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1、發(fā)酵工程  部分題庫(kù)及答案1、舉出幾例微生物大規(guī)模表達(dá)的產(chǎn)品, 及其產(chǎn)生菌的特點(diǎn)?A.蛋白酶表達(dá)產(chǎn)物一般分泌至胞外,能利用廉價(jià)的氮源,生長(zhǎng)溫度較高,生長(zhǎng)速度快,純化、分離及分析快速;安全性高,得到FDA的批準(zhǔn)的菌種。B.單細(xì)胞蛋白生長(zhǎng)迅速,營(yíng)養(yǎng)要求不高,易培養(yǎng),能利用廉價(jià)的培養(yǎng)基或生產(chǎn)廢物。適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),產(chǎn)量高,質(zhì)量好。安全性高,得到FDA的批準(zhǔn)的菌種。C. 不飽和脂肪酸生長(zhǎng)溫度較低,安全性高,能利用廉價(jià)的碳源,不飽和脂肪酸含量高,D.抗生素生產(chǎn)性能穩(wěn)定,產(chǎn)量高,不產(chǎn)色素,能利用廉價(jià)原料F. 氨基酸    代謝途徑比較清楚,代謝途徑比較

2、簡(jiǎn)單2、工業(yè)化菌種的要求?A能夠利用廉價(jià)的原料,簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基,大量高效地合成產(chǎn)物B有關(guān)合成產(chǎn)物的途徑盡可能地簡(jiǎn)單,或者說(shuō)菌種改造的可操作性要強(qiáng)C. 遺傳性能要相對(duì)穩(wěn)定D. 不易感染它種微生物或噬菌體E. 產(chǎn)生菌及其產(chǎn)物的毒性必須考慮(在分類學(xué)上最好與致病菌無(wú)關(guān))F. 生產(chǎn)特性要符合工藝要求4、討論:微生物(包括動(dòng)、植物)可以生產(chǎn)我們所需的一切產(chǎn)品,但是涉及到工業(yè)化生產(chǎn),對(duì)于某一種特定的產(chǎn)品,為何只有特定的微生物才具有大量表達(dá)的潛力?在不同的環(huán)境條件下,微生物細(xì)胞對(duì)遺傳信息作選擇性的表達(dá),實(shí)現(xiàn)代謝的自動(dòng)調(diào)節(jié)。代謝的協(xié)調(diào)能保證在任何特定時(shí)刻、特定的細(xì)胞空間,只合成必要的酶系(參與代謝的多種酶)和剛

3、夠用的酶量。一旦特定物質(zhì)的合成達(dá)到足夠的量,與這些物質(zhì)合成有關(guān)的酶就不再合成了。并且,已合成的酶的活力受到許多調(diào)節(jié)機(jī)制的控制,以確保新陳代謝全面協(xié)調(diào),、為細(xì)胞的經(jīng)濟(jì)運(yùn)行提供保證。因此,細(xì)胞固有的生產(chǎn)關(guān)系支持細(xì)胞自身的增殖(生產(chǎn)細(xì)胞),不支持(人的)目的產(chǎn)物的過(guò)量生產(chǎn)(生產(chǎn)特定的初級(jí)代謝產(chǎn)物)。而工業(yè)化生產(chǎn)要求特定表達(dá)某種或某類物質(zhì),只有正常代謝被打破,代謝協(xié)調(diào)失常的微生物才能達(dá)到要求5、自然界分離微生物的一般操作步驟?樣品的采取預(yù)處理培養(yǎng)菌落的選擇初篩復(fù)篩性能的鑒定菌種保藏6、從環(huán)境中分離目的微生物時(shí),為何一定要進(jìn)行富集培養(yǎng)?自然界中目的微生物含量很少,非目的微生物種類繁多,進(jìn)行富集培養(yǎng),使目

