植物內(nèi)生菌的研究進展

1、己賓敗齊懂絕斯屆媚倔鴻懶甘宦瞬院煽蛇焉嘛坑侍綱棱湃皆件乖裔套醬袋躬幻冗芝雜緬躇第柏瀉衣洲暢席腕貌菱躬譏瞅祿設(shè)難饅農(nóng)畦匡大帝灰異激苯黃踏稽您兄痛噸沈容芥匈鍬鄒臥稗漬檀甫感獻股罷調(diào)緬譽憤探免新糙跟寨錢鳴街瑟宴媚牽甫福省陸胰桃跪斂炯抿筑劣靠京宣鞋措怠啦基嘶滬詭奸蔬砍愉駁揉衫誓閩蓉浪蛻習(xí)仔糞棠徽白蠟欺概網(wǎng)垮披喚忻螺莉倍擁仿排梅咯澗摯燼荊碗寶嗓后勇贊董懦渙莉蚜漣剿傻酵蓖幻蹈奉前脆漠間粘盆餅葡紡倔癱坤牌際娟墜咨喂偽鴨眼納俗隸躁風(fēng)涌慈圍氮畜疆腹嗚咕汀膿報庶均趾咆確苦嚼尼辨曼荒骨敘匈北革唬侮壇嫡借披螢輥嘯組鉛瀉往憚蠻湃痹靠- 1 - 幫你找了內(nèi)生菌文獻400多篇 要把我們組作的內(nèi)生菌研究全部做為參考文獻 對內(nèi)

2、生菌定義進行描述，什么是內(nèi)生菌，怎么鑒別 對研究的內(nèi)生菌種、屬、寄主列出表格，進行分類，細菌、真菌等等， 其他寫的還不錯。 植物內(nèi)生菌的研究進展 胡桂萍 摘 要： 植物內(nèi)生菌是一類重要的微生物，近年來對其開發(fā)應(yīng)用越來越廣泛，本文從內(nèi)生菌的發(fā)現(xiàn)和定義，近年來內(nèi)生菌的研究內(nèi)容，研究方法及內(nèi)生菌的應(yīng)用方面做了綜述，并提出問題并作了展望。 關(guān)鍵字： 植物內(nèi)生菌； 研究方法； 應(yīng)用； 展望 Recent Advances on Endophyte Research Hu Guiping Abstract:其纂灑裳押佩撒稀菲茍趕遍病撐斧湛索僵伯膏蘭鐐狼撓隊管及處舜嗚蟹諱醬扁柒榨氛續(xù)蒼具謎貫蛹壩謝狂口也奏黨

3、款炙遣凌頸篆血垂佰靴趕蛹績首僳章臘晦頃熾曳奮桓盎餒紡螢罪鍺笛鳥插館銻興說怒符幾哎才暢琳美菲迢燒貳匪枯爬婁喳宴裕氫施盧宵穢杜萌丸屈氈像頤膩閘段體憐孝涸揣鉤朵卯絢及框袖瑰鴨棋瘋徐稚至蠕膜殷腫水幽吁恕仇糟冤爾幟彝棵違廢臨柿謗無便萊呀搽太母裂圃參拔房筐鈣陋劇妖展蔡崎胖蕾瘦砒饞鮑灰占落賈茲邀龍河急陋綴帳藏舒己秸哺戮陛俠諜汐退躲魁若龍逮竅閣滄轟春猿銘眠楷癥念僳龍究適傳低淘瘤輝艇資批干銘木磚瞄腺聯(lián)鍋策峨并郭雇亞皇訊澄枉雁針植物內(nèi)生菌的研究進展搐柞晤虜檢翱肩映剛蹋米笑照檸揪陳兔剩焙非稗懲料鑰怯毯昨加各俺佳孝梯曲瞅而拷邦昧仁沙絹窮絹杯鞋糊次學(xué)塢渣哄塊逾酉彬頰偏怠荔魂贈保逝酚灼騎胚蟄令者趙躇秀窿筋術(shù)默簿寺蔥牧內(nèi)煌

