食品現(xiàn)代儀器分析實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)2016課件

1、食品現(xiàn)代儀器分析實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)福州大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院吳佳2016年 5月實(shí)驗(yàn)一 苦味飲料中硫酸奎寧的熒光法測(cè)定1. 目的意義喹啉結(jié)構(gòu)是“苯并吡啶”。即一個(gè)苯環(huán)與一個(gè)吡啶環(huán)稠合而成?？鼘幨青难苌?，其結(jié)構(gòu)如下： 奎寧是金雞納樹皮中含有的苦味晶狀粉末，抗瘧疾藥。瘧疾曾是熱帶、亞熱帶地區(qū)猖獗流行的疾病，曾奪走成千上萬人的生命。17世紀(jì)末，奎寧由歐洲傳入我國，曾稱為“金雞納霜”，當(dāng)時(shí)是非常罕見的藥。后來，瑞典納尤斯對(duì)這種植物的樹皮進(jìn)行了認(rèn)真的研究，提取了其中的有效成分金雞納堿，起名為“奎寧”?！翱鼘帯边@個(gè)詞在秘魯文字中是樹皮的意思。直到1945年，奎寧才實(shí)現(xiàn)了人工合成?？鼘幨菈A性物質(zhì)，與硫酸反應(yīng)生成

2、鹽，俗名硫酸奎寧。在飲料中硫酸奎寧是調(diào)味料，主要用在滋補(bǔ)品和苦檸檬水中，有調(diào)味及預(yù)防瘧疾之功效，例如湯力水是Tonic Water的音譯，又叫奎寧水、通寧汽水。是蘇打水與糖、水果提取物和奎寧調(diào)配而成的?？勺鳛榭辔讹嬃匣蛴糜谂渲齐u尾酒或其它飲料?？鼘庯嬃弦云湮⒖嗟目谖冻蔀闀充N的解渴飲料，特別是在夏季人們大量飲用，但大量消費(fèi)含奎寧成分的飲料對(duì)一些個(gè)體有害，如新陳代謝紊亂或?qū)@種物質(zhì)有超敏性的人要避免攝取奎寧，特別是孕婦。對(duì)懷孕期間每天飲用一升以上奎寧飲料的孕婦進(jìn)行的調(diào)查顯示，出生后24小時(shí)，新生兒就出現(xiàn)神經(jīng)戰(zhàn)栗癥狀，在他們的尿液中發(fā)現(xiàn)了奎寧成分，但2個(gè)月以后這些癥狀就不存在了。為此，對(duì)奎寧含量的測(cè)

3、定具有重要意義。2. 原理：本實(shí)驗(yàn)包括熒光光譜和激發(fā)光譜測(cè)定，以及苦味飲料中硫酸奎寧含量測(cè)定。硫酸奎寧是強(qiáng)熒光性物質(zhì)，在紫外光照射下，會(huì)發(fā)射藍(lán)色熒光。在稀溶液中熒光強(qiáng)度與硫酸奎寧濃度成正比，可根據(jù)熒光強(qiáng)度求出硫酸奎寧濃度。熒光(發(fā)射)光譜：固定激發(fā)光波長和強(qiáng)度，在不同的波長下測(cè)定所發(fā)射的熒光強(qiáng)度，以發(fā)射波長為橫坐標(biāo)，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，所作曲線為熒光發(fā)射光譜。熒光發(fā)射光譜是選擇最大熒光發(fā)射波長的依據(jù)。熒光激發(fā)光譜：固定熒光發(fā)射波長(一般在最大發(fā)射波長處)，改變激發(fā)光波長，得出不同激發(fā)波長的熒光強(qiáng)度，以激發(fā)光波長為橫坐標(biāo)，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，所得曲線稱為激發(fā)光譜。熒光激發(fā)光譜是選擇最大激發(fā)波長的

4、依據(jù)。3. 儀器 970CRT熒光分光光度計(jì)。4. 試劑 (1) 0.05 mol/L硫酸溶液。(2) 0.1 mol/L硫酸溶液。(3) 硫酸奎寧儲(chǔ)備液：稱取100 mg硫酸奎寧，用0.05 mol/L硫酸溶液溶解并移入100 mL容量瓶中，稀釋定容至100 mL，將其儲(chǔ)于棕色瓶中(此溶液存放于冰箱中可保存長久。若溶液變渾濁，則需要重新配制)。此溶液濃度為1 mg/mL。(4) 硫酸奎寧應(yīng)用液：取硫酸奎寧儲(chǔ)備液1 mL用0.05 mol/L硫酸溶液稀釋定容至100 mL，此溶液含硫酸奎寧10 mg/mL。5. 操作方法(1) 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制取6只50 mL容量瓶，以5 mL移液管精確吸取10

5、 mg/mL硫酸奎寧標(biāo)準(zhǔn)溶液（即應(yīng)用液）：0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL，分別置于各容量瓶中，用0.05 mol/L硫酸溶液稀釋并定容。此系列硫酸奎寧濃度分別為0.00，0.200，0.400，0.600，0.800，1.00 mg/mL（標(biāo)記為1-6號(hào)）。(2) 熒光發(fā)射光譜的制作用少量6號(hào)1.00 mg/mL濃度的硫酸奎寧液潤洗比色皿，然后將該濃度的硫酸奎寧液注入熒光比色皿中（2/3即可），將比色皿放入熒光分光光度計(jì)的固定槽中。依次點(diǎn)擊操作界面菜單上的定性分析圖譜掃描參數(shù)設(shè)定打開設(shè)定對(duì)話框，設(shè)定固定激發(fā)光波長(EX)為350 nm；發(fā)射波長(EM)掃描范圍

