急性B淋巴細(xì)胞白血病免疫球蛋白重鏈可變區(qū)基因的分子特

1、1急性急性 B B 淋巴細(xì)胞白血病免疫球蛋白重鏈可變區(qū)基因的分子特征淋巴細(xì)胞白血病免疫球蛋白重鏈可變區(qū)基因的分子特征劉英1 朱平2 胡亞美1 摘要摘要 目的目的 探討急性 B 淋巴細(xì)胞白血?。˙-ALL）的起源和 T 細(xì)胞表位（T cell epitope） 。方法方法 PCR 擴(kuò)增108 例 ALL 不同免疫球蛋白重鏈可變區(qū)（IgHV）亞家族的重排基因；PCR 產(chǎn)物直接測(cè)序并翻譯成氨基酸序列；利用生物信息資源分析 B-ALL IgHV 基因的重排類型、胚系基因片段利用及體細(xì)胞突變并預(yù)測(cè) T 細(xì)胞表位。結(jié)果結(jié)果 66%ALL檢測(cè)到完整的 VHDJH重排克隆，其中 34 例單等位基因重排（47.

2、89%） ，30 例雙等位基因重排（42.25%） ，7 例（9.86%）寡克隆基因重排。40 份 B-ALL IgHV 基因序列中,13 份讀框內(nèi)（in frame）重排，其中 5 份含終止密碼子；27 份讀框移位（frameshift） ；功能性重排 8 份(20%)。重排使用最多的 VH家族為 VH3（11/40） 、VH4（11/40）和 VH1（8/40） ，占 75%；VH4-59（5/40）和 VH4-34（4/40）是 VH4 家族中利用頻率最高的片段。優(yōu)先利用的 D 家族為D3（35%）和 D2（27.5%） ，D7-27 的利用率（15%）明顯高于正常 PBL（p= 1.2

3、9E-12） 。JH6 是 B-ALL 利用最多的 JH基因片段（42.50%） ，JH4（30.00%）次之；20%（8/40）的 B-ALL 在 DJH連接區(qū)缺乏 N 核苷酸的插入, 高于正常 PBL (p=0.017)。22.5%B-ALL IgHV 基因發(fā)生體細(xì)胞突變，突變的堿基散布于 IgHV 全長(zhǎng)，CDR 區(qū)替代突變與靜寂突變的比例1；26 例 B-ALL 重鏈可變區(qū)的 HLA I 類分子結(jié)合肽 80%以上位于框架區(qū),同一 VH家族的 B-ALL 有相同的 12 條九肽。 結(jié)論結(jié)論 B-ALL 起源于未受抗原刺激的祖 B 或前 B 細(xì)胞，它們的 IgHV 基因具有胚系特征；白血病的

4、惡性轉(zhuǎn)化往往發(fā)生于胚胎期；生物信息分析 B-ALL 的 T 細(xì)胞表位主要位于框架 1 和框架 3 區(qū)。 關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞 基因，免疫球蛋白；表位，T 細(xì)胞；白血病，淋巴細(xì)胞性；聚合酶鏈反應(yīng)；生物信息資源 CharacteristicsCharacteristics ofof immunoglobulinimmunoglobulin heavyheavy chainchain variablevariable regionregion genesgenes inin B-cellB-cell acuteacute lymphoblasticlymphoblastic leukemialeukemia

5、 LIU Ying *, ZHU Ping , Hu Yamei .*Beijing Childrens Hospital Affiliated to Capital University of Medical Sciences , Beijing 100045 .AbstractAbstract ObjectiveObjective To investigate the origin and T-cell epitopes of B-cell acute lymphoblastic leukemia. MethodsMethods Rearrangement genes of differe

6、nt VH families were amplified by PCR and directly sequenced for 108 children with acute lymphoblastic leukemia. Nucleotide Sequences available were translated into amino acid sequences. Bioinformatics were applied for analyzing recombination patterns，somatic mutations and usage of germline gene segm

7、ents and predicting T cell epitopes. ResultsResults Complete VHDJH rearrangements were identified in 71(66%)out of 108 cases with 34（47.89%）monoallelic rearrangements, 30（42.25%）biallelic rearrangements and 7（9.86%）oligoclonal rearrangements. Among 40 B-ALL IgHV gene sequences available ,13 were in

