反應性關節(jié)炎患者淋巴細胞亞群和免疫球蛋白檢測的臨床意義

1、反應性關節(jié)炎患者淋巴細胞亞群和免疫球蛋白檢測的臨床意義         11-03-23 15:39:00     作者：許聯(lián)紅, 戚傳平    編輯：studa20【摘要】  目的： 研究反應性關節(jié)炎(ReA)患者外周血淋巴細胞亞群以及血清免疫球蛋白的變化及臨床意義。方法： 采用流式細胞術檢測56例ReA患者和53例健康對照組外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD16+56+NK、CD19+B細胞的百分率;免疫比濁法

2、檢測血清IgG 、IgA及IgM含量。結(jié)果： ReA患者與正常對照組比較,CD4+T淋巴細胞百分率、CD4+/CD8+比值及CD19+B淋巴細胞百分率均明顯增高(P<0.01);血清IgG水平升高(P<0.05);CD15+56+NK細胞百分率明顯降低(P<0.01);CD3+T、CD8+T淋巴細胞的百分率及血清IgM、IgA含量與正常對照組相比差異無統(tǒng)計學意義。結(jié)論： 反應性關節(jié)炎患者體內(nèi)細胞和體液免疫功能紊亂,監(jiān)測ReA患者體內(nèi)淋巴細胞亞群和免疫球蛋白水平,對于ReA的免疫治療具有重要的臨床意義。 【關鍵詞】  反應性關節(jié)炎; T細胞亞群; NK淋巴細胞; B淋

3、巴細胞; 血清免疫球蛋白Abstract Objective: To study the changes of lymphocyte subsets in peripheral blood and serum immunoglobulin of patients with reactive arthritis (ReA) and their clinical significance. Methods： CD3+T, CD4+T, CD8+T,CD16+56+NK, CD19+B positive rate (with flow cytometry) and serum IgG, IgA, I

4、gM levels (with immunoturbidity) were measured in 56 patients with ReA and 53 normal controls. Results： Compared with the normal controls, the percentage of CD4+T lymphocyte,CD4+/CD8+ratio and CD19+B cell percentage increased significantly (P<0.01) in ReA patients. IgG level slightly increased (P

5、<0.05). While, NK cell percentage reduced obviously (P<0.01). There were no statistical difference between ReA patients and normal controls about the levels of CD3+T, CD8+T cell and IgM, IgA (P>0.05). Conclusion： Cellular and humoral immune function were significantly abnormal in patients w

6、ith reactive arthritis. Detection of lymphocyte subsets and serum immunoglobulin had important clinical significane for ReAs immunotherapy.Key words reactive arthritis; T lymphocyte subsets; NK lymphocyte; B lymphocyte; serum immunoglobulin反應性關節(jié)炎(reactive arthritis, ReA)是在關節(jié)外遠端部位發(fā)生微生物感染后產(chǎn)生的慢性無菌性炎癥,其

7、病因與病原體、免疫、遺傳有關。該疾病發(fā)病機制尚未明確,目前認為其本質(zhì)上都有抗原微生物侵入黏膜內(nèi),而且機體免疫防御系統(tǒng)存在功能紊亂1。本研究采用流式細胞技術檢測反應性關節(jié)炎患者與健康人群外周血T淋巴細胞亞群、NK淋巴細胞及B淋巴細胞百分率,采用免疫比濁法檢測血清IgA、IgG、IgM含量,觀察ReA患者體內(nèi)細胞免疫、體液免疫指標的變化和規(guī)律,并探討其臨床意義。1 材料和方法1.1 材 料1.1.1 對象 病例來源于2007年9月至2009年10月我院免疫風濕科住院患者。診斷標準符合1990年公布的Amor診斷標準2。ReA患者56例,男30例,女26例,年齡2574歲,中位年齡53歲。正常對照組

8、為53例本院健康體檢者,男27例,女26例,年齡1778歲。1.1.2 試劑 試劑均由BD公司提供,包括:熒光抗體CD3percp/CD4FITC/CD8PE;CD3FITC/CD16+CD56+PE;CD19cy5;溶血素,鞘液等。免疫球蛋白試劑盒由BEHRING 公司提供。1.2 方 法1.2.1 標本采集 抽取病例組和對照組外周靜脈血1 ml,注入EDTAK2抗凝管中,室溫保存,在24 h內(nèi)用于流式細胞儀檢測;同時抽取4 ml靜脈血注入真空采血管中,用于檢測血清免疫球蛋白。1.2.2 淋巴細胞亞群檢測 取50 l上述抗凝血分別加入兩個試管中,一管加入10 l熒光抗體CD3percp/CD

9、4FITC/CD8PE;另一管加入熒光抗體CD3FITC/CD16+CD56+PE和CD19cy5各10 l,充分混勻后避光室溫孵育20 min后,每管加入溶血素(110稀釋)1 ml,避光放置至透明后1 000 r/min離心5 min,棄去上清液體,加入1 ml PBS洗滌細胞2次,最后加入500 l PBS溶液混勻直接上流式細胞儀(德國PARTEC公司)檢測。1.2.3 免疫球蛋白檢測 每個樣本分離出血清,在特種蛋白分析儀(德國BEHRING公司)上測定血清中IgG 、IgA、IgM的含量。1.3 統(tǒng)計學處理應用SPSS13.0處理數(shù)據(jù),結(jié)果以±s表示, t檢驗比較各組間差異,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2 結(jié) 果2.1 ReA患者的淋巴細胞亞群流式細胞儀檢測散點圖采用CD3+T為總T細胞,CD3+CD4+T細胞為輔助性T細胞,CD3+CD8+T為抑制性T細胞,CD3-CD16+CD56+為NK細胞,CD19+為B細胞。設門分析各淋巴細胞亞群的百分比。典型檢測結(jié)果見圖1。a為FSC和SSC的散點圖,R1區(qū)為淋巴細胞區(qū);b為CD3和CD4的散點圖,Q2區(qū)為輔助性T細胞(C