微生物學(xué)復(fù)習(xí)題2015(共12頁(yè))

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第一章 復(fù)習(xí)思考題 1.試圖示G+細(xì)菌和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的主要構(gòu)造，并簡(jiǎn)要說(shuō)明其異同？答：革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁：G+細(xì)菌細(xì)胞壁具有較厚（20-80nm）而致密的肽聚糖層，多達(dá)20層，占細(xì)胞壁成分的60%-90%。它同細(xì)胞膜的外層緊密相連。有的G+細(xì)菌細(xì)胞壁中含有磷壁酸也稱(chēng)胞壁質(zhì)，它是甘油和核酸的酯而存在。由于磷壁酸通常帶負(fù)電荷，它可在細(xì)胞表面能調(diào)節(jié)陽(yáng)離子濃度，磷壁酸與細(xì)胞生長(zhǎng)有關(guān)，細(xì)胞生長(zhǎng)中有自溶素酶與細(xì)胞生長(zhǎng)起作用，磷壁酸對(duì)自溶素有調(diào)節(jié)功能，阻止胞壁過(guò)度降解和壁溶。如果細(xì)胞壁的肽聚糖層被消溶，G+細(xì)胞成為原生質(zhì)體，細(xì)胞壁不復(fù)存在，而只存留細(xì)胞膜。除鍵球菌外，大多是G

2、+細(xì)菌細(xì)胞壁中含有極少蛋白質(zhì)。革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁：G-細(xì)菌細(xì)胞壁比G+細(xì)菌細(xì)胞壁薄（15-20nm）而結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，分外膜和肽聚糖層（2-3nm）。在細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)膜之間有一個(gè)明顯的空間，稱(chēng)為壁膜間隙。G-細(xì)菌細(xì)胞壁外膜的基本成分是脂多糖，它同細(xì)胞質(zhì)膜相同之處也是雙層類(lèi)脂，但除磷脂外還含有多糖和蛋白質(zhì)。2.試述革蘭氏染色的機(jī)制？答：革蘭氏染色的機(jī)制是：微生物學(xué)中最重要的染色法。通過(guò)結(jié)晶紫色初染和碘液媒染后，在細(xì)菌的細(xì)胞壁以?xún)?nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+細(xì)菌由于其細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故乙醇的處理不會(huì)溶出間隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其保持紫色。反

3、之，G¯細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄，外膜層類(lèi)脂含量高，肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑乙醇后，以類(lèi)脂為主的外膜迅速溶解，這時(shí)薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋，結(jié)晶紫和碘復(fù)合物的溶出，因此細(xì)胞退成無(wú)色，這時(shí)，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染。就使G¯細(xì)菌呈現(xiàn)紅色，G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色了。此法證明了，G+和G¯主要由于起細(xì)胞壁化學(xué)成分的差異而引起了物理特性的不同而使染色反應(yīng)不同，是一種積極重要的鑒別染色法，不僅可以用與鑒別真細(xì)菌也可鑒別古生菌。3.什么是缺壁細(xì)菌？試列表比較4種缺壁細(xì)菌的形成，特點(diǎn)和實(shí)踐意義？答：缺壁細(xì)菌是一種特殊的缺損或損細(xì)胞壁的細(xì)菌。雖然細(xì)胞壁是一切原核生物的最基本構(gòu)造

4、，但在自然界長(zhǎng)期進(jìn)化中和在實(shí)驗(yàn)室菌種的自發(fā)突變中都會(huì)產(chǎn)生少數(shù)缺細(xì)胞壁的種類(lèi)，此外，在實(shí)驗(yàn)室中，還可用人為方法通過(guò)抑制新細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)成細(xì)胞壁進(jìn)行酶解而獲得人工缺壁細(xì)菌。 自發(fā)缺壁突變：L型細(xì)菌 實(shí)驗(yàn)室中形狀 徹底除盡：原生質(zhì)體 人工方法去壁：缺壁細(xì)菌 部分去除：球狀體 自然界長(zhǎng)期進(jìn)化中形成：支原體原生質(zhì)體：指人工條件下用溶菌酶除盡原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制細(xì)胞壁的合成后，所留下的僅由細(xì)胞膜包裹著的圓球狀滲透敏感細(xì)胞，一般由G+細(xì)菌形狀。球狀體：指還殘留部分細(xì)胞的原生質(zhì)體，一般由G¯細(xì)菌形成。原生質(zhì)體和球狀體的共同特點(diǎn)是無(wú)完整的細(xì)胞壁，細(xì)胞呈球狀，對(duì)滲透壓較敏感，即使有鞭毛也無(wú)法運(yùn)動(dòng)