8、frame, whereas 27 were frameshifts; 5 in frame joinings contained stop codons, leaving 8(20%) potentially functional rearrangements. VH3（11/40） 、VH4（11/40）and VH1（8/40）amounted to 75% rearranged VH families in B-ALL; VH4-59 and VH4-34 were the most frequently rearranged VH4 family gene segments；Usag

9、e of D2 and D3 families was most prominent(35% and 27.5% respectively) in B-ALL; Increased frequency of D7-27 in B-ALL (15%)was found compared to that observed for peripheral B lymphocytes（p= 1.29E-12）.JH6 was found in 42.5% rearrangements followed by JH4（30%）. 8/40(20%)DJH junctions lacked N nucleo

10、tides, the frequency higher than that reported for peripheral B lymphocytes(p=0.017). 22.5% immunoglobulin heavy chain variable region codons showed scattered mutations with an replacement(R) to silent(S) substitution ratio(R/S ratio) of 1 in CDR. More 80% potential HLA class I molecule binding pept

11、ides were derived from framework regions of immunoglobulin heavy chains in 26 B-ALL cases and 12 peptides were shared by B-ALL belonging to the same VH family. ConclusionConclusion B-ALL arises from progenitor or precursor B lymphocytes which have not yet encountered exogenous antigens and their IgH

12、V genes are of germline characteristics; 基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金 39970313 ；北京市自然科學(xué)基金 7032028 ；北京大學(xué)人類疾病中心基金；2北京大學(xué)生物醫(yī)學(xué)跨學(xué)科基金；北京大學(xué)腫瘤中心科研基金；作者單位：1 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院 100045；2 北京大學(xué)第一醫(yī)院 100034通訊作者：朱平 北京西城區(qū)西什庫(kù)大街八號(hào) 北京大學(xué)第一醫(yī)院 100034；e-mail：Leukemic transformation frequently occurs in fetal life; Potential T cell epitopes we

13、re derived from framework regions 1 and 3 of immunoglobulin heavy chain in B-ALL.KeyKey wordswords Genes, immunoglobulin; epitope, T-cell; Leukemia, lymphoblastic; PCR; Bioinformatics急性 B 淋巴細(xì)胞白血病（B-ALL）的病因至今尚不清楚，有人認(rèn)為系胚胎 B 細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來，有人認(rèn)為與病毒感染等抗原刺激有關(guān)。作為 B-ALL 克隆性標(biāo)志的 IgHV 基因，其可變區(qū)（VH） 、多變區(qū)（D）和結(jié)合區(qū)（JH）基因片段的重

14、排類型及編碼蛋白的表達(dá)與 B 細(xì)胞系的發(fā)育階段密切相關(guān)。分析 B-ALL 的 IgHV 基因特征，有可能揭示 B-ALL 的發(fā)病機(jī)制及白血病細(xì)胞的起源。兒童 B-ALL 雖然對(duì)化療高度敏感，7080%有望長(zhǎng)期緩解，但常規(guī)化療伴隨嚴(yán)重副作用，而且 2030%的緩解患兒由于耐藥微小殘留白血病細(xì)胞（MRD）的存在而復(fù)發(fā)。IgHV 基因編碼的蛋白稱獨(dú)特型,獨(dú)特型疫苗治療惡性淋巴瘤的臨床前期實(shí)驗(yàn)已取得成功11。獨(dú)特型疫苗能否成為殺傷急淋 MRD 從而降低急淋復(fù)發(fā)率的有效武器，國(guó)內(nèi)外尚無相關(guān)研究的報(bào)導(dǎo)。本文利用生物信息資源對(duì) B-ALL 獨(dú)特型的 T 細(xì)胞表位作初步預(yù)測(cè)。材料和方法材料和方法1病例：108

15、 例初治急性淋巴細(xì)胞白血病由北京兒童醫(yī)院血液中心提供，均經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)確診，男 71 名，女 37 名，發(fā)病年齡 1 月18 歲。初診時(shí)骨髓原始細(xì)胞90%，F(xiàn)icoll-Paque Plus （Pharmacia）分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒（Promega）提取骨髓單個(gè)核細(xì)胞的 DNA。2PCR 擴(kuò)增 ALL IgHV 基因 CDR3：上游引物為 FR3 通用：5CTG TCG ACA CGG C(C/T)(G/C) TGT ATT ACT GACC TGA GGA GAC GGT GAC CCAT GGA CTG GAC CTG GAGCAC ACT TT

