燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注致肺損傷家兔膈神經(jīng)放電的影響_劉瑞麗講解

1、收稿日期：2013- 05 - 10基金項(xiàng)目：河南省科技廳基金資助項(xiàng)目（編號(hào)：132300410160）作者簡(jiǎn)介：劉瑞麗（1975），女，河南安陽(yáng)人，博士，講師，主要從事中藥藥理學(xué)和神經(jīng)藥理 學(xué)研究。通信作者：劉鳳岐（1961 ），女，河南安陽(yáng)人，學(xué)士，畐燉授，研究方 向：中藥藥理學(xué)欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉本文引用：劉瑞麗，武文杰，房志鑫，等燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注致肺損 傷家兔膈神經(jīng)放電的影響J 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013,

2、 30 （9）： 709-711.燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注致肺損傷家兔膈神經(jīng)放電的影響劉瑞麗1,武文杰2,房志鑫3,楊宇平1,楊純生4,劉鳳岐1（1 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，河南新鄉(xiāng)453003; 2新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院普外科，河南新鄉(xiāng)453003; 3.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院藥理學(xué)教研室，河南新鄉(xiāng)453003; 4新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南新鄉(xiāng)453003）摘要：目的探討燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注致肺損傷的保護(hù)作用。方法30只新西蘭家兔隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和治療組，每組10只，制備左心缺血再灌注肺損傷模型，并與 BL-420生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)相連；假手術(shù)組不做左冠狀動(dòng)脈的前降支結(jié)

3、扎，其 余同模型組。治療組缺血10min后靜脈給予燈盞花素10mg kg 1。記錄缺血30min，再灌注20、40min 3個(gè)時(shí)間點(diǎn)3組家兔膈神經(jīng)放電曲線，測(cè)定放電幅 度、放電持續(xù)時(shí)間和放電頻率。結(jié)果與假手術(shù)組比較，模型組家兔各時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電幅度顯著減小，放電持續(xù)時(shí)間縮短，放電頻率 增加，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P V0. 05）;與模型組比較，治療組膈神經(jīng)放電 幅度顯著增加，放電持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，膈神經(jīng)放電頻率降低，其差異亦均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意 義（P V0. 05）。結(jié)論燈盞花素可改善左心缺血再灌注急性肺損傷家兔膈神經(jīng)放電曲線參數(shù)，燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注后的呼吸功能具有保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：燈盞花素；左

4、心缺血再灌注；肺損傷；膈神經(jīng)放電中圖分類號(hào)：Q424文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1004-7239 (2013) 09-0709-03Effect of breviscapine on phrenic nerve discharge curve on acute lung injury induced by left heart is-chemic reperfusion of rabbitsLIU Rui-li 1 , WU Wen-jie 2 , FANG Zhi-xin 3 , YANG Yu-ping 1 , YANG Chun-sheng 4, LIU Feng-qi 1(1. Depa

5、rtment of Pharmacology , Xinxiang Medical University , Xinxiang 453003, He nan Province , Chi na ； 2. Departme nt of Gen-eral Surgery , the Third Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University , Xinxiang 453003, Henan Province , China ； 3. Depart-ment of Pharmacology ,Sanquan College, Xinxiang M

6、edical University , Xinxiang 453003, Henan Province , China ； 4. Department of Neurology , the Third Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University , Xinxiang 453003 , Henan Provinee , China )Abstract :ObjectiveTo in vestigate the protective effects of breviscap ine on acute lung injury in duced

7、 by left heart is-chemic reperfusion of rabbits MethodsA total of 30rabbits were randomly divided into sham operation group , model groupand treatme nt group ,ten rabbits in each group The model of left heart ischemia-reperfusion was established through ligaturi ng and loos ing the an terior desce n

8、ding bran chThe model group were only copied the models , the treatment group were not only copied the modle but also cured by breviscap ine inject ion (10mg kg 1) 10minu tes after ischemia , the sham operati on group did n't ligature the an terior desce nding bran chThedischarge of phre nic n e

9、rve were recorded with BL-420computer system 30minu tes after ligaturing , 20minutes after loosing and 40minutes after loosing respectively. The amplitude , continual time and frequency of the phrenic nerve discharges were measured ResultsCompared with sham operation group, the amplitude andcontinua

10、l time of phre nic n erve discharge were sig nifica ntly lower and the discharge freque ncy of phre nic n erve in creased sig-n ifica ntly in model group at the 3time points(P v0. 05). Compared with model group, the amplitude and continual time of phre nic n erve discharge in creased sig nifica ntly

11、 and the discharge freque ncy of phre nic nerve decreased significantly in treat-ment group at the 3time points( P v0. 05). ConclusionBreviscap ine can improve discharge curve parameter of phre nicn erve and has protective effect on acute lung injury in duced by left heart ischemic reperfusi on mode

