妊娠組織中轉(zhuǎn)化生長因子及其受體與早期復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)性研究

1、妊娠組織中轉(zhuǎn)化生長因子及其受體與早期復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)性研究                   作者：韋枝紅 寧克勤 龍淑芳 徐小平【摘要】  目的：了解轉(zhuǎn)化生長因子1（TGF -1）及其受體（TR、）在絨毛及蛻膜組織中的表達(dá)情況，初步探討（TGF -1）及（TR）與早期復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)（RSA）的關(guān)系。方法：應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄 - 聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)，檢測 38 例 RSA 患者和 35 例正常早孕婦女

2、的絨毛及蛻膜組織中 TGF -1 mRNA，TR（、型）mRNA 的表達(dá)情況。結(jié)果：TGF -1 及 TR、型在正常早孕及 RSA 絨毛、蛻膜組織中均有表達(dá)，TGF -1 在 RSA 組絨毛及蛻膜組織中表達(dá)水平為（0.18±0.02）、（0.12±0.01），對(duì)照組為（0.98±0.03）、（0.72±0.02）；TR -在 RSA 組絨毛 及蛻膜組織中表達(dá)水平為（0.15±0.03）、（0.11±0.03），對(duì)照組為（0.71±0.01）、（0.73±0.01）；TR -在 RSA 組 絨毛及蛻膜組織中表達(dá)水平為

3、（0.16±0.01）、（0.09±0.01），對(duì)照組為（0.68±0.02）、（0.86±0.02）；上述指標(biāo) RSA組與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 0.01）。結(jié)論：TGF -1 及 TR 在絨毛及蛻膜組織中表達(dá)下降可能是早期復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的重要原因之一。 【關(guān)鍵詞】  轉(zhuǎn)化生長因子1；受體；復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)；滋養(yǎng)細(xì)胞；蛻膜   Abstract Objective  To  understand  the  expressions  of  transfo

4、rming  growth  factor 1  (TGF -1)  and  its  receptors  (TR)  in  villi  and  decidua  during  early  pregnancy  and  their  effects  on  early  recurrent  spontaneous  abortion.  

5、 Methods   Expressions  of  TGF -1  mRNA  and  its  receptors  were  detemined  in  villi  and  deciduas semi-quantitative  reverse  transcriptional-polymerase  chain  reaction  from  38  cases&#

6、160; of  spontaneous  abortion women  and  35  cases  of  normal  early  pregnancy  women  (control  group).   Results   TGF -1  and  its  receptors had  expressioned  in  decidua  cell

7、s,  villis  glands  and  interstitial  cytoplasm  in  all  two  groups.  The  expressions  of TGF -1  in  the  villi  and  decidua  of  spontaneous  abortion  and  control  group 

8、were  (0.18±0.02),  (0.98±0.03) and  (0.12±0.01),  (0.72±0.02)  respectively.  The  intensity  of  TR - in  the  villi  and  decidua  of  spontaneous  abortion  and  control  groups wer

9、e  (0.15±0.03),  (0.71±0.01)  and  (0.11±0.03),  (0.73±0.01)  respectively.   And  the expressions  of  T1R - in  the  villi  and  decidua  of  spontaneous  aboetion  and  control&

10、#160; groups  were  (0.16±0.01), (0.68±0.02)  and  (0.09±0.01),  (0.86±0.02)  respectively.  The  differences  between  the  control  group  and  abortion group  were  all  significant  (P&#

11、160;   0.01).   Conclusion   The  expressions  of  TGF -1  and  its  receptors  in  the  early  pregnancy  tissues  of  aborted  women  declined.  It  demonstrates  that  the 

12、 abnomal  expressions  of  TGF -1  and  its   receptors  play  an  important  role  in  spontaneous  abortion,  they  are  one  of  the  causes  of  spontaneous  abortion.   K

13、ey  Words   Transforming  growth  factor ;  Receptor;  Recurrent  Spontaneous  abortion;  Trophoblasl;  Decidua   早期復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)（recurrcent spontaneous abortin, RSA）是指 2 次或 2 次以上的自然流產(chǎn)，其原因復(fù)雜，主要有遺傳、內(nèi)分泌、解剖、感染、免疫等因素，生殖免疫學(xué)認(rèn)為妊娠是成功的半同種移植過程，正常妊娠體液免

14、疫占主要優(yōu)勢，形成免疫內(nèi)受，保護(hù)胚胎組織，而自然流產(chǎn)患者以細(xì)胞免疫為主，產(chǎn)生胚胎排斥作用，我們采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)，分別對(duì) RSA 患者及正常早孕婦女的絨毛及蛻膜組織中 TGF -1 mRNA 及其受體表達(dá)情況進(jìn)行檢測，探討其與 RSA 發(fā)病的關(guān)系。   1   資料與方法   1.1   研究對(duì)象   2004 年 4 月 - 2007 年 8 月，在我院門診就診，連續(xù) 2 次或 2 次以上自然流產(chǎn)患者 38 例、年齡 2241歲，孕次 25 次，停經(jīng) 4090 d 并排