16、G CTC CAC GCT C GCT GGG TTT TCC TTG TTG TGG TGG CAG CTC CCA GAT CCC TCC TCC TGG CTG TTC CTT CCT CAT CTT CCT GCC C 3用 clustalw 1.82 軟件分析每個(gè)家族引物和同一家族各代表序列之間的同源性為 85%100%；和其它家族相同位置序列之間的同源性均40%；Oligo6.31 分析引物和同源性80%的代表序列之間的配對(duì)效率均在結(jié)合閾值之下，證明 6 個(gè)引導(dǎo)序列引物均有家族特異性；反應(yīng)體系同上；94預(yù)熱 3 分鐘，30 個(gè)循環(huán)（9440 秒，6350 秒，721 分鐘） ，72

17、延伸 7 分鐘；5lPCR 產(chǎn)物行 6%聚丙烯酰胺凝膠電泳。4用四色熒光末端終止法對(duì) IgHV 基因的 PCR 產(chǎn)物直接測(cè)序（由上海博亞生物技術(shù)有限公司協(xié)助） 。5免疫分型：選擇具有明確清晰 IgHV 重排的 37 例急淋白血病進(jìn)行 FACS 免疫分型。使用的 B 細(xì)胞系分化抗原：CD10、CD19、CD22、胞漿（c） 、CD79a；T 細(xì)胞系分化抗原：3CD2、CD3、CD5、CD7；髓細(xì)胞系分化抗原：CD13、CD14、CD15、CD33、CD117、MPO；非分化抗原：CD34、CD38、HLA-DR。6 計(jì)算機(jī)評(píng)分系統(tǒng)預(yù)測(cè) B-ALL 可變區(qū)的 T 細(xì)胞表位：通過http:/www.

18、expasy.ch/tools/DNA.html，將 B-ALL 重鏈可變區(qū)的核酸序列翻譯為氨基酸序列；利用 /Igblast 基因庫(kù)，與胚系重鏈可變區(qū)基因比較同源性，并劃分出氨基酸序列的 4 個(gè)框架區(qū)（FR）和 3 個(gè)超變區(qū)（CDR） ；借助 Rammense22 和 Parker33兩個(gè)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)，對(duì) B-ALL 重鏈可變區(qū)序列及 Lefranc44于 2001 年 11 月報(bào)導(dǎo)的胚系VH家族代表序列進(jìn)行 HLA-A1、HLA-A*0201、HLA-A3、HLA-B*2705、HLA-B*5101、HLA-B7 和 HLA-B8 等 HL

19、A-I 類分子限制性 T細(xì)胞表位的預(yù)測(cè)。7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用 SPSS10.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行2 檢驗(yàn),p 值0.05 為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果結(jié)果1初治急性淋巴細(xì)胞白血病的 IgHV 基因重排狀況：FR3 區(qū)通用引物擴(kuò)增 CDR3，初篩具有 VHDJH重排克隆的急淋白血病病例，108 例急淋白血病中擴(kuò)增出 CDR3 的 71 例，占 66%圖 1。位于引導(dǎo)序列的家族特異性引物擴(kuò)增 71 例患者的 IgHV 基因，34 例單等位基因重排（47.89%） ，30 例雙等位基因重排（42.25%） ，7 例（9.86%）寡克隆基因重排圖 2。挑選電泳條帶濃的 37 例患者共 40 份IgHV 基因 PC

20、R 產(chǎn)物進(jìn)行直接測(cè)序。2免疫分型：上述 37 例急淋白血病均為 B-ALL，其中早前 B 型（CD19+CD10-c-）2 例，普通型（CD19+CD10+c-）27 例，前 B 型（CD19+CD10+c+）8 例表 1。3B-ALL 重排基因的讀框分析：測(cè)序得到的 40 例 B-ALL 重排基因中，13 例讀框內(nèi)重排；27 例讀框移位；出現(xiàn)終止密碼子的重排 14 例，包括 5 例讀框內(nèi)重排表 1。由于讀框移位或含終止密碼子，32 例重排理論上不能合成有功能的免疫球蛋白重鏈（IgH） ，為非功能性重排，占 80%；8 例不含終止密碼子的讀框內(nèi)重排，理論上可合成有功能的 IgH，事實(shí)上患者的白

