生物安全實驗室病原微生物實驗活動危險度評估.

1、生物安全實驗室病原微生物實驗活動危險度評估馬智龍?zhí)┲菔屑膊☆A防控制中心病原微生物危險程度分類主要依據(jù)： 1、病原微生物的致病性； 致病性越強，導致的疾病越嚴重，等級越高 2、微生物的傳播方式和宿主范圍 人群已有免疫水平、密度和流動、媒界、環(huán)境衛(wèi)生水平 3、當?shù)厮邆涞挠行ьA防措施 疫苗接種、衛(wèi)生措施、傳染源和媒界的控制 4、地所具備的有效治療措施國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較國內(nèi)外病原微生物危害程度分類比較： 1、病原微生物實驗室生物安全管理條例 2、實驗室生物安全通用要求GB19489-2008 3、 WHO實驗室生物安全手冊病原微生物實驗室生物安全管理條例實驗室生物安全通用要求GB194

2、89-2008WHO實驗室生物安全手冊四類：在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。三類：能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播鳳險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。二類：能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。級：（低個體危害、低群體危害）不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。級（中等個體危害，有限群體危害）能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原微生物。實驗室感染不導致嚴重疾病、具備

3、有效治療和預防措施，并且傳播風險有限。級（高個體危害，低群體危害）能引起人類或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的閏原微生物。級：（無或極低的個體和群體危險）不太可能引起人或動物致病的微生物。級（個體危害中等，群體危害低）病原微生物能夠?qū)θ嘶騽游镏虏。珜嶒炇夜ぷ魅藛T、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導致嚴重危害。實驗室暴露也許會引起嚴重感染、但對感染有有效的預防和治療措施，并且疾病傳播的風險有限級（個體危害高，群體危害低）病原微生物通常能引起人或動物的嚴重疾病，但一般不會發(fā)生感染個體向其它個體的傳播，并且對感染有有效的預防和治療措施。病

4、原微生物實驗室生物安全管理條例實驗室生物安全通用要求GB19489-2008WHO實驗室生物安全手冊一類：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。級（高個體危害，高群體危害）能引起人類或動物非常嚴重疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或偶然接觸在人與人，或動物與人，或動物與動物間傳播的病原微生物。級（個體和群體危害均高）病原微生物通常能引起人或動物的嚴重疾病，并且很容易發(fā)生個體之間的直接或間接傳播，對感染一般沒有有效的預防和治療措施。人間傳染的病原微生物名錄頒布時間：2006年1月11日核心內(nèi)容： 對于常見病原微生物（病毒、細菌、衣原體、支原體、立克次

5、體、螺旋體和真菌）的常見實驗操作的生物安全實驗室等級提出了明確要求，以指導各單位涉及人間傳染的病原微生物的實驗活動。高致病性病原微生物： 第一、二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。 主要的病原微生物包括： 1、中華人民共和國傳染病防治法規(guī)定甲、乙類、丙類傳染病的病原微生物。 2、國內(nèi)外常見的傳染病病原 3、新發(fā)現(xiàn)的病原微生物 4、國際上已宣布消滅的傳染病病原 其中：病毒160類、細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體155類，真菌59類，朊病毒（prion)6種有關病毒的說明 所涉及的病毒的操作級別主要指野生型病原微生物，重組體另加說明 一、實驗室活動的劃分： 1、病毒培養(yǎng)： 2

6、、動物感染實驗： 3、未經(jīng)感染的感染性材料的操作 4、滅活材料的操作 5、無感染性材料的操作 有關病毒的說明二、運輸包裝分類： 依據(jù)：國際民航組織文件Doc9284危險品航空安全運輸技術細則分為A、B二類， A 類 B類 聯(lián)合國編號 UN2814（動物UN2900） UN3373 注：1、對于A類感染性物質(zhì)，若表中未注明“僅限于病毒培養(yǎng)物”，則 包括涉及病毒的所有材料；對于注明“僅限于病毒培養(yǎng)物”的A 類感染性物質(zhì)，則病毒培養(yǎng)物按UN2814包裝，其他標本按 UN3373的要求包裝和空運。 2、凡標明B類的病毒和相關樣本均按UN3373要求包裝和空運有關病毒的說明 三、有關事項的說明： 1、一

