《細(xì)胞工程復(fù)習(xí)課》課件

1、細(xì)胞工程細(xì)胞工程理理論論基基礎(chǔ)礎(chǔ)細(xì)胞的細(xì)胞的全能性全能性植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)植物體細(xì)胞雜交胞雜交分類分類分類分類植物植物細(xì)胞細(xì)胞工程工程動物動物細(xì)胞細(xì)胞工程工程動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)單克隆單克隆抗體抗體動物細(xì)動物細(xì)胞融合胞融合核核移移植植胚胚胎胎移移植植知識結(jié)構(gòu)知識結(jié)構(gòu)植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較獲得細(xì)胞獲得細(xì)胞或細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白分泌蛋白細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞群體細(xì)胞群體植物體植物體培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株等無病毒植株等培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成

2、分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖原理原理動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目比較項目植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合比較植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合比較最終目的最終目的誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法原理原理比較項目比較項目獲得雜種植株獲得雜種植株物理（離心、振物理（離心、振蕩、電刺激）蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）去除細(xì)胞壁后去除細(xì)胞壁后誘誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單

3、克隆抗體物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（滅活的仙臺病毒）（滅活的仙臺病毒）使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合生物方法：生物方法：幾種雜交技術(shù)的比較幾種雜交技術(shù)的比較項項目目雜交育雜交育種技術(shù)種技術(shù)植物體細(xì)胞植物體細(xì)胞雜交技術(shù)雜交技術(shù)動物細(xì)胞動物細(xì)胞融合技術(shù)融合技術(shù)分子雜分子雜交技術(shù)交技術(shù)原原理理方方法法用用途途基因重組基因重組細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖性、細(xì)胞增殖堿基互補配堿基互補配對原則對原則植物母本植物母本去雄去雄套袋套袋人工傳粉人工傳粉后后, ,套袋隔套袋隔離

4、離物理法：離心電物理法：離心電刺激振蕩等刺激振蕩等 化學(xué)法：化學(xué)法：PEGPEG物化法：同左物化法：同左 生物法：生物法：滅活的仙臺滅活的仙臺病毒病毒標(biāo)記的標(biāo)記的單鏈單鏈DNADNA或或RNARNA探探針針培養(yǎng)新品種培養(yǎng)新品種克服遠(yuǎn)緣雜交不克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性的障礙親和性的障礙制備單克隆制備單克隆抗體抗體用于克隆基因用于克隆基因的篩選、基因的篩選、基因組中序列的定組中序列的定性、基因診斷等性、基因診斷等幾種類型生物的培養(yǎng)幾種類型生物的培養(yǎng)比較比較生物生物微生物培養(yǎng)微生物培養(yǎng)植物植物動物細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)無土栽培無土栽培培養(yǎng)培養(yǎng)對象對象培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分成分培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型類型培

5、養(yǎng)培養(yǎng)條件條件微生物個體微生物個體離體植物細(xì)胞離體植物細(xì)胞 完整植物個體完整植物個體 幼齡動物幼齡動物器官或胚胎器官或胚胎水、無機鹽、水、無機鹽、碳源、氮源、碳源、氮源、生長因子生長因子水、無機鹽、水、無機鹽、有機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、維生素、維生素、植物激素植物激素水、無機鹽水、無機鹽水、無機鹽、水、無機鹽、有機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、維生素、維生素、動物血清動物血清固體、半固體固體、半固體或液體或液體固體固體液體液體液體液體無菌、適宜無菌、適宜的溫度等的溫度等無菌、離體、無菌、離體、適宜的溫度等適宜的溫度等光照、光照、COCO2 2、適宜的溫度等適宜的溫度等無菌、適宜的無菌、適宜的溫度等溫度等右圖為細(xì)胞

6、融合的簡略過程（只考慮兩個細(xì)右圖為細(xì)胞融合的簡略過程（只考慮兩個細(xì)胞的融合），請據(jù)圖回答：胞的融合），請據(jù)圖回答：若若A、B是基因型分別為是基因型分別為rrHH、RRhh兩個煙兩個煙草品種細(xì)胞的花粉，且這兩對基因位于非同源草品種細(xì)胞的花粉，且這兩對基因位于非同源染色體上，由于一對隱性純合基因染色體上，由于一對隱性純合基因(rr或或hh) 的的作用，在光照強度大于作用，在光照強度大于800勒克斯時，都不能勒克斯時，都不能生長。生長。（1）實驗開始時必須用）實驗開始時必須用 除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)。除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)。（2）實驗中除獲得雜種細(xì)胞外，還有基因）實驗中除獲得雜種細(xì)胞外，