12、l of rabbits.Key words :breviscapine； left heart ischemic reperfusion； lung injury ； phrenic nerve discharge臨床資料表明，多數(shù)左心心肌梗死患者往往以急性呼吸困難為主訴就診，其中 部分患者經(jīng)溶栓治療后，呼吸困難加劇導(dǎo)致呼吸衰竭而死亡，提示左心缺血再灌注可能導(dǎo)致 肺病理性損傷，引起呼吸功能障礙。左心缺血再灌注致肺損傷的機(jī)制及其治療是目 前研究的熱點(diǎn)1。有研究表明，肺源性心臟病患者使用燈盞花素注射液治療后，氣喘、心悸、 胸悶癥狀有明顯改善2。本研究采用家907第30卷第9期2013年9月新鄉(xiāng)醫(yī)

13、學(xué)院學(xué)報(bào)Journal of Xinxiang Medical University Vol . 30No. 9Sep. 2013兔左心缺血再灌注致肺損傷模型、BL-420生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)，采集分析缺血再灌注不同時(shí)間點(diǎn)家兔膈神經(jīng)放電曲線的變化，探討燈盞花素對(duì) 左心缺血再灌注致肺損傷家兔膈神經(jīng)放電的影響，為臨床應(yīng)用燈盞花素防治左心缺 血再灌注致肺損傷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料與方法1ChinaAll rights reserved.Publishing House, http:/ 1994-2013Academic Journal Electronic再瀋注20 min1. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要儀器和試

14、劑健康成年新西蘭家兔30只，雌雄不限，體質(zhì)量2. 5 3. 0kg，由新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提 供。燈盞花素注射液購(gòu)自黑龍江迪龍制藥有限公司（2mL : 5mg，國(guó)藥準(zhǔn)字 Z23020112）, BL-420生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)購(gòu)自成都泰盟生物儀器有限公司，其 他試劑均為國(guó)產(chǎn)市售分析純。1. 2方法1. 2. 1動(dòng)物分組及處理將家兔隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和治療組，每組10只。參照文獻(xiàn)3-4進(jìn)行操作：動(dòng)物測(cè)質(zhì)量,體積分?jǐn)?shù)20%氨基甲酸己酯5mL -kg - 1耳緣靜脈注射麻醉，仰臥位固定，備 皮。行頸外靜脈插管，打開(kāi)輸液裝置螺旋夾，維持靜脈輸液速度為每分鐘35滴于劍突下作一 3cm切口暴露膈肌

15、，2個(gè)絕緣針灸針掛于膈肌兩側(cè)，與 BL-420生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)相連，記錄 膈神經(jīng)放電曲線。于胸骨正中線切開(kāi)胸壁，暴露心臟，在左心耳與肺動(dòng)脈干之間結(jié) 扎左冠狀動(dòng)脈前降支，同時(shí)在結(jié)扎線與血管之間放置直徑0. 3mm銀絲，縫線束緊銀絲后結(jié)扎30min，然后剪斷結(jié)扎線再灌注，造成左心缺血再灌注后肺損傷模 型。假手術(shù)組僅分離前降支，不結(jié)扎。治療組在左冠狀動(dòng)脈前降支缺血后10min經(jīng)靜脈輸液裝置滴壺處給燈盞花素注射液 10mg kg -1 5，調(diào)節(jié)滴速為每分鐘20滴，藥物滴完后恢復(fù)滴速。1. 2. 2膈神經(jīng)放電曲線描記各組動(dòng)物在胸部手術(shù)開(kāi)始之前先描記5 10min的曲線作為對(duì)照，左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎時(shí)

16、開(kāi)始計(jì) 時(shí)，采集缺血30min，再灌注20、40min 3個(gè)時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電曲線，并進(jìn)行對(duì)比 分析。1. 3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 11 0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)？標(biāo)準(zhǔn)差（珋x ? s ）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P V0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2. 1膈神經(jīng)放電曲線3組家兔不同時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電曲線描記如圖1所示，模型組與假手術(shù)組比較，再灌注以后節(jié)律紊亂，而治療組家兔經(jīng)燈盞花素干預(yù)后，節(jié)律紊亂發(fā)生減少。圖13組家兔不同時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電曲線Fig. 1Phre nic n erve discharge curve of rabbits at differe nttime p

17、oints in three groups2. 2膈神經(jīng)放電幅度結(jié)果見(jiàn)表 1。缺血30min，再灌注20、40min模型組膈神經(jīng)放電幅度較假手術(shù)組顯著減少，治療組膈神經(jīng)放電幅度較模型組顯著增加，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P v 0. 01，0. 05）。表13組家兔不同時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電幅度比較Tab. 1Comparison of the amplitude of phrenic nerve dis-charge at different time in threegroups' rabbits（珔x ?s )組別n膈神經(jīng)放電幅度/mV缺血30min再灌注20min再灌注40min假手術(shù)組

