榕樹葉中總黃酮的提取及鑒別(一)

1、榕樹葉中總黃酮的提取及鑒別(一)    作者：龍光錦， 黃曄 ， 姜林華， 黃鎖義【關(guān)鍵詞】 榕樹葉；,總黃酮；,提??；,鑒別摘要：目的探討榕樹葉總黃酮的提取及鑒別方法，以充分利用榕樹葉植物資源。方法 采用純物理的工藝流程過程和分光光度法從榕樹葉中提取黃酮類物質(zhì)，對所提取的黃酮類物質(zhì)進行驗證。結(jié)果測得樣品中總黃酮的含量C=8.36%。回收率為97.9%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論 該方法采用全物理過程，無任何化學(xué)變化及污染，是提取榕樹葉黃酮類物質(zhì)的有效途徑。關(guān)鍵詞：榕樹葉； 總黃酮； 提??； 鑒別The Total Flavanone of Ficus m

2、icrocarpa L. Leaf Withdraws and DistinctionAbstract：ObjectiveIn order to make use of the resources of Ficus microearpa L. leaf, avoiding waste. MethodsUse purely physical process flow and spectrophotometry to introduce the method of which withdrawed the flavanone from Ficus microearpa L. leaf , and

3、check the flavanone which withdrawed from Ficus microearpa L. leaf. ResultsThe contents of the total flavanone of onion was C=8.36% and rate of the recovery was 97.9%. ConclusionUsing this text which provide the withdrawal and purifying methods the outcome and purity of the flavanone are all very hi

4、gh.This method is purely physical process, and has no chemical change and pollution. It is ideal to withdraw the flavanone of Ficus microearpa L. leaf.Key words：Ficus microearpa L. leaf; Total flavanone; Withdraw; Distinction 黃酮類（flavontes）化合物是植物光合作用產(chǎn)生的一大類化合物，已知的此類化合物約有2 000多種，有以黃酮（2苯基色酮）為母核的一類黃色色素和

5、黃酮的同分異構(gòu)體及其還原產(chǎn)物，還包括黃酮醇類、異黃酮類、兒茶素類、雙黃酮類及其衍生物。榕樹（banyan），是桑科榕屬無花果類植物，全世界有800多種，主要分布在熱帶亞熱帶地區(qū)。我國榕屬植物約100種，屬熱帶雨林的關(guān)鍵種類。研究表明，榕樹葉含三萜苷、黃酮苷、酸性樹脂、鞣質(zhì)等，其中黃酮類和內(nèi)酯類等有效成分對治療冠心病、老年性癡呆、腦血栓、神經(jīng)系統(tǒng)疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有顯著效果，無毒副作用，并以此開發(fā)出多種藥品和保健食品1。目前對銀杏類黃酮的研究較多，但對于榕樹葉黃酮類化合物的研究還相對缺乏。為了充分利用榕樹葉資源，筆者對榕樹葉中黃酮類成分進行提取與鑒別。現(xiàn)將過程介紹如下。1 材料與

6、方法1.1 材料新鮮的榕樹(小葉榕)葉。95%乙醇AR；氨水AR；正丁醇AR；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；氫氧化鈉AR；蘆丁標準品（中國藥品生物制品檢定所）。UV755B紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；DZF50小型真空恒溫干燥箱（鄭州長城科工貿(mào)易有限公司）；802離心沉淀器（上海分析器械廠）；ZFI型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)。1.2 方法1.2.1 工藝流程榕樹葉中總黃酮提取工藝流程。見圖1。圖1 榕樹葉中總黃酮提取工藝流程(略)1.2.2 操作步驟取新鮮榕樹葉，切碎，烘干，取50 g，置于大的燒杯中，加蒸餾水煮沸3 h。冷卻后進行粗濾，對濾渣用上述方法進行再浸取2次，將3

7、次濾液合并，濾液用高速離心機分離10 min，2 000 r/min。并進行加熱濃縮（加熱溫度在85左右）。濃縮冷卻后加入等體積95%乙醇，放入冰箱內(nèi)2 h。用高速離心機進行分離10 min，2 000 r/min。過濾得濾液濾渣，棄去濾渣。對濾液進行蒸發(fā)濃縮（加熱溫度在85左右）。待乙醇蒸發(fā)完后，將濃液置于真空干燥箱中干燥成疏松固體，粉碎得終產(chǎn)物。1.3 定量實驗-總黃酮的含量測定1.3.1 標準曲線的制備標準溶液的制備：精密稱取蘆丁對照品100 mg，置于250 ml容量瓶中，加入95乙醇溶液并稀釋至刻度，搖勻即得（每毫升含有無水蘆丁0.4 mg）。標準曲線的制備：精密吸取標準溶液0，1.

8、0 ，2.0，4.0，6.0，8.0，12.0 ml分置于50 ml容量瓶中，各加95%乙醇12 ml，加5%亞硝酸鈉溶液2.0 ml，混勻，放置6 min，加10%硝酸鋁溶液2.0 ml，放置6 min加5%氫氧化鈉溶液20 ml，最后用95%乙醇稀釋至刻度，搖勻，以第一瓶為空白溶液，用UV755B紫外可見分光光度計，在500 nm2上測定吸光度。結(jié)果見表1。1.3.2 提取物含量的測定精密稱定提取物1.000 0 g，置索氏提取器中，加95%乙醇回流至無色68 h，將提取液置于燒杯中，水浴加熱濃縮至干，再用熱水洗滌3次，將洗液移至分液漏斗中，并加無水正丁醇液萃取4次，10 ml/次,合并萃

9、取液于燒杯中，水浴蒸干，再加95%乙醇使溶解，并移于50 ml容量瓶中，再加95%乙醇至刻度，搖勻。精密取10 ml于50 ml容量瓶中加95%乙醇至刻度，搖勻，按標準曲線的制備操作測定吸光度，測得A=0.197。表1 紫外可見分光光度計測定(略)根據(jù)上表得一回歸方程：A=0.601 4C-0.004 1，r=0.999 6,n=6，其中截距0.004 1，斜率0.601 4。1.3.3 顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈棕色并有熒光斑點。濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏0.5 min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃綠色熒

10、光斑點。2 結(jié)果A=0.197，根據(jù)回歸方程：A=0.601 4C-0.004 1，計算樣品中總黃酮的含量C=8.36%?；厥諏嶒灒壕芊Q取蘆丁對照品0.040 4g，同前樣品測定方法操作測定吸光度A=0.091，求出回收率為97.9%。3 討論實驗結(jié)果表明，本實驗方法工藝簡單，回收率為97.9%，利用本實驗所提供的提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。此方法采用全物理過程，無任何化學(xué)變化及污染，且該方法操作簡單方便，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑。黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用38。近年

11、來，世界上掀起了植物藥開發(fā)的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目，榕樹葉分布廣泛，實驗結(jié)果表明，榕樹葉中含有較為豐富的黃酮。因此，榕樹葉具有廣泛開發(fā)和利用價值，值得綜合利用加強資源開發(fā)。參考文獻：1 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中醫(yī)大詞典,下冊M.上海：上海人民出版社，1997：2690.2 李冬菊.山楂葉總黃酮的提取及鑒別J.遼寧中醫(yī)雜志，2003， 30（7）：578.3 華光軍，郭 勇.黃酮類化合物藥理研究進展J.廣東藥學(xué)，1999，9（4）：9.4 黃河勝，馬傳庚，陳志武.黃酮類化合物藥理作用研究進展J.中國中藥雜志，2000，25（10）：499.5 王 瑋，王 琳. 黃酮類化合物的研究進展J.沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2002