人參皂苷Re的提取分離與鑒定

1、天然藥物化學(xué)教研室123要求提取分離人參皂苷要求提取分離人參皂苷Re； 掌握大孔樹(shù)脂法提取人參皂苷的操作程序；掌握大孔樹(shù)脂法提取人參皂苷的操作程序； 學(xué)習(xí)薄層層析在皂苷檢識(shí)中的應(yīng)用。學(xué)習(xí)薄層層析在皂苷檢識(shí)中的應(yīng)用。二、實(shí)驗(yàn)原理v 果汁中含脂溶性雜質(zhì)，用乙醚脫脂后，利于水溶果汁中含脂溶性雜質(zhì)，用乙醚脫脂后，利于水溶性皂苷在樹(shù)脂上的吸附，籍此提取皂苷，且利用性皂苷在樹(shù)脂上的吸附，籍此提取皂苷，且利用Re溶于熱乙醇，在冷乙醇溶解度小的特點(diǎn)析出溶于熱乙醇，在冷乙醇溶解度小的特點(diǎn)析出Re，與，與其它成分分離。其它成分分離。1人參果汁總皂苷的提取人參果汁總皂苷的提取 人參果肉人參果肉50g150ml水溫浸

2、（水溫浸（70，1hr），抽濾），抽濾濾液濾液1 果肉果肉 合并，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂合并，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂D4020柱柱 ；水洗至無(wú)糖反應(yīng)水洗至無(wú)糖反應(yīng) ；90%乙醇（乙醇（8001000ml）洗脫）洗脫 。 回收乙醇回收乙醇乙醇提取物（人參粗總苷乙醇提取物（人參粗總苷A）100ml水溫浸（70，30），抽濾 濾液濾液2 果肉果肉乙醇洗脫液乙醇洗脫液 三、三、實(shí)驗(yàn)方法2人參皂苷人參皂苷Re的制備的制備取取4/5量的乙醇提取物量的乙醇提取物少量展開(kāi)劑少量展開(kāi)劑2溶解；溶解；上樣于硅膠上樣于硅膠H（40g）柱）柱展開(kāi)劑展開(kāi)劑1洗脫，每洗脫，每30ml為一流份收集為一流份收集 Re粗晶粗晶BTLC檢測(cè)

3、，合并檢測(cè)，合并Re單一斑點(diǎn)的流份單一斑點(diǎn)的流份回收洗脫液至小體積（約回收洗脫液至小體積（約2030ml）放置、析晶放置、析晶95%乙醇重結(jié)晶乙醇重結(jié)晶 Fr1 Fr2 Fr3 Fr13 Re純品純品Cv 注：樹(shù)脂柱用前需經(jīng)無(wú)水乙醇處理； 可用萘酚糖反應(yīng)檢測(cè)，實(shí)際中可目測(cè)，至 水洗液顏色變淺至清即可； 洗脫時(shí)，自紫色帶即將流出時(shí)，開(kāi)始收集洗脫 液。收集12001500ml 需半周時(shí)間； 可用回流裝置中脫色半小時(shí)。Liebermann-Burchard反應(yīng)：反應(yīng)：取果汁取果汁1ml，加等，加等量乙酸酐，滴加量乙酸酐，滴加1滴濃硫酸滴濃硫酸,變成紫紅變成紫紅色。色。取果汁取果汁12ml于試于試管內(nèi)，激烈振搖，管內(nèi)，激烈振搖，如產(chǎn)生多量蜂窩狀如產(chǎn)生多量蜂窩狀泡沫，放置泡沫，放置10分鐘分鐘以上，泡沫不明顯以上，泡沫不明顯減少，示有皂苷成減少，示有皂苷成分。分。 1)展開(kāi)劑：展開(kāi)劑：1氯仿：甲醇：乙酸氯仿：甲醇：乙酸乙酯：水（乙酯：水（2：2：4：1，下層），下層）2氯仿：甲醇：水（氯仿：甲醇：水（65：35：10，下層）下層）2)顯色劑：顯色劑：5%硫酸乙醇溶液硫酸乙醇溶液（110以上加熱以上加熱5分鐘）顯紅色、分鐘）顯紅色、紫紅色斑點(diǎn)紫紅色斑點(diǎn) 。1泡沫實(shí)驗(yàn)泡沫實(shí)驗(yàn) 2顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 3薄層層析薄層層析 五、思考題11. 層析