18、10198. 36?7. 45185. 69?14. 20185. 42?4. 57模型組 10124. 26? 9. 38a90. 25?3. 41a65. 51?2. 13a 治療組10199. 82?3. 32b 128. 27?11. 24c95. 65?9. 27c注：與假手術(shù)組比較a P v0. 01;與模型組比較b P v0. 01,cP v 0. 05。2. 3膈神經(jīng)放電持續(xù)時(shí)間結(jié)果見(jiàn)表 2。缺血30min，再灌注20、40min模型組膈神經(jīng)放電持續(xù)時(shí)間較假手術(shù)組顯著縮短，治療組膈神經(jīng)放電持續(xù)時(shí)間較模型組顯著延長(zhǎng)，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pv0. 01,0. 05)。表23組家兔

19、不同時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電持續(xù)時(shí)間比較Tab. 2Comparison of continual time of phrenic nerve dis-charge at different time in threegroups' rabbits(珔x ?s ）組別膈神經(jīng)放電持續(xù)時(shí)間/ms缺血30min再灌注20min再灌注 40min 假手術(shù)組 10500. 02? 25. 79485. 23?32. 67490. 32?30. 41模型組 10365. 04? 27. 13a 350. 12? 13. 34a 245. 06? 5. 28a 治療組10475. 35?50. 63b 40

20、0. 18?55. 00b 354. 20? 48. 16b注：與假手術(shù)組比較a P v0. 01;與模型組比較b P v0. 05。2. 4膈神經(jīng)放電頻率結(jié)果見(jiàn)表 3。缺血30min，再灌注20、40min模型組膈神經(jīng)放電頻率較假手術(shù)組顯著增加，治療組膈神經(jīng)放電頻率較模型組顯著降低，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P v 0. 01,0. 05）。表33組家兔不同時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電頻率比較Tab. 3Comparis on of the freque ncy of phre nic n erve dis-charge at differe nt time in threegroups' rabb

21、its（珔x ?s ）組別n膈神經(jīng)放電頻率/ （次min)缺血30min再灌注20min再灌注40min假手術(shù)組1061?1260?1562? 13模型組 1099?18a 87? 17a 92? 17a 治療組1084?15b78?16b69?11b注：與假手術(shù)組比較a P v0. 01;與模型組比較b P v0. 05。3討論燈盞花素是從菊科短亭飛蓬燈盞花中提取分離的黃酮類有效成分，近年來(lái)對(duì)燈盞花素藥理學(xué)作用的研究往往局限于其抑制血小板和紅細(xì)胞黏附聚集，降低血液黏稠度，擴(kuò)張血管等方面6-9，但燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注所致肺損傷是否具有保護(hù)作用未見(jiàn)報(bào)道。周期性呼吸運(yùn)動(dòng) 是由呼吸中樞產(chǎn)生的節(jié)律

22、性沖動(dòng)，經(jīng)膈神經(jīng)和肋間神經(jīng)傳遞至呼吸肌所形成。膈神 經(jīng)放電與呼吸節(jié)律同步，其變化能反映體內(nèi)外各種刺激對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)的反射性影響。本研究結(jié)果顯示，模型組與假手術(shù)組比較膈神經(jīng)放電幅度明顯減少、再灌注以后放電持續(xù)時(shí)間縮短、節(jié)律紊亂，甚至于出現(xiàn)潮式呼吸或陣發(fā)式呼 吸，提示左心缺血再灌注致左心功能減退，引起呼吸功能減退。而治療組家兔經(jīng)燈 盞花素干預(yù)后，各時(shí)間點(diǎn)膈神經(jīng)放電的幅度明顯增加，放電持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)，節(jié)律紊 亂的發(fā)生減少，左心缺血再灌注家兔的呼吸功能明顯改善，表明燈盞花素對(duì)左心缺 血再灌注致肺損傷具有保護(hù)作用。肺循環(huán)的生理特點(diǎn)決定了一旦當(dāng)左心缺血再灌注 后肺循環(huán)血液流變學(xué)變化，生理性聚集的白細(xì)胞迅速激活發(fā)

23、生黏附聚集釋放反應(yīng)， 引起炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)失衡，導(dǎo)致炎癥損傷和功能損害。燈盞花素可以減少肺循環(huán)白細(xì) 胞的黏附聚集釋放反應(yīng)10，抑制炎癥反應(yīng)失衡，減輕炎癥損傷，保護(hù)呼吸功能。本實(shí)驗(yàn)治療組與模型組的膈神經(jīng)放電幅度、持續(xù)時(shí)間和頻率的差異 進(jìn)一步證實(shí)了燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注后的呼吸功能具有保護(hù)作用。綜上所述，燈盞花素可改善左心缺血再灌注致急性肺損傷家兔干預(yù)后的膈神經(jīng) 放電曲線參數(shù)，證實(shí)燈盞花素對(duì)左心缺血再灌注后的呼吸功能具有保護(hù)作用。參考文獻(xiàn)：1 De Campos T，Deree J， Coimbra R. From acute pancreatitis to end-organ injury : mecha ni sms of acute lung injury J . Surg Infect ( Larchmt ) ， 2007，8(1): 107-120.2 Xu G L，Yao L， Rao S Y，et al . Attenuation of acute lung injury inmice by oxymatri ne is associated with in hibiti on of phosphorylated p38mitoge n- act