導痰湯對大鼠非酒精性脂肪性肝炎的治療作用

1、導痰湯對大鼠非酒精性脂肪性肝炎的治療作用         08-08-19 11:37:00     編輯：studa20               作者：應豪 陳漢誠 李凌 周文紅【摘要】  目的 觀察導痰湯對實驗性大鼠非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的影響，并探討其作用機理。 方法 采用高脂飲食復制大鼠NASH模型，以導痰湯

2、低、中、高劑量分別進行干預，然后觀察動物一般情況，計算肝指數(shù)，觀察肝組織脂肪變性及炎癥活動度，并查血清學指標ALT、甘油三脂（TG）、總膽固醇（TCH）、高密度脂蛋白（HCL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、腫瘤壞死因子-(TNF-)，肝組織超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。結(jié)果 與空白模型組相比，各劑量治療組大鼠肝指數(shù)明顯降低(P<0.05)，血清ALT及TG、TCH、LDL- C也有顯著降低(P<0.01P<0.05)，但HCL-C無明顯變化(P>0.05)，能夠升高肝組織SOD活性(P<0.01P<0.05)，降低MDA含量(P<0.

3、05)，血清TNF-含量顯著減少(P<0.01)，且表現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。各治療組大鼠肝臟炎癥活動度也顯著改善(P<0.05)，但量效關(guān)系不明顯。 結(jié)論 導痰湯有明顯防治NASH作用，其機制在于減輕脂類在肝臟的積聚，緩解氧化應激，降低炎癥反應，保護肝細胞等作用有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】  非酒精性脂肪性肝炎 大鼠 導痰湯 動物實驗【Abstract】  Objective  To observe the influence of Daotan decoction on nonalcoholic steatohepatitis(NASH) in rats, an

4、d study their relative mechanisms. Methods  After NASH in rats was induced by high fat diet, the rats of therapeutic groups were treated with small、middle and high dose Daotan decoction respectively. Then their general condition was observed、 liver index was computed, and fatty degeneration and

5、 inflammatory activity of liver were observed . The  ALT、triglyceride(TG),total cholesterol（TCH）,low density lipoprotein（HCL-C）,high density lipoprotei（LDL-C）,TNF- were determined respectively. The SOD ,MDA in liver were determined too. Results  The liver index of therapeutic groups were m

6、arkedly reduced respectively compared with those of model group（P<0.05）. ALT, TG, TCH and LDL- C were markedly reduced too (P<0.01P<0.05). But HCL-C of therapeutic groups were not significant different from that of model groups（P>0.05）. The activities of SOD in liver were elevated and th

7、e content level of MDA in liver was decreased in all therapeutic groups(P<0.01P<0.05). the content of TNF- in serum in all therapeutic groups showed significantly decrease by comparison with model group (P<0.01), and there were significant relations of quantity and effect. The inflammation

8、of liver of therapeutic groups were improved better than those in model group too（P<0.05）,but there were not significant relations of quantity and effect. Conclusion  Daotan decoction has shown definite effect on NASH. The possible mechanism is its effect of alleviation of fat accumulation、

9、lipid antioxidation   , anti-inflammation and hepatocyte protection.【Key words】  Nonalcoholic steatohepatitis  Rat  Daotan decoction  Animal experiment   非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease)是指與飲酒、嗜肝病毒感染等明確的病因無關(guān)的肝臟實質(zhì)細胞脂肪變性的一類肝病，單純的脂肪變性預后良好，不進展至肝硬化；但

10、一些NASH（nonalcoholic steatohepatitis）患者則伴有炎癥壞死、纖維化或肝硬化的脂肪變性，可能進展至肝硬化，甚至引起肝癌，所以應對NASH進行及時有效的治療，作者于2006年1至6月建立大鼠NASH模型，采用導痰湯治療，取得明顯的療效，現(xiàn)報告如下。1  材料與方法1.1  試劑及設(shè)備  (1)膽固醇（國產(chǎn)，由廣州威佳科技有限公司提供），豬油為市售，血清學指標用Olymbus全自動生化儀測定。(2)導痰湯：制半夏6g、膽南星3g、枳實3g、茯苓3g、橘紅3g、生甘草2g、生姜3g，用自動中藥煎煮機制成煎劑，含生藥1g/ml，備用。(3)實

11、驗動物：采用健康、清潔級質(zhì)量標準的雄性SD大鼠52只（由廣州中醫(yī)藥大學提供），體重180200g，分籠喂養(yǎng)。1.2  實驗方法  (1)動物分組：實驗大鼠用普通飼料正常喂養(yǎng)1周后，隨機分為5組， A組為正常對照組，B組為模型組，C組為治療組，其中導痰湯低劑量組(C1組)，導痰湯中劑量組(C2組)，導痰湯高劑量組(C3組)，其中B組為12只，其余均為10只。(2)模型建立及給藥：參考鐘嵐等報道的方法復制出大鼠NASH模型，4周后驗證造模成功后，B組及治療組繼用高脂飼料喂養(yǎng)，同時B組給予生理鹽水1ml/100g灌胃治療，1次/d；治療組給予導痰湯灌胃治療1次/d，其中C1組0.

12、5ml/100g，C2組1.0ml/100g，C3組1.5 ml/100g。C2組劑量相當于成人常規(guī)劑量的1/70。(3)取材：給藥8周后(即實驗12周)，禁食12h，以2%戊巴比妥鈉溶液麻醉所有動物，迅速按常規(guī)分離血清及留取肝組織。1.3  指標檢測  （1）一般情況：動物飼養(yǎng)過程中的精神狀態(tài)，活動情況，毛發(fā)光澤，食欲，大小便情況等，稱體重/周。（2）肝臟標本大體觀：稱重并觀察肝臟的大小、色澤、質(zhì)地、切面情況等。(3) 血清生化測定： 各組大鼠以股動脈放血法處死。取血做各項血清學檢查，用全自動生化分析儀測定血清ALT、TG、TCH、HDL-C、LDL-C，按試劑盒操作說明

13、測定TNF-的含量。（4） 肝勻漿生化測定：取右葉肝組織1g制成10%肝勻漿,按試劑盒說明書測定SOD、MDA含量。（5）肝臟組織病理觀察：處死后立即取肝，稱重后中性福爾馬林固定，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察，評估脂肪變性和炎癥活動程度，肝細胞脂肪變性程度，按祁培宏等方法分級：炎癥活動度計分標準為匯管區(qū)炎癥(P)，小葉內(nèi)炎癥(L)，碎屑樣壞死(PN)，橋接壞死(BN)4項，每項根據(jù)病變程度分別計14分，因為PN、BN嚴重度與預后直接相關(guān)，因而計分2倍于其他病變，計分公式為P+L+2PN+2BN。1.4  統(tǒng)計學處理  計量資料以(x±s)形式表示，用t檢驗分析，等級資料用Radit分析，采用SPSS統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，