7、般情況下對現(xiàn)場和臨床的未知樣本檢測應在二級以上生物安全防護級別的實驗室進行，若判定為疑似高致病性病原體，應在相應生物安全級別的實驗室開展工作。 2、名錄中未列出的病毒和實驗活動，由各單位生物安全委員會負責危害程度評估，確定相應的生物安全防護級別。名錄已列出的病毒，在實施活動中根據(jù)具體情況進行再評估，提高防護水平和級別。 3、Prion為特殊病原體，對其單獨列出。 4、人類病毒的重組體的使用。 5、脊髓灰質(zhì)炎病毒： 有關細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體、真菌的說明 一、實驗室活動的劃分： 1、大量活菌操作： 2、動物感染實驗： 3、樣本檢測： 4、非感染性材料的實驗 二、運輸包裝

8、： A類：特指危害程度二類病原菌的菌株或活菌培養(yǎng)物，按 UN2814的要求包裝和空運； B類：其它危害程度二類病原菌的樣本和三類病原菌及相關樣本；有關細菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次氏體、螺旋體、真菌的說明n三、其它說明： 1、一般情況下對現(xiàn)場和臨床的未知樣本檢測應在二級以上生物安防 護級別的實驗室進行，但此項工作僅限于對樣本中病原菌的初步分離鑒 定，一旦病原菌初步明確，應按病原菌的危害類別將轉(zhuǎn)移至相應級別的 生物安全實驗室開展工作。 2、霍亂屬甲類傳染病，霍亂弧菌流行株按第二類管理，其菌株或活菌 培養(yǎng)物，運輸包裝分類屬A類。因該類病原不經(jīng)過氣溶膠傳播，涉及大量活菌培養(yǎng)等工作可在BSL-2

9、實驗室進行；非流行株歸為三類。 3、肉毒梭菌可產(chǎn)生肉毒素，肉毒毒素是已知毒性最高的細菌性毒素屬于神經(jīng)毒素。名錄中將肉毒梭菌菌株歸為第二類，運輸時按A類標準包裝。 4、名錄未列之的病原菌和實驗活動，由各單位生物安全委員會負責危害程度評估，確定相應的生物安全防護級別。 5、名錄中未列國家正式批準的生物制品、疫苗生產(chǎn)用減毒、弱毒菌（毒）株。該類菌（毒）株分類地位另行規(guī)定。病原微生物危害評估的要素一、病原微生物危害評估的要素： 主要依據(jù)： 病原微生物背景資料 試驗活動可能產(chǎn)生的危害 1、病原微生物背景資料： 1）病原微生物的致病性和感染數(shù)量 2）暴露的潛在后果 A：隱性感染或不顯性感染或亞臨床感染 B

10、：顯性感染或臨床傳染病 C：是否出現(xiàn)個體最嚴重的結(jié)局，發(fā)生嚴重型臨床傳染病死 亡。 病原微生物危害評估的要素 3）自然傳播途經(jīng)。 4）病原微生物在環(huán)境中的穩(wěn)定性。 5）病原微生物的宿主。 6）從動物研究和實驗室感染報告或臨床報告中得到的信 息。 7）當?shù)厥欠衲苓M行有效的預防和治療 2、擬從事實驗活動的危險分析： 1）操作所致的非自然途經(jīng)感染 2）病原微生物的種類、來源 3）操作病原微生物的濃度 4）實驗操作 5）涉及動物的病原微生物實驗室 病原微生物危害評估的要素 6）工作人員的素質(zhì)。 3、評估結(jié)論應考慮的要點： A：根據(jù)實驗的內(nèi)容與對各實驗環(huán)節(jié)的分析，明確危 害的來源和危害因素 B：進行固有

11、風險的評估 C：進行殘余風險評估 D：確定殘余風險 4、針對不同類型的病原微生物實驗活動危害評估的原則 病原微生物危害評估的要素 1）含已知的病原微生物的物質(zhì) 著重考慮收集資料為重點 2）含未知病原微生物的物質(zhì) 重點：A：該含未知病原微生物的物質(zhì)為什么為可疑樣 本 B：對現(xiàn)有的流行病資料進行分析 C：可疑的傳播途經(jīng)是什么 D：根據(jù)發(fā)病率和死亡率資料探討其危害程度 E：可參考病人的臨床資料 病原微生物實驗室活動危害的再評估 1、生物安全實驗室正式啟用前 2、收集的資料表明所從事的病原微生物 的致病性、毒力或傳染方式發(fā)生變化 3、增加新的項目 4、實驗活動中分離到原評估中未涉及的 高致病性病原微生