21、血病細(xì)胞胞漿也檢測(cè)到重鏈（c） ，為功能性重排，占 20%。4B-ALL 重排基因利用 VH、D 和 JH基因片段的情況：B-ALL 重排基因使用最多的 VH家族為VH3（11/40） 、 VH4（11/40）和 VH1（8/40） ，共占 75%。在 VH4 家族中 VH4-59（5/40）和 VH4-34（4/40）是使用頻率最高的片段表 1；優(yōu)先利用的 D 家族為 D3（35%） 、D2（27.5%）和 D7-27（15%） ，其中 D3、D2 家族在 B-ALL 中的利用與正常 PBL（D3 29.85%；D2 13.43%）相似（p 值分別為 0.07、0.58） ，D7-27 的利

22、用率明顯高于正常 PBL（1.49%）55（p=0.02）；JH6 是 B-ALL 利用最多的 JH基因片段（42.50%） ，JH4（30.00%）次之，與正常 PBL(JH6 22.22%；JH4 52.53%)55不同（p值均為 0.02） 。5B-ALL 重排基因的 P 核苷酸插入和 DJH連接區(qū) N 核苷酸缺失：正常 VHDJH重排接頭處常有核苷酸插入，插入的核苷酸可以是隨機(jī)的非胚系編碼核苷酸，即 N 核苷酸，也可是與接頭處模板呈回文結(jié)構(gòu)的 P 核苷酸。B-ALL 重排過程中同樣發(fā)生 P 核苷酸的插入，在 VH-N、N-D、D-N、N-JH出現(xiàn)頻率分別為 2.5%、25%、10%、2

23、7.5%，絕大多數(shù)為 12 個(gè)核苷酸，個(gè)別為 3 個(gè)核苷酸表 2；20%（8/40）的 B-ALL 在 DJH連接區(qū)缺乏 N 核苷酸的插入表 2,明顯高于正常 PBL(9%) 66(p=0.02)。6B-ALL 重排基因的突變情況：40 例重排基因中與胚系基因 100%同源的 3 例（7.5%） ；不完全同源的 37 例基因中屬于等位基因多態(tài)性的 26 例（65%） ，2 例（P9b 和 P22） （5%）發(fā)生變化的堿基幾4乎完全相同，可能同屬一個(gè)尚未知的胚系基因，確實(shí)發(fā)生堿基突變的基因 9 例，占 22.5%。突變的堿基零星散布于 IgHV 全長(zhǎng)，而非簇集于 CDR 區(qū)，CDR 區(qū)替代突變與

24、靜寂突變的比例1表 1。7B-ALL 重鏈可變區(qū)的 T 細(xì)胞表位預(yù)測(cè)：選擇 26 例不含終止密碼子的 B-ALL 可變區(qū)序列及代表 7個(gè)胚系 VH家族的 56 種序列，通過 Rammense22和 Parker33 系統(tǒng)計(jì)算其 HLA-I 類分子限制性抗原肽的積分并排序，收集在兩個(gè)系統(tǒng)中均位于前 2%的九肽。由于 HLA-A*0201 是人群出現(xiàn)頻率最高的位點(diǎn)，基序組成明確，本文著重分析 HLA-A*0201 結(jié)合肽的結(jié)果：同一 VH家族的 B-ALL 可變區(qū)與代表相應(yīng) VH家族的胚系序列具有相同的 12 條抗原肽，7 個(gè)家族共有 12 條抗原肽；除 1 條位于 CDR3，為白血病克隆特有外，

25、其余 10 條（83%）位于 FR 區(qū)，1 條位于 FR 與 CDR 重疊區(qū)，為 VH家族共有；12 條抗原肽的序列見表 3。其它 HLA-I 類分子限制性抗原肽的預(yù)測(cè)結(jié)果與 HLA-A*0201 類似，80%以上位于 FR1 區(qū)和 FR3 區(qū)。 討論討論分析 IgHV 基因重排特征有可能了解急淋白血病（ALL）細(xì)胞的起源。測(cè)序發(fā)現(xiàn)有完整 VHDJH重排的 37 例 B-ALL 患者在他們的白血病細(xì)胞表面均檢測(cè)不到免疫球蛋白，其中 8 例（22%）于胞漿內(nèi)檢測(cè)到重鏈。在正常 B 細(xì)胞發(fā)育過程中，祖 B 細(xì)胞階段開始有完整的 VHDJH重排，5%10%的祖 B 細(xì)胞和 95%以上的前 B 細(xì)胞僅