6、350800 nm；掃描速度：高速；靈敏度：2；激發(fā)光狹縫寬度：10 nm；發(fā)射光狹縫寬度：10 nm。參數(shù)設(shè)定完畢，點(diǎn)擊開始掃描按鈕，掃描發(fā)射波長，得到以發(fā)射波長為橫坐標(biāo)，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)的熒光發(fā)射光譜圖。點(diǎn)擊保存按鈕，在指定的文件夾中，以自己“學(xué)號(hào)未尾3位+姓名+a”為文件名進(jìn)行保存。(注：請(qǐng)按以上文件名保存，以便教師實(shí)地查驗(yàn)。)點(diǎn)擊退出按鈕，退出對(duì)話框。依次點(diǎn)擊操作界面菜單上的定性分析圖譜分析打開譜圖，點(diǎn)擊剛保存的文件(使文件呈藍(lán)色)，依次點(diǎn)擊選中確定，從打開的熒光光譜圖右邊表格中找出最大發(fā)射波長(EM)，并記錄于后面的表格中。退出對(duì)話框。(3) 熒光激發(fā)光譜的制作點(diǎn)擊操作界面菜單上的

7、定性分析圖譜掃描參數(shù)設(shè)定打開設(shè)定對(duì)話框，固定熒光發(fā)射(EM)波長(以所得最大發(fā)射波長設(shè)定)；激發(fā)光(EX)波長掃描范圍：200400 nm；掃描速度：高速；靈敏度：2；激發(fā)光狹縫寬度：10 nm；發(fā)射光狹縫寬度：10 nm。掃描激發(fā)光波長，制作以激發(fā)光波長為橫坐標(biāo)，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)的熒光激發(fā)光譜。點(diǎn)擊保存按鈕，以自己“學(xué)號(hào)未尾3位+姓名+b”為文件名進(jìn)行保存。點(diǎn)擊退出按鈕，退出對(duì)話框。依次點(diǎn)擊操作界面菜單上的定性分析圖譜分析打開譜圖，點(diǎn)擊剛保存的文件(使文件呈藍(lán)色)，依次點(diǎn)擊選中確定，從打開的熒光光譜圖右邊表格中找出最大激發(fā)波長(EX)，并記錄于后面的表格中。退出對(duì)話框。(4) 設(shè)定定量測(cè)量

8、波長點(diǎn)擊操作界面上的快捷鍵to l，打開對(duì)話框，按最大激發(fā)波長(EX)和最大發(fā)射波長(EM)設(shè)定，點(diǎn)擊開始，等到所設(shè)波長字跡退色并再轉(zhuǎn)黑即可，按退出鍵，退出對(duì)話框。(5) 硫酸奎寧標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將步驟(1)的1號(hào)空白液，潤洗并注入比色皿中，依次點(diǎn)擊操作界面菜單上的定量分析測(cè)量樣品濃度，打開測(cè)量對(duì)話框，點(diǎn)擊測(cè)本底按鈕，測(cè)定樣品空白。依次將26號(hào)標(biāo)準(zhǔn)液潤洗并注入比色皿中，每注入一次，按3次測(cè)INT鍵，點(diǎn)擊求平均值求出測(cè)量平均值，記錄每次測(cè)量數(shù)據(jù)(平均值)。用所得數(shù)據(jù)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。(6) 待測(cè)液中硫酸奎寧濃度的測(cè)定(ug/mL)用胖肚移液管吸取待測(cè)液25 mL，移至50 mL容量瓶中，用0.1 m

9、ol/L硫酸溶液稀釋并定容。按步驟(5)的方法測(cè)量熒光強(qiáng)度，平行測(cè)定兩次，求平均值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得測(cè)定液濃度，計(jì)算出待測(cè)液中硫酸奎寧濃度。6 數(shù)據(jù)記錄和計(jì)算(1) 記錄硫酸奎寧的最大發(fā)射波長和最大激發(fā)波長。表1-1 最大發(fā)射波長和最大激發(fā)波長最大發(fā)射波長，nm最大激發(fā)波長，nm(2) 記錄標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)液的熒光強(qiáng)度。表1-2 標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)液的熒光強(qiáng)度樣品號(hào)123456待測(cè)液12濃度，mg/mL熒光強(qiáng)度(3) 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，算出待測(cè)液中硫酸奎寧的濃度。7. 思考題(1) 如何確定熒光物質(zhì)的最大發(fā)射波長和最大激發(fā)波長？(2) 測(cè)定溶液中分子熒光的基本步驟如何？970CRT熒光分光

10、光度計(jì)的使用操作連接好所有電纜和電源線。 開機(jī)步驟：1)開氙燈電源2)開主機(jī)電源3)開打印機(jī)電源4)開計(jì)算機(jī)電源。 關(guān)機(jī)步驟：1)關(guān)計(jì)算機(jī)電源2)關(guān)打印機(jī)電源3)關(guān)主機(jī)電源4)關(guān)氙燈電源。開氙燈電源后氙燈點(diǎn)亮指示應(yīng)有紅光，反之未點(diǎn)亮(見維修保養(yǎng))。 注意：初始化時(shí)請(qǐng)不要對(duì)計(jì)算機(jī)進(jìn)行任何操作。開計(jì)算機(jī)化后儀器自動(dòng)進(jìn)入初始化，初始化大約需要5min時(shí)間。儀器初始化后工作參數(shù)已經(jīng)設(shè)置為：1)EX當(dāng)前波長：350nm。2)EM當(dāng)前波長：397nm。3)EX掃描范圍：200nm800nm。4)EM掃描范圍：200nm800nm。5)EX縫寬：10nm；EM縫寬：10nm。 6)掃描速度：高速。7)靈敏度

