高二生物選修3課件222動物細胞融合與單克隆抗體備課講稿

1、高二生物選修3課件222動物細胞融合與單克隆抗體一、動物細胞融合（細胞雜交）2、概念：、概念：指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。的過程。3、結(jié)果：、結(jié)果：形成單核的雜交細胞形成單核的雜交細胞4、原理：、原理：細胞膜的流動性細胞膜的流動性5、誘導(dǎo)方式、誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動、電激物理法：離心、振動、電激化學法：聚乙二醇（化學法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒生物法：滅活的病毒動物細胞融合動物細胞融合過程：過程：動物細胞動物細胞A A動物細胞動物細胞B B誘導(dǎo)，融合誘導(dǎo)，融合篩選篩選雜交細雜交細胞胞ABAB有絲分裂有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合、（

2、膜融合、質(zhì)融合、核融合核融合）注意：動物細胞的融合也需要把多個兩種細胞放在一起，注意：動物細胞的融合也需要把多個兩種細胞放在一起，讓它們隨機融合后，再從中篩選雜交細胞讓它們隨機融合后，再從中篩選雜交細胞7、意義：、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交 （種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。8 8、應(yīng)用：、應(yīng)用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段新品種培育等的重要手段 特別是利用細胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜特別是利用細胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技

3、術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。交瘤技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。1 1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？2、抗體由什么細胞產(chǎn)生？、抗體由什么細胞產(chǎn)生？B淋巴細胞淋巴細胞每個每個B細胞只分泌一種特異性抗體細胞只分泌一種特異性抗體要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋淋巴細胞，形成細胞群巴細胞，形成細胞群設(shè)計方案：設(shè)計方案：一種一種B B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體淋巴細胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞能在體外大量增殖小鼠骨髓瘤細胞能在體外大量增殖雜交細胞雜交細胞二二. .單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備1

4、1、注射抗原的目的是什么、注射抗原的目的是什么2 2、誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？、誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？3 3、融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞、融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞4 4、第一次篩選的方法和目的、第一次篩選的方法和目的5 5、第二次篩選的方法和目的、第二次篩選的方法和目的6 6、雜交瘤細胞獲得單一抗的方法、雜交瘤細胞獲得單一抗的方法1、原理：、原理：雜交瘤細胞具有兩個親本的特性，即能雜交瘤細胞具有兩個親本的特性，即能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。2、過程B淋巴細胞淋巴細胞骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞誘導(dǎo)誘導(dǎo)融合融合B-B細胞細胞B-瘤細胞瘤細胞瘤瘤-瘤細胞瘤細胞選擇

5、培養(yǎng)選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞雜交瘤細胞（ B-瘤細胞）瘤細胞）克隆化培養(yǎng)克隆化培養(yǎng)專一抗體檢測專一抗體檢測能產(chǎn)生特異能產(chǎn)生特異性抗體的雜性抗體的雜交瘤細胞交瘤細胞體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體單克隆抗體3.單克隆抗體的應(yīng)用：單克隆抗體的優(yōu)點：單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大 作為診斷試劑作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合 優(yōu)點：準確、高效、簡易、快速用于用于運載藥物：制成運載藥物：制成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療治療疾病：主要用于癌癥治療既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量。 除通過雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體

6、外，除通過雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體外，還有什么方法？還有什么方法？1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（ ） A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細胞A3.3.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.B.所用的技術(shù)手段基本相所用的技術(shù)手段基本相同同 C. C. 所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 D. D. 都能形成雜種細都能形成雜種細胞胞 D4. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是-A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合淋巴細胞與肝細胞融合 B.由小鼠一個由小鼠一個B淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細胞誘導(dǎo)融合而成 C.由小鼠一個由小鼠一個B淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細胞與肌瘤細胞誘導(dǎo)融合而成 D.由小鼠一個由小鼠一個B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合而成 D(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞與植物細胞的差別：無細胞壁全能性受限制，不能發(fā)育成雜種動