26、僅合成 c鏈，到了不成熟 B 細(xì)胞和成熟 B 細(xì)胞階段開始表達(dá)免疫球蛋白77?？梢娢覀?B-ALL 病例的白血病細(xì)胞是祖 B 或前 B 細(xì)胞克隆增殖形成的。產(chǎn)生非功能性重排的正常祖 B 細(xì)胞不能分化為前 B 細(xì)胞而在骨髓中凋亡。我們測(cè)序的 40 個(gè)白血病重排基因，80%為非功能性，表明：未成功進(jìn)行功能性重排的，本應(yīng)發(fā)生凋亡的祖 B 細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了耐受凋亡的白血病細(xì)胞。Steenbergen 66曾經(jīng)分析 68 個(gè) B-ALL 的重排基因，發(fā)現(xiàn) 61.8%為非功能性，也支持這種對(duì) B-ALL起源的推測(cè)。我們分析了 B-ALL 重排基因?qū)ε呦祷蚱蔚睦眉绑w細(xì)胞突變情況，以了解祖 B 或前 B 細(xì)

27、胞在向白血病轉(zhuǎn)化過程中是否由于選擇壓力而改變其 IgHV 基因的特征。結(jié)果表明，B-ALL對(duì) VH3、VH4 和 VH1 家族的使用頻率最高，與正常人 VH家族的分布一致。VH4-59 和 VH4-34 的使用受細(xì)胞發(fā)育階段的調(diào)節(jié)，部分 B-ALL 優(yōu)先使用的 VH4-59 和 VH4-34，是正常祖 B 細(xì)胞在 VH4 家族中利用最多的片段88?？梢?B-ALL 并無明顯的 VH家族選擇傾向。胚胎 B 細(xì)胞的 VHDJH重排最常使用 D7-27 99 ，B-ALL 利用 D7-27 明顯增多。胚胎 B 細(xì)胞無末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT） ，不能在 DJH結(jié)合區(qū)插入 N 核苷酸66，B-AL

28、L DJH結(jié)合區(qū)缺乏 N 核苷酸者明顯增多。B-ALL 的白血病細(xì)胞顯然是由胚胎期祖 B 或前 B 細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來。Yagi 1010從 7 例 B-ALL 患兒的新生兒期血斑（Guthrie Card）檢測(cè)到和白血病細(xì)胞相同的 IgHV 基因，這些重排基因都具有 N 或 P 核苷酸缺如、短 D 片段及保守 JH 等特征。我們對(duì)中國(guó)兒童 B-ALL 的檢測(cè)結(jié)果與其十分類似。B-ALL 的 IgHV 基因發(fā)生堿基突變的頻率為 22.5%，突變堿基零星散布于 IgHV 全長(zhǎng)，而非簇集于 CDR 區(qū)，CDR 區(qū)替代突變與靜寂突變之比（R/S）1?？乖碳?dǎo)致的堿基突變往往簇集于 CDR 區(qū)，CDR 區(qū)

29、 R/S 2.91111。顯然 B-ALL IgHV基因發(fā)生的突變不是抗原刺激的結(jié)果。以上分析表明，B-ALL 起源于未受抗原刺激的祖 B 或前 B 細(xì)胞，其 IgHV 基因重排機(jī)制仍然受個(gè)體或細(xì)胞發(fā)育階段的調(diào)節(jié)，具有胚系基因重排的特征。盡管兒童 B-ALL 的細(xì)胞表面無免疫球蛋白作為特異性抗原誘發(fā)抗體介導(dǎo)的抗白血病反應(yīng)，但是胞漿內(nèi)的重鏈可變區(qū)蛋白有可能通過 T 細(xì)胞表位誘發(fā)抗白血病的 CTL 反應(yīng)。T 細(xì)胞表位指內(nèi)源性蛋白形成的，與 HLA-I 類分子結(jié)合并被 T 細(xì)胞受體（TCR）識(shí)別的短肽?；蛲蛔円鹱x框移位時(shí)，腫瘤相關(guān)抗原通過非原發(fā)（non-primary）開放閱讀框架（open r