11、：第一位(最低擋)。 8)掃描方式：EM掃描。初始化結(jié)束后儀器進(jìn)入操作界面。上行為菜單，下行為快捷操作鍵。1)(文件)；用鼠標(biāo)左鍵單擊本框后，可以選擇：數(shù)據(jù)導(dǎo)出；打印機(jī)設(shè)置(出廠時(shí)已設(shè)置好，如果要更改打印機(jī)，用戶可重新設(shè)置)；退出970CRT工作狀態(tài)(關(guān)機(jī)前退出)的操作。把掃描數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)到Access數(shù)據(jù)厙(dblmdb)2)(定性分析)；用鼠標(biāo)左鍵單擊本框后，可以選擇：圖譜掃描；圖譜分析；圖譜運(yùn)算功能。3)(定量分析)；用鼠標(biāo)左鍵單擊本框后，可以選擇：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；測(cè)定樣品濃度等功能。4)(設(shè)置及測(cè)試)；用鼠標(biāo)左鍵單擊本框后，可以選擇：參數(shù)設(shè)置；S/N比測(cè)定等功能。5)(幫助)；使用中如有什么問

12、題可參閱本項(xiàng)內(nèi)容。6)在進(jìn)行定量或定性分析前首先須選(設(shè)置及測(cè)試)中的參數(shù)設(shè)置，在參數(shù)設(shè)置項(xiàng)中設(shè)置好掃描方式；EX波長和EM波長范圍或時(shí)間掃描的時(shí)間，同時(shí)設(shè)置好靈敏度；掃描速度及EX和EM縫寬。·利用 圖譜掃描快捷鍵進(jìn)入圖譜或時(shí)間掃描。·按 鍵開始掃描，此時(shí)紅燈亮，綠燈滅。注意：在掃描過程中請(qǐng)勿進(jìn)行任何操作，無特殊情況不要終止掃描，直至綠燈亮，這樣才能掃出完整圖譜。·利用濃度測(cè)定快捷鍵進(jìn)入濃度測(cè)量的定量分析。1)首先選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線，并打開。2)放入樣品或背景樣品后，按“測(cè)INT"或“測(cè)本底”鍵即可測(cè)量樣品或背景值。對(duì)應(yīng)顯示樣品INT值和樣品濃度或背景值。3

13、)測(cè)量結(jié)束后必須用打印機(jī)把數(shù)據(jù)打印保存。注意：濃度測(cè)量時(shí)的測(cè)試條件應(yīng)和所打開的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜的測(cè)試條件一致。·利用繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線快捷鍵進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。1)首先測(cè)定本底或打入本底值。 2)輸入已知標(biāo)樣濃度值。 3)按“測(cè)INT”鍵逐一將標(biāo)樣測(cè)定完(19個(gè)標(biāo)樣)。 4)選擇擬合次數(shù)，然后按“擬合”鍵，出標(biāo)準(zhǔn)圖譜。 5)保存標(biāo)準(zhǔn)圖譜(圖譜名由操作者自定義)。 6)退出。·利用圖譜分析快捷鍵進(jìn)入圖譜分析。 1)先打開所需分析圖譜(16個(gè))。 2)數(shù)據(jù)框內(nèi)變動(dòng)數(shù)據(jù)值：左邊第一框?yàn)橛螛?biāo)所示波長位置；后六個(gè)框?yàn)閳D譜對(duì)應(yīng)波長的數(shù)據(jù)。 3)平滑處理只能對(duì)其中被選定的一個(gè)圖譜進(jìn)行。 4)時(shí)間掃描

14、只能打開一個(gè)圖譜，此時(shí)數(shù)據(jù)框的左邊第一框?yàn)閽呙钑r(shí)間， 第二框?yàn)檫@時(shí)INT值，其他框數(shù)據(jù)無效。·利用圖譜運(yùn)算快捷鍵進(jìn)入圖譜運(yùn)算。1)按鍵選擇運(yùn)算圖譜，上項(xiàng)選擇被加；減；乘；除的圖譜，下項(xiàng)選擇需要減去或是相加的圖譜，以及乘數(shù)和除數(shù)(兩個(gè)圖譜不能乘除，非同類圖譜不能進(jìn)行運(yùn)算)。2)保存運(yùn)算結(jié)果。3)退出。·利用快捷鍵，使EX和EM走到所需測(cè)量的波長位置(EX和EM不能同時(shí)走到0nm位置)。·利用快捷鍵，進(jìn)行手動(dòng)清零。利用 快捷鍵，進(jìn)行手動(dòng)清零復(fù)位(此功能只有在進(jìn)行手動(dòng)清零后才有效)。注意：以上兩項(xiàng)操作在測(cè)量時(shí)可不必進(jìn)行，因?yàn)閮x器有自動(dòng)清零功能。 ·利用S/N快

