補骨脂乳膏劑的制備及其質(zhì)量控制

1、補骨脂乳膏劑的制備及其質(zhì)量控制摘要LI的:制備補骨脂乳膏并建立其質(zhì)量標準。方法:加熱回流法提取補骨 脂中主要成分補骨脂素和異補骨脂素，濃縮至浸膏。取處方對應(yīng)量的主藥、乳化劑水相 和油相制得乳膏劑,采用高效液相法測定乳膏中補骨脂素和異補骨脂素的含量，并考察制劑穩(wěn)定 性。結(jié)果:補骨脂素檢測濃度在0.014 5, 0. 362 0 U g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0. 999 9),平均 回收率為98. 20%(RSD=l. 79%, n二6);異補骨脂素檢測濃度在0. 018 8,0.47 0 U g范圍內(nèi) 線性關(guān)系良好(r=0. 999 9),平均回收率為98. 87%, RSD二1. 58%,且

2、制備的補骨脂乳育均勻細膩, 易于涂布，質(zhì)量穩(wěn)定。結(jié)論:補骨脂乳膏的處方及制備工藝合理，質(zhì)量可控，值得推廣,質(zhì)量控 制方法簡便，準確，重現(xiàn)性好,適用于該制劑的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞補骨脂;乳膏;制備;質(zhì)量控制中圖分類號R943文獻標識碼A 文章編號1673-7210 (2010) 06 (a)-071-03The preparation of Fructus Psoraleae Cream and its quality controlWANG Chuanke(Yueyang Vocational Technical College, Yueyang 414000, China)Abstract Ob

3、jective: To prepare Fructus Psoraleae Cream and establish its standard of quality contro1 Methods: Extracted psoralen and isopsoralen by using heating reflux method and condense to a certain volume The oil phase and water phase were prepared according to prescription and merged to make Fructus Psora

4、leae Cream The HPLC method was used to determined the content of psoralen and isopsoralen. Results: The linear range of psoralen was in the range of 0.014 5一0.362 0 u g (r=0. 9999). The average recovery was 98. 20% with a RSD of 1. 79% (nW The linear range of isopsoralen was in the range of 0.018 8一

5、0. 470 0 u g (r=0.999 9) The average recoverywas 98. 87% with a RSD of 158% (n二6) The prepared Cream was even, fine stable and easy to spread Conclusion: The prescription and preparation of Fructus Psoraleae Cream are reasonable and controllable, worth popularizing The method for determinetion is si

6、mple, accurate and reproducible, applicable to the quality control of the preparation.Key Words Fructus Psoraleae; Cream; Preparation; Quality control 白瘢風是一種常見的后天性表皮色素脫失性皮膚病，中醫(yī)稱為"白瘢”、'白 駁風”，好發(fā)于皮膚皺褶及暴露部位,在臨床中屬于慢性、難治的疾病，臨床表現(xiàn)為皮膚上 出現(xiàn)大小不等的圓形或橢圓形的白斑，邊界清晰，邊緣色素較深。該病可發(fā)生于任何年齡、性 別，多發(fā)于40歲以前，我國白瘢風發(fā)病率為1%

7、, 2%,有逐年上升的趨勢1 o因其病因復雜，治療比較困難,其治療的主要LI的是增加皮損中黑色素細胞的數(shù)量，中藥補骨脂別名黑故子，為 豆科植物補骨脂（Psoralea coryl辻olia L.）的干燥成熟果實，性味辛、苦、溫，歸腎、脾經(jīng)， 為中醫(yī)傳統(tǒng)補腎助陽中藥,有溫腎助陽、納氣、止瀉的功效，且有祛白斑增色的作用，常用于 治療口瘢風等皮膚頑疾2-5,臨床應(yīng)用的有口服片劑、膠囊、針劑、酊劑等傳統(tǒng)劑型,均可因 吸收入血而導致全身不良反應(yīng)（視網(wǎng)膜毒性、肝毒性）等6,而外用制劑避免了這些不良反應(yīng)， 成為了補骨脂制劑的主要研究開發(fā)方向，為了開發(fā)更安全有效的外用制劑，本試驗從補骨脂中提 取分離獲得其中主

8、要有效成分補骨脂素和異補骨脂素7-9,通過處方的選擇，制備 了補骨脂乳膏。1儀器與試藥高效液相色譜儀（Agilent 1200LC）,UV檢測器;補骨脂素對照品（中國藥品生物 制品檢定所，批號:110739-200814）,異補骨脂素對照品（中國藥品生物制品檢定所， 批號:110738-200309）,乙醇、中醇均為色譜純，雙重蒸憎水，其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2. 1補骨脂的提取工藝稱取補骨脂藥材20 g,水煎煮3次，每次加入的水量分別為600、500、400 ml, 前2次煎煮的時間各1 h,第3次為45 min,合并3次濾液,過濾,濃縮到100 ml,加 3倍量的9概乙醇，邊加邊攪