4、的微生物在最適的環(huán)境下迅速地生長(zhǎng)繁殖,數(shù)量增加,由原來(lái)自然條件下的劣勢(shì)種變成人工環(huán)境下的優(yōu)勢(shì)種,使篩選變得可能。7、菌種選育分子改造的目的?防止菌種退化;解決生產(chǎn)實(shí)際問(wèn)題;提高生產(chǎn)能力;提高產(chǎn)品質(zhì)量;開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品.8、以目前的研究水平,土壤中能夠培養(yǎng)的微生物大概占總數(shù)的多少?什么是16sRNA同源性分析?目前能夠培養(yǎng)的微生物不到總數(shù)的1%。以16sRNA為靶基因,設(shè)計(jì)引物,建立pcr擴(kuò)增體系,再通過(guò)DNA測(cè)序進(jìn)行細(xì)菌同源性分析。9、什么叫自然選育?自然選育在工藝生產(chǎn)中的意義?自然選育就是不經(jīng)人工處理,利用微生物的自然突變進(jìn)行菌種選育的過(guò)程。自然選育在工業(yè)生產(chǎn)上的意義:自然選育可以有效地用于高性能

5、突變株的分離。然選育雖然突變率很低,但卻是工廠保證穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要措施。10、什么是正突變?什么是負(fù)突變?什么是結(jié)構(gòu)類似物?生產(chǎn)上所不希望看到的,表現(xiàn)為菌株的衰退和生產(chǎn)質(zhì)量的下降,這種突變成為負(fù)突變。生產(chǎn)上希望看到的,對(duì)生產(chǎn)有利,這種突變成為正突變。結(jié)構(gòu)類似物:在化學(xué)和空間結(jié)構(gòu)上和代謝的中間物(終產(chǎn)物)相似,因而在代謝調(diào)節(jié)方面可以代替代謝中間物(終產(chǎn)物)的功能,但細(xì)胞不能以其作為自身的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。發(fā)酵工程與工藝學(xué)試題庫(kù)及答案 10-202008-06-16 08:36:11 1 樓11、什么是誘變育種?常用的誘變劑有哪些?誘變育種是指用物理、化學(xué)因素誘導(dǎo)植物的遺傳特性發(fā)生變異,再?gòu)淖儺惾?/p>

6、體中選擇符合人們某種要求的單株,進(jìn)而培育成新的品種或種質(zhì)的育種方法。誘變劑有兩大類:物理誘變劑和化學(xué)誘變劑。常用的物理誘變劑有紫外線、x射線、射線(如Co60等)、等離子、快中子、射線、射線、超聲波等。常用的化學(xué)誘變劑有堿基類似物、烷化劑、羥胺、吖定類化合物等。12、什么是基因的重組?什么是基因的直接進(jìn)化?二者有何區(qū)別?基因的重組:是由于不同DNA鏈的斷裂和連接而產(chǎn)生DNA片段的交換和重新組合,形成新DNA分子的過(guò)程基因的直接進(jìn)化:在分子水平上,對(duì)目標(biāo)基因直接處理,然后通過(guò)高通量的篩選方法,提高目標(biāo)蛋白的性能。基因的直接進(jìn)化,可使已有基因獲得新的特性,可獲得自然界中不存在的基因,可解決許多新的

7、理論和應(yīng)用問(wèn)題13、什么是培養(yǎng)基?發(fā)酵培養(yǎng)基的特點(diǎn)和要求?   培養(yǎng)基:廣義上講培養(yǎng)基是指一切可供微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的一組營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和原料。同時(shí)培養(yǎng)基也為微生物培養(yǎng)提供除營(yíng)養(yǎng)外的其它所必須的條件。培養(yǎng)基能夠滿足產(chǎn)物最經(jīng)濟(jì)的合成。發(fā)酵后所形成的副產(chǎn)物盡可能的少。培養(yǎng)基的原料應(yīng)因地制宜,價(jià)格低廉;且性能穩(wěn)定,資源豐富,便于采購(gòu)運(yùn),適合大規(guī)模儲(chǔ)藏,能保證生產(chǎn)上的供應(yīng)。/所選用的培養(yǎng)基應(yīng)能滿足總體工藝的要求,如不應(yīng)該影響通氣、提取、純化及廢物處理等。必須提供合成微生物細(xì)胞和發(fā)酵產(chǎn)物的基本成分。有利于減少培養(yǎng)基原料的單耗,即提高單位營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)所合成產(chǎn)物數(shù)量或最大產(chǎn)率。有利于提高培養(yǎng)基