7、還有基因型為型為 的融合細(xì)胞。的融合細(xì)胞。（3）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從）設(shè)計一方法（不考慮機械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，方法：培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，方法： 纖維素酶纖維素酶(或果膠酶或果膠酶) rrHH、RRhh 置大于置大于800勒克斯光照下培養(yǎng)，收集分化的細(xì)胞團(tuán)勒克斯光照下培養(yǎng)，收集分化的細(xì)胞團(tuán) 5、（、（2006 2006 年江蘇卷）年江蘇卷）(9(9分分) )下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。（1 1） 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2 2）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中HAT

8、HAT培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。（3 3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是 . . （4 4）動物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采）動物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采用用 。（5 5）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的 特點，又具備淋巴特點，又具備淋巴細(xì)胞的細(xì)胞的 特點。特點。（6 6）淋巴細(xì)胞是由動物體）淋巴細(xì)胞是由動物體 中的中的 細(xì)胞分化、發(fā)育而來。細(xì)胞分化、發(fā)育而來。（7 7）雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要

9、方式是）雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng) 選擇選擇 特異性強，靈敏度高特異性強，靈敏度高 滅活的病毒滅活的病毒 在體外大量增殖在體外大量增殖 分泌特異性抗體分泌特異性抗體 骨髓骨髓 造血干造血干 主動運輸主動運輸 外植體外植體愈傷組織愈傷組織根、芽根、芽植物體植物體脫分化脫分化再分化再分化一、植物組織培養(yǎng)的過程一、植物組織培養(yǎng)的過程（分化）（分化）（未分化）（未分化）（分化）（分化）幼芽或幼根？幼芽或幼根？條條件？件？優(yōu)優(yōu)點？點？特點？特點？繁殖速度快繁殖速度快不受季節(jié)限制不受季節(jié)限制工廠化生產(chǎn)工廠化生產(chǎn)幼苗無毒幼苗無毒保持優(yōu)良性狀保持優(yōu)良性狀適宜

10、溫度、光照、適宜溫度、光照、 pH和無菌環(huán)境。和無菌環(huán)境。無機物、有機物無機物、有機物和植物激素（和植物激素（生長生長素，細(xì)胞分裂素素，細(xì)胞分裂素）無定形狀態(tài)無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞薄壁細(xì)胞高度液泡化高度液泡化排列疏松、無規(guī)則排列疏松、無規(guī)則分化程度低分化程度低脫分化較易脫分化較易考點胡蘿卜的組織培養(yǎng)技術(shù)及植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用1細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性(1)細(xì)胞全能性的基礎(chǔ)：生物體的每一個細(xì)胞都含細(xì)胞全能性的基礎(chǔ)：生物體的每一個細(xì)胞都含有本物種的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個體的全有本物種的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個體的全套基因。套基因。(2)細(xì)胞全能性實現(xiàn)的條件：離體、提供營養(yǎng)物質(zhì)、細(xì)胞全能

11、性實現(xiàn)的條件：離體、提供營養(yǎng)物質(zhì)、激素及其他適宜條件。激素及其他適宜條件。(3)細(xì)胞全能性高低的比較：受精卵卵細(xì)胞體細(xì)胞全能性高低的比較：受精卵卵細(xì)胞體細(xì)胞；植物體細(xì)胞動物體細(xì)胞；細(xì)胞；植物體細(xì)胞動物體細(xì)胞；胚胎干細(xì)胞其他胚胎干細(xì)胞其他干細(xì)胞體細(xì)胞。干細(xì)胞體細(xì)胞。2胡蘿卜的組織培養(yǎng)技術(shù)(1)實驗原理：離體的植物組織、器官、細(xì)胞表現(xiàn)出植物細(xì)實驗原理：離體的植物組織、器官、細(xì)胞表現(xiàn)出植物細(xì)胞的全能性，發(fā)育成新個體胞的全能性，發(fā)育成新個體。(2)實驗流程：制備外植體實驗流程：制備外植體接種接種脫分化培養(yǎng)脫分化培養(yǎng)再分化培再分化培養(yǎng)養(yǎng)移栽培養(yǎng)成正常植株移栽培養(yǎng)成正常植株。(3)注意事項注意事項選材：根

12、尖、莖尖、形成層等最容易誘導(dǎo)脫分化。選材：根尖、莖尖、形成層等最容易誘導(dǎo)脫分化。無菌：培養(yǎng)基一旦污染，迅速生長的各種雜菌不僅會與無菌：培養(yǎng)基一旦污染，迅速生長的各種雜菌不僅會與培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)，而且還會產(chǎn)生大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)。培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)，而且還會產(chǎn)生大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)。光照：脫分化過程不需要光照，再分化過程一定要有光光照：脫分化過程不需要光照，再分化過程一定要有光照照。激素的使用激素的使用a生生長素類細(xì)胞分裂素類：誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原長素類細(xì)胞分裂素類：誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基形成基形成。b生生長素類細(xì)胞分裂素類：誘導(dǎo)愈傷組織再分化和芽原長素類細(xì)胞分裂素類：誘導(dǎo)愈傷組織再分化和