5、，對(duì)相應(yīng)噬菌體不敏感，細(xì)胞不能分裂等，在合適的再生培養(yǎng)基中，原生體可以恢復(fù)，生長(zhǎng)細(xì)胞壁。L型細(xì)菌：L型細(xì)菌專(zhuān)一指在實(shí)驗(yàn)室中通過(guò)自發(fā)突變形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株，L型細(xì)菌雖然喪失合成細(xì)胞壁的能力，但是由于質(zhì)膜完整在一定的滲透壓下不影響其生存和存殖，但是不能保持原有細(xì)胞形態(tài)，菌體形成高度多形態(tài)的變異菌。支原體：是在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的適應(yīng)自然生活條件的無(wú)細(xì)胞壁的原生核微生物。其細(xì)胞壁中含有一般原核生物所沒(méi)有的甾醇，因此雖缺乏細(xì)胞壁，其細(xì)胞仍有較高的機(jī)械強(qiáng)度。人們?cè)趯?shí)驗(yàn)中，還可用人為方法通過(guò)抑制新生細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)成細(xì)胞壁進(jìn)行酶解而獲得人工缺壁細(xì)菌。4.研究細(xì)菌芽孢有何理論和實(shí)際意義？答：

6、芽孢的有無(wú)，形態(tài)，大小和著生位置等是細(xì)菌分類(lèi)和鑒定中的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)。這類(lèi)菌種芽孢的存在，有利于提高菌種的篩選效率，有利于菌種的長(zhǎng)期保藏。是否能殺滅一些代表菌的芽孢是衡量和制定，各種消毒滅菌標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)。許多產(chǎn)芽孢細(xì)菌是強(qiáng)致病菌，例如：炭疽芽孢桿菌肉毒校菌和破傷風(fēng)校菌等。有些產(chǎn)芽孢細(xì)菌可伴隨產(chǎn)生有用的產(chǎn)物，如：抗生素短桿菌肽等。5.什么是菌落？試討論微生物的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性及其內(nèi)在原因？答：菌落是指單個(gè)（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)表面或內(nèi)部生長(zhǎng)，繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的，有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。菌落形態(tài)包括菌落的大小，形態(tài)，邊緣，光澤質(zhì)地，顏色和透

7、明程度等，每一種細(xì)菌在一定條件下形成固定的菌落特征，不同種或同種的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的，這些特征對(duì)菌落種識(shí)別，鑒定有一定意義。細(xì)胞形態(tài)是菌落的基礎(chǔ)，菌落形態(tài)是細(xì)胞形態(tài)在群體集聚時(shí)反映，細(xì)菌是原微生物故形成的菌落也小，細(xì)菌個(gè)體之間瞞著水分，所以整個(gè)菌落顯得濕潤(rùn)，易被接種環(huán)挑起，球菌形成隆起的菌落，有鞭毛細(xì)菌常形成邊緣不規(guī)則的菌落，具有硬膜的菌落表面較透明，邊緣光滑整齊，有芽孢的菌落表面干燥皺褶，有些能產(chǎn)生紫色的細(xì)菌，菌落還顯出鮮艷的顏色。其原因，菌落的特征是細(xì)菌自身的形態(tài)結(jié)構(gòu)及營(yíng)養(yǎng)特性在菌落生長(zhǎng)形態(tài)上的反應(yīng)。6. 試以鏈霉菌為例，描述這類(lèi)典型放線(xiàn)菌的菌絲，孢子和菌落的一般特征？答：放線(xiàn)菌

8、是一類(lèi)主要呈菌絲狀生長(zhǎng)和以孢子繁殖的陸生性較強(qiáng)的原核生物，多數(shù)生活在土壤中，它們中有許多是抗生素的生產(chǎn)物，鏈霉菌屬是典型的放線(xiàn)菌，它們基內(nèi)有基內(nèi)菌絲和氣生菌絲構(gòu)成，后者成熟后，會(huì)分化出各種類(lèi)型的孢子絲，其上產(chǎn)生形態(tài)，顏色各異的分生孢子，便于傳播和大量繁殖。放線(xiàn)菌在固體培養(yǎng)基上形成，與細(xì)菌不同的菌落特征，放線(xiàn)菌菌絲互相交錯(cuò)纏線(xiàn)形成質(zhì)地致密的小菌落，干燥，不透明，難以挑取，當(dāng)大量孢子覆蓋于菌落表面時(shí)，就形成面為粉末狀或顆粒狀的典型放線(xiàn)菌菌落，由于基內(nèi)菌絲和孢子常有顏色，使得菌落的反正面呈現(xiàn)出不同的色澤。放線(xiàn)菌的菌落由菌絲體組成，一般圓形，光平或有許多褶皺，光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察，菌落類(lèi)不同可分為兩大類(lèi)：