12、物 5、發(fā)現(xiàn)隱患或存在生物安全的問題微生物危害評估的用途 1、確定生物安全防護水平 2、根據(jù)評估的結(jié)果，制定相關的操作程 序和管理規(guī)程 3、掌握相關的微生物的背景知識 4、評價病原微生物實驗室安全狀況的依 據(jù)麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告版號：第版號：第1版版 文件編號：文件編號： 1.1.目的目的規(guī)范實驗操作技術，完善實驗室管理，確保實驗室生物安全。規(guī)范實驗操作技術，完善實驗室管理，確保實驗室生物安全。2.2. 適用范圍適用范圍 本文件適用于本文件適用于XXXX疾病預防控制中心微生物檢驗科。疾病預防控制中心微生物檢驗科。3.3.職責職責3.1 3.1 檢測人員：檢測人員：按照本文件

13、的要求開展相關工作。按照本文件的要求開展相關工作。3.2 3.2 質(zhì)量監(jiān)督員：質(zhì)量監(jiān)督員：按照本文件的要求對檢測人員進行監(jiān)督。按照本文件的要求對檢測人員進行監(jiān)督。3.3 3.3 科室負責人：科室負責人：按照本文件的要求對科室進行管理。按照本文件的要求對科室進行管理。 麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.4.程序程序4.14.1 危害程度分類等級危害程度分類等級4.1.14.1.1 麻疹是兒童最常見的急性呼吸道傳染病。麻疹是兒童最常見的急性呼吸道傳染病。通過飛沫直接傳播，人是自然宿主，人群普遍通過飛沫直接傳播，人是自然宿主，人群普遍易感。根據(jù)易感。根據(jù)中華人民共和國傳染病防治法中華人民共

14、和國傳染病防治法，屬丙類傳染病。屬丙類傳染病。4.1.24.1.2 根據(jù)根據(jù)20062006年衛(wèi)生部年衛(wèi)生部人間傳染的病原微生人間傳染的病原微生物名錄物名錄，麻疹病毒屬于第三類病原微生物。，麻疹病毒屬于第三類病原微生物。運輸包裝：運輸包裝：B B類，類，UNUN編號：編號：UN3373UN3373。 A類感染性物質(zhì)類感染性物質(zhì)（Infectious substances, Category A）nUN 2814 恰當?shù)倪\輸名稱是恰當?shù)倪\輸名稱是 “感染性物質(zhì)，感染人類感染性物質(zhì)，感染人類”nUN 2900 恰當?shù)倪\輸名稱是恰當?shù)倪\輸名稱是 “感染性物質(zhì)，僅感染動物感染性物質(zhì)，僅感染動物” B類

15、感染性物質(zhì)的編號類感染性物質(zhì)的編號為為UN3373 UN 3373恰當?shù)倪\輸名稱是恰當?shù)倪\輸名稱是 “診斷樣本診斷樣本” 或或“臨床樣本臨床樣本”麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.2 4.2 不同實驗活動生物安全實驗室級別不同實驗活動生物安全實驗室級別4.2.14.2.1病毒分離與鑒定：病毒分離與鑒定：根據(jù)根據(jù)名錄的要求名錄的要求，務，務必在必在BSL-2BSL-2實驗室內(nèi)進行。實驗室內(nèi)進行。4.2.2 PCR4.2.2 PCR檢測：檢測：麻疹病毒未經(jīng)滅活，提取病毒核麻疹病毒未經(jīng)滅活，提取病毒核酸，務必在酸，務必在BSL-2BSL-2實驗室內(nèi)進行；確認病毒滅活措實驗室內(nèi)進行；確認病毒

16、滅活措施有效后，可在施有效后，可在BSL-1BSL-1實驗室內(nèi)進行實驗室內(nèi)進行PCRPCR檢測。檢測。4.2.34.2.3血清學檢測：血清學檢測：血清未滅活前，檢測麻疹病毒血清未滅活前，檢測麻疹病毒抗體，需在抗體，需在BSL-2BSL-2實驗室內(nèi)進行；血清滅活后可在實驗室內(nèi)進行；血清滅活后可在BSL-1BSL-1實驗室內(nèi)進行操作。實驗室內(nèi)進行操作。 麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.3 4.3 擬從事實驗活動的危險性分析及相應擬從事實驗活動的危險性分析及相應的預防措施的預防措施4.3.1 4.3.1 標本采集標本采集4.3.1.1 4.3.1.1 咽拭子：咽拭子：采集時近距離接觸患者

