石斛中總生物堿的含量測(cè)定方法研究

1、24=基層中藥雜志2001年第15卷第3期PrimaryournalofChineseMateriaMedica石斛中總生物堿的含量測(cè)定方法研究徐寧(安徽省安慶衛(wèi)生學(xué)校*246003)關(guān)鍵詞石斛總生物堿含量UV石斛*別名吊蘭花黃草*為蘭科植物環(huán)草石斛DendlobzumloddzgeszzRolfe.馬鞭石斛Dendlobzumfzmblzatumook.var.oCulatumook.鐵皮石斛DendlobzumCondzdumWall.exLindl.黃草石斛DendlobzumChlsanthumWall.金釵石斛DendlobzumnobzleLindl.的新鮮或干燥莖O成分:金釵石斛

2、莖含生物堿*主要為石斛堿(dendrobine)*石斛次堿(nobilonine)*6-羥基石斛堿等O選用酸性染料分光光度法*在p4.5緩沖液中*石斛堿鹽的陽(yáng)離子與溴甲酚綠陰離子結(jié)合成離子對(duì)并定量被氯仿提取*再加堿堿化*根據(jù)定量釋放出的溴甲酚綠在一定波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度O1實(shí)驗(yàn)材料和試劑儀器1.1石斛藥材樣品由本校生藥標(biāo)本室提供并鑒定1.2p4.5緩沖溶液:0.2M鄰苯二甲酸氫鉀(p4.0)*用0.2M氫氧化納調(diào)至p4.5;0.04%溴甲酚綠溶液:稱取溴甲酚綠40.0mg*加100mlp4.5緩沖溶液溶解*濾過即得;0.01N氫氧化鈉無水乙醇溶液*氯仿*無水乙醇(以上均為國(guó)產(chǎn)分析試劑)O1.372

3、1型分光光度計(jì)*上海第三分析儀器廠O2標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取石斛堿1.00mg置100ml容量瓶中加氯仿至刻度O精密量取1.02.03.04.05.0ml分別置分液漏斗中*用氯仿準(zhǔn)確稀釋至10.0ml加入p4.5緩沖液5.0ml和0.04%溴甲酚綠溶液1.0ml*劇烈振搖3min*靜置30min*氯仿層經(jīng)氯仿浸泡處理并干燥后的藥棉濾過*取續(xù)濾液6.0ml加0.01N氫氧化鈉無水乙醇液1.0ml搖勻O以氯仿10.0ml同樣操作*做空白對(duì)照O于波長(zhǎng)620nm處分別測(cè)得吸收度見表1O表1石斛堿濃度與溴甲酚綠吸收度的關(guān)系石斛堿量(pg/10ml)1020304050吸收度0.0790.1760.2530.3

4、430.415以石斛堿量為橫坐標(biāo)*吸收度縱坐標(biāo)*石斛堿量在1*5pg/10ml范圍內(nèi)符合比爾定律*見圖1O圖1石斛堿吸收標(biāo)準(zhǔn)曲線圖3顯色穩(wěn)定性按 樣品測(cè)定 項(xiàng)上操作*于氯仿提液加堿釋放染料后*間隔53060110170min測(cè)其吸收度結(jié)果如表2O表2放置時(shí)間(min)對(duì)溴甲酚綠吸收度的影響石斛堿量(pg/10ml)即測(cè)53060110170100.0770.0770.0760.0710.0460.036200.1610.1640.1610.1550.1220.114300.2460.2440.2370.2330.2080.206加堿后30min以內(nèi)基本穩(wěn)定*故應(yīng)及時(shí)測(cè)定O4樣品測(cè)定精密稱取石斛

5、粉(60目)0.500g*用適量氨水浸濕密塞放置30min*精密加入氯仿1000ml稱重*置水溶回流加熱2h*冷后稱重;補(bǔ)充氯仿達(dá)原重量*過濾*精密吸取續(xù)濾液1.0ml*置10ml容量瓶中*加氯仿至刻度搖勻*從中吸取2.0ml置25ml容量瓶中*加氯仿稀釋至刻度*搖勻*為樣品試液O精密吸取樣品試液10.0ml*同法加入緩沖溶液及溴甲酚綠試液*顯色后*于620mm處測(cè)吸收度*并以石斛堿標(biāo)準(zhǔn)溶液(25mg ml-1)2.0ml置25ml容量瓶中*加氯仿稀釋至刻度*再準(zhǔn)確吸收10ml同法顯色*測(cè)吸收度*按標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法計(jì)算總生物堿含量(以石斛堿計(jì)算)計(jì)算公式如下:總生物堿含量%=樣品標(biāo)準(zhǔn)品A>&

6、gt;100%5討論與小結(jié)D石斛堿量在一定濃度范圍內(nèi)符合朗伯 比爾定律*故應(yīng)控制樣品的濃度O加堿釋放染料后在30min內(nèi)基本穩(wěn)定*故應(yīng)及時(shí)測(cè)定O(2000-10-26收稿)石斛中總生物堿的含量測(cè)定方法研究作者：作者單位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次數(shù)：徐寧安徽省安慶衛(wèi)生學(xué)校基層中藥雜志PRIMARY JOURNAL OF CHINESE MATERIA MEDICA2001,15(3)12次1.汪曙.魏鳳娟.蔡永萍.林毅 霍山石斛雜交種與親本有效成分積累規(guī)律的研究期刊論文-安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)2010(7)2.陳蕤.崔盛.陶宗婭 三種川產(chǎn)石斛有效成分的測(cè)定及其分布規(guī)律研究期刊論文-西南農(nóng)業(yè)學(xué)

7、報(bào) 2010(3)3.劉寧.孫志蓉.廖曉康.袁明貴.李興玉.張宏桂 不同采收期金釵石斛總生物堿及多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化期刊論文-吉林大學(xué)學(xué)報(bào)（理學(xué)版） 2010(3)4.黃琦.李菲.吳芹.石京山 金釵石斛總生物堿對(duì)四氧嘧啶所致糖尿病大鼠的保護(hù)作用期刊論文-遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) 2009(5)5.葉磊.陳建真.羅小敏 石斛屬藥用植物質(zhì)量控制研究進(jìn)展期刊論文-江西中醫(yī)藥 2007(6)6.宋錫全.王素英.李海紅 滇產(chǎn)金釵石斛植株與細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生總生物堿含量分析期刊論文-貴州師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） 2007(2)7.陳曉梅.肖盛元.郭順星 鐵皮石斛與金釵石斛化學(xué)成分的比較期刊論文-中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào) 2006(4)8.陳曉梅.郭順星 4種內(nèi)生真菌對(duì)金釵石斛無菌苗生長(zhǎng)及其多糖和總生物堿含量的影響期刊論文-中國(guó)中藥雜志 2005(4)9.唐金剛 金釵石斛快速繁殖及其生物堿累積的研究學(xué)位論文碩士 200510.陳曉梅 真菌誘導(dǎo)子對(duì)鐵皮石斛原