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文檔簡介

1、第四章第四章 毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)根底毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)根底一、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的原那么一、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的原那么二、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的二、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和處置三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和處置四、劑量設(shè)置和對(duì)照四、劑量設(shè)置和對(duì)照五、結(jié)果處置五、結(jié)果處置一、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的原那么一、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的原那么化學(xué)物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中產(chǎn)生的作用可以化學(xué)物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中產(chǎn)生的作用可以外推于人:外推于人:1 1人是最敏感的動(dòng)物;人是最敏感的動(dòng)物;2 2人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生物學(xué)過程包人和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生物學(xué)過程包括化學(xué)物的代謝,與體重或體外表積括化學(xué)物的代謝,與體重或體外表積相關(guān)。相關(guān)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必需暴露于高劑量,這是發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必需暴露于高劑量,這是

2、發(fā)現(xiàn)對(duì)人呵斥潛在危害的可靠方法?,F(xiàn)對(duì)人呵斥潛在危害的可靠方法。成年的安康動(dòng)物和人能夠的暴露途徑成年的安康動(dòng)物和人能夠的暴露途徑是根本的選擇。是根本的選擇。毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的局限性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的局限性-動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推到人的不確定性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推到人的不確定性動(dòng)物與人對(duì)外源化學(xué)物的反響敏感性能夠不同,動(dòng)物與人對(duì)外源化學(xué)物的反響敏感性能夠不同,甚至存在質(zhì)的差別;甚至存在質(zhì)的差別;運(yùn)用少量動(dòng)物、采用較大劑量,使對(duì)群體的代表運(yùn)用少量動(dòng)物、采用較大劑量,使對(duì)群體的代表性較差,能夠呵斥高劑量與低劑量的差別;性較差,能夠呵斥高劑量與低劑量的差別;動(dòng)物數(shù)量較少,對(duì)低概率毒效應(yīng)難以發(fā)現(xiàn);動(dòng)物數(shù)量較少,對(duì)低概率毒效應(yīng)難

3、以發(fā)現(xiàn);實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為純系,成年動(dòng)物,反響較單一,與接實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為純系,成年動(dòng)物,反響較單一,與接觸人群的復(fù)雜性不匹配,對(duì)外源化學(xué)物的易感性觸人群的復(fù)雜性不匹配,對(duì)外源化學(xué)物的易感性存在差別。存在差別。二、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的二、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì)描畫毒理學(xué)受試物毒作用的表現(xiàn)和性質(zhì)描畫毒理學(xué) 在急性或慢性實(shí)驗(yàn)中察看動(dòng)物異常,發(fā)在急性或慢性實(shí)驗(yàn)中察看動(dòng)物異常,發(fā)現(xiàn)有害作用現(xiàn)有害作用劑量劑量- -反響效應(yīng)研討反響效應(yīng)研討 毒性評(píng)價(jià)和平安性評(píng)價(jià)的根底;得到多毒性評(píng)價(jià)和平安性評(píng)價(jià)的根底;得到多種毒性參數(shù)和劑量種毒性參數(shù)和劑量- -反響效應(yīng)線的斜率反響效應(yīng)線的斜率確定毒作用的器官確定毒作用的

4、器官 闡明毒作用特點(diǎn),為機(jī)制研討和毒性闡明毒作用特點(diǎn),為機(jī)制研討和毒性防治提供線索防治提供線索確定損傷的可逆性確定損傷的可逆性經(jīng)過動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物的毒性反響,向人外推,經(jīng)過動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物的毒性反響,向人外推,以期評(píng)價(jià)化學(xué)物對(duì)人的危害和危險(xiǎn)性以期評(píng)價(jià)化學(xué)物對(duì)人的危害和危險(xiǎn)性三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的職業(yè)品德三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的職業(yè)品德普通原那么普通原那么人道主義的管理人道主義的管理和處置和處置使痛覺和不適感使痛覺和不適感減到最小減到最小防止不用要的運(yùn)防止不用要的運(yùn)用動(dòng)物用動(dòng)物3R 原那么原那么replacement替代:用替代:用無知覺資料的科學(xué)方無知覺資料的科學(xué)方法替代有知覺脊椎動(dòng)法替代有知覺脊椎動(dòng)物的方法物