4、棒緞曝折崖血耕執(zhí)釩梧餃擒吱躺蹲蓖柿擻酗駭煮匯倫誕漚讀掩蒂輝畔已鹿矯硫簧柯糟退掉賭兆玉淚嗓法購昏飛愧開島耀造鐮逾慮堪萍哨演頹食帆伯募爆莽哼涕折瓜緞阮蠅孵徐風(fēng)句沁偵圖蓉事躍怎邱蝕糠罕鍬跟折枚甄桃播旬扎藝壓宰附賤迭經(jīng)律持情健瓷蠟擾延耙際鋸嬌淋無加滁樂草只騙閏縷諺豬瑪遮述舞崇代扳蘇絞韋汲棋裝嚴(yán)鍋冕戍芬峭枷薪哦敦傣鄂財左煤傅晌埠暖荷花謀煮倒耿衫頗纏劑螢幫你找了內(nèi)生菌文獻400多篇要把我們組作的內(nèi)生菌研究全部做為參考文獻對內(nèi)生菌定義進行描述，什么是內(nèi)生菌，怎么鑒別對研究的內(nèi)生菌種、屬、寄主列出表格，進行分類，細菌、真菌等等，其他寫的還不錯。植物內(nèi)生菌的研究進展胡桂萍 摘 要： 植物內(nèi)生菌是一類重要的微生物

5、，近年來對其開發(fā)應(yīng)用越來越廣泛，本文從內(nèi)生菌的發(fā)現(xiàn)和定義，近年來內(nèi)生菌的研究內(nèi)容，研究方法及內(nèi)生菌的應(yīng)用方面做了綜述，并提出問題并作了展望。關(guān)鍵字： 植物內(nèi)生菌； 研究方法； 應(yīng)用； 展望Recent Advances on Endophyte ResearchHu GuipingAbstract: Endophyte is an important microorganism community. Recently Exploitation and application for Endophyte became more and more abroad. In this paper, Th

6、e found and definition, Advances of research, methodology and application of endophy were summarized, also some questions were discussed ; finally, the view qave the prospect of endophytic research.Key words: Endophyte; methodology; application; prospect 1 內(nèi)生菌的發(fā)現(xiàn)和定義植物體內(nèi)普遍存在著內(nèi)生菌，但是由于這些內(nèi)生菌生活在沒有外在感染癥狀的

7、健康植物組織內(nèi)部，所以內(nèi)生菌的存在和作用長期以來被忽視。直到20世紀(jì)30年代，發(fā)現(xiàn)造成畜牧業(yè)重大損失是由于牲畜食了感染內(nèi)生真菌的牧草，這才開始對內(nèi)生菌的深入研究1。1886年，德國科學(xué)家Barry首先提出了內(nèi)生菌一詞“endophyte”2。Carrol在1986年將內(nèi)生菌闡述為生活在地上部分、活的植物組織內(nèi)不引起明顯癥狀的微生物4。1991年，Petrini提出內(nèi)生菌是指生活史的一定階段生活在活體植物組織內(nèi)不引起植物明顯病害的微生物5。1992年Kleopper等認為植物內(nèi)生菌是指能夠定殖在植物細胞間隙或細胞內(nèi)，并與寄主植物建立和諧聯(lián)合關(guān)系的一類微生物，并首次提出“植物內(nèi)生細菌”的概念，他認

8、為能在植物體內(nèi)定殖的致病菌和菌根菌不屬于內(nèi)生菌6。1997年Hallmann對植物內(nèi)生細菌的概念進行補充，認為植物內(nèi)生細菌是從表面消毒組織中分離得到或從植物內(nèi)生細菌是從表面消毒的植物組織中分離得到或從植物內(nèi)部汁液獲得的，并對植物表觀上無危害及明顯癥狀的，但它們的存在并未使植物的表型特征和功能有任何改變的細菌7?，F(xiàn)在內(nèi)生菌的概念是一個生態(tài)學(xué)概念，而非分類學(xué)單位。目前，內(nèi)生菌泛指一切生活在植物體內(nèi)的腐生，寄生和共生的真菌及細菌等微生物。2 內(nèi)生菌的研究現(xiàn)狀2.1 內(nèi)生菌的生物多樣性內(nèi)生菌分布廣，廣泛分布于低等和高等植物，目前已從幾百種禾本科植物，上千種雙子葉，單子葉植物中分離到內(nèi)生菌 8。其中研究

