鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片釋放度測(cè)定方法的研究

1、鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片釋放度測(cè)定方法的研究(1)    【摘要】 目的 研究自制鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片的體外釋放度。方法 采用中國(guó)藥典附錄XC第三法，pH 1.2的鹽酸緩沖液和pH 6.8磷酸鹽緩沖液為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r·min-1, 累計(jì)釋藥量檢測(cè)方法為高效液相色譜法。結(jié)果 平均回收率100.8%，RSD=0.32%，3批產(chǎn)品在2、4、8 h的平均累積釋藥量分別為44.87%、67.57%和84.72%，藥物釋放符合Weibull方程模型。結(jié)論 自制鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片有較好的釋藥性能，本文建立的釋放度測(cè)定方法可作為該制劑的質(zhì)控方法。

2、【關(guān)鍵詞】 高效液相色譜法 鹽酸左旋沙丁胺醇 緩釋片 釋放度Release of levalbuterol hydrochloride sustained released tablets in vitroAbstract:Objective To study the in vitro dissolution rate of levalbuterol hydrochloride sustained released tablets. Methods Following the CHP appendix XC(method three), the hydrochloric acid soluti

3、on (pH=1.2) and PBS (pH=6.8) was taken as release medium. Rotation speed is 50 r/min and dissolution rate was determined by HPLC. Results Average recovery was 100.8%(RSD= 0.32%) . The average cumulative releases were 2 h (44.87%), 4 h(67.57%), 8 h (84.72%). The drug release profile in vitro was foll

4、owed Weibull model equation. Conclusion The study indicates that the sustained released tablet had satisfactory sustained release characteristics. The method could be used for the quality control of levalbuterol hydrochloride sustained released tablets.Key words: HPLC; levalbuterol hydrochloride; su

5、stained released tablets手性藥物左旋沙丁胺醇（levalbuterol)是一種2腎上腺素受體激動(dòng)劑，能刺激支氣管平滑肌的2腎上腺受體，選擇性松弛支氣管平滑肌，具有支氣管擴(kuò)張作用，用于治療哮喘、喘息性支氣管炎、肺氣腫患者的支氣管痙攣。作為外消旋體沙丁胺醇的其中一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體，與消旋體比較，左旋沙丁胺醇去除了產(chǎn)生不良作用的右旋體后，其副作用減少，療效也進(jìn)一步提高1。目前，國(guó)外已有左旋沙丁胺醇噴霧劑上市，我國(guó)尚未有左旋沙丁胺醇制劑上市，但已有多家企業(yè)研究生產(chǎn)其原料藥，并已完成臨床試驗(yàn)。為對(duì)自制鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片進(jìn)行質(zhì)量控制，本文系統(tǒng)地考察了鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片體外釋放的

6、影響因素，并建立了該緩釋片釋放度的測(cè)定方法,該法專屬性強(qiáng)、精密度高。1 儀器與試藥    ZRS8G智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)無(wú)線電精密儀器廠)；美國(guó)戴安Ultimate3000高效液相色譜儀；日本島津UV1601型分光光度計(jì)；鹽酸左旋沙丁胺醇對(duì)照品（蘇州君寧新藥開(kāi)發(fā)中心有限公司提供，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.8%）；鹽酸左旋沙丁胺醇緩釋片（自制，批號(hào)070307、070312、070327，規(guī)格：4 mg/片）；甲醇，色譜純；其他試劑均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定    精密稱取鹽酸左旋沙丁胺醇對(duì)照品適量，分

7、別用pH 1.2鹽酸緩沖液、pH 6.8的磷酸鹽緩沖液溶解并稀釋，制成質(zhì)量濃度約為20 g/mL的溶液，在200400 nm范圍，分別以各溶劑為空白，進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果表明，均在276 nm處有最大吸收，故選擇此波長(zhǎng)為測(cè)定波長(zhǎng)。2.2 色譜條件的確定    以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鈉9.77 g，加水溶解并稀釋至1 000 mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.10±0.05）甲醇（體積比8515）為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為276 nm，進(jìn)樣量為20 L，理論塔板數(shù)按鹽酸左旋沙丁胺醇峰計(jì)算不低于3 0

8、00。2.3 專屬性試驗(yàn)    鹽酸左旋沙丁胺醇峰形對(duì)稱、尖銳,且輔料均不干擾鹽酸左旋沙丁胺醇的測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)圖1。2.4 線性考察     精密稱取鹽酸左旋沙丁胺醇約10 mg置25 mL容量瓶中，以pH1.2的鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液（0.4 mg/mL），精密移取1 mL置20 mL容量瓶中，以pH1.2的鹽酸溶液稀釋至刻度，配成20 g/mL溶液作為對(duì)照液，濾過(guò)，取5、10、20、30、40 L按“2.2”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。以絕對(duì)進(jìn)樣量對(duì)峰面積回歸，得回歸方程。表明藥物在0.10

9、.8 g的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。同法制備藥物在pH6.8磷酸鹽緩沖液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如下：    A=0.1098C-0.0128,r=1.000 （pH=1.2）    A=0.1181C-0.0309,r=0.9995 （pH=6.8）A.陰性溶液(pH1.2鹽酸溶液) ;B.鹽酸左旋沙丁胺醇對(duì)照液(pH1.2的鹽酸溶液);C.陰性溶液(pH6.8 磷酸鹽緩沖液);D.鹽酸左旋沙丁胺醇對(duì)照液(pH6.8 磷酸鹽緩沖液)圖1 HPLC圖（略）Fig.1 HPLC chromatograms2.5 回收率試驗(yàn)

10、60;   精密稱取鹽酸左旋沙丁胺醇對(duì)照品適量分別置250 mL量瓶中，按處方量加入輔料，用pH 1.2的鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，濾過(guò)，取20 L注入色譜儀，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖，另取“2.4”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)液（20 g/mL）20 L注入色譜儀，同法測(cè)定，記錄色譜圖，采用外標(biāo)法計(jì)算濃度，以測(cè)得量對(duì)加入量計(jì)算回收率，同法測(cè)定鹽酸左旋沙丁胺醇在pH6.8磷酸鹽緩沖液中的回收率，見(jiàn)表1。    2.6 溶液穩(wěn)定性    取質(zhì)量濃度為20 g/mL的鹽酸左旋沙丁胺醇供試液，分別在0、2、4、6、8、12、24 h測(cè)定其峰面積,并計(jì)算其RSD=0.19%。結(jié)果表明鹽酸左旋沙丁胺醇供試液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。2.7 釋放度試驗(yàn)    參照中國(guó)藥典2005版二部中硫酸沙丁胺醇緩釋片項(xiàng)下關(guān)于釋放度的測(cè)定，選擇附錄XC第三法即小杯漿法。取本品，以鹽酸溶液（91000）125 mL為介質(zhì)，2 h后以磷酸鹽緩沖液（pH6.8）代替鹽酸溶液（91000）125 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)