5、的方法reduction減少:保證減少:保證數(shù)據(jù)信息前提下,盡數(shù)據(jù)信息前提下,盡量減少動(dòng)物運(yùn)用數(shù)量量減少動(dòng)物運(yùn)用數(shù)量refinement優(yōu)化:必需優(yōu)化:必需運(yùn)用動(dòng)物時(shí),減少非運(yùn)用動(dòng)物時(shí),減少非人道程序的影響人道程序的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:指經(jīng)人工培育,對(duì)其攜帶微實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:指經(jīng)人工培育,對(duì)其攜帶微生物實(shí)行控制,遺傳背景明確,來源生物實(shí)行控制,遺傳背景明確,來源清楚,可用于科學(xué)研討的動(dòng)物。清楚,可用于科學(xué)研討的動(dòng)物。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇一物種選擇一物種選擇根本原那么:根本原那么:對(duì)外源化學(xué)物的毒性反響及代謝特點(diǎn)與人對(duì)外源化學(xué)物的毒性反響及代謝特點(diǎn)與人類接近的物種很難滿足;類接近的物種很難滿

6、足;自然壽命不太長的物種;自然壽命不太長的物種;易于豢養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作的物種;易于豢養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作的物種;經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。經(jīng)濟(jì)并易于獲得的物種。常規(guī)實(shí)驗(yàn)選擇兩個(gè)物種,分屬:常規(guī)實(shí)驗(yàn)選擇兩個(gè)物種,分屬:嚙齒類嚙齒類非嚙齒類非嚙齒類 豚鼠:特點(diǎn)是毛短而光滑,生長快,抗病力強(qiáng),繁衍性能好。廣泛用于藥物學(xué)、傳染病學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、耳科學(xué)等各項(xiàng)醫(yī)學(xué)及生物學(xué)的研討中。 C57BL/6J小鼠:黑色,對(duì)放射物質(zhì)耐受性強(qiáng),但照射后肝癌發(fā)生率高。眼畸形,對(duì)結(jié)核桿菌有耐受性嗜酒精性高,是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、遺傳學(xué)研討常用品系。 SD大鼠:白色,產(chǎn)仔多,生長發(fā)育較Wistar大鼠為快,對(duì)疾病的抵抗力尤以呼吸道疾病的抵抗

7、力強(qiáng)。自發(fā)腫瘤發(fā)生率較低,對(duì)性激素感受性高。 Lewise大鼠:近交系大鼠,白化,對(duì)誘發(fā)本身免疫心肌炎高度敏感,可誘發(fā)過敏性腦脊髓炎、過敏性關(guān)節(jié)炎和本身免疫復(fù)合物血管球性腎炎等立刻移植多種腫瘤,高脂肪食物容易引起肥胖癥。 BALB/c小鼠:對(duì)致癌因子敏感,對(duì)放射性照射極為敏感。消費(fèi)性能良好,繁衍期長,廣泛運(yùn)用于腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、核醫(yī)學(xué)和單克隆抗體等研討。 BN大鼠:近交系大鼠,棕色,對(duì)實(shí)驗(yàn)過敏性腦脊髓炎有抗力。對(duì)自家免疫性復(fù)合性腎小球腎炎也具抗力。平均31月齡大鼠心內(nèi)膜疾病的發(fā)生率為7%,先天性高血壓為30%。 長爪沙鼠:被毛棕灰色,對(duì)許多需氧及厭氧菌敏感,對(duì)多種病毒、寄生蟲等敏感,也常

8、用于腦神經(jīng)病、內(nèi)分泌學(xué)、代謝病、腫瘤學(xué)等方面的研討。 品系:指用方案交配的方法獲得的來源于共同品系:指用方案交配的方法獲得的來源于共同祖先的一群動(dòng)物。祖先的一群動(dòng)物。同一品系的動(dòng)物具有共同的遺傳來源、類似的同一品系的動(dòng)物具有共同的遺傳來源、類似的外貌特征、獨(dú)特的生物學(xué)特性、穩(wěn)定的遺傳外貌特征、獨(dú)特的生物學(xué)特性、穩(wěn)定的遺傳性能性能二品系選擇二品系選擇1近交系動(dòng)物:指采用延續(xù)20代以上兄妹交配或親子交配而培育的純品系動(dòng)物。 基因純合度98.6%99.8% 適用于涉及組織或腫瘤移植的實(shí)驗(yàn). 津白、津白、615、BALB/c、C3H小鼠突變系動(dòng)物:動(dòng)物在生長繁衍過程中,經(jīng)過突變系動(dòng)物:動(dòng)物在生長繁衍過