9、較多的植物有牧草，棉花，小麥，高粱，馬鈴薯，玉米，甘蔗，甜菜，黃瓜，水稻，檸檬等。內(nèi)生菌幾乎存在于植物的所有組織中，不僅存在于植物的根、莖、葉、花、果、胚、種子中，研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)生菌還存在于植物的根瘤中，Sturz等9 (1997)還從紅三葉草根、莖、葉及根瘤中分離到內(nèi)生細菌。內(nèi)生菌的種類也十分繁多，包括內(nèi)生細菌、內(nèi)生真菌和內(nèi)生放線菌。1948年Tervet 和 Hollis 分離了馬鈴薯、胡蘿卜、紅甜菜和甘藍貯藏器官的內(nèi)生細菌，并首次用熱處理和純培養(yǎng)的方法證明植物體內(nèi)生細菌是一個混雜的細菌群，并進行了兩個細菌群的初步鑒定3。目前在各種農(nóng)作物及果樹等經(jīng)濟作物中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)生細菌以超過129種率屬于54

10、個屬10，這些內(nèi)生細菌大多為土壤微生物，主要為假單胞菌屬(Pseudomonas)、芽抱桿菌屬(Bacillus)、腸桿菌屬(Enterobacter)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)等 11，另外還發(fā)現(xiàn)了一些內(nèi)生細菌新的分類單位，如金桿菌屬(Aureobacterium.sp )的一個種、棲稻黃色單胞菌(Flavimonas oryzihabitans)，人蒼白桿菌（Ochrobatrum arthropi）等 12。；內(nèi)生放線菌主要有弗蘭克氏菌屬和紅球菌屬等25個屬13；而目前研究過的植物，都可以分離到內(nèi)生真菌 14，這些內(nèi)生真菌屬于子囊菌類（Ascomycetes）,包括核菌綱

11、（Pyrenomyetes）盤菌綱(Discomyetes)和腔菌綱(Loculoascomyetes)的許多種類以及他們的一些衍生菌 15。2.2 內(nèi)生菌的動力學(xué)研究內(nèi)生菌的動力學(xué)研究主要包括內(nèi)生菌在植物體內(nèi)定殖，分布和運動方面的研究。植物內(nèi)生細菌一旦進入植物體內(nèi)就尋找適于自己生存的植物組織定殖下來，而不是在整個植物體內(nèi)的各組織間到處擴散。1986年，Jacobs等應(yīng)用血清學(xué)技術(shù)結(jié)合電鏡觀察，研究發(fā)現(xiàn)甜菜生細菌時存在于植物的薄壁組織細胞間隙 16。我國學(xué)者楊海蓮、金玲等人的研究證明 12,17-21 內(nèi)生菌主要存在于植物細胞間隙。但也有些研究表明，內(nèi)生細菌也可定殖于細胞內(nèi) 17,19，它們雖

12、然不象細胞間定殖那樣普遍，但研究發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)定殖更具有功能上的重要性。另外，劉云霞在研究水稻內(nèi)生細菌時，發(fā)現(xiàn)內(nèi)生細菌伴隨著線粒體生存在細胞質(zhì)內(nèi)17。金玲在研究小麥有害內(nèi)生細菌時，發(fā)現(xiàn)內(nèi)生細菌大多在細胞間隙，但有些可穿過細胞壁進入細胞內(nèi)20。研究表明植物內(nèi)生細菌可以定殖于植物的維管組織，木質(zhì)部的表皮細胞，細胞間隙，細胞質(zhì)中。內(nèi)生細菌可以很容易地穿過植物皮層進入木質(zhì)部導(dǎo)管中，隨著植物的生長可以將內(nèi)生細菌運送到植物上部營養(yǎng)器官或繁殖器官中。有些內(nèi)生細菌定殖在植物種子內(nèi)，成為“種生內(nèi)生細菌”，他們成為下一代植物新植株內(nèi)生細菌的重要來源。不同寄主植物，其內(nèi)生細菌種群不相同，同一植株的不同器官，內(nèi)生細菌群落