15、捷鍵進(jìn)行信噪比和穩(wěn)定性測(cè)定。1)此時(shí)儀器應(yīng)設(shè)置為： EX縫寬10nm。 EM縫寬10nm。 掃描速度慢。 靈敏度6。 其他都不必設(shè)置。2)打印測(cè)試報(bào)告。3)退出。實(shí)驗(yàn)二 紅外光譜圖測(cè)量與解析1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1) 掌握常規(guī)樣品的制樣方法。(2) 了解紅外光譜儀的工作原理。(3) 了解鑒定未知物的一般過程。2. 實(shí)驗(yàn)原理不同的樣品狀態(tài)(固體、液體、氣體以及黏稠樣品)需要相應(yīng)的制樣方法。制樣方法的選擇、制樣技術(shù)的好壞直接影響譜帶的頻率、數(shù)目和強(qiáng)度。(1) 液膜法：樣品的沸點(diǎn)高于100可采用液膜法制樣。黏稠的樣品也采用液膜法。這種方法較簡(jiǎn)單，只要在兩個(gè)鹽片之間滴加l2滴未知樣品，使之形成一個(gè)薄的液膜。

16、流動(dòng)性較大的樣品，可選擇不同厚度的墊片來調(diào)節(jié)液膜的厚度。(2) 液體池法：樣品的沸點(diǎn)低于100可采用液體池法。選擇不同的墊片尺寸可調(diào)節(jié)液池的厚度，對(duì)強(qiáng)吸收的樣品用溶劑稀釋后再測(cè)定。(3) 糊狀法：這種方法是將干燥的粉末研細(xì)，然后加入幾滴懸浮劑在瑪瑙研缽中研磨成均勻的糊狀，涂在鹽片上測(cè)定。常用的懸浮劑有石蠟油和氟化煤油。糊狀法可以克服壓片法易吸水的缺點(diǎn)。(4) 壓片法：粉末樣品常采用壓片法。將研細(xì)的粉末分散在固體介質(zhì)中，并用壓片裝置壓成透明的薄片后測(cè)定。固體分散介質(zhì)一般是金屬鹵化物(如KBr)，使用時(shí)要將其充分研細(xì)，顆粒直徑最好小于2mm(因?yàn)橹屑t外區(qū)的波長是從2.5mm開始的)。(5) 薄膜法

17、：對(duì)于熔點(diǎn)低、熔融時(shí)不發(fā)生分解、升華和其他化學(xué)變化的物質(zhì)，可采用加熱熔融的方法壓制成薄膜后測(cè)定。在相同的制樣和測(cè)定條件下，被分析的樣品和標(biāo)準(zhǔn)純化合物的紅外光譜圖，若吸收峰的位置、吸收峰的數(shù)目和峰的相對(duì)強(qiáng)度完全一致，則可認(rèn)為這兩者是同一種化合物。3. 儀器與試劑儀器：FTIR光譜儀；壓片機(jī)、模具和樣品架；瑪瑙研缽、不銹鋼藥匙、鑷子及紅外燈。試劑：KBr粉末、苯甲酸。4. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟先打開紅外光譜儀電源(變壓器電源)，再打開計(jì)算機(jī)電源，在計(jì)算機(jī)窗口點(diǎn)擊EZOMNIC快捷鍵，打開紅外光譜儀控制軟件。在菜單上依次點(diǎn)擊采集實(shí)驗(yàn)設(shè)置采集按以下設(shè)置：掃描次數(shù)：32；分辨率：4；Y軸格式：%Transmi

18、ttance；采集窗口中，Y軸單位固定：“”； Min0.00；Max100。確定。壓片法：取23mg干燥的苯甲酸固體樣品與約200300mg干燥的KBr粉末在瑪瑙研缽中混勻，充分研磨后，用不銹鋼藥匙取7090mg壓片，壓片機(jī)壓力約為20MPa，取出薄片并放入樣品夾具中。在紅外軟件菜單上依次點(diǎn)擊采集采集樣品，輸入學(xué)號(hào)后三位作為樣品名稱，確定后彈出“準(zhǔn)備背景采集”對(duì)話框，點(diǎn)擊“確定”，進(jìn)行背景掃描，背景掃描完畢，彈出“準(zhǔn)備樣品采集”對(duì)話框，推開樣品室上蓋，將樣品架放入樣品室內(nèi)樣品固定座，拉下樣品室蓋子，點(diǎn)擊“確定”，進(jìn)行樣品紅外光譜的采集，采集結(jié)束后，彈出“數(shù)據(jù)采集完成”窗口，點(diǎn)擊“是”，樣品采

19、集結(jié)束。取出樣品。以TIF格式保存紅外圖譜，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后指認(rèn)主要的紅外吸收峰對(duì)應(yīng)的基團(tuán)和振動(dòng)類型。5. 數(shù)據(jù)記錄與解析請(qǐng)解析苯甲酸的紅外光譜圖，將結(jié)果記錄于表2-1中。表2-1 苯甲酸紅外吸收光譜的解析波數(shù), cm-1官能團(tuán)振動(dòng)類型6. 思考題：(1) 采集背景信號(hào)的目的是什么？(2) 進(jìn)行紅外光譜分析時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？實(shí)驗(yàn)三 食品中銅的火焰原子吸收分光光度法測(cè)定1. 原理樣品經(jīng)消化后，導(dǎo)入原子吸收分光光度計(jì)中，經(jīng)火焰原子化后，吸收波長324.8nm的共振線，其吸收量與銅含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2. 試劑要求使用去離子水，酸為優(yōu)級(jí)純。(1) 濃硫酸、濃硝酸(2) 0.5mol/L硝酸：量