17、，可能采集時近距離接觸患者，可能通過空氣、飛沫傳播而引起感染，操作者必須通過空氣、飛沫傳播而引起感染，操作者必須加強個人防護（工作服、口罩、帽子、一次性加強個人防護（工作服、口罩、帽子、一次性乳膠手套等）。乳膠手套等）。4.3.1.2 4.3.1.2 血清：血清：可能產(chǎn)生的危害是采集時使用注可能產(chǎn)生的危害是采集時使用注射器不當，造成的扎傷引起經(jīng)血液感染，操作射器不當，造成的扎傷引起經(jīng)血液感染，操作者必須戴手套，禁止將使用后的一次性針頭重者必須戴手套，禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。新套上針頭套。 麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.3.2 4.3.2 病毒分離：病毒分離： 吸取

18、病毒液接種細胞，液體有可吸取病毒液接種細胞，液體有可能滴灑、濺出或在吹打混勻過程中能滴灑、濺出或在吹打混勻過程中形成氣溶膠。因此，操作必須在形成氣溶膠。因此，操作必須在BSL-2BSL-2實驗室的生物安全柜中進行實驗室的生物安全柜中進行麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.3.2 4.3.2 病毒分離：病毒分離： 操作臺面應鋪浸有消毒劑的紗布或一操作臺面應鋪浸有消毒劑的紗布或一次性吸水墊，一旦發(fā)生意外，立即將污次性吸水墊，一旦發(fā)生意外，立即將污染的紗布或吸水墊棄入含染的紗布或吸水墊棄入含10%10%有效氯的次有效氯的次氯酸鈉氯酸鈉的消毒缸內(nèi)，立即消毒臺面并更的消毒缸內(nèi)，立即消毒臺面并更換

19、新的紗布或吸水墊。換新的紗布或吸水墊。 換液過程中動作要輕柔勿劇烈，棄液換液過程中動作要輕柔勿劇烈，棄液時應將吸管插入消毒液中。時應將吸管插入消毒液中。 麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.3.3 PCR4.3.3 PCR檢測：檢測： PCRPCR實驗室嚴格功能分區(qū)，防止病實驗室嚴格功能分區(qū)，防止病原體核酸和環(huán)境原體核酸和環(huán)境雙向污染雙向污染。PCRPCR過程過程中與核酸或中與核酸或cDNAcDNA接觸的吸頭回收至接觸的吸頭回收至密閉容器內(nèi)。使用的一次性手套等密閉容器內(nèi)。使用的一次性手套等物品，務必置于密閉垃圾桶內(nèi)。物品，務必置于密閉垃圾桶內(nèi)。 麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告

20、4.3.44.3.4血清學檢測：血清學檢測： 未知的血清樣品，操作者有感染其它未知的血清樣品，操作者有感染其它疾病的可能。檢測前滅活血清標本；不疾病的可能。檢測前滅活血清標本；不能做滅活處理的血清樣品，則需在能做滅活處理的血清樣品，則需在BSL-2BSL-2實驗室的生物安全柜中進行，操作者必實驗室的生物安全柜中進行，操作者必須加強個人防護（工作服、口罩、帽子、須加強個人防護（工作服、口罩、帽子、一次性乳膠手套）。一次性乳膠手套）。麻疹病毒危害評估報告麻疹病毒危害評估報告4.4 4.4 工作人員的預防接種和工作人員素質(zhì)工作人員的預防接種和工作人員素質(zhì) 4.4.1 4.4.1 工作人員的預防接種：工作人員的預防接種：進行麻疹病毒進行麻疹病毒相關操作的人員必須接種過麻疹疫苗，且相關操作的人員必須接種過麻疹疫苗，且保護抗體呈陽性。保護抗體呈陽性。4.4.24.4.2 經(jīng)過規(guī)范的生物安全培訓，嚴格考核，經(jīng)過規(guī)范的生物安全培訓，嚴格考核，取得上崗證或上級主管部門相關證書。取得上崗證或上級