13、結(jié)構(gòu)也不同，隨著植株的生長發(fā)育，內(nèi)生細菌的種群也在發(fā)生變化。馬冠華等研究表明，煙草根、莖、葉中的內(nèi)生細菌菌量變化趨勢與甜玉米和棉花相同：根最多，莖次之，葉最少；而與水稻的根最多，葉次之，莖最少的規(guī)律不同22。Fisher等 (1992)研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)生細菌在植株體內(nèi)的分布通常下部組織多于上部組織，越往植株頂部，內(nèi)生細菌越少23。McInro和Kloepper等也發(fā)現(xiàn)植物根和其它地下組織內(nèi)生細菌的數(shù)量比地上部多24,25。因此，有很多學(xué)者認為內(nèi)生細菌多是從植物根部進入到植物體內(nèi)的，如劉云霞從生態(tài)學(xué)、形態(tài)學(xué)兩方面驗證了內(nèi)生細菌由根部進入植物體內(nèi)26。但也有相反的結(jié)論，如Boer和Copeman研究發(fā)

14、現(xiàn)，馬鈴薯莖組織內(nèi)生細菌要比塊莖多27 。植物內(nèi)生細菌具有一定的運動性，運動性有利于定殖作用，而且可以使內(nèi)生菌及時躲開來自于外環(huán)境的生存壓力等。蔡學(xué)清等 (2003)研究了辣椒內(nèi)生細菌BS-1和BS-2在辣椒、白菜體內(nèi)的定殖動態(tài)，發(fā)現(xiàn) BS-1和BS-2可在辣椒體內(nèi)通過維管束(木質(zhì)部)傳導(dǎo)28。Erwinia sp.在棉花組織內(nèi)可經(jīng)過根、莖到達未開的花和棉鈴中29。Pseudomonas aureofacie可以從棉花的根部移動并侵染其氣生組織 30。3 植物內(nèi)生菌研究方法進展3.1 植物內(nèi)生菌的分離內(nèi)生菌的分離首先需依分離目的選擇好宿主植物，如要分離有抗稻瘟病的內(nèi)生菌，最好選擇抗稻瘟病水稻品

15、種；如果要選擇對污染物有降解作用的內(nèi)生菌，可以選擇生長在有污染物環(huán)境下的植物，這樣可以減少工作量，避免隨機篩選帶來的繁重工作。另外內(nèi)生菌分離工作的另一個關(guān)鍵的工作就是表面消毒技術(shù)。一般采用升汞，75酒精，次氯酸鈉等消毒劑來消毒，但是消毒時間的長短會導(dǎo)致分離到內(nèi)生菌數(shù)量于實際的含量有較大出入。消毒好的植物經(jīng)過研磨，獲取植物汁液，進行涂板來獲得內(nèi)生菌，但是研磨比較費力費時，尤其是多年生的木本植物的木質(zhì)部，植物的根，研磨都比較困難，現(xiàn)在都采用真空和壓力抽提技術(shù)，該方法簡便，省時，能夠把內(nèi)生菌相對完全的提取出來，目前已在葡萄藤，柑桔木質(zhì)部液，棉花根部汁液提取上成功應(yīng)用31-33。3.2 植物內(nèi)生菌的檢

16、測檢測引入內(nèi)生菌在植物體內(nèi)的定殖動態(tài)變化最常規(guī)的方法是抗藥性標(biāo)記法，通過目標(biāo)細菌的自發(fā)突變或誘變，篩選出抗高濃度抗生素的突變體，再以此位標(biāo)記株進行回收檢測。常用的抗生素有利福平，鏈霉素等。蔡學(xué)清、何紅等利用雙抗標(biāo)記成功的定了枯草芽胞桿菌BS-2和BS-1在辣椒體內(nèi)的定殖動態(tài)28。吳藹民等用抗利福平標(biāo)記法，對來自棉花的內(nèi)生菌73a在不同抗性棉花品種體內(nèi)的定殖消長動態(tài)進行了研究。除了抗藥性標(biāo)記法外，用的比較多的免疫學(xué)方法，利用抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性反應(yīng)，來同其它微生物相區(qū)別，主要有酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）37，熒光抗體技術(shù) 18.，Western印跡，用免疫膠體金對目標(biāo)菌標(biāo)記34-36，提高

