壽菊苷（）、異槲皮苷（）、槲皮苷（）、綠原酸（）、槲皮素（）和山柰酚（）。結(jié)論化合物（）、（）、（）為首次從歐亞旋覆花植物中得到。 【關(guān)鍵詞】  歐亞旋覆花； 化學(xué)成分    Abstract：ObjectiveTo stu

2、dy the chemical constituents of Inula Britannica. MethodsThe n-butanol fractions of ethanol extract of Inula Britannica were isolated by chromatographic methods,their structures were elucidated on the basis partitioned and purified by means of several separation methods. The structures of these isol

3、ates were elucidated on the basis of physico-chemical property and spectral analysis.ResultsEight compounds were purified and their structures were identified,they were identified as rutin（）、berberine（）、patulitrin（）、isoquercitrin（）、quercitrin（）、chlorogenic acid（）、quercetin（）and kaempferol（）. Conclus

4、ion Compounds（）、（）、（）were obtained from this plant for the first time.    Key words：Inula Britannica；  Chemical constituents    歐亞旋覆花是一種傳統(tǒng)的中草藥，為菊科旋覆花屬植物歐亞旋覆花Inula Britannica L.的干燥頭狀花序，主要分布于我國、韓國和日本,該藥收載于中國藥典（2005年版）部，味咸、性溫，入肺、腎經(jīng)，具有降氣止嘔，消痰行水等功效。主治咳嗽消痰、脅下脹滿、大腹水腫、去頭目風(fēng)

5、、泄散風(fēng)寒。本實(shí)驗(yàn)從歐亞旋覆花乙醇提取液的正丁醇部分中分得8個化合物，經(jīng)光譜鑒定和與對照品對照，確定它們的結(jié)構(gòu)分別為：蘆?。ǎ?、小檗堿（）、萬壽菊苷（）、異槲皮苷（）、槲皮苷（）、綠原酸（）、槲皮素（）和山柰酚（）。其中化合物（）、（）、（）為首次從該植物分得。    1  儀器與材料    X4型顯微熔點(diǎn)測定儀（溫度未校正）；Bruker EQUINO55 型紅外光譜儀；GCT型質(zhì)譜儀；Bruker AM-500核磁共振儀；Agilent 1100 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；柱色譜用硅膠、薄層用硅膠G、薄層用硅膠GF254均為

6、青島海洋化工廠產(chǎn)品；柱色譜用聚酰胺、聚酰胺薄膜為浙江省臺州市路橋四甲生化塑料廠產(chǎn)品，葡聚糖凝膠LH-20為瑞典Pharmacia公司產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純。                   歐亞旋覆花采自山西運(yùn)城地區(qū)，經(jīng)河北醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室聶鳳?A教授鑒定為菊科植物歐亞旋覆花Inula Britannica L.。    2  方法與結(jié)果  

7、;  2.1  提取與分離取10 kg歐亞旋覆花地上部分，粉碎后用95%乙醇室溫提取3次，提取液減壓濃縮至膏狀物762g，將膏狀物分次以1 g:2 ml的比例懸浮于水中,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮得干膏。取正丁醇萃取物100 g，經(jīng)AB-8大孔吸附樹脂富集, 聚酰胺柱層析, 硅膠柱層析，氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫,葡聚糖凝膠LH-20（甲醇）純化得到化合物( 8 mg)、( 80 mg)、(12 mg )、( 30 mg ) 、( 7 mg ) 、( 8 mg ) 、(100 g ) 、(7 mg)。    2.2&#

8、160; 結(jié)構(gòu)鑒定    2.2.1  化合物黃綠色粉末，m.p. 173174，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性，Molish 反應(yīng)陽性。用TLC（三種不同的展開系統(tǒng)）和HPLC檢測，與蘆丁對照品的Rf值和tR值相同，且與蘆丁對照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)為蘆?。╮utin）。    2.2.2  化合物黃色針晶（甲醇），m.p. 283285，對改良碘化鉍鉀試劑呈陽性反應(yīng)。 EI-MS：m/z：335。 IR（KBr）cm-1：-OCH3 2947 cm-1，C=N 1633 cm-1， Ar-OCH3 1276、1331 c

9、m-1，-O-CH2-O- 1387、1359、1232 cm-1。1HNMR（400 MHz, DMSO-d6, TMS, ppm）：9.87（1H, s, H-8），8.91（1H, s, H-13），8.19（1H, d, J=9.16Hz, H-11），7.98（1H, d, J=9.00Hz, H-12），7.78（1H, s, H-1），7.08（1H, s, H-4），6.16（2H, s, -O-CH2-O-），4.91（2H, t, H-6），4.06（3H, s, -OCH3），4.08（3H, s, -OCH3），3.19（2H, t, H-5）。13CNMR（100MH