13、芽原基形成?；纬?。c赤赤霉素類：促進(jìn)分化的叢芽和小植株快速生長。霉素類：促進(jìn)分化的叢芽和小植株快速生長。3植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用植物細(xì)胞植物細(xì)胞 A A（大豆）（大豆）植物細(xì)胞植物細(xì)胞 B B（花生）（花生）原生質(zhì)體原生質(zhì)體 A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體 B B再生出細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁方法？方法？促融方法？促融方法？類型？類型？遺傳物質(zhì)？遺傳物質(zhì)？優(yōu)點？優(yōu)點？去除細(xì)胞壁去除細(xì)胞壁原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合雜種植株雜種植株( (大豆花生大豆花生) )細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂愈傷組織愈傷組織雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞植物體細(xì)胞雜交的過程：植物體細(xì)胞雜交的過程： 小小 結(jié)結(jié)D.篩選和組織培養(yǎng)。篩選和組

14、織培養(yǎng)。C. 植物細(xì)胞植物細(xì)胞A和植物細(xì)胞和植物細(xì)胞B雜交時，產(chǎn)生了雜交時，產(chǎn)生了AB和和AA、BB型融合細(xì)胞。型融合細(xì)胞。B.誘導(dǎo)融合：注意物理方法的類型和化學(xué)方法的藥誘導(dǎo)融合：注意物理方法的類型和化學(xué)方法的藥劑劑聚乙二醇。聚乙二醇。A.制備原生質(zhì)體：用纖維素酶、果膠酶分解細(xì)制備原生質(zhì)體：用纖維素酶、果膠酶分解細(xì)胞壁。胞壁。E.打破生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培打破生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育作物新品種。育作物新品種?？键c植物體細(xì)胞雜交技術(shù)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志細(xì)胞融合完成的標(biāo)志：新的細(xì)胞壁的生成。：新的細(xì)胞壁的生成。植物體細(xì)胞雜交的終點植物體細(xì)胞雜交的終點是培育成雜種植是培

15、育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。雜種植株特征雜種植株特征：具備兩種植物的遺傳特征。：具備兩種植物的遺傳特征。原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。質(zhì)。(1)體細(xì)胞雜交即兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞，不管染色體、體細(xì)胞雜交即兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞，不管染色體、基因組還是染色體組都采用直接相加的方法?；蚪M還是染色體組都采用直接相加的方法。若一植物細(xì)胞含若一植物細(xì)胞含有有 2X 條染色體，條染色體，2 個染色體組，基因型為個染色體組，基因型為 Aabb，另一植物細(xì)，另一植物細(xì)胞含有胞含有 2Y 條染色體，條染色體，2 個染色體組

16、，基因型為個染色體組，基因型為 ccDd，則新植，則新植株應(yīng)為四倍體，其體細(xì)胞中染色體數(shù)為株應(yīng)為四倍體，其體細(xì)胞中染色體數(shù)為 2X 2Y ，基因型為，基因型為AabbccDd。(2)該培育新品種的過程中，該培育新品種的過程中，遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德爾遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德爾的遺傳定律，的遺傳定律，只有有性生殖進(jìn)行減數(shù)分裂過程中才符合遺傳定只有有性生殖進(jìn)行減數(shù)分裂過程中才符合遺傳定律，而體細(xì)胞雜交未有此過程。律，而體細(xì)胞雜交未有此過程。（2006年重慶卷）植物甲、乙是兩種瀕危藥用植物（二倍體）。請按要求年重慶卷）植物甲、乙是兩種瀕危藥用植物（二倍體）。請按要求回答問題：回答問題：(1)以植物

17、甲、乙的莖尖和葉片為材料，通過組織培養(yǎng)獲得了再生植株，解以植物甲、乙的莖尖和葉片為材料，通過組織培養(yǎng)獲得了再生植株，解決了自然繁殖率低的問題。這表明植物細(xì)胞具有決了自然繁殖率低的問題。這表明植物細(xì)胞具有_。由葉片等材。由葉片等材料形成的愈傷組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點是料形成的愈傷組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點是_。（2）題）題31圖圖1和題和題31圖圖2分別是植物甲、乙的萌發(fā)花粉粒和未受精胚珠的分別是植物甲、乙的萌發(fā)花粉粒和未受精胚珠的示意圖。示意圖。在分離珠被細(xì)胞的原生質(zhì)體時，通常使用纖維素酶和果膠酶破除細(xì)胞壁。在分離珠被細(xì)胞的原生質(zhì)體時，通常使用纖維素酶和果膠酶破除細(xì)胞壁。其原理是利用了酶的其原理是利用了酶的

