瑞康益肝膠囊長期毒性實(shí)驗(yàn)研究

1、瑞康益肝膠囊長期毒性實(shí)驗(yàn)研究    【關(guān)鍵詞】  瑞康益肝膠囊；,長期毒性；,血液學(xué)指標(biāo)；,臟器系數(shù)摘要：目的觀察瑞康益肝膠囊對大鼠長時間給藥可能產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，為臨床應(yīng)用提供毒理學(xué)依據(jù)。方法分別以相當(dāng)于人日用量的150，50，25倍，經(jīng)180 d大鼠灌胃給藥，觀察給藥中、末期及停藥恢復(fù)期動物的一般狀況、主要血液學(xué)指標(biāo)、生化學(xué)指標(biāo)和臟器病理組織變化。結(jié)果各實(shí)驗(yàn)期動物一般狀況良好，體重、臟器系數(shù)值、主要血液學(xué)指標(biāo)、生化學(xué)指標(biāo)與空白對照組基本一致；給藥末期和恢復(fù)期高劑量動物尿液分析指標(biāo)和空白對照無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別；解剖主要臟器未見明顯肉眼可見的病理性改變

2、，組織學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)明顯病理改變。結(jié)論該品長期服用無明顯毒性，停藥后未見藥物延遲性毒性反應(yīng)。關(guān)鍵詞：瑞康益肝膠囊；  長期毒性；  血液學(xué)指標(biāo)；  臟器系數(shù)Longterm Toxicity of Ruikang Yigan Capsule on Rats in vivo Abstract：ObjectiveTo observe the longterm toxicity of Ruikang Yigan Capsule on rats.MethodsWistar rats were given Rui Kang Yigan Capsule by gavage fo

3、r 180 days,once a day,with three doses of 1.50 g/kg,0.50 g/kg and 0.25g/kg (equal to 150,50 and 25 times of clinic dosage respectively).The animal general condition ,indexes of hemotology and biochemistry,and the histopathology of the major organs were examined during both medium and end term of the

4、 treatment. Meanwhile,the condition of convalescence was observed in 2 weeks after feeding.ResultsThe general condition of the treated  rats were found normal both during and after feeding the medicine;their weight ,organ coefficients,main indexes of hemotology and biochemistry were basically t

5、he same as the control. The index of urine analysis ,main indexes of hemotology and biochemistry were basically the same as the control. The index of urine analysis showed no significant difference with that of the control. The histopathological examinations of the major organs also showed no signif

6、icant changes.ConclusionRuikang Yigan Capsule has no significant toxicity or delayed  toxicity after long-term administration on rats,which indicates that this capsule would be safe for the clinical use.Key words：Rui Kang Yi Kang Capsuls;  Longterm toxicity;  Indexes of hemotology;

7、60; Organ coefficients    瑞康益肝膠囊系為葛根、甘草、紅棗、陳皮等的提取物研制而成的中藥制劑，具抗疲勞、預(yù)防脂肪肝、維持肝臟健康及身體正常新陳代謝等功效，為可長期服用的保健專方。為探討瑞康益肝膠囊在臨床應(yīng)用的安全性及臨床用藥可能出現(xiàn)的慢性毒性反應(yīng)，根據(jù)長期毒性實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)要求，我們對其進(jìn)行了大鼠長期毒性實(shí)驗(yàn)。1  器材1.1  動物與環(huán)境健康Wistar大鼠，SPF級，鼠齡810周，體重8090 g，雌雄各半。購自湖北省實(shí)驗(yàn)動物中心（許可證：SCXX（鄂）20030005）。實(shí)驗(yàn)動物按性別籠飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)室溫度為2124

8、，濕度為55%70%。光照12 h的明暗周期。實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號SYXK（鄂）20040024。1.2  受試藥物瑞康益肝膠囊，0.3 g/粒。用前倒出內(nèi)容物用蒸餾水分別籠飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)室溫度為2124，濕度為55%70%。光照12 h的明暗周期。實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號SYXX（鄂）20040024。1.3  空白對照品蒸餾水。1.4  檢測試劑生化試劑盒由上海科華?D冬菱診斷用品有限公司生產(chǎn)；血液稀釋液，南昌特康科技有限公司生產(chǎn)；尿分析試紙條，韓國盈東生物科技（北京）有限公司生產(chǎn)。1.5  儀器MEK6918全自動分類血液分析儀、CL-8000全自動生化分