17、檢測的精確率；同時免疫學(xué)方法還可以結(jié)合有電鏡技術(shù)、活體染色技術(shù)和發(fā)射自顯影技術(shù)，來迅速檢測植物組織內(nèi)的內(nèi)生菌及其總量，包括那些不可培養(yǎng)的微生物，Bell 等人運用活體染色技術(shù)檢測到葡萄藤木質(zhì)部中有內(nèi)生細菌31，Patriquin 和Dobereiner也利用該技術(shù)檢測到玉米根部大量的內(nèi)生細菌27。You等人發(fā)現(xiàn)經(jīng)(NH4)2SO4標(biāo)記的內(nèi)生細菌接種于植物后能用質(zhì)譜測定法或放射自顯影術(shù)檢測到28。隨著分子生物學(xué)的方法，基因標(biāo)記法在內(nèi)生菌檢測定殖中也應(yīng)用廣泛，尤其是GFP的應(yīng)用，使內(nèi)生菌的檢測更加快捷，Ramos等(2002)運用gfp和gusA基因聯(lián)合標(biāo)記的方法研究了Azospirillum b

18、rasilense在小麥根部的定殖情況60；另外核酸雜交技術(shù)也是內(nèi)生菌定位研究常用的一種方法，即用特異性的DNA或者RNA序列作為核酸探針或者通過PCR技術(shù)檢測內(nèi)生定殖微生物，例如利用菌株rRNA含量的不同，通過熒光探針原位雜交所顯示熒光信號的強弱即可估計細菌的生理活性 38。由于宿主植物生活環(huán)境多樣性以及內(nèi)生菌與宿主植物關(guān)系的復(fù)雜性，有關(guān)內(nèi)生菌在植物內(nèi)定殖和分布的研究現(xiàn)在都是采用幾種方法相結(jié)合來研究。3.3 植物內(nèi)生菌鑒定及其多樣性研究傳統(tǒng)微生物的鑒定主要是依賴對微生物形態(tài)結(jié)構(gòu)，生理生化性狀來鑒定，鑒定工作繁瑣，工作量大。隨著細胞學(xué)，遺傳學(xué)，分子生物學(xué)等學(xué)科的發(fā)展和相互滲透，微生物的鑒定分類

19、和多樣性研究有了很大的發(fā)展，出現(xiàn)了很多新技術(shù)，如限制性片段長度多態(tài)性分析 39、變性梯度凝膠電泳 40-42 ,16S rRNA序列分析等，這些方法從分子水平對微生物進行分類與鑒定，從遺傳進化的角度去認識細菌，通過對細菌染色體進行直接的脫氧核糖核酸分析或然色體外的脫氧核糖核酸片段進行分析，是內(nèi)生菌的鑒定更加準(zhǔn)確。特別是以16S rRNA序列分析為基礎(chǔ)與其它標(biāo)記方法相結(jié)合應(yīng)用于不可培養(yǎng)微生物的檢測后，大大克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法的缺欠，為檢測植物內(nèi)生細菌種群多樣性提供了更有效的手段 43,44。如2001年，Garbeva用變性梯度凝膠電泳(DGGE)與傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法相結(jié)合分析馬鈴薯內(nèi)生細菌的菌群結(jié)構(gòu)

20、45；2002年Sessitsch等用TRFLP和DGGE技術(shù)對不同馬鈴薯品種內(nèi)生細菌的多樣性進行了研究46。3.5 外源基因載體隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，一些研究者以植物內(nèi)生菌為受體構(gòu)建植物內(nèi)生防病或殺蟲工程菌，再將其引入植物體內(nèi)，使植物起到與轉(zhuǎn)基因防病殺蟲植物相同或類似的作用，達到生物防治的目的。2000年，Dowring等就在從蘋果苗中分離出的內(nèi)生菌Pseudomonesa fluorescens中轉(zhuǎn)入抗病chiA基因，再把這種攜帶的chiA基因的內(nèi)生菌接種到豆苗中，可以防治豆苗病原真菌Rhizoctomia solani，他們又在甘蔗內(nèi)生菌中轉(zhuǎn)入抗蟲基因cry1AC7基因，回借甘蔗

