高中生物基因工程知識詳解

1、.高中生物基因工程知識詳解 高中生物基因工程的根本工具1.“分子手術刀限制性核酸內(nèi)切酶限制酶1來源：主要是從原核生物中別離純化出來的。2功能：可以識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。3結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2.“分子縫合針DNA連接酶1兩種DNA連接酶E•coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶的比較：一樣點：都縫合磷酸二酯鍵。區(qū)別：E•coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA

2、連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。2與DNA聚合酶作用的異同:¬¬¬DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3.“分子運輸車載體1載體具備的條件：能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。2最常用的載體是¬¬質(zhì)粒,它是一種裸露的、構(gòu)造簡單的、獨立于細菌染色體之外，并具有自我復制才能的雙鏈環(huán)狀DNA分子。3其它載體： 噬菌體的衍生物、動植物病毒高中生物基因工程的應用1.植物基因工

3、程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改進植物的品質(zhì)。2.動物基因工程：進步動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物消費藥物。3.基因治療：把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用。誤區(qū)提醒動物基因工程主要是為了改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)，而不是為了產(chǎn)生體型宏大的個體。DNA分子作探針進展檢測時應檢測單鏈，即將待測雙鏈DNA分子翻開。Bt毒蛋白基因控制合成的Bt毒蛋白并無毒性，進入昆蟲消化道被分解成多肽后產(chǎn)生毒性。高中生物基因工程的根本操作程序第一步：目的基因的獲取1.目的基因是指： 編碼蛋白質(zhì)的構(gòu)造基因 。2.原核基因采取直接別離獲得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法

4、有反轉(zhuǎn)錄法_和化學合成法_。3.PCR技術擴增目的基因1原理：DNA雙鏈復制2過程：第一步：加熱至9095DNA解鏈;第二步：冷卻到5560，引物結(jié)合到互補DNA鏈;第三步：加熱至7075，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1.目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因可以表達和發(fā)揮作用。2.組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因1啟動子：是一段有特殊構(gòu)造的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。2終止子：也是一段有特殊構(gòu)造的DNA片段 ，位于基因的尾端。3標記基

5、因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞挑選出來。常用的標記基因是抗生素基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1.轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ?農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ?顯微注射技術。此方法的受體細胞多是 受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少 ，最常用的原核細胞是 大腸桿菌 ，其轉(zhuǎn)化方法是：先用 Ca2+ 處理細胞，使其成為 感受

6、態(tài)細胞 ，再將 重組表達載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3.重組細胞導入受體細胞后，挑選含有基因表達載體受體細胞的根據(jù)是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1.首先要檢測 轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子雜交技術。2.其次還要檢測 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用 用標記的目的基因作探針與 mRNA雜交。3.最后檢測 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取 蛋白質(zhì)，用相應的 抗體進展抗原-抗體雜交。4.有時還需進展 個體生物學程度的鑒定。如 轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?？戳?lt;高中生物基因工程知識詳解>的人還看了：1.高二生物基因工程知識點梳理2.高中生物選