9、程中,經(jīng)過自然突變或人工定向突變的方法,使其某自然突變或人工定向突變的方法,使其某基因發(fā)生突變并喪失原有的正常功能,該基因發(fā)生突變并喪失原有的正常功能,該突變基因可以世代相傳并堅(jiān)持遺傳基因特突變基因可以世代相傳并堅(jiān)持遺傳基因特性的品系動(dòng)物。性的品系動(dòng)物。無胸腺裸鼠:免疫系統(tǒng)缺陷可接受人類多種無胸腺裸鼠:免疫系統(tǒng)缺陷可接受人類多種癌細(xì)胞移植。癌細(xì)胞移植。免疫毒理學(xué)、化學(xué)致癌作用等研討領(lǐng)域免疫毒理學(xué)、化學(xué)致癌作用等研討領(lǐng)域(2)雜交群動(dòng)物:指兩個(gè)不同近交系之間有目雜交群動(dòng)物:指兩個(gè)不同近交系之間有目的地進(jìn)展交配所產(chǎn)生的第一代動(dòng)物,即雜交的地進(jìn)展交配所產(chǎn)生的第一代動(dòng)物,即雜交第一代動(dòng)物。第一代動(dòng)物。

10、具兩系雙親一切的遺傳特性,雜合程度一致,具兩系雙親一切的遺傳特性,雜合程度一致,個(gè)體差別?。痪邆潆s交優(yōu)勢(shì),生命力強(qiáng),無個(gè)體差別??;具備雜交優(yōu)勢(shì),生命力強(qiáng),無近親衰退景象。近親衰退景象。不能繼續(xù)繁衍育種,因在子二代會(huì)發(fā)生遺傳性不能繼續(xù)繁衍育種,因在子二代會(huì)發(fā)生遺傳性狀分別。狀分別。(3)封鎖群動(dòng)物:指在封鎖群動(dòng)物:指在5年以上不從外部引進(jìn)年以上不從外部引進(jìn)新血緣,僅由同一品系的動(dòng)物在固定場(chǎng)所新血緣,僅由同一品系的動(dòng)物在固定場(chǎng)所保管繁衍的動(dòng)物群保管繁衍的動(dòng)物群. 具有一定程度的遺傳學(xué)差別具有一定程度的遺傳學(xué)差別. 昆明種小鼠、昆明種小鼠、NIH小鼠、小鼠、LACA小鼠、小鼠、SD大鼠、青紫藍(lán)兔、新

11、西蘭兔等均屬封鎖群大鼠、青紫藍(lán)兔、新西蘭兔等均屬封鎖群動(dòng)物動(dòng)物.動(dòng)物品系的遺傳均一性動(dòng)物品系的遺傳均一性 遺傳均一性排序:近交系雜交群遺傳均一性排序:近交系雜交群封鎖群封鎖群 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇:適宜品系、固定品實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇:適宜品系、固定品系系無菌動(dòng)物無菌動(dòng)物GF:指體內(nèi)外均無任何微生物和寄生蟲的:指體內(nèi)外均無任何微生物和寄生蟲的動(dòng)物。是經(jīng)人工剖腹產(chǎn)凈化培育。動(dòng)物。是經(jīng)人工剖腹產(chǎn)凈化培育。悉生動(dòng)物悉生動(dòng)物GN:知菌動(dòng)物,指體內(nèi)帶有知微生物的動(dòng):知菌動(dòng)物,指體內(nèi)帶有知微生物的動(dòng)物。經(jīng)人工有方案地將知菌投入動(dòng)物體內(nèi)。物。經(jīng)人工有方案地將知菌投入動(dòng)物體內(nèi)。三實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物控制的選擇三實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物控制的

12、選擇按照微生物控制分類,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí)按照微生物控制分類,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí)無特定病原體動(dòng)物無特定病原體動(dòng)物SPF:指體內(nèi)無特定的:指體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在的動(dòng)物。來源于微生物和寄生蟲存在的動(dòng)物。來源于GF和和GN,豢養(yǎng)于封鎖的系統(tǒng)中。,豢養(yǎng)于封鎖的系統(tǒng)中。 SPF已成為國際上進(jìn)展毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的規(guī)已成為國際上進(jìn)展毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。清潔動(dòng)物清潔動(dòng)物CL:即最低限制無疾病動(dòng)物,動(dòng):即最低限制無疾病動(dòng)物,動(dòng)物體內(nèi)外不攜帶人畜共患疾病的病原體物體內(nèi)外不攜帶人畜共患疾病的病原體或動(dòng)物傳染病病原體?;筐B(yǎng)于半屏蔽系或動(dòng)物傳染病病原體。豢養(yǎng)于半屏蔽系統(tǒng)。統(tǒng)。四、個(gè)體選擇四、個(gè)體選擇性