15、除子宮畸形、感染、內(nèi)分泌及夫婦染色體異常，既往無自然免疫性疾病史，選取同期正常早孕要求行人工流產(chǎn) 35 例作對(duì)照，年齡 2340 歲孕次 26 次，停經(jīng) 45 80 d，對(duì)照組無不孕、自然流產(chǎn)、死胎等不良孕產(chǎn)史，兩組年齡、孕周、孕次、停經(jīng)天數(shù)無顯著差異。   1.2   方法   1.2.1   標(biāo)本采集   復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者在確認(rèn)胚胎停止發(fā)育或難免流產(chǎn)行清宮以及正常早孕 B 超證實(shí)宮內(nèi)孕囊見心管搏動(dòng)的孕婦行人工流產(chǎn)時(shí)，取絨毛及蛻膜組織，生理鹽水漂洗，裝入防凍管中待測。  

16、 1.2.2   方法   采用 RT-PCR 技術(shù)檢測絨毛、蛻膜組織 TGF -1、TR（、）的 mRNA，具體步驟參照參考文獻(xiàn)1，2，RNA 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購自美國GIBCO 公司，引物由上海生物工程有限公司合成，應(yīng)用瑞典生產(chǎn) LKB2202 紫外凝膠掃描分析系統(tǒng)進(jìn)行吸光度掃描，得出擴(kuò)增產(chǎn)物灰度值（A），得到TGF1 及 TR（、）mRNA 相對(duì)含量（擴(kuò)增產(chǎn)物 A 值/參照系統(tǒng)actin擴(kuò)增產(chǎn)物 A 值×%）。   1.2.3   統(tǒng)計(jì)學(xué)處理   各組測定值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表

17、示采用 SPSS 10.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。             2   結(jié)   果   2.1   兩組絨毛組織中 TGF -1、TR（、）mRNA 的表達(dá)   在兩組絨毛組織中細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及合體滋養(yǎng)細(xì)胞均有表達(dá)，RSA 組表達(dá)明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 0.01）。見表 1。   2.2   兩組蛻膜組織中 TGF

18、 -1、TR（、）mRNA  的表達(dá)   兩組蛻膜腺體細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞中均有 TGF - 1、TR（、）陽性染色，RSA 組表達(dá)明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 0.01），見表 2。    3   討   論   3.1   正常妊娠組織中 TGF及 TR 的表達(dá)   Simpson 等利用免疫組化和原位雜交技術(shù)發(fā)現(xiàn)， TGF1 及 TR 分布于子宮內(nèi)膜的腺體及間質(zhì)中，其含量呈周期性變化，于月經(jīng)周期的增生期含量最低，分泌期為增生期

19、的 2 倍，妊娠早期的蛻膜中 TGF含量為增生期的 5 倍，妊娠后TGF1  刺激子宮內(nèi)膜基質(zhì)合成基質(zhì)蛋白，使子宮內(nèi)膜蛻膜樣變，并刺激基質(zhì)細(xì)胞合成甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白，促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞將鈣從母體運(yùn)輸給胎兒，郝晶等對(duì)著床小鼠子宮內(nèi)膜中轉(zhuǎn)化生長因子及其受體的研究亦證實(shí)了受孕子宮內(nèi)膜表面上皮、基質(zhì)細(xì)胞、蛻膜細(xì)胞中 TGF1 及 TR 表達(dá)較未孕時(shí)顯著增加。本研究顯示正常早孕絨毛及蛻膜組織中均有大量的 TGF1 及 TR 表達(dá)這與上述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符，提示 TGF1 及 TR 在維持正常早孕起著重要作用。   3.2   TGF1 及 TR 的異常表達(dá)與復(fù)發(fā)

20、性自然流產(chǎn)的關(guān)系   作為同種移植物的胎兒能夠耐受母體免疫防御而不被排斥，與母 - 胎界面形成的免疫平衡有關(guān)，一旦平衡被打破，則產(chǎn)生流產(chǎn)，而這種免疫平衡主要由絨毛及蛻膜合成的多種肽類細(xì)胞因子有關(guān)，其中 TGF1 是一種調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化的多肽，它抑制免疫活性細(xì)胞的增殖，抑制巨噬細(xì)胞的激活以及自然殺傷（NK）細(xì)胞對(duì)干擾素的反應(yīng)性；抑制某些因子如干擾素、TNF的產(chǎn)生及活性，故 TGF1 主要起到免疫負(fù)調(diào)節(jié)作用，在正常妊娠過程中，它起到免疫抑制作用，使母體對(duì)胚胎排斥的免疫應(yīng)答反應(yīng)被封閉，使妊娠維持，同時(shí) TGF必須與特異性受體 TR、結(jié)合，才能發(fā)揮其調(diào)節(jié)信號(hào)傳導(dǎo)的生物學(xué)功能，同時(shí) TGF1 還有促進(jìn)細(xì)胞形態(tài)的發(fā)生、增殖、分化作用，并調(diào)節(jié)胚胎滋養(yǎng)層的分化；本研究顯示：復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者絨毛及蛻