9、一類(lèi)是由產(chǎn)生大量的分枝和氣生菌絲的菌種所形成的菌落，另一類(lèi)菌落由不產(chǎn)生大量菌絲體的種類(lèi)形成，如諾長(zhǎng)氏放線(xiàn)菌的菌落。第2章 復(fù)習(xí)思考題1.試列表比較真核生物和原核生物的10個(gè)主要差別？答：比較項(xiàng)目真核生物原核生物細(xì)胞大小較大（通常直徑>2nm）較?。ㄍǔＶ睆?lt;2nm）若有壁，其主要成分纖維素，幾丁質(zhì)等多數(shù)的為肽聚糖線(xiàn)粒體有無(wú)葉綠體光合自養(yǎng)生物中有無(wú)核糖體80S（指細(xì)胞質(zhì)核糖體）70SDNA含量低（約5%）高（約10%）有絲分裂有無(wú)光合作用部位葉綠體細(xì)胞膜生物固氮能力無(wú)有些有繁殖方式有性，無(wú)性等多種一般無(wú)性2. 試總結(jié)酵母菌的5個(gè)特點(diǎn)，并列出各個(gè)特點(diǎn)的例處？答：酵母菌是一個(gè)通俗名稱(chēng)，一

10、般指發(fā)酵糖類(lèi)的各種單細(xì)胞真菌，由于不同的酵母菌在進(jìn)化和分類(lèi)地位上的異源性，因此很難對(duì)酵母菌下一個(gè)確切的定義，通常認(rèn)為，酵母菌具有以下5個(gè)特點(diǎn)：個(gè)體一般以單細(xì)胞非菌絲狀態(tài)存在。多數(shù)營(yíng)出芽繁殖。能發(fā)酵糖類(lèi)產(chǎn)能。細(xì)胞壁常含甘露聚糖。常生活在含糖量較高酸度較大的水生環(huán)境中。多分布在含糖的偏酸性環(huán)境，也稱(chēng)為“糖菌”。如水果蔬菜，葉子，樹(shù)皮等處，及葡萄園和果園土壤中等，有的酵母菌可利用烴類(lèi)物質(zhì)：如，假絲酵母，畢亦式酵母是正烷酵生產(chǎn)三羧酸的高產(chǎn)微生物，為石油化工開(kāi)發(fā)許多嶄新的工藝和生產(chǎn)，人類(lèi)和第一種“家養(yǎng)微生物”釀造工業(yè)，食品工業(yè)，醫(yī)藥工業(yè)，飼料工業(yè)，化學(xué)工業(yè)。3. 試列表比較四大類(lèi)微生物的細(xì)胞形態(tài)和菌落特

11、征？答：菌落特征 微生物類(lèi)別單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物細(xì)菌酵母菌放線(xiàn)菌霉菌主要特征 菌 落含水狀態(tài)很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀(guān)形態(tài)小而凸起或大而平坦大而凸起小而緊密大而致密 細(xì) 胞相互關(guān)系單個(gè)分散或有一定排列方式單個(gè)分散假絲狀絲狀交織絲狀交織形態(tài)小而均勻大而分化細(xì)而均勻粗而分化特征個(gè)別有芽孢參考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落與培養(yǎng)不結(jié)合不結(jié)合牢固結(jié)合較牢固結(jié)合菌落顏色多樣單調(diào)十分多樣十分多樣菌落正反面相同相同一般不同一般不同菌落邊緣一般看不到細(xì)胞可見(jiàn)球狀，卵圓狀有時(shí)可見(jiàn)細(xì)胞絲狀細(xì)胞可見(jiàn)粗絲狀細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)速度一般很快較快慢一般較快氣味一般很臭多帶酒香味常有泥腥味往往有霉味4