9、拌，有沉淀析出，放置24 h,抽濾,濾液回收乙醇至無醇 味，加蒸憎水至足量約600 ml,即得補骨脂提取液,備用。2.2處方與制備2. 2. 1處方補骨脂提取液0. 020 g、十二烷基硫酸鈉0. 200 g、十八醇5. 000 g、白凡士林5. 000 g、羥苯乙酯 0. 008 g、丙二醇 2. 400 go制備取十八醇與口凡士林在水浴上熔化，作為油相,加熱至75?,其他成分也加熱至75?,加入約35 ml的補骨脂，提取濃縮液至水相，與油相混合，攪拌至冷凝，即得。2.3質(zhì)量控制本品為棕色，均勻，細膩的0/W型乳膏。稱取本品5 g,加純化水100 ml,攪勻， 濾過，測得濾液pH值為4, 5

10、。2.4穩(wěn)定性試驗2. 4. 1離心取本品10 g,置離心管中，以4 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心30 min,無出現(xiàn)分層現(xiàn) 象。2. 4. 2 60?耐熱穩(wěn)定性試驗取適量樣品，在60?恒溫培養(yǎng)箱中試驗,6 h內(nèi)無出現(xiàn)分層現(xiàn)象。2.4. 3耐寒穩(wěn)定性試驗取適量樣品，加入試管中，放置于15?冰箱中,24 h后取出，恢復室溫后觀察，無 出現(xiàn)分層現(xiàn)象。2. 4. 4常溫留樣觀察時間為1年,無霉變和油水分離，表明本制劑穩(wěn)定性良好。2. 5刺激性試驗取體質(zhì)量為2. 5, 3. 0 kg健康家兔5只，分別剃去背部兩側(cè)的毛約3 cm2,每天3 次，取0.5 g乳肓均勻涂布在一側(cè)剃毛處，用藥后在2、4、6、1

11、2、24、48、72 h觀 察家兔涂藥側(cè)皮膚與不涂藥側(cè)皮膚，結(jié)果涂藥側(cè)皮膚無紅斑、充血異常變化。2. 6含量測定2. 6. 1色譜條件色譜柱：Zorbax EclipseXDB-C18 (4. 6 mmX 150 mm, 5 口 m),流動相：中醇-水 (55?45):流速:0. 6 ml/min<> 檢測波長：249 nm;柱溫:25?。對照品溶液的制備2. 6. 2. 1補骨脂素對照品溶液的制備精密稱取對照品補骨脂素3. 8 mg,甲醇定 容于10 ml量瓶中。從其中另取0.1 ml, 醇定容于10 ml量瓶中，即得3. 8 ug/ml的補骨脂素對照品溶液。2. 6. 2. 2

12、異補骨脂素對照品溶液的制備精密稱取對照品異補骨脂素8 mg,甲醇 定容于10 ml量瓶中。從其中另取0. 1 ml,甲醇定容于10 ml量瓶中，即得8. 0 Ug/ml的異補骨脂素對照品溶液。2. 6. 3供試品溶液的制備取本品約2.5 g,置100 ml量瓶中，加75 ml甲醇，超聲20 min,迅速水浴30 min,用屮醇定容,取干燥濾紙迅速過濾上清液，精密量取續(xù)濾液5 ml,置50 ml量瓶 中,用流動相定容，搖勻，經(jīng)0. 45 Pm的微孔濾膜過濾，得供試品溶液。2. 6.4系統(tǒng)適應(yīng)性試驗分別取標準曲線制備項下對照品溶液及樣品測定項下供試溶液各10 P 1,注入 色譜儀，記錄色譜圖，見圖

13、1。補骨脂素、異補骨脂素分別于11、12 min左右出峰, 分離良好，峰形對稱?？瞻赘蓴_試驗按處方制備不含補骨脂素、異補骨脂素的陰性樣品，照項下方法制備 陰性樣品供試液，取陰性樣品供溶液在色譜條件下進樣20 P 1,得色譜圖，結(jié)果見圖 1。由圖可見，陰性樣品對樣品的含量測定無干擾。2. 6.6線性關(guān)系考察取對照品貯備液，定量稀釋后分別進樣補骨脂素0.014 4、0. 036 2、0. 072 0、0. 144 0、0.216 0、0. 288 0、0. 362 0 U g,異補骨脂素 0.018 8、0. 047 0、0. 094 0、0. 188 0、0. 282 0、0. 376 0、0