9、析儀，日本島津公司生產(chǎn)；UriSCANPRO尿液分析儀，韓國盈東制藥株式會社生產(chǎn)；PB302型電子天平，瑞士梅特勒公司生產(chǎn)。2  方法取上述規(guī)格大鼠120只，按體重隨機(jī)分成4組，高劑量組、中劑量組、低劑量組和空白對照組各30只，雌雄各半。高、中、低3個劑量組分別灌胃給予1.2項(xiàng)下所述的3種混懸液，空白對照組灌胃給予蒸餾水，灌胃1次/d，體積均為1.0 ml/100g，連續(xù)給藥180 d（每周停藥1     d），每7 d稱體重1次，根據(jù)體重變化，調(diào)整給藥量。每日觀察受試動物的外觀、行為體征、活動、精神狀態(tài)、進(jìn)食、體重變化、糞便及尿液等情況。在給

10、藥中期（90 d）、給藥末期（180 d）及恢復(fù)期（停藥15 d），分別各隨機(jī)抽取1/3動物，麻醉采血后處死。收集全血，檢測血常規(guī)指標(biāo)；離心得血清，檢測血液生化指標(biāo)。同時剖取心、肝、脾、肺、腎等各主要臟器，電子天平稱重，肉眼觀察和病理切片檢查，以判斷用藥期間及停藥后可能出現(xiàn)的延遲毒性反應(yīng)或毒性反應(yīng)的可逆程度。 2.1  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理統(tǒng)計(jì)資料以±s表示，數(shù)據(jù)用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。3  結(jié)果3.1  一般觀察給藥期高、中、低3劑量組大鼠和正常對照組大鼠外觀、行為、活動、精神狀態(tài)等均無明顯異常；飲食，大小便正常，體重呈線性增加，給藥組與對照組比較無

11、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果見表1。表1  瑞康益肝膠囊對大鼠體重的影響(略)3.2  主要血液學(xué)指標(biāo)結(jié)果顯示，各組動物在給藥期和恢復(fù)期，其紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、紅細(xì)胞容積（HCT）、平均紅細(xì)胞容積（MCV）、紅細(xì)胞分布寬度（RDW）、血紅蛋白（HGB）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、白細(xì)胞（WBC）、淋巴細(xì)胞（LY）、單核細(xì)胞（MO）、嗜酸性粒細(xì)胞（EO）、血小板（PLT）、血小板容積（PCT）等主要血液學(xué)指標(biāo)與空白對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果見表2。表明本品對正常大鼠外周血象無明顯影響?；謴?fù)期未見延遲性損害。3.3  血液生化指標(biāo)恢復(fù)期

12、給藥各組與對照組相比血糖、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P0.05），但均在正常范圍內(nèi)，無臨床意義；總膽紅素（TBIL）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、總膽固醇（TC）、肌酐（Cr）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（AKP）、鈉離子（Na+）、鉀離子（K+）、氯離子（Cl-）等主要血液生化指標(biāo)與對照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。表明本品對正常大鼠肝、腎功能以及蛋白質(zhì)、糖、脂代謝均無明顯影響。結(jié)果見表3。表2  瑞康益肝膠囊對大鼠主要血液學(xué)指標(biāo)的影響(略)表3  瑞康益肝膠囊對大鼠主要血液生化學(xué)指標(biāo)的影響(略)3.4  尿液分

13、析指標(biāo)結(jié)果顯示，高劑量給藥組（給藥期、恢復(fù)期）動物尿液紅細(xì)胞（RBC）、白細(xì)胞（WBC）、尿蛋白（PRO）、尿膽紅素（BIL）、酮體（KET）、尿糖（GLU）、pH值、比重（SG）等指標(biāo)和空白對照組（給藥期、恢復(fù)期）比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果見表4。表明，本品對正常大鼠尿常規(guī)無影響及延遲性影響。表4  瑞康益肝膠囊對大鼠主要尿液指標(biāo)的影響(略)3.5  系統(tǒng)解剖主要臟器系數(shù)及病理組織學(xué)檢查給藥期及恢復(fù)期各組動物的主要臟器心、肝、脾、腎、大腦、腸、腎上腺、甲狀腺、胸腺睪丸、子宮等肉眼觀察其位置，形態(tài)，色澤，硬度等均無明顯異常情況。各組動物臟器系數(shù)與對照組比較基本一致。結(jié)果見表5。表5  瑞康益肝膠囊對大鼠主要臟器系數(shù)的影響(略)臟器系數(shù)為每100 g體重中臟器克數(shù)3.6  病理組織學(xué)檢查高、中劑量組各期與空白對照組比較組織臟器均無明顯病理改變。4  討論瑞康益肝膠囊的臨床推薦成人日用量為2粒，為可長期服用的保健專方，本實(shí)驗(yàn)以高（1.50 g/kg），中（0.50 g/kg），低（0.25 g/kg）3劑量，分別相當(dāng)于成人日用