12、. 試列表比較細(xì)菌，放線(xiàn)菌，酵母菌和霉菌細(xì)胞壁成分的異同，并提出制備相應(yīng)原生質(zhì)體的酶或試劑？答：細(xì)胞壁成分的異同：細(xì)菌分為G+和G¯，G+肽聚糖含量高，G¯含量低，G+磷壁酸含量較高，G¯而不含磷壁酸；G+類(lèi)脂一般無(wú)，而G¯含量較大；G+不含蛋白質(zhì)，G¯含量較高。放線(xiàn)菌為G¯，其細(xì)胞壁具有G¯所具有的特點(diǎn)。酵母菌和霉菌為真菌，酵母菌的細(xì)胞壁外層為甘露聚糖，內(nèi)層為葡萄聚糖；而霉菌的細(xì)胞壁成分為幾丁質(zhì)，也含有纖維素。原生質(zhì)體制備方法：G+細(xì)菌原生質(zhì)體獲得：青霉菌，溶菌霉。G¯細(xì)菌原生質(zhì)體獲得：EDTA螯合劑處理，溶菌霉

13、。放線(xiàn)菌原生質(zhì)體獲得：青霉素，溶菌酶。酵母菌原生質(zhì)體獲得：蝸牛消化酶。霉菌原生質(zhì)體獲得：蝸牛消化酶，纖維素酶。5. 各種屬酶菌的結(jié)構(gòu)和繁殖方式？答：無(wú)隔菌絲：為長(zhǎng)管狀單細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含多個(gè)核其生長(zhǎng)表現(xiàn)為菌絲的延長(zhǎng)和細(xì)胞核的增多，這是低等真菌所具有的菌絲類(lèi)型。有隔菌絲：菌絲中有隔膜，被隔膜隔開(kāi)的一段菌絲就是一個(gè)細(xì)胞，菌絲由多個(gè)細(xì)胞組成，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)有一至多個(gè)核，隔膜上有單孔或多孔，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核可自由流通，每個(gè)細(xì)胞功能相同。營(yíng)養(yǎng)菌絲：伸入到培養(yǎng)基內(nèi)部，以吸收養(yǎng)分為主的菌絲。氣生菌絲：向空中生長(zhǎng)的菌絲。 菌絲片段 包囊孢子 分生孢子 繁殖方式 無(wú)性孢子 厚坦孢子 節(jié)孢子 孢子 卵孢子 有性孢子 接合

14、孢子 子囊孢子 擔(dān)孢子第6章 復(fù)習(xí)思考題（微生物生長(zhǎng)及其控制）1. 微生物的生長(zhǎng)與繁殖間的關(guān)系如何？研究它們的生長(zhǎng)繁殖有何理論與實(shí)踐意義？答：生長(zhǎng)，繁殖和死亡是微生物最本質(zhì)的屬性之一，其中的規(guī)律對(duì)科學(xué)研究和指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐具有重要的意義。生長(zhǎng)是一個(gè)逐步發(fā)生的量變過(guò)程，繁殖是一個(gè)產(chǎn)生新的生命個(gè)體的質(zhì)變過(guò)程。高等生物里這兩個(gè)過(guò)程可以明顯分開(kāi)，但在低等特別是在單細(xì)胞的生物里，這兩個(gè)過(guò)程是緊密聯(lián)系又很難劃分的過(guò)程。單個(gè)微生物細(xì)胞 合適的外界條件，吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行代謝同化作用的速度超過(guò)了異化作用個(gè)體的生長(zhǎng)原生質(zhì)的總量（重量，體積，大小）就不斷地增加如果各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)時(shí)，則達(dá)到一定程度后就會(huì)發(fā)

15、生繁殖，引起個(gè)體數(shù)的增加群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)群體的生長(zhǎng)。微生物的生長(zhǎng)繁殖是其在內(nèi)外各種環(huán)境因素相互作用下生理，代謝等狀態(tài)的綜合反映，因此，有關(guān)生長(zhǎng)繁殖的數(shù)據(jù)就可作為研究多種生理，生化和遺傳等問(wèn)題的重要指標(biāo)；同時(shí)，微生物的生產(chǎn)實(shí)踐上的各種應(yīng)用或是人類(lèi)對(duì)致病，霉腐等有害的微生物的防治，也都與它們的生長(zhǎng)繁殖或抑制密切相關(guān)。這是研究微生物生長(zhǎng)繁殖規(guī)律的重要指標(biāo)。2.平板菌落計(jì)數(shù)法有何優(yōu)點(diǎn)？試對(duì)澆注平板法和涂布平板法作一比較？答：平板菌落計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)：平板計(jì)數(shù)簡(jiǎn)單靈敏，廣泛應(yīng)用于食品，水體及土壤樣品中活菌的計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：可能因?yàn)椴僮鞑皇炀毷沟眉?xì)胞未均勻分散或者由于培養(yǎng)基不合適不能滿(mǎn)足有微生物的需要而