8、和產(chǎn)物的濃度,以提高單位容積發(fā)酵罐的生產(chǎn)能力。有利于提高產(chǎn)物的合成速度,縮短發(fā)酵周期。所用原料盡可能減少對(duì)發(fā)酵過(guò)程中通氣攪拌的影響,利于提高氧的利用率,降低能耗。14、用的碳源有哪些?常用的糖類有哪些,各自有何特點(diǎn)?碳源:糖類(淀粉、葡萄糖、蔗糖等)、油脂(動(dòng)、植物油)、有機(jī)酸(琥珀酸、檸檬酸、乳酸、乙酸等)和低碳醇(甲醇、乙醇等)。葡萄糖,所有的微生物都能利用葡萄糖,但是會(huì)引起葡萄糖效應(yīng)糖蜜,是制糖生產(chǎn)時(shí)的結(jié)晶母液,它是制糖工業(yè)的副產(chǎn)物。主要含有蔗糖,總糖可達(dá)50%75%。一般糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。除糖份外,含有較多的雜質(zhì),其中有些是有用的,但是許多都會(huì)對(duì)發(fā)酵產(chǎn)生不利的影響,需要

9、進(jìn)行預(yù)處理。淀粉、糊精,缺點(diǎn):難利用、發(fā)酵液比較稠、一般>2.0%時(shí)加入一定的-淀粉酶。成分比較復(fù)雜,有直鏈淀粉和支鏈淀粉等等。優(yōu)點(diǎn):來(lái)源廣泛、價(jià)格低,可以解除葡萄糖效應(yīng)。15、什么是生理性酸性物質(zhì)?什么是生理性堿性物質(zhì)?經(jīng)微生物生理作用(代謝)后能形成酸性物質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)物叫生理酸性物質(zhì),若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)物稱為生理堿性物質(zhì)16、常用的無(wú)機(jī)氮源和有機(jī)氮源有哪些?有機(jī)氮源在發(fā)酵培養(yǎng)基中的作用?常用的有機(jī)氮源有花生餅粉、黃豆餅粉、酵母粉、蛋白胨等;常用的無(wú)機(jī)氮源有氨水、銨鹽和硝酸鹽。有機(jī)氮源在發(fā)酵培養(yǎng)基中的作用有:除提供氮源外,有些有機(jī)氮源還提供大量的無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子。誘導(dǎo)某些酶的

10、產(chǎn)生。17、什么是前體?前體添加的方式?前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中,能直接彼微生物在生物合成過(guò)程中合成到產(chǎn)物物分子中去,而其自身的結(jié)構(gòu)并沒(méi)有多大變化,但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。前體使用時(shí)普遍采用流加的方法。18、什么是生長(zhǎng)因子?生長(zhǎng)因子的來(lái)源?凡是微生物生長(zhǎng)不可缺少而細(xì)胞自身不能合成的微量的有機(jī)物質(zhì),如氨基酸、嘌呤、嘧啶、維生素等均稱生長(zhǎng)因子。有機(jī)氮源是這些生長(zhǎng)因子的重要來(lái)源19、什么是產(chǎn)物促進(jìn)劑?產(chǎn)物促進(jìn)劑舉例?是指那些非細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)物,又非前體,但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。20、什么是理論轉(zhuǎn)化率?什么是實(shí)際轉(zhuǎn)化率?理論轉(zhuǎn)化率是指理想狀態(tài)下根據(jù)微生物的代謝途

11、徑進(jìn)行物料衡算,所得出的轉(zhuǎn)化率的大小。實(shí)際轉(zhuǎn)化率是指實(shí)際發(fā)酵過(guò)程中轉(zhuǎn)化率的大小發(fā)酵工程與工藝學(xué)試題庫(kù)及答案 20-302008-06-16 08:51:03 2 樓21、培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的一般步驟?   1.根據(jù)前人的經(jīng)驗(yàn)和培養(yǎng)基成分確定時(shí)一些必須考慮的問(wèn)題,初步確定可能的培養(yǎng)基成分;2.通過(guò)單因子實(shí)驗(yàn)最終確定出最為適宜的培養(yǎng)基成分;3.當(dāng)培養(yǎng)基成分確定后,剩下的問(wèn)題就是各成分最適的濃度,由于培養(yǎng)基成分很多,為減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)常采用一些合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。22、培養(yǎng)基成分選擇考慮的問(wèn)題?1.菌種的同化能力2.代謝的阻遏和誘導(dǎo)3.合適的C、N比4.pH的要求23、讀書報(bào)告:舉