20、取32mL硝酸，加入適量的水中，用水稀釋并定容至1000mL。(3) 銅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：精確稱取1.000g金屬銅(純度大于99.99%)，加適量硝酸(1+1)，使之溶解，移入1000mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，儲(chǔ)存于聚乙烯瓶?jī)?nèi)，冰箱內(nèi)保存。此溶液中銅濃度為1mg/mL。(4) 銅標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取銅標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00mL，置于100mL的容量瓶中，用0.5mol/L硝酸溶液稀釋至刻度，該溶液每mL相當(dāng)于10mg銅。3. 儀器(1) 原子吸收分光光度計(jì)(2) 消化爐(3) 馬弗爐(4) 玻璃儀器：所用玻璃儀器使用前必須用20的硝酸浸泡24h以上，然后分別用水和去離子水沖洗干凈后晾干。4. 操

21、作步驟以下濕法和干法兩種消化法可任意選擇一種，也可都做后，進(jìn)行測(cè)量結(jié)果比較。每次消化都要求平行二到三份。(1) 樣品濕法消化精確稱取均勻樣品約0.50g于30mL凱氏瓶中，加入濃硫酸5mL、濃硝酸10mL，放入幾粒玻璃珠，浸泡片刻，置于井式消化爐中，先于350加熱消化，至棕色濃煙消失，冷卻后觀察消化液顏色，若消化液呈黑色或棕黃色，則向凱氏燒瓶中滴加幾滴硝酸，繼續(xù)消化，直至冷卻后呈無色為止。加2毫升去離子水，加熱至400以除去多余的硝酸。待凱氏燒瓶中的液體接近45ml時(shí)，取下冷卻。將消化液移入50mL容量瓶中，并以水稀釋至刻度備用。此即為樣品消化液。同時(shí)做試劑空白。(2) 樣品干法灰化稱取制備好

22、的均勻樣品1.02.0g置于50mL瓷坩堝中，加5mL硝酸，放置0.5h后，于電爐上小火蒸干，繼續(xù)炭化至無煙后移入馬弗爐中，500灰化約1h后取出，放冷后再加入1mL硝酸濕潤灰分并小火蒸干。再移入馬弗爐500灰化約0.5h冷卻后取出，加0.5mol/L的硝酸，溶解殘?jiān)⒁迫?0mL的容量瓶中，再用0.5mol/L的硝酸反復(fù)洗滌坩堝，洗滌液并入容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻備用。同時(shí)做試劑空白。(3) 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線吸取0.00mL，0.50mL，1.00mL，2.00mL，3.00mL，4.00mL，5.00mL銅標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于50mL容量瓶中，以0.5mol/L稀硝酸稀釋至刻度，混勻，此標(biāo)

23、準(zhǔn)系列含銅分別為0.00mg/mL，0.10mg/mL，0.20mg/mL，0.40mg/mL，0.60mg/mL，0.80mg/mL，1.00mg/mL。將該系列標(biāo)準(zhǔn)溶液記為17號(hào)標(biāo)樣。(4) 儀器條件燃燒器位置設(shè)定為-2。測(cè)定波長324.8nm，燈電流、狹縫、空氣乙炔流量及燈頭高度均按儀器說明調(diào)至最佳狀態(tài)。(5) 樣品測(cè)定將銅標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑空白液和樣品消化液分別導(dǎo)入火焰原子化器進(jìn)行測(cè)定。記錄其對(duì)應(yīng)的吸光度值，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。樣品消化液平行測(cè)定兩次。5. 結(jié)果記錄與計(jì)算(1) 將吸光度數(shù)據(jù)記錄于表3-1中。表3-1 標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)液的吸光度樣品號(hào)1234567樣品消化液12濃度，mg/m

24、L吸光度(2) 根據(jù)表1中的數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出樣品消化液中的銅濃度。(3) 根據(jù)下面的公式計(jì)算樣品中的銅含量。式中 x樣品中銅的含量，mg/kg； C測(cè)定用樣品液中銅的濃度，mg/mL，可由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得； V樣品消化液的總體積，mL；50mLm樣品質(zhì)量(g)。0.50g6. 思考題(1) 原子吸收光譜的基本原理是什么？(2) 原子吸收光譜法測(cè)定食品中金屬元素含量的基本步驟有哪些？TAS986原子吸收分光光度計(jì)維護(hù)手冊(cè)1、目的為了更好地維護(hù)保養(yǎng)TAS986原子吸收分光光度計(jì)，保證儀器所測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性，保護(hù)實(shí)驗(yàn)操作人員的安全，延長儀器的使用壽命，制定本維護(hù)手冊(cè)。新的實(shí)驗(yàn)操作人員在使用本儀器以前

25、應(yīng)認(rèn)真閱讀本手冊(cè)。2、原子吸收儀器室環(huán)境要求1）儀器室不應(yīng)設(shè)置在附近有強(qiáng)電磁場(chǎng)和強(qiáng)熱輻射流的地方。2）儀器室附近不能有產(chǎn)生劇烈振動(dòng)的設(shè)備。3）原子吸收儀器不能和發(fā)射光譜儀器使用同一個(gè)房間。4）儀器室必須和化學(xué)處理（前處理）室分開，絕對(duì)不能共用一室。5）儀器室光線應(yīng)該柔和，不能有日光直射。6）儀器室不要在有煙塵、污濁氣流及水蒸氣的地方。7）儀器室空氣濕度應(yīng)小于70，室內(nèi)溫室應(yīng)保持在1530內(nèi)，低于15嚴(yán)禁使用儀器。8）儀器室不能使用水泥地板，裝有石墨爐的型號(hào)不能使用全脫落塑料地板。9）搞好實(shí)驗(yàn)室清潔工作，保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的干凈。4、氣源的要求1）放置氣瓶室與儀器室分開，室溫必須低于40，避免陽光直射