16、導(dǎo)致結(jié)果偏低，或使用傾平板技術(shù)時(shí)因培養(yǎng)基溫度過(guò)高損傷細(xì)胞等原因造成結(jié)果不穩(wěn)定等。澆注平板法：為最常用的分離培養(yǎng)細(xì)菌的方法，通過(guò)平板劃線(xiàn)后，可使細(xì)胞分散生長(zhǎng)，形成單個(gè)菌落，有利于含有多種細(xì)菌的標(biāo)本中分離出目的菌。其目的都要使細(xì)菌呈現(xiàn)單個(gè)菌落生長(zhǎng)，便于同雜菌鑒別。涂布平板法：由于將含菌料現(xiàn)加到還較燙培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且采用稀釋平臺(tái)法也會(huì)使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(zhǎng)，因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。3. 在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基的PH變化有何規(guī)律？如何合理調(diào)整以利微生物更好地生長(zhǎng)和產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物？答：微生物的生命活動(dòng)過(guò)程

17、中會(huì)有自動(dòng)地改變外界環(huán)境的PH，其中發(fā)生PH改變有變酸和變堿兩種過(guò)程，在一般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢(shì)，因此，隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，培養(yǎng)基的PH會(huì)逐漸下降。PH的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系，碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后PH明顯下降；相反，碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后，其PH常會(huì)明顯上升。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中的變化往往對(duì)該微生物本身及發(fā)酵生產(chǎn)均不利的影響，因此，如何及時(shí)調(diào)整PH就成了微生物培養(yǎng)和發(fā)酵生產(chǎn)中的一項(xiàng)重要措施。通過(guò)總結(jié)實(shí)踐中的經(jīng)驗(yàn)，這里把人工調(diào)節(jié)PH的措施分成“治標(biāo)”和“治本”兩大類(lèi)，前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進(jìn)行直接，及時(shí)，快捷但不持久的表面化調(diào)節(jié)，后者則是指根據(jù)內(nèi)在機(jī)制而采用的間接

18、，緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)。這兩類(lèi)措施表解如下： 過(guò)酸時(shí)：加NaOH,Na2CO3等堿液中和 “治標(biāo)” 過(guò)堿時(shí)：加H2SO4，HCl等酸液中和 PH調(diào)節(jié) 過(guò)酸時(shí)：加適當(dāng)?shù)矗杭幽蛩?，NaNO3，NH4OH或蛋白質(zhì) “治本” 等提高通氣量 過(guò)堿時(shí)：加適當(dāng)碳源：加糖，乳酸醋酸，檸檬酸或油脂 等降低通氣量。4. 抗生素對(duì)微生物的作用機(jī)制可分幾類(lèi)？試各舉一例。答：名稱(chēng)類(lèi)型作用機(jī)制抑制細(xì)胞壁合成青霉素抑制肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)化作用引起細(xì)胞壁降解溶葡萄球菌素水解肽尾和分解胞壁酸-葡萄球菌干擾細(xì)胞壁多粘菌素使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)釋放抑制蛋白質(zhì)合成紅霉素與50S核糖體結(jié)合抑制DNA合成灰黃霉素不清楚抑制DNA復(fù)制絲

19、裂霉素使DNA的互補(bǔ)鏈相結(jié)合抑制DNA轉(zhuǎn)錄放線(xiàn)菌素D與DNA中的鳥(niǎo)嘌呤結(jié)合抑制RNA合成利福霉素與RNA聚合酶結(jié)合5.抗藥性是如何產(chǎn)生的？其作用類(lèi)型有幾種？試各舉一例。答：抗藥性是通過(guò)遺傳途徑產(chǎn)生，例如基因突變，遺傳重組或質(zhì)粒轉(zhuǎn)移等。產(chǎn)生原因：產(chǎn)生一種能使藥物失去活性的酶；例如：抗青霉素的菌株可產(chǎn)生-內(nèi)酰胺酶，從而使這兩類(lèi)抗生素的核心結(jié)構(gòu)中的內(nèi)酰胺酶鏈斷裂而喪失活性。把藥物作用的靶位加以修飾和改變；抗鏈霉素的菌株可因而通過(guò)突變使30S核糖體亞單位的蛋白質(zhì)組分改變，從而使鏈霉素不再與這種變更的30S亞單位結(jié)合。形成“救護(hù)途徑”既通過(guò)被藥物阻斷的代謝途徑發(fā)生變異，而變?yōu)槿阅芎铣稍瓉?lái)產(chǎn)物的新途徑。使