12、例說(shuō)明培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的方法與步驟?24、討論:培養(yǎng)基優(yōu)化在發(fā)酵優(yōu)化控制中的作用與地位?發(fā)酵優(yōu)化控制分兩個(gè)階段:第一階段控制菌體的生長(zhǎng),目的是使長(zhǎng)好的菌體能處在最佳的產(chǎn)物合成狀態(tài)。培養(yǎng)基優(yōu)化應(yīng)該保證菌體快速生長(zhǎng),有利于產(chǎn)物合成和分泌的酶系開(kāi)啟,而不利于產(chǎn)物合成酶系的關(guān)閉,處于最佳的產(chǎn)物合成狀態(tài),并且副產(chǎn)物合成和分泌的酶系盡可能的少開(kāi)啟第二階段控控制產(chǎn)物的合成。該階段,培養(yǎng)基優(yōu)化應(yīng)使產(chǎn)物合成能較長(zhǎng)時(shí)間保持在最大合成速度。副產(chǎn)物的的合成速率盡可能小。25、什么是種子的擴(kuò)大培養(yǎng)?種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后,再經(jīng)過(guò)扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),最終獲

13、得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過(guò)程。26.種子擴(kuò)大培養(yǎng)的目的與要求?種子擴(kuò)培的目的:接種量的需要,菌種的馴化,縮短發(fā)酵時(shí)間、保證生產(chǎn)水平種子的要求:總量及濃度能滿足要求,生理狀況穩(wěn)定,個(gè)體與群體,活力強(qiáng),移種至發(fā)酵后,能夠迅速生長(zhǎng),無(wú)雜菌污染27、種子擴(kuò)大培養(yǎng)的一般步驟?休眠孢子母斜面活化搖瓶種子或茄子瓶斜面或固體培養(yǎng)基孢子一級(jí)種子罐二級(jí)種子罐發(fā)酵罐28、在大規(guī)模發(fā)酵的種子制備過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)室階段和生產(chǎn)車間階段在培養(yǎng)基和培養(yǎng)物選擇上各有何特點(diǎn)?實(shí)驗(yàn)室階段培養(yǎng)物選擇的原則:種子能擴(kuò)培到一定的量和質(zhì),獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的孢子/菌體。培養(yǎng)基的選擇應(yīng)該是有利于菌體的生長(zhǎng),對(duì)孢子培養(yǎng)基應(yīng)該是有利于孢子的生長(zhǎng)。在原

14、料方面,實(shí)驗(yàn)室種子培養(yǎng)階段,規(guī)模一般比較小,因此為了保證培養(yǎng)基的質(zhì)量,培養(yǎng)基的原料一般都比較精細(xì)。生產(chǎn)車間階段培養(yǎng)物的選擇原則最終一般都是獲得一定數(shù)量的菌絲體。培養(yǎng)基選擇首先考慮的是有利于孢子的發(fā)育和菌體的生長(zhǎng),所以營(yíng)養(yǎng)要比發(fā)酵培養(yǎng)基豐富。在原料方面:不如實(shí)驗(yàn)室階段那么精細(xì),而是基本接近于發(fā)酵培養(yǎng)基,這有兩個(gè)方面的原因: 一是成本二是馴化29、什么是接種量?對(duì)于細(xì)菌、放線菌及霉菌常用的接種量是多少?接種量移入種子的體積/接種后培養(yǎng)液的體積細(xì)菌5、放線菌20 霉菌1030 什么是發(fā)酵級(jí)數(shù)?發(fā)酵級(jí)數(shù)對(duì)發(fā)酵有何影響,影響發(fā)酵級(jí)數(shù)的因素有哪些?一般由菌絲體培養(yǎng)開(kāi)始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù),但有時(shí),工廠從第一級(jí)種子