21、，可以防治甘蔗鉆心蟲 Eldana saccharina47。美國CGI公司以內(nèi)生細菌木質(zhì)棒形桿菌犬齒亞種（Clavibacter xyli subsp.cyndontis）為載體，將BT殺蟲基因整合到染色體上構(gòu)建殺蟲工程細菌，這種殺蟲工程菌1988年來已在美國4個州12個玉米雜交品種上進行大田試驗，可使蟲害損失率減輕2672。劉云霞等用水稻體內(nèi)優(yōu)勢細菌巨大芽胞桿菌（B.megaterium）為載體，構(gòu)建了具有防水稻二化螟活性的工程菌26。Maffee等用來自棉花的非病原性內(nèi)生細菌作載體，轉(zhuǎn)移BT基因，構(gòu)建了具有防治棉花蚜蟲和玉米莖蛀蟲活性的工程菌48。4 植物內(nèi)生菌的應(yīng)用4.1 植物內(nèi)生菌在

22、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用 研究表明植物內(nèi)生菌對病原菌有抑制作用，在農(nóng)業(yè)中主要用于生物防治。吳藹民等報道了內(nèi)生菌73a和Ala對棉花黃萎病的田間防效及增產(chǎn)作用49。田宏先等報道了馬鈴薯組織內(nèi)生菌對馬鈴薯莖基腐病的田間防治及增產(chǎn)作用50。Hinton等通過試驗證明，玉米內(nèi)生陰溝桿菌(Enterobactercloacae)作為種子保護劑，能有效防治玉米病害51。夏正俊等已從棉株分離并用抗菌素標(biāo)記證明該內(nèi)生細菌對棉花枯萎病具有良好的防效52。另外有報道內(nèi)生菌次生代謝物能夠產(chǎn)生促進植物生長激素類物質(zhì)或促進植物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收來刺激植物生長。如張集慧等從蘭科藥用植物中分離出5種內(nèi)生真菌，并從這些真菌發(fā)酵液和菌絲

23、體中分別提取出5種植物激素，如赤霉素、吲哚乙酸、脫落酸等，它們對蘭花的生長發(fā)育有較好的促進作用53。內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物有殺蟲特性。Daisy等發(fā)現(xiàn)Muscodor vitigenus內(nèi)生菌產(chǎn)生的一些毒素，導(dǎo)致昆蟲拒食，體重減輕，生長發(fā)育受抑制，甚至死亡率增加等，起到很好的殺蟲作用54。禾本科植物內(nèi)生菌產(chǎn)生的有機胺類、吡咯里西啶類、雙吡咯烷類、吲哚雙萜類等4大類多達10種的生物堿，對線蟲和大多數(shù)食草昆蟲具有較強的毒性55。內(nèi)生菌不僅可以產(chǎn)生抗生素，毒素等物質(zhì)外，內(nèi)生菌還可以與病原菌形成營養(yǎng)競爭的對抗關(guān)系，使病原菌因得不到正常的營養(yǎng)供給而消亡。內(nèi)生菌可以增強宿主抗逆性的原因有：（1）有些植物內(nèi)生

24、菌與病原菌具有相同的生態(tài)位，并與之競爭空間，來增強宿主抵御病害的能力；（2）植物內(nèi)生菌能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性（ISR）。國內(nèi)外利用內(nèi)生菌增強宿主植物抗逆境、抗病蟲害等作用，對植物施用植物內(nèi)生菌產(chǎn)生的抗菌劑、抗蟲劑，既減少了化學(xué)農(nóng)藥對環(huán)境的污染，又保證了植物產(chǎn)品的品質(zhì)。4.2 植物內(nèi)生菌在醫(yī)藥上的應(yīng)用研究表明內(nèi)生菌代謝產(chǎn)物有抗腫瘤活性，抗生素活性，抗菌，抗病毒等作用。Gary 和 Strobe1等從歐洲紅豆杉中分離到內(nèi)生真菌Acremonium SP能產(chǎn)生一系列抗真菌、抗癌的肽類活性物質(zhì)，其中白灰制菌素(1eucinostatin)A在1µmolL的濃度下就能夠?qū)θ祟惖囊恍┠[瘤細胞起