20、藥物不能透過(guò)細(xì)胞膜。通過(guò)主動(dòng)外排系統(tǒng)吧進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外。第7章 復(fù)習(xí)思考題（微生物的遺傳變異和育種）【P237】1.試述用Ames法檢測(cè)微量致癌，致突變，致畸變物質(zhì)的理論依據(jù)，方法要點(diǎn)和優(yōu)缺點(diǎn)。答：Ames實(shí)驗(yàn)是一種利用細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的恢復(fù)突變來(lái)檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡(jiǎn)便有效方法。理論依據(jù)：由于一切生物的遺傳物質(zhì)都是核酸，尤其是DNA，因此凡是能改變核酸結(jié)構(gòu)的生物學(xué)功能，某些化學(xué)物質(zhì)會(huì)引起核酸結(jié)構(gòu)損傷，并對(duì)生物具有致突變，致癌變，致畸變的作用。根據(jù)生物化學(xué)統(tǒng)一性原理，人們可以選用最簡(jiǎn)單的低等生物作為模型去了解發(fā)生在復(fù)雜的高等生物體內(nèi)的突變事件的原因。鼠傷寒沙門(mén)氏的組氨酸

21、營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基的平板上不能生長(zhǎng)，如發(fā)生恢復(fù)突變成原養(yǎng)型后能生長(zhǎng)。方法大致是在含持測(cè)可凝“三致”物的試樣中，加入鼠肝勻漿液，經(jīng)一段時(shí)間保溫后，吸入濾紙片中，然后將濾紙片放置于平板中央，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后出現(xiàn)三種情況：在平板上無(wú)大量菌落產(chǎn)生，說(shuō)明試樣中不含誘變劑。在紙上周?chē)幸灰种?，其外周?chē)霈F(xiàn)大量菌落說(shuō)明試樣中有某種高濃度誘變劑存在。在紙上周?chē)写罅烤?，說(shuō)明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。優(yōu)點(diǎn)：快速，準(zhǔn)確，費(fèi)用省等。2.試用表解概括一下篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的主要步驟和方法。答：步驟過(guò)程方法第一步 誘變劑處理一般誘變劑處相同紫外線(xiàn)等物理方法化學(xué)誘變劑法第二步 淘汰野生型在誘變后的存活個(gè)體中，營(yíng)養(yǎng)

22、缺陷型的比例一般較低，通常只有百分之幾至千分之幾，從而達(dá)到“濃縮”極少數(shù)營(yíng)養(yǎng)缺陷型的目的抗生素法菌絲過(guò)濾法第三步 檢出缺陷型要用連個(gè)培養(yǎng)皿才能檢測(cè)出的，有逐個(gè)檢出法和影印接種法，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和實(shí)驗(yàn)室具體條件加以選用。夾層培養(yǎng)法限量補(bǔ)充培養(yǎng)法逐個(gè)檢出法影印平板法第四步 鑒定缺陷型生長(zhǎng)譜法是指在混有供試菌的基本培養(yǎng)基平板表面點(diǎn)加微量營(yíng)養(yǎng)物視某營(yíng)養(yǎng)物的周?chē)蟹耖L(zhǎng)菌來(lái)確定，該供試菌的營(yíng)養(yǎng)要求的一種快速，直觀(guān)的方法。生長(zhǎng)譜法3. 試簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)化的基本過(guò)程？答：轉(zhuǎn)化的基本過(guò)程：供體菌dsDNA片段與感受態(tài)體菌細(xì)胞表面的膜連DNA結(jié)合蛋白相結(jié)合，其中一條鏈被核酸酶切開(kāi)和水解，；另一條進(jìn)入細(xì)胞。來(lái)自供體菌的ss