26、，應(yīng)保證良好的通風(fēng)換氣。2）可燃性氣瓶與明火距離應(yīng)不小于10m；有困難時(shí)，應(yīng)有可靠的隔熱防護(hù)措施，但不得小于5m。3）乙炔鋼瓶必須豎立使用，遠(yuǎn)離火源，避免曝曬，嚴(yán)禁敲擊、碰撞，應(yīng)可靠地固定在支架上，防止滑倒，新?lián)Q上的氣瓶必須豎立靜止兩小時(shí)以后，方可使用，且每個(gè)鋼瓶最多只供一臺(tái)儀器使用。4）乙炔氣路管接口嚴(yán)禁使用銅材質(zhì)，不要讓乙炔氣直接與銅材、銀材、液態(tài)汞、氯氣或油脂接觸，否則可能引起爆炸。5）開關(guān)高壓氣瓶瓶閥時(shí)，應(yīng)用手或?qū)ｉT扳手，不得隨便使用鑿子、鉗子等工具硬扳，以防止損壞瓶閥。6）高壓氣瓶上選用的減壓閥要專用，安裝時(shí)螺扣要上緊。7）開啟乙炔鋼瓶時(shí)，操作者須站在氣瓶出氣口的側(cè)面，氣瓶應(yīng)直立，然

27、后緩緩旋開瓶閥。氣體必須經(jīng)減壓閥減壓，不得直接放氣。打開乙炔鋼瓶時(shí)，鋼瓶上的氣閥開關(guān)，只需逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)一下就可以了，不要過多旋轉(zhuǎn)，嚴(yán)禁氣閥旋轉(zhuǎn)超過二圈。乙炔減壓閥調(diào)節(jié)壓力時(shí)，乙炔氣出口壓力應(yīng)保持 0.1Mpa以下，一般實(shí)驗(yàn)時(shí)乙炔的壓力在0.05Mpa。8）經(jīng)常檢查是否有漏氣：關(guān)閉減壓閥，打開瓶閥，觀察氣壓表有沒有變化，如果漏氣，氣壓表會(huì)降低。9）使用乙炔氣之前，開少許壓力檢查是否有丙酮噴出，如果有，將該氣退回供應(yīng)商。乙炔器的純度應(yīng)為99.5%以上。10）氣瓶?jī)?nèi)氣體不得全部用盡，乙炔鋼瓶上的總壓力降到0.3Mpa時(shí)，就必須更換氣瓶，否則瓶?jī)?nèi)丙酮全溢出，容易引出事故；11)氣瓶必須定期進(jìn)行技術(shù)檢驗(yàn)。

28、充裝一般氣體的氣瓶，每3年檢驗(yàn)1次；充裝腐蝕性氣體的氣瓶每?jī)赡隀z驗(yàn)1次。氣瓶在使用過程中，如發(fā)現(xiàn)有嚴(yán)重腐蝕或其他嚴(yán)重?fù)p傷應(yīng)提前進(jìn)行檢驗(yàn)。盛裝劇毒或高毒介質(zhì)的氣瓶，在定期技術(shù)檢驗(yàn)同時(shí)，還應(yīng)進(jìn)行氣密性試驗(yàn)。12）不要采用氧氣作為助燃?xì)?，否則可能引起爆炸。13）空壓機(jī)必須具備除油和除水功能，實(shí)驗(yàn)時(shí)空壓機(jī)輸出壓力在0.25-0.28Mpa。 14）空氣壓縮機(jī)開動(dòng)1到2小時(shí)后要關(guān)閉儀器，空壓機(jī)放水一次。4、儀器的保養(yǎng)1）在陰雨天氣，儀器要開機(jī)二個(gè)小時(shí)，保持儀器內(nèi)部的干燥。2）儀器因經(jīng)常保持開機(jī)狀態(tài)，即使長期沒有檢測(cè)業(yè)務(wù)，亦必須至少每星期要保證開機(jī)一次（每次開機(jī)二個(gè)小時(shí)）。3）空芯陰極燈，要保證4個(gè)月內(nèi)，

29、點(diǎn)燃二個(gè)小時(shí)以上。4）實(shí)驗(yàn)時(shí)先打開排風(fēng)扇。5）實(shí)驗(yàn)前，要檢查各連接處是否有漏氣。6）儀器點(diǎn)火前，必須校正燃燒器的燃燒縫與空芯陰極燈光點(diǎn)保持三點(diǎn)一條線。7）點(diǎn)火時(shí)，必須保證先開空壓機(jī)，后打開乙炔鋼瓶。熄火時(shí)，正好相反，先關(guān)乙炔，待火滅后，繼續(xù)吸噴蒸餾水三分鐘沖洗燃燒頭，然后關(guān)閉空壓機(jī)。8）實(shí)驗(yàn)時(shí)，儀器點(diǎn)火后，要預(yù)熱15至20分鐘才能進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn)；9）火焰燃燒時(shí)一定要有人監(jiān)管。10）實(shí)驗(yàn)后，廢液缸應(yīng)及時(shí)清理。11）燃燒頭的維護(hù)（1）根據(jù)乙炔流量大小，調(diào)整好適當(dāng)?shù)幕鹧娓叨?。?）在接觸燃燒頭前，請(qǐng)注意燃燒頭可能很燙，請(qǐng)帶上防護(hù)手套。燃燒頭上清晰地標(biāo)有該燃燒頭所適合的燃?xì)?助燃?xì)忸愋?，要正確使用。（3