10、z, DMSO ）：150.85（C-3），150.29（C-9），148.15（C-2），145.92（C-8）， 144.10（C-10），137.95（C-13a），133.41（C-12a），131.15（C-4a），127.21（C-13），123.96（C-12），121.86（C-1a），120.90（C-11），120.64（C-8a），108.89（C-4），105.87（C-1）, 102.54（-O-CH2-O-），62.36（-OCH3），57.49（-OCH3），55.63（C-6）， 26.77（C-5）。 經(jīng)與文獻(xiàn)1，2對照，以上數(shù)據(jù)與小檗堿的波譜數(shù)據(jù)基本一致，確

11、定化合物為小檗堿。    2.2.3  化合物黃色粉末（甲醇），鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性，Molish 反應(yīng)陽性。酸水解后薄層層析，與糖的對照品對照，證明糖為葡萄糖。 LC/ESI-MS: m/z: 493.3M-H-，二級質(zhì)譜m/z: 331.3M-H-162- 。 1HNMR（400 MHz  DMSO-d6, TMS,ppm）：7.72（1H，s，H-2），7.55 （1H，d，J=8.48， H-6）， 6.94（1H，s，H-8）， 6.90（1H，d，J=8.38，H-5），5.13（1H，d，J=6.38）。經(jīng)與文獻(xiàn)35對照，確認(rèn)化合物

12、為萬壽菊苷（patulitrin）。百事通    2.2.4  化合物黃色粉末（甲醇），m.p. 234236。鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性，Molish 反應(yīng)陽性。經(jīng)過酸水解后與糖的對照品進(jìn)行薄層層析實(shí)驗(yàn)，證明為葡萄糖。LC/ESI-MS m/z: 463.2M-H-。 1HNMR（400MHz DMSO-d6, TMS,ppm）：6.18（1H，s，H-6），6.38（1H，s，H-8）， 6.82（1H，d，J=8.96Hz，H-5），7.57（1H，s，H-2）, 7.55（1H, s, H-6）， 5.44（1H, d, J=6.96, H-1）。13C

13、NMR （100MHz，DMSO ）：155.6（C-2），132.8（C-3），176.9（C-4），160.7（C-5），98.1（C-6），163.6（C-7），92.9（C-8），155.8（C-9），103.4（C-10），120.6（C-1）114.7（C-2），144.3（C-3），147.9（C-4），115.6（C-5），121.1（C-6），100.3（C-1），73.5（C-2），75.9（C-3），69.4（C-4），77.1（C-5），60.4（C-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)68對照，確認(rèn)化合物為異槲皮苷（isoquercitrin）。   

14、2.2.5  化合物黃色粉末， m.p. 183185, 鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性，Molish 反應(yīng)陽性。LC/ESI-MS：m/z:447.1M-H-，二級質(zhì)譜m/z：301.2 苷元-H-。用TLC（3種不同的展開系統(tǒng)）和HPLC檢測，與槲皮苷對照品的Rf值和tR值相同，且與槲皮苷對照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物V為槲皮苷（quercitrin）。    2.2.6  化合物無色針狀結(jié)晶， m.p. 207209, 三氯化鐵反應(yīng)墨綠色，與綠原酸已知品對照，用TLC（3種不同的展開系統(tǒng)）和HPLC檢測的Rf值和tR值一致，且與綠原酸對照品的混合

15、熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物為綠原酸（chlorogenic acid）。    2.2.7  化合物黃色粉末（甲醇），m.p. 312316，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性，Molish 反應(yīng)陰性。LC/ESI-MS：m/z：301.2 M-H-，二級質(zhì)譜：m/z 151.0A1-1。用TLC（3種不同的展開系統(tǒng)）和HPLC檢測，與槲皮素對照品的Rf值和tR值相同，且與槲皮素對照品的混合熔點(diǎn)不下降，確認(rèn)化合物為槲皮素（quercetin）。    2.2.8  化合物黃色粉末（甲醇）， m.p. 276278，鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽性，

16、Molish 反應(yīng)陰性。LC/ESI-MS: m/z: 284.9 M-H- 。用TLC（3種不同的展開系統(tǒng)）和HPLC檢測，與山柰酚對照品的Rf值和tR值相同，確認(rèn)化合物為山柰酚（kaempferol）。    3  討論    歐亞旋覆花正丁醇萃取物中所含的化合物主要是黃酮苷，大部分是槲皮素苷元，我們在醋酸乙酯部分得到1 g槲皮素，己在另文報(bào)道。    歐亞旋覆花中除含有黃酮類化合物外，還有酸素化合物和生物堿，為進(jìn)一步研究歐亞旋覆花奠定了基礎(chǔ)。    該部分還有

17、一極性較大的成分沒有得到，且通過HPLC觀察其含量很高，值得進(jìn)一步分離研究。【參考文獻(xiàn)】  1 秦海林，尚玉俊，趙 偉，等. 核磁共振氫譜法鑒別黃連的研究J.中草藥, 2000, 31(1):48.2 張起輝，高慧媛，吳立軍，等. 吳茱萸的化學(xué)成分J.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 22(1):12.3 Park EJ, Kim Y, and Kim J. Acylated flavonol glycosides from the flower of Inula britannicaJ.J Nat Prod, 2000, 63(1): 34.4 Bai NS, Zhou Zh, Zhu NQ, et al. Antioxidative flavonoids from theflower