15、罐開(kāi)始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)發(fā)酵級(jí)數(shù)對(duì)發(fā)酵影響:1.種子級(jí)數(shù)少,可簡(jiǎn)化工藝和控制,減少染菌機(jī)會(huì)2.種子級(jí)數(shù)太少,接種量小,發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng),降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率,增加染菌機(jī)會(huì)3.級(jí)數(shù)大,難控制、易染菌、易變異,管理困難,一般2-4級(jí)。4.在發(fā)酵產(chǎn)品的放大中,反應(yīng)級(jí)數(shù)的確定是非常重要的一個(gè)方面影響發(fā)酵級(jí)數(shù)的因素:(1)菌種生長(zhǎng)特性,孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度;(2) 發(fā)酵規(guī)模.(3)工藝要求.(4)接種量的影響.發(fā)酵工程與工藝學(xué)試題庫(kù)及答案 30-402008-06-16 08:52:33 3 樓31、什么是種齡?事宜種齡確定的依據(jù)?種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開(kāi)始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。原則

16、:對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末,細(xì)胞活力強(qiáng),菌體濃度相對(duì)較大,但是最終由實(shí)驗(yàn)結(jié)果定。32、讀書報(bào)告:結(jié)合具體的產(chǎn)品理解種子質(zhì)量控制的方法,以及認(rèn)識(shí)種子質(zhì)量對(duì)發(fā)酵的影響?影響斜面種子質(zhì)量的因素:(1)原材料質(zhì)量,水質(zhì),培養(yǎng)基pH.(2)滅菌條件,(3)接種量,(4)溫度,通風(fēng)、(5)培養(yǎng)時(shí)間(6)有害氣體或揮發(fā)物(7) 冷藏條件種子質(zhì)量好:1. 縮短發(fā)酵時(shí)間、保證生產(chǎn)水平. 2. 無(wú)雜菌污染. 3移種至發(fā)酵后,能夠迅速生長(zhǎng).4.泡末產(chǎn)生少. 5.產(chǎn)物生成速率大. 6.副產(chǎn)物合成少. 7.對(duì)下游分離純化有利33、接種、倒種、雙種?接種:接入種子罐后直接移種到發(fā)酵罐。雙種:兩個(gè)種子罐種子接種到一個(gè)發(fā)酵罐中。倒種:一

17、部分種子來(lái)源于種子罐,一部分來(lái)源于發(fā)酵罐。34、什么是菌體的生長(zhǎng)比速?產(chǎn)物的形成比速?基質(zhì)的消耗比速?維持消耗?菌體的比生長(zhǎng)速率:?jiǎn)挝恢亓康木w瞬時(shí)增量=(dx/dt)/x;單位為1/h,其中x菌體濃度(g/L )產(chǎn)物的形成比速:?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)單位菌體形成產(chǎn)物(菌體)的量=(dp/dt)/x,;單位為1/h,其中p產(chǎn)物濃度(g/L )基質(zhì)的比消耗速率:單位時(shí)間內(nèi)單位菌體消耗基質(zhì)的量  =(ds/dt)/x;單位為1/h,其中s底物濃度(g/L )35、什么是Monod方程其使用條件如何?各參數(shù)的意義與求解?當(dāng)培養(yǎng)基中不存在抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)時(shí),細(xì)胞的生長(zhǎng)速率與基質(zhì)濃度關(guān)系(Monod方程

18、式)如下:=max S/(Ks+ S):菌體的生長(zhǎng)比速. S:限制性基質(zhì)濃度. Ks:半飽和常數(shù). max: 最大比生長(zhǎng)速度Monod方程的參數(shù)求解(雙倒數(shù)法):將Monod方程取倒數(shù)可得:1/=1/max+ Ks/max S或S/= S/max+ Ks/max這樣通過(guò)測(cè)定不同限制性基質(zhì)濃度下,微生物的比生長(zhǎng)速度,就可以通過(guò)回歸分析計(jì)算出Monod方程的兩個(gè)參數(shù)。36、什么是初級(jí)代謝產(chǎn)物?什么是次級(jí)代謝產(chǎn)物?初級(jí)代謝產(chǎn)物是指微生物產(chǎn)生的,生長(zhǎng)和繁殖所必需的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、核酸等。次級(jí)代謝產(chǎn)物是指由微生物產(chǎn)生的,與微生物生長(zhǎng)、繁殖無(wú)關(guān)的一類物質(zhì)。37、什么是一類發(fā)酵?二類發(fā)酵?三類發(fā)酵?一類發(fā)酵