14、470 0 u g。以對照品進樣量(口 g)為橫 坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線,得補骨脂素的線性方程:Yl=6. 091X106X1+2 224. 6 (r=0. 999 9);異補骨脂素線性方程:Y2二6 276X106X2+3 929. 3(r=0. 999 9),表明補骨脂素在 0.014 5, 0. 362 0 ug范圍內(nèi)、異補骨脂素在0.018 & 0. 470 0 ug范圍內(nèi)分別與峰面積呈良好的線 性關(guān)系。2. 6. 7精密度試驗精密吸取供試品溶液20 Ml,注入液相色譜儀，重復進樣5次，分別測定補骨脂 素及異補骨脂素的峰面積,結(jié)果補骨脂素RSD為1. 9%,異

15、補骨脂素RSD為2. 1%,表明 本法精密度良好。2. 6. 8重復性試驗取制成的補骨脂乳膏5份,分別按“2. 6. 3”項下方法制成供試品溶液,樣品含 量測定項下方法測定含量,結(jié)果補骨脂素RSD為2. 4%,異補骨脂素RSD為2. 5%。結(jié) 果表明本方法重復性良好。2. 6. 9穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液20 U1,分別于配制后0、2、4、8、17、26 h,測得色譜 峰面積，計算補骨脂素RSD為1. 3%,異補骨脂素RSD為1. 5%,表明供試品溶液在26 h內(nèi)基本穩(wěn)定。2. 6. 10加樣回收率試驗取已知補骨脂素和異補骨脂素含量的乳膏1 g,精密稱定，共6份,分別準確加入 對照品貯備液

16、2.0、2.5、3.0 ml各2份。按項下制成供試品溶液，分別 進樣20 m,測定，計算回收率，結(jié)果表明，補骨脂素回收率平均值為98. 20%, RSD二1. 79%,異補骨脂素回收率平均值為98. 87%, RSD二1. 58%,見表1和2。表1補骨脂素回收率試驗結(jié)果(n二6)Tab. 1 Recovery test of psoralen(n=6)表2異補骨脂素回收率試驗結(jié)果(n二6)Tab. 2 Recovery test of isopsoralen(n=6)2. 6.11樣品含量測定分別精密吸取3批供試品溶液，各20 u 1,依上述色譜條件測定，結(jié)果見表1。3討論U前國內(nèi)尚未見補骨脂

17、乳膏劑成品上市,本文所得補骨脂乳膏劑具有光潔細膩、涂展性好、不油膩、穩(wěn)定性好、刺激性低等優(yōu)點，具有藥物釋放快和穿透皮膚強的優(yōu)點，主 要用于口瘢風的局部治療，可降低補骨脂制劑不良反應(yīng)的發(fā)生。通過對基質(zhì)的處方和制備工藝的考察結(jié)果發(fā)現(xiàn)，處方中不同乳化劑之間的不同 配比均能夠影響膏體的稠度以及其他各項指標。同時主藥加入順序、攪拌方式、乳化劑 加入順序以及溫度控制等也能夠影響膏體的性狀及穩(wěn)定性。由于補骨脂提取液中的有效成分 補骨脂素和異補骨脂素為脂溶性,所以在制備乳膏制劑的時候，應(yīng)該先加入油相，再與水相混 合。乳膏劑的質(zhì)量控制主要是以基質(zhì)的外觀性狀、穩(wěn)定性和有效成分的含量為考察 指標10,從而對基質(zhì)處方

18、和制備工藝進行綜合篩選，以獲得安全、穩(wěn)定、有效的乳膏 劑。參考文獻1 李娜,楊欽河.淺議白瘢風中醫(yī)病因病機J.遼宇中醫(yī)雜志，2007, 34(7) : 902-903.2 陳驪珠，張墨.口瘢風治療新進展J.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,200& 24(14) :2144- 2145.3 王淑云.補骨脂的藥理作用研究概況J.時珍國醫(yī)國藥,2006, 17(6) : 1081- 1082.4 曹金一，劉京晶,黃文華，等.補骨脂藥理作用與臨床應(yīng)用研究進展J.中藥 藥理與臨床,2008, 24(6) : 89-92.5 林桂海，郭宴華.補骨脂主要藥效學考察J.中華中醫(yī)藥學刊,2007, 25(11) :2347-2348.6jHonigsmann H. Phototherapy for psoriasis J. Clin ExpDermatol, 2001, 26:343-350.7劉樺，白験晶，陳亞云，等.中藥補骨脂化學成分的研究J.中國中藥雜志,2008, 33(12) : 1410-1412.8_Ruan B, Kong LY, Takaya Y, et al. Studies on the chemical constitu