23、DNA片段被細(xì)胞內(nèi)的感受態(tài)特異的ssDNA結(jié)合蛋白相結(jié)合，并使ssDNA結(jié)合蛋白相結(jié)合，并且使ssDNA進(jìn)入細(xì)胞，隨即在RecA蛋白的介導(dǎo)下與受體菌核染色體上的同源區(qū)段配對(duì)，重組，形成一小段雜合DNA區(qū)段。受體菌染色體組進(jìn)行復(fù)制，于是雜合區(qū)也跟著得到復(fù)制。細(xì)胞分裂后，形成一個(gè)轉(zhuǎn)化子和一個(gè)仍保持受體菌原來(lái)基因型的子代。4. 試比較E.coil的F+F-F和Hfr4菌株的特點(diǎn)。并圖示它們間的相互聯(lián)系。答：F+ 菌株：既“雄性”菌株，指細(xì)胞內(nèi)存在幾個(gè)F質(zhì)粒，并在細(xì)胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。F-菌株：既“雄性”菌株，指與F+菌株相應(yīng)的，細(xì)胞中無(wú)F質(zhì)粒，細(xì)胞表面也無(wú)性菌毛的菌株，不含因子。Hfr4

24、菌株：在Hfr菌株細(xì)胞中，因F質(zhì)粒已從游離態(tài)轉(zhuǎn)變成在核染色體組特定位點(diǎn)上的整合態(tài)。Hfr菌株的染色體向F-菌株的轉(zhuǎn)移過(guò)程與上述的F質(zhì)粒的F+ 轉(zhuǎn)移至F-基本相同。 F- 與F+接合 F+ 分離或消除 與 與 分 核 F 離 染 脫 接 消 色 離 合 除 體 整 合 F因子與染色體組整合 F 不正常脫離 HfrHfr與F細(xì)胞配對(duì)通過(guò)性菌毛使兩個(gè)細(xì)胞直接接觸，并形成接合管，Hfr的染色體在起始子（i）部開(kāi)始復(fù)制，F(xiàn)質(zhì)粒插入的部分才告結(jié)束，供體DNA的一條單鏈通過(guò)性菌毛進(jìn)入受體細(xì)胞。發(fā)生接合中斷， F-成了一個(gè)部分雙倍體，在那里供體細(xì)胞的單鏈DNA片段合成了另一條互補(bǔ)的DNA鏈。外源雙鏈DNA片段

25、與受體菌（ F-）的染色體DNA雙鏈間進(jìn)行雙交換，從而產(chǎn)生了穩(wěn)定的接合子。5. 試列表比較原核微生物的轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)導(dǎo)，接合和原生質(zhì)體融合的異同？答：轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)導(dǎo)原生質(zhì)體融合接合源基因供體菌的DNA片段供體菌的DNA片段供體菌的全部基因F質(zhì)?；蚬w菌的DNA片段媒介無(wú)dsDNA直接與感受體接合醋鋰或CaCl2缺陷噬菌體無(wú)性菌毛增進(jìn)措施處理，增加感受態(tài)個(gè)數(shù)對(duì)雙重溶源菌進(jìn)行誘導(dǎo)PEG或電源沖使融合控制F質(zhì)粒舉例十分普通，主要有肺炎鏈球菌，嗜血桿菌屬，芽孢桿菌屬，根瘤屬鼠傷寒沙門(mén)氏菌，變形桿菌屬，弧菌屬，根瘤菌屬原生生物和真核生物都有主要在革蘭氏陰性菌中，放線(xiàn)菌中常見(jiàn)共同點(diǎn)實(shí)現(xiàn)了外源基因的導(dǎo)入，并獲得了新的穩(wěn)定重組子，表現(xiàn)出若干新遺傳性狀6. 基因工程的基本操作過(guò)程是怎樣的？試用簡(jiǎn)圖表示并簡(jiǎn)要說(shuō)明。答：基因工程的基本操作過(guò)程是： 目的基因的取得：取得具生產(chǎn)意義的目的基因主要有3條途徑：從適當(dāng)?shù)墓w生物包括微生物，動(dòng)物或植物中提?。煌ㄟ^(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，由mRNA合成cDNA。由化學(xué)合成方法有特定功能的目的基因。優(yōu)良載體的選擇： 優(yōu)良載體必須具備幾個(gè)條件：是一個(gè)相對(duì)分子質(zhì)量較小，結(jié)構(gòu)清楚，具自我復(fù)制能力