13、別:初次實(shí)驗(yàn)雌雄同用;存在差別分開統(tǒng)性別:初次實(shí)驗(yàn)雌雄同用;存在差別分開統(tǒng)計(jì);選敏感性別。計(jì);選敏感性別。年齡和體重:動(dòng)物年齡依實(shí)驗(yàn)類型選擇,取年齡和體重:動(dòng)物年齡依實(shí)驗(yàn)類型選擇,取成年期數(shù)據(jù)。體重可作為判別年齡的目的。成年期數(shù)據(jù)。體重可作為判別年齡的目的。生理形狀:防止激素影響,雌雄分開豢養(yǎng);生理形狀:防止激素影響,雌雄分開豢養(yǎng);繁衍實(shí)驗(yàn)、致畸實(shí)驗(yàn)適時(shí)合籠交配。繁衍實(shí)驗(yàn)、致畸實(shí)驗(yàn)適時(shí)合籠交配。安康情況:用安康動(dòng)物,提早察看確認(rèn)。安康情況:用安康動(dòng)物,提早察看確認(rèn)。五實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理五實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理 動(dòng)物管理:動(dòng)物的接受、順應(yīng)、豢養(yǎng)、鑒動(dòng)物管理:動(dòng)物的接受、順應(yīng)、豢養(yǎng)、鑒別和記錄動(dòng)物來源、處置、其它

14、資料別和記錄動(dòng)物來源、處置、其它資料. 環(huán)境條件管理:氣候溫度、濕度、通風(fēng)、環(huán)境條件管理:氣候溫度、濕度、通風(fēng)、光照、其它條件噪音、氣味、墊料、光照、其它條件噪音、氣味、墊料、群體密度、空間限制、飼料、飲水等群體密度、空間限制、飼料、飲水等. 設(shè)備管理:清潔衛(wèi)生、廢棄物處置、害蟲設(shè)備管理:清潔衛(wèi)生、廢棄物處置、害蟲控制、突發(fā)事件管理控制、突發(fā)事件管理.五、受試物樣品的預(yù)備五、受試物樣品的預(yù)備 了解其化學(xué)構(gòu)造與理化性質(zhì):揮發(fā)性、了解其化學(xué)構(gòu)造與理化性質(zhì):揮發(fā)性、溶解性、穩(wěn)定性;溶解性、穩(wěn)定性; 純度及雜質(zhì)成分;純度及雜質(zhì)成分; 采用同一種同一批號(hào)受試物采用同一種同一批號(hào)受試物; 毒性資料查閱形似

15、化學(xué)物毒性資料查閱形似化學(xué)物; 制備成一定劑型:水溶液、油溶液、混制備成一定劑型:水溶液、油溶液、混懸液懸液.一、體內(nèi)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一、體內(nèi)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)劑量分組劑量分組以獲得劑量以獲得劑量-反響關(guān)系,確認(rèn)受試物反響關(guān)系,確認(rèn)受試物與毒作用的關(guān)系:至少三個(gè)劑量組高、中、與毒作用的關(guān)系:至少三個(gè)劑量組高、中、低;設(shè)對(duì)照組陽性、陰性、未處置對(duì)照、低;設(shè)對(duì)照組陽性、陰性、未處置對(duì)照、歷史性對(duì)照歷史性對(duì)照各組動(dòng)物數(shù):實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮O(shè)計(jì)、統(tǒng)計(jì)學(xué)要求各組動(dòng)物數(shù):實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮O(shè)計(jì)、統(tǒng)計(jì)學(xué)要求實(shí)驗(yàn)期限:由實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮退脛?dòng)物種或品系決實(shí)驗(yàn)期限:由實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮退脛?dòng)物種或品系決議:急毒為一次或議:急毒為一次或24h內(nèi)多次