19、:產(chǎn)物形成與底物利用直接相關(guān),為生長(zhǎng)聯(lián)系型,又稱簡(jiǎn)單發(fā)酵型,產(chǎn)物直接由碳源代謝而來(lái),產(chǎn)物生成速度的變化與微生物對(duì)碳源利用速度的變化是平行的,產(chǎn)物生成與微生物的生長(zhǎng)也是平行的。在這些發(fā)酵過(guò)程中,菌體的生長(zhǎng)、基質(zhì)的消耗、產(chǎn)物的生成三個(gè)速度都有一個(gè)高峰,三高峰幾乎同時(shí)出現(xiàn)。二類發(fā)酵:產(chǎn)物形成與底物利用間接相關(guān),為部分生長(zhǎng)聯(lián)系型,又稱中間發(fā)酵型,產(chǎn)物不是碳源的直接氧化產(chǎn)物,而是菌體代謝的主流產(chǎn)物。它的特點(diǎn)是在發(fā)酵的第一時(shí)期碳源大量消耗用于菌體的迅速增長(zhǎng)而產(chǎn)物的形成很少或全無(wú),第二時(shí)期碳源大量消耗用于產(chǎn)物的高速合成及菌體的生長(zhǎng)。三類發(fā)酵:產(chǎn)物形成與底物利用不相關(guān),為非生長(zhǎng)聯(lián)系型,又稱復(fù)雜發(fā)酵型,產(chǎn)物的生

20、成在菌體生長(zhǎng)和基質(zhì)消耗完以后才開(kāi)始,與菌體生長(zhǎng)不相關(guān),與基質(zhì)消耗無(wú)直接關(guān)系,所形成的產(chǎn)物為次級(jí)代謝產(chǎn)物。38、什么是連續(xù)培養(yǎng)?什么是連續(xù)培養(yǎng)的稀釋率?由于新鮮培養(yǎng)基不斷補(bǔ)充,所以不會(huì)發(fā)生營(yíng)養(yǎng)物的枯竭,另一方面,發(fā)酵液不斷取出,發(fā)酵罐內(nèi)的微生物始終處于旺盛的指數(shù)生長(zhǎng)期,罐內(nèi)細(xì)胞濃度X、比生長(zhǎng)速率、以及t, pH等都保持恒定。稀釋率(D):補(bǔ)料速度與反應(yīng)器體積的比值(h-1)39、解釋連續(xù)培養(yǎng)富集微生物的原理?菌的積累速率=生長(zhǎng)速率-流出速率,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基,使目的菌的流出速率<生長(zhǎng)速率,雜菌的流出速率>生長(zhǎng)速率,就起到富集作用40、何氧容易成為好氧發(fā)酵的限制性因素?氧是需氧微生物生長(zhǎng)所必

21、需的。氧往往容易成為控制因素,是因?yàn)檠踉谒械娜芙舛群艿停囵B(yǎng)基因含有大量的有機(jī)和無(wú)機(jī)物質(zhì),氧的溶解度比水中還要更低。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期即使發(fā)酵液中的氧濃度達(dá)到飽和,若此時(shí)終止供氧,發(fā)酵液中的溶氧可在幾分鐘內(nèi)全部耗盡,使溶氧成為控制因素。發(fā)酵工程.部分題庫(kù)及答案241、臨界溶氧濃度、氧飽和度的概念?臨界氧濃度:CCr臨界氧濃度:指不影響菌的呼吸所允許的最低氧濃度。氧飽和度:發(fā)酵液中氧的濃度/臨界溶氧溶度飽和溶氧濃度:在一定溫度和壓力下,空氣中的氧在水中的溶解度。(mol/m3)42、影響微生物需氧的因素有哪些?細(xì)胞濃度直接影響培養(yǎng)液的攝氧率,在分批發(fā)酵中攝氧率變化很大,不同生長(zhǎng)階段需氧不同,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)