30、eading frame，ORF）編碼 T 細(xì)胞表位。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人的黑色素瘤細(xì)胞可同時(shí)呈遞 NY-ESO-1 基因原發(fā)和非原發(fā) ORF 編碼的 T 細(xì)胞表位1212。兒童 B-ALL 也有可能同時(shí)呈遞功能性和非功能性重鏈可變區(qū)蛋白的 T 細(xì)胞表位。我們利用Rammense22和 Parker33 兩個(gè)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)同時(shí)預(yù)測(cè) 8 例功能性重鏈可變區(qū)序列和 18 例不含終止密碼子的非功能序列的 T 細(xì)胞表位。最初預(yù)測(cè)抗原肽采用的是順序重疊法，需要合成覆蓋整個(gè)蛋白抗5原序列的上百甚至數(shù)百條肽，工作量大，成本高。隨著 MHC-I 類分子結(jié)構(gòu)及其自然配基（natural ligand）的闡明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)自然配基

31、總是通過 23 個(gè)固定位置上高度保守的氨基酸與相應(yīng)型別的MHC-I 類分子形成非共價(jià)鍵結(jié)合。比如 HLA-A*0201 自然配基的第二位為亮氨酸（L）或蛋氨酸（M） ，第九位為亮氨酸（L）或纈氨酸（V） 。這種 MHC-I 類分子對(duì)其配基氨基酸組成的特定要求稱 MHC-I類分子等位基因特異性基序（allele-specific motif） 。決定基序特征的氨基酸殘基稱為錨定殘基。輔錨定殘基和優(yōu)選殘基也影響配基與 MHC-I 類分子的親和力。Rammense 系統(tǒng)根據(jù)基序特征計(jì)算某蛋白抗原所含九肽的積分，錨定殘基 810 分，輔錨定殘基 46 分，優(yōu)選殘基 14 分，對(duì)結(jié)合有負(fù)面影響的殘基-1

32、-3 分，各個(gè)氨基酸殘基分?jǐn)?shù)之和即為該九肽的積分。Parker 系統(tǒng)是基于 MHC/抗原肽復(fù)合物解離時(shí)間的另一獨(dú)立評(píng)分程序。兩個(gè)系統(tǒng)對(duì)任何一條肽的評(píng)分和排序不會(huì)完全一致。我們通過 Rammense 和 Parker 對(duì)重鏈可變區(qū)所含九肽進(jìn)行排序，選取在兩個(gè)系統(tǒng)均位于前 2%者作為目的肽，發(fā)現(xiàn) 80%以上抗原肽位于 FR 區(qū)，同一 VH家族的 B-ALL 與代表相應(yīng) VH家族的胚系序列具有相同的 12 條九肽。其中 VH1 和 VH5 家族的 HLA-A*0201 結(jié)合肽是 FR1（311）QLVQSGAEV；VH2 是FR1（1018）TLVKPTQTL，F(xiàn)R1/CDR1（2836）SLSTS

33、GVGV；VH3 是 FR3（7886）TLYLQMNSL或SLYLQMNSL；VH4 是 FR1（311）QLQESGPGL或 QLQQWGAGL，F(xiàn)R1（1018）GLLKPSETL或GLVKPSETL；VH6 是 FR1（311）QLQQSGPGL，F(xiàn)R1（1018）GLVKPSQTL。這些 B-ALL 可變區(qū)抗原肽為組織特異的自身抗原，具有 VH家族通用性。Trojan 1313 用上述兩個(gè)系統(tǒng)預(yù)測(cè)了 65 例 HLA-A*0201 慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）和惡性淋巴瘤患者免疫球蛋白的抗原肽，71.3%位于 FR，30%框架肽為 2個(gè)以上患者共有，包括 TLYLQMNSL 的部分框

34、架肽在體外成功誘發(fā)抗 CLL 的 CTL 反應(yīng)；本課題組1414曾報(bào)道用正常臍帶血胚系基因克隆出來的 VH1 家族重鏈可變區(qū)基因（表達(dá)這些抗原肽）作核酸疫苗，能夠成功誘發(fā)小鼠抗人淋巴瘤的免疫反應(yīng)。因此，我們報(bào)道的這些框架區(qū)抗原肽有可能作為 T 細(xì)胞表位，用于制備基因家族特異性疫苗，在體內(nèi)誘導(dǎo)抗 B-ALL 的細(xì)胞毒 T 細(xì)胞反應(yīng)。參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)1Hsu FJ , Caspar CB , Czerwinski D , et al . Tumor specific vaccines in the treatment of patients with B-cell lymphomalong ter

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