30、）為減少燃燒頭堵塞，燃燒頭必須要清理，因?yàn)闃悠贩治鰰r(shí)會(huì)在燃燒頭口子上產(chǎn)生鹽類沉積物，如果不清除會(huì)影響分析。一般用硬紙片清理燃燒頭，最好不要用金屬片，小心劃傷燃燒頭。（4）清潔燃燒頭之前一定要將火焰熄滅，不要試圖在火焰燃燒時(shí)清潔燃燒頭。（5）千萬不要拆改燃燒頭，使使其結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。12）霧化器的維護(hù)（1）不正確組裝霧化器可能會(huì)引起爆炸、火災(zāi)，不要試圖在火焰燃燒時(shí)拆卸霧化器，拆卸前一定要熄滅火焰。 （2）霧化器是由粗細(xì)不一的玻璃管組成，噴出口很細(xì)，比較容易受堵，測(cè)試液體必須沒有累浮物顆粒。（3）樣品前處理必須完全，嚴(yán)禁使用含有顆粒狀物體的液體，測(cè)試液體必須純凈或經(jīng)過過濾，這樣不損傷霧化器。（4）霧

31、化器發(fā)生堵塞后，只可用空壓機(jī)來吹洗，絕對(duì)不能用細(xì)金屬來捅。（5）每天工作結(jié)束后，可用510%的酸液沖洗三分鐘，然后再用蒸餾水來沖洗干凈，既能排盡霧化室內(nèi)的殘液，又有防止霧化器堵塞的作用。13）燃燒頭兩邊透鏡的清洗由于乙炔燃燒時(shí)會(huì)有一定的煙塵，會(huì)使透鏡表面變得模糊，所以要定期清洗透鏡。用乙醚和乙醇混合液（1：1），用棉花棒來清洗透鏡。清洗時(shí)儀器不能開動(dòng)。5、維護(hù)記錄對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)后，及時(shí)要作好維護(hù)記錄。6、儀器故障處理1）實(shí)驗(yàn)時(shí)儀器遇到故障，應(yīng)及時(shí)關(guān)閉乙炔氣體，關(guān)閉儀器。2）及時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任。TAS-986操作規(guī)程一、 開機(jī)依次打開打印機(jī)，顯示器，計(jì)算機(jī)電源開關(guān)，等windows完全啟動(dòng)后，打

32、開原子吸收主機(jī)電源。二、儀器聯(lián)機(jī)初始化.1：在計(jì)算機(jī)桌面上雙擊 AAwin圖標(biāo)，出現(xiàn)窗口，選擇聯(lián)機(jī)方式，點(diǎn)擊確定,出現(xiàn)儀器初始化界面。等待35分鐘(聯(lián)機(jī)初始化過程)，等初始化各項(xiàng)出現(xiàn)確定后，將彈出選擇元素?zé)艉皖A(yù)熱燈窗口。2：依照用戶需要選擇工作燈和預(yù)熱燈(雙擊元素?zé)粑恢?可更改所在燈位置上的元素符號(hào),注意軟件設(shè)定與原吸主機(jī)硬件位置保持一致)。點(diǎn)擊下一步，出現(xiàn)設(shè)置元素測(cè)量參數(shù)窗口。3：可以根據(jù)需要更改光譜帶寬，燃?xì)饬髁?，燃燒器高度等參?shù)，（一般工作燈電流，預(yù)熱燈電流和負(fù)高壓以及燃燒器位置不用更改。）設(shè)置完成后點(diǎn)擊下一步。出現(xiàn)設(shè)置波長窗口。4：在默認(rèn)的波長列表中選擇波長，點(diǎn)擊尋峰。將彈出尋峰窗口，

33、（根據(jù)所選元素?zé)粼夭煌?，整個(gè)過程需要時(shí)間不同，一般在13分鐘）等尋峰過程完成后，點(diǎn)擊關(guān)閉。點(diǎn)擊下一步，點(diǎn)擊完成三、設(shè)置樣品點(diǎn)擊 樣品，彈出樣品設(shè)置向?qū)Т翱冢?：選擇校正方法（一般為標(biāo)準(zhǔn)曲線法），曲線方程（一般為一次方程），和濃度單位，輸入樣品名稱和起始編號(hào)，點(diǎn)擊下一步。2：輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度和個(gè)數(shù)（可依照提示增加和減少標(biāo)準(zhǔn)樣品的數(shù)量），點(diǎn)擊下一步。3：可以選擇需要或不需要空白校正和靈敏度校正（一般為不要）然后點(diǎn)擊下一步。4：輸入待測(cè)樣品數(shù)量，名稱，起始編號(hào)，以及相應(yīng)的稀釋倍數(shù)等信息，點(diǎn)擊完成。四、設(shè)置參數(shù) 點(diǎn)擊 參數(shù)，彈出測(cè)量參數(shù)窗口。 1：常規(guī)：輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品，空白樣品，未知樣品等的測(cè)量次數(shù)