22、后期達(dá)最大值。培養(yǎng)基的成分和濃度顯著影響微生物的攝氧率,碳源種類對(duì)細(xì)胞的需氧量有很大影響,一般葡萄糖的利用速度比其他的糖要快。43、發(fā)酵液中的體積氧傳遞方程?其中Kla的物理意義是什么?以單位體積的液體中所具有的氧的傳遞面積為 a (m2/m3)OTR=KL (C* CL )KL以氧濃度為推動(dòng)力的容積氧傳遞系數(shù),反映了設(shè)備的供氧能力 44、如何調(diào)節(jié)搖瓶發(fā)酵的供氧水平?往復(fù),頻率80-120分/次,振幅 8cm旋轉(zhuǎn),偏心距轉(zhuǎn)速250rpm裝液量,一般取1/10左右:250ml          &

23、#160;  15-25 ml500ml                30 ml750ml                80 ml45、如何調(diào)節(jié)通氣攪拌發(fā)酵罐的供氧水平?一般認(rèn)為,發(fā)酵初期較大的通風(fēng)和攪拌而產(chǎn)生過(guò)大的剪切力,對(duì)菌體的生長(zhǎng)有時(shí)會(huì)產(chǎn)生不利的影響,所以有時(shí)發(fā)酵初期采

24、用小通風(fēng),停攪拌,不但有利于降低能耗,而且在工藝上也是必須的。但是通氣增大的時(shí)間一定要把握好。46、氧的供需研究與反應(yīng)器設(shè)計(jì)與放大的關(guān)系?發(fā)酵過(guò)程放大困難的原因就在放大時(shí)不可能同時(shí)做到幾何相似、流體運(yùn)動(dòng)學(xué)相似和流體動(dòng)力學(xué)相似,當(dāng)在小試研究時(shí)某一個(gè)對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)生影響的重要因素沒(méi)有被觀察到,而這個(gè)因素恰恰在放大時(shí)成為關(guān)鍵因子時(shí),就會(huì)造成整個(gè)發(fā)酵過(guò)程的失敗(供氧、混合、剪切)。47、發(fā)酵過(guò)程糖代謝、氮代謝有什么規(guī)律,為什么?糖代謝:特別是快速利用的糖,分解成小分子酸、醇,使pH下降。糖缺乏,pH上升,是補(bǔ)料的標(biāo)志之一氮代謝:氨基酸被利用后產(chǎn)生NH3 ,pH會(huì)上升;尿素被分解成NH3,pH上升。微生物生長(zhǎng)

25、和產(chǎn)物合成與糖代謝有密切關(guān)系。糖的消耗反映產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)繁殖情況,反映產(chǎn)物合成的活力。菌體生長(zhǎng)旺盛糖耗一定快,殘?zhí)且簿徒档偷每焱ㄟ^(guò)糖含量的測(cè)定,可以控制菌體生長(zhǎng)速率,可控制補(bǔ)糖來(lái)調(diào)節(jié)pH,促進(jìn)產(chǎn)物合成,不致于盲目補(bǔ)糖,造成發(fā)酵不正常。氮利用快慢可分析出菌體生長(zhǎng)情況,含氮產(chǎn)物合成情況。但是氮源太多會(huì)促使菌體大量生長(zhǎng)。有些產(chǎn)物合成受到過(guò)量銨離子的抑制,因此必須控制適量的氮。通過(guò)氨基氮和氨氮的分析可控制發(fā)酵過(guò)程,適時(shí)采取補(bǔ)氨措施。發(fā)酵后期氨基氮回升,這時(shí)就要放罐,否則影響提取過(guò)程。48、發(fā)酵過(guò)程為什么要補(bǔ)料?補(bǔ)些什么?在分批培養(yǎng)過(guò)程中補(bǔ)入新鮮的料液,以克服營(yíng)養(yǎng)不足而導(dǎo)致的發(fā)酵過(guò)早結(jié)束的缺點(diǎn)。在這樣一種系統(tǒng)中可以維持低的基質(zhì)濃度,避免快速利用碳源的阻遏效應(yīng);可以通過(guò)補(bǔ)

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