16、染毒察看內(nèi)多次染毒察看14天,天,亞慢性規(guī)定繼續(xù)至動(dòng)物壽命的亞慢性規(guī)定繼續(xù)至動(dòng)物壽命的10%,慢性實(shí)驗(yàn)、,慢性實(shí)驗(yàn)、致癌實(shí)驗(yàn)為繼續(xù)至動(dòng)物壽命的大部分。致癌實(shí)驗(yàn)為繼續(xù)至動(dòng)物壽命的大部分。六、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要點(diǎn)六、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要點(diǎn)二、體外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)二、體外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 溶解性測(cè)試:在實(shí)驗(yàn)測(cè)試期間,受試物溶解性能溶解性測(cè)試:在實(shí)驗(yàn)測(cè)試期間,受試物溶解性能夠改動(dòng),起始和終了時(shí)評(píng)價(jià)溶解性具有意義;夠改動(dòng),起始和終了時(shí)評(píng)價(jià)溶解性具有意義; 最高劑量引薦:高劑量會(huì)影響浸透壓引發(fā)損傷,最高劑量引薦:高劑量會(huì)影響浸透壓引發(fā)損傷,上限為:動(dòng)物細(xì)胞上限為:動(dòng)物細(xì)胞10mmol/L或或5mg/ml;細(xì)菌實(shí)驗(yàn)細(xì)

17、菌實(shí)驗(yàn)5mg/平板。毒性物應(yīng)有毒效應(yīng)和致死率。平板。毒性物應(yīng)有毒效應(yīng)和致死率。 代謝活化:大鼠預(yù)處置后,取肝組織勻漿為代謝代謝活化:大鼠預(yù)處置后,取肝組織勻漿為代謝活化系統(tǒng)活化系統(tǒng)-S9p124 陽性對(duì)照:劑量反響的直線部分陽性對(duì)照:劑量反響的直線部分 反復(fù):可疑結(jié)果要反復(fù),但非簡單反復(fù)反復(fù):可疑結(jié)果要反復(fù),但非簡單反復(fù)六、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要點(diǎn)六、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要點(diǎn)七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒和處置七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒和處置 盡能夠模擬人接觸毒物的方式盡能夠模擬人接觸毒物的方式 不同途徑的吸收速率為:靜注吸入不同途徑的吸收速率為:靜注吸入 肌注肌注 腹腔注射腹腔注射 皮下注射皮下注射 經(jīng)經(jīng)口口 皮內(nèi)注射皮內(nèi)注射

18、 其他其他一、染毒一、染毒 經(jīng)口染毒:經(jīng)口染毒:1喂飼、喂飼、2灌胃、灌胃、3吞咽膠囊;吞咽膠囊; 經(jīng)呼吸道染毒:經(jīng)呼吸道染毒:1靜式吸入染毒、靜式吸入染毒、2動(dòng)式吸入染毒動(dòng)式吸入染毒 經(jīng)皮膚染毒:經(jīng)皮膚染毒: 注射染毒:尾靜脈、肌注、皮下、腹腔注射染毒:尾靜脈、肌注、皮下、腹腔實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒和處置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒和處置針對(duì)一種外源化學(xué)物,如何選擇染毒方式針對(duì)一種外源化學(xué)物,如何選擇染毒方式?二、生物標(biāo)本采集二、生物標(biāo)本采集 生物標(biāo)本采集:生物標(biāo)本采集:1血液終末、非終末血液終末、非終末采血、采血、2尿液采集、尿液采集、3膽汁采集、膽汁采集、4糞便采集糞便采集. 麻醉:短效、中效、長效麻醉劑運(yùn)用麻醉

19、:短效、中效、長效麻醉劑運(yùn)用-;麻;麻醉過程察看醉過程察看. 安死術(shù):安死術(shù):p129. 病了解剖和樣標(biāo)本留?。翰×私馄屎蜆訕?biāo)本留取:(1大體解剖、大體解剖、2組織病理學(xué)檢測(cè)組織病理學(xué)檢測(cè).實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒和處置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒和處置八、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)根底八、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)根底 統(tǒng)計(jì)學(xué)要點(diǎn):統(tǒng)計(jì)學(xué)要點(diǎn): 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵照原那么:隨機(jī)、反復(fù)、對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵照原那么:隨機(jī)、反復(fù)、對(duì)照. 包括:包括: 1劑量程度數(shù)目及間隔;劑量程度數(shù)目及間隔; 2每個(gè)劑量點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)單位數(shù),實(shí)驗(yàn)單位確定每個(gè)劑量點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)單位數(shù),實(shí)驗(yàn)單位確定要保證樣本的獨(dú)立性、代表性;要保證樣本的獨(dú)立性、代表性; 3對(duì)照設(shè)置;對(duì)照設(shè)置; 4非實(shí)驗(yàn)要素條件的均一性:樣本足夠數(shù)量、非實(shí)驗(yàn)要素條件的均一性:樣本足夠數(shù)量、適當(dāng)反復(fù)、盲法察看等。適當(dāng)反復(fù)、盲法察看等。 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析:方法選擇,可用不同方法處置結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析:方法選擇

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