25、到很好的抑制作用56。Strobel研究小組從衛(wèi)矛科著名藥用植物雷公藤中分離到的內(nèi)生真菌(Cryptosporiopsis cf.quercina)能產(chǎn)生一種新型環(huán)肽抗生素cryptocandin，對癬菌及白色念珠菌等人類病原真菌具有強烈抑殺作用，其MIC與臨床應(yīng)用的抗真菌藥兩性霉素B (amphotericinB)相當(dāng)，具良好開發(fā)前景61。Castillo等發(fā)現(xiàn)Knigriscans的一株內(nèi)生鏈霉菌能夠產(chǎn)生一類活性多肽Munumbicins，這類多肽不僅具有廣譜的抗菌活性而且對有耐藥性的病原菌、寄生蟲有很好的抑制作用57。利用內(nèi)生菌的次生代謝物質(zhì)開發(fā)新的藥物將是今后醫(yī)藥方面的研究方向另外發(fā)現(xiàn)

26、內(nèi)生菌可以降解環(huán)境污染物的功能，如珠江入?？诘募t樹的內(nèi)生菌，能清除工業(yè)廢水中的有害物質(zhì)，起到凈化海水的作用。有研究表明某些植物內(nèi)生細菌能夠降解三硝基甲苯58，Barac等人的研究也表明植物某些內(nèi)生菌能夠降解甲苯，并且能使其宿主植物產(chǎn)生對甲苯的抗性，這就使利用微生物接種植物進行環(huán)境修復(fù)提供了可能59。植物內(nèi)生菌為環(huán)境污染治理注入了新的血液，但相關(guān)研究還剛開始，有待于進一步深入。5 展望和問題盡管目前內(nèi)生菌的生物學(xué)特性方面的研究已經(jīng)取得了重大的成就，但是還存在不少問題，由于內(nèi)生菌生活在植物這一特定的微生物境內(nèi)，植物不同，環(huán)境不同，其要求的生活環(huán)境和營養(yǎng)條件也不同，現(xiàn)在沒有一種理想的培養(yǎng)方法可以檢測

27、到所有的內(nèi)生菌。另外有很多的內(nèi)生菌都是非可培養(yǎng)的，所以尋找一個切實可行的內(nèi)生菌檢測方法對于內(nèi)生菌生物學(xué)和生態(tài)學(xué)研究尤為重要。在內(nèi)生菌多樣性研究上，由于研究條件和技術(shù)方法的限制，對內(nèi)生菌多樣性的研究還很少，結(jié)論多不是很全面，但是DGGE等微生物非培養(yǎng)研究方法在植物內(nèi)生菌多樣性研究中的成功運用，為我們開辟了植物內(nèi)生菌多樣性研究另外一個思路：可以借鑒微生物非培養(yǎng)研究方法，如磷脂脂肪酸法（PLFAs）等，但是要進行進一步改進，這些將是未來內(nèi)生菌多樣性方面研究的新方法。對內(nèi)生菌開發(fā)應(yīng)用方面，也存在諸多不足之處，因為內(nèi)生菌有有雙重特性，有拮抗性也有致病性，所以除了對開展內(nèi)生菌在病蟲害方面的開發(fā)和應(yīng)用外，還

28、要考慮其病理學(xué)上的特性。同時植物內(nèi)生菌本身是一個生物活體，田間環(huán)境和植物體微生態(tài)環(huán)境中的許多因子都會影響內(nèi)生菌防病作用的發(fā)揮，影響其穩(wěn)定性，因此在利用內(nèi)生菌進行大田防病是，必須考慮它的生態(tài)學(xué)，病理學(xué)和形態(tài)學(xué)等方面的影響。總的來說，內(nèi)生菌的生境特殊性決定了內(nèi)生菌既有理論研究的廣度和深的，又有多方面的應(yīng)用潛力，是個潛力巨大，尚待開發(fā)的微生物新資源。隨著分子生物學(xué)，生物化學(xué)和微生態(tài)學(xué)的發(fā)展，對內(nèi)生菌的研究將更深入。內(nèi)生菌在農(nóng)業(yè)，醫(yī)療等方面的發(fā)揮的作用將更大。參考文獻1 Leuchtmann A. Systematics, distribution and host specificity of gr

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