18、_性質(zhì)。性質(zhì)。 全能性全能性 排列疏松無規(guī)則排列疏松無規(guī)則,高度液泡化而無定型狀態(tài)的薄壁細(xì)胞高度液泡化而無定型狀態(tài)的薄壁細(xì)胞專一性專一性 動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng)按細(xì)胞的來源不同可以分為原代培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)按細(xì)胞的來源不同可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)。1.為什么將組織取出后，要用胰蛋白酶處理分散成單為什么將組織取出后，要用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞？個細(xì)胞？卵細(xì)胞卵細(xì)胞母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細(xì)胞乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核細(xì)胞核移植細(xì)胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母綿羊子宮母綿羊子宮胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育過程多莉羊的培育過程融合后

19、的卵細(xì)胞融合后的卵細(xì)胞滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞？骨髓瘤細(xì)胞？選出能產(chǎn)特定抗體細(xì)胞群、繼續(xù)培養(yǎng)選出能產(chǎn)特定抗體細(xì)胞群、繼續(xù)培養(yǎng)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)從培養(yǎng)液從培養(yǎng)液中獲取中獲取促融方法？促融方法？單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程抗原？抗原？淋巴細(xì)胞？淋巴細(xì)胞？體內(nèi)培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)從腹水中提取從腹水中提取單克隆抗體單克隆抗體細(xì)胞融合細(xì)胞融合、篩選、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法生物法：生物法： 滅活的病毒滅活的病毒動物細(xì)胞培養(yǎng)

20、技術(shù)應(yīng)用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用n克隆器官：皮膚、耳朵克隆器官：皮膚、耳朵n檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì) n細(xì)胞治療：干細(xì)胞細(xì)胞治療：干細(xì)胞n蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、酶、激素、蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、酶、激素、生長因子、單抗生長因子、單抗單抗的應(yīng)用和特點單抗的應(yīng)用和特點n診斷、治療和預(yù)防疾病診斷、治療和預(yù)防疾病n治療癌癥等?。ㄉ飳?dǎo)彈）治療癌癥等?。ㄉ飳?dǎo)彈）n特異性強、靈敏度高、純度高特異性強、靈敏度高、純度高考點動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞克隆1動動物細(xì)胞培養(yǎng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1)流程流程幼齡動物組織或胚胎幼齡動物組織或胚胎細(xì)胞貼壁生長細(xì)胞貼壁生長單個細(xì)胞細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液細(xì)胞株或細(xì)胞系選用

21、幼齡動物組織或胚胎的原因：它們的細(xì)胞分化程度選用幼齡動物組織或胚胎的原因：它們的細(xì)胞分化程度低，增殖能力很強，更易于培養(yǎng)。低，增殖能力很強，更易于培養(yǎng)。進(jìn)行動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時用進(jìn)行動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶胰蛋白酶分散細(xì)胞，不用胃分散細(xì)胞，不用胃蛋白酶的原因：胃蛋白酶作用的適宜蛋白酶的原因：胃蛋白酶作用的適宜pH 約為約為 2，當(dāng)，當(dāng) pH 大于大于 6時，胃蛋白酶就會失去活性。而胰蛋白酶作用的適宜時，胃蛋白酶就會失去活性。而胰蛋白酶作用的適宜pH 為為7.28.4，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜 pH 為為7.27.4，因此胰蛋白酶，因此胰蛋白酶適用于細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞間質(zhì)適用

22、于細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞間質(zhì)(主要為蛋白質(zhì)主要為蛋白質(zhì))的分解。的分解。(2)細(xì)胞貼壁和接觸抑制細(xì)胞貼壁和接觸抑制細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼壁：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上。：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上。接觸抑制接觸抑制：細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長：細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。(3)動物細(xì)胞培養(yǎng)條件動物細(xì)胞培養(yǎng)條件營養(yǎng)：微量元素、無機鹽、糖類、營養(yǎng)：微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。氨基酸、促生長因子、血清等。適宜的溫度：適宜的溫度：36.5 0.5 。適宜的適宜的 pH：7.27.4。氣體環(huán)境氣體環(huán)境O2：有氧呼吸、細(xì)胞代謝有氧呼吸、細(xì)胞代謝( (95%的空氣的空氣) )CO2：維持：維持 pH( (5%) )無菌、無毒環(huán)境：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具殺菌消無菌、無毒環(huán)境：培養(yǎng)