34、（測(cè)幾次計(jì)算出平均值）選擇測(cè)量方式（手動(dòng)或自動(dòng)，一般為自動(dòng)），輸入間隔時(shí)間和采樣延時(shí)（一般均為1秒）石墨爐沒有測(cè)量方式和間隔時(shí)間以及采樣延時(shí)的設(shè)置。 2：顯示：設(shè)置吸光值最小值和最大值一般為（00.7）以及刷新時(shí)間（一般300秒） 3：信號(hào)處理：設(shè)置計(jì)算方式（一般火焰吸收為連續(xù)或峰高，石墨爐多用峰面積），以及積分時(shí)間和濾波系數(shù)。（火焰積分時(shí)間一般為1濾波系數(shù)為0.3-0.8） 點(diǎn)擊確定，退出參數(shù)設(shè)置窗口五、火焰吸收的光路調(diào)整火焰吸收測(cè)量方法下：點(diǎn)擊儀器下的燃燒器參數(shù)，彈出燃燒器參數(shù)設(shè)置窗口，輸入燃?xì)饬髁亢透叨?，點(diǎn)擊執(zhí)行，看燃燒頭是否在光路的正下方，如果有偏離，更改位置中相應(yīng)的數(shù)字，點(diǎn)擊執(zhí)行，可

35、以反復(fù)調(diào)節(jié)，直到燃燒頭和光路平行并位于光路正下方。（如不平行，可以通過用手調(diào)節(jié)燃燒頭角度來完成）點(diǎn)擊確定退出燃燒器參數(shù)設(shè)置窗口。六、測(cè)量 1：依次打開空氣壓縮機(jī)的風(fēng)機(jī)開關(guān)，工作開關(guān)，調(diào)節(jié)壓力調(diào)節(jié)閥，使得空氣壓力穩(wěn)定在 0.20.25MPa后，打開乙炔鋼瓶主閥，調(diào)節(jié)出口壓力在0.050.06MPa（點(diǎn)火前后出口壓力可能有變化，這里的出口壓力在0.050.06MPa指點(diǎn)火后的壓力）檢查水封，打開風(fēng)機(jī)，點(diǎn)擊 點(diǎn)火，等火焰穩(wěn)定后首先吸噴純水。以防止燃燒頭結(jié)鹽。 2：點(diǎn)擊測(cè)量下的測(cè)量,開始(或 )，吸噴空白溶液校零，依次吸噴標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知樣品，每測(cè)量一個(gè)樣品，都必須點(diǎn)擊屏幕右上角對(duì)話框的開始，進(jìn)行測(cè)量。

36、測(cè)量完成后，點(diǎn)擊終止，完成測(cè)量，退出測(cè)量窗口。擋住火焰探頭熄火（如果不再需要繼續(xù)測(cè)量其他元素，請(qǐng)關(guān)閉乙炔鋼瓶主閥，讓火焰自動(dòng)熄滅），點(diǎn)擊確定，退出熄火提示窗口，吸噴純水1分鐘，清洗燃燒頭，防止燃燒頭結(jié)鹽。 3：點(diǎn)擊視圖下的校正曲線，查看曲線的相關(guān)系數(shù)，決定測(cè)量數(shù)據(jù)的可靠性，點(diǎn)擊 進(jìn)行保存或 打印處理。 4：點(diǎn)擊儀器下的測(cè)量方法，可以在火焰吸收，火焰發(fā)射，氫化物和石墨爐等測(cè)量方法間切換 5：其他未列舉的軟件使用技巧等信息，您可以在軟件幫助菜單下獲得。七、關(guān)機(jī)過程依次關(guān)閉乙炔鋼瓶主閥，空壓機(jī)工作開關(guān)，按放水閥，排空壓縮機(jī)中的冷凝水，關(guān)閉風(fēng)機(jī)開關(guān)，AAwin軟件，原子吸收主機(jī)電源，退出計(jì)算機(jī)Wind

37、ow操作程序，關(guān)閉打印機(jī)，顯示器和計(jì)算機(jī)電源。蓋上儀器罩，檢查乙炔，氬氣，冷卻水，是否已經(jīng)關(guān)閉，清理實(shí)驗(yàn)室。八、注意事項(xiàng) 1：如果開機(jī)順序不對(duì)，可能出現(xiàn)COM口被占用，無法聯(lián)機(jī)的現(xiàn)象，這時(shí)需要關(guān)閉原子吸收主機(jī)電源開關(guān)，重新啟動(dòng)計(jì)算機(jī)，等待Windows完全啟動(dòng)后再開啟原子吸收主機(jī)電源開關(guān)，將聯(lián)機(jī)正常。2：開機(jī)初始化時(shí)，如果在工作燈位置沒有元素?zé)?，或原子化器擋光，可能造成初始化過程中的波長電機(jī)初始化失敗。 工作中：如果工作燈位置上元素?zé)粼O(shè)置的元素和實(shí)際元素?zé)粼夭煌?，或原子化器擋光，將造成尋峰失敗，出現(xiàn)燈能量不足，負(fù)高壓超上限的提示。3：點(diǎn)火前后，乙炔鋼瓶壓力可能有變化，注意調(diào)節(jié)出口壓力。當(dāng)燃?xì)饬髁啃∮?200時(shí)可能點(diǎn)火失敗或吸噴溶液后自動(dòng)熄火，這時(shí)需要調(diào)高燃?xì)饬髁康?500以上，再次點(diǎn)火即可。特別注意：1、乙炔氣瓶的總表壓力低于0.4MPa就必須更換新的氣瓶，否則易損壞儀器，導(dǎo)致不良后果；要求乙炔氣必須達(dá)到99.9%以上，如