TSPOT介紹總結(jié)（課堂PPT）

1、列入歐美等列入歐美等20多個(gè)國(guó)家結(jié)核診療指南多個(gè)國(guó)家結(jié)核診療指南.2內(nèi)容內(nèi)容 結(jié)核病基礎(chǔ)概念結(jié)核病基礎(chǔ)概念 T-SPOT.TB 產(chǎn)品知識(shí)產(chǎn)品知識(shí) T-SPOT.TB 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用 病例分享病例分享.3內(nèi)容內(nèi)容 結(jié)核病基礎(chǔ)概念結(jié)核病基礎(chǔ)概念 T-SPOT.TB 產(chǎn)品知識(shí)產(chǎn)品知識(shí) T-SPOT.TB 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用 病例分享病例分享.42000-2008年我國(guó)肺結(jié)核報(bào)告發(fā)病情況結(jié)核分枝桿菌（MTB）是結(jié)核病的致病菌，通過呼吸道傳播，可以侵入人體全身各種器官，主要感染肺部全世界約三分之一的人群感染了結(jié)核分枝桿菌，2012年全球結(jié)核病報(bào)告顯示，在2011年有870萬(wàn)新發(fā)病例， 140萬(wàn)人死于結(jié)核

2、病.5活動(dòng)性結(jié)核與潛伏性結(jié)核 新發(fā)TB病例來(lái)自潛伏性結(jié)核感染人群 潛伏性結(jié)核感染（hidden epidemic）人群數(shù)量巨大“定時(shí)炸彈” 若想控制活動(dòng)性TB，必須先控制潛伏性結(jié)核感染 鑒別高危人群 預(yù)防性治療 免疫接種 活動(dòng)性TB 全球每年900萬(wàn)新發(fā)病例 僅為冰山一角Latent TB - “hidden epidemic”- 2 billion people infected.6活動(dòng)性結(jié)核與潛伏性結(jié)核接觸活動(dòng)性結(jié)接觸活動(dòng)性結(jié)核病患者核病患者暴露程度不足，結(jié)核桿菌被機(jī)暴露程度不足，結(jié)核桿菌被機(jī)體免疫力清除體免疫力清除-沒有癥狀沒有癥狀,結(jié)核桿菌結(jié)核桿菌仍舊存在而不能被仍舊存在而不能被偵測(cè)偵

3、測(cè) - X-光光/ CT 掃描顯掃描顯示正常示正常-沒有抗體應(yīng)答沒有抗體應(yīng)答-診斷困難診斷困難-傳統(tǒng)的結(jié)核感染檢傳統(tǒng)的結(jié)核感染檢測(cè)只有測(cè)只有PPD機(jī)體被感染機(jī)體被感染受免疫抑制受免疫抑制沒有臨床癥狀沒有臨床癥狀終身處于感染終身處于感染狀態(tài)狀態(tài)潛伏性結(jié)核潛伏性結(jié)核有臨床癥狀有臨床癥狀具有傳染性具有傳染性-結(jié)核桿菌可以通結(jié)核桿菌可以通過涂片、培養(yǎng)檢過涂片、培養(yǎng)檢測(cè)出測(cè)出-胸部的胸部的 X-光或光或 CT 掃描顯示異掃描顯示異常常 -肺外結(jié)核難以診肺外結(jié)核難以診斷斷(特別是兒童特別是兒童)活動(dòng)性結(jié)核活動(dòng)性結(jié)核-結(jié)核病結(jié)核病5%5%再次激再次激活活.7LTBI活動(dòng)的危險(xiǎn)因素活動(dòng)的危險(xiǎn)因素Erkens

4、J ERJ 20108結(jié)核病常規(guī)診斷技術(shù)耗時(shí)長(zhǎng)涂陰PTB檢出低肺外結(jié)核難結(jié)核診斷X射線射線分子診斷分子診斷接觸史接觸史涂片涂片鏡檢鏡檢細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)特異性差主觀肺外結(jié)核難 操作復(fù)雜技術(shù)要求高涂陰PTB檢出低肺外結(jié)核難 不能區(qū)分NTMPTB近半陰性肺外結(jié)核難試劑靈敏度低；不能區(qū)分既往感染和發(fā)病病人抗體檢測(cè)抗體檢測(cè)9WHO關(guān)于血清學(xué)檢測(cè)聲明2011年年7月月20日，世界衛(wèi)生組織（日，世界衛(wèi)生組織（WHO）發(fā)出正式聲明，要求）發(fā)出正式聲明，要求禁止禁止將將血清學(xué)檢血清學(xué)檢測(cè)方法測(cè)方法（抗原，抗體，蛋白芯片等）用（抗原，抗體，蛋白芯片等）用于肺結(jié)核和肺外結(jié)核的診斷。于肺結(jié)核和肺外結(jié)核的診斷。WHO

5、warns against the use of inaccurate commercial serological tests for pulmonary and extra-pulmonary TB10小結(jié)活動(dòng)性結(jié)核病與潛伏性結(jié)核感染的區(qū)別LTBI危險(xiǎn)因素結(jié)核中有20%左右的肺外結(jié)核，診斷困難傳統(tǒng)結(jié)核診斷方法不能滿足臨床需要11內(nèi)容內(nèi)容 結(jié)核病基礎(chǔ)概念結(jié)核病基礎(chǔ)概念 T-SPOT.TB 產(chǎn)品知識(shí)產(chǎn)品知識(shí) T-SPOT.TB 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用 病例分享病例分享12T-SPOT.TB原理T-SPOT.TB原理：結(jié)核感染者體內(nèi)存在特異的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞，效應(yīng)T淋巴細(xì)胞再次受到結(jié)核抗原（ESAT-6

6、，CFP 10）刺激時(shí)會(huì)分泌多種細(xì)胞因子（ IFN- ）。因此，檢測(cè)效應(yīng)T淋巴細(xì)胞可用于結(jié)核病或結(jié)核潛伏感染者的診斷 列入美國(guó)、英國(guó)等歐美列入美國(guó)、英國(guó)等歐美20多個(gè)國(guó)家結(jié)核診療指南多個(gè)國(guó)家結(jié)核診療指南 美國(guó)美國(guó)CDC推薦：推薦：BCG接種人群結(jié)核感染檢測(cè)首選接種人群結(jié)核感染檢測(cè)首選 國(guó)內(nèi)風(fēng)濕科國(guó)內(nèi)風(fēng)濕科/消化科指南消化科指南13T-SPOT.TB原理由于效應(yīng)T細(xì)胞存活時(shí)間很短（6周左右），而且具有特異性，因此可以作為機(jī)體是否正處于被感染的指標(biāo)，無(wú)論是否有臨床癥狀14結(jié)核桿菌特異抗原15T-SPOT.TB 準(zhǔn)確、可信、快速 特異性好特異性好只針對(duì)結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群敏感，與絕大多數(shù)環(huán)境分枝桿菌和

7、卡介苗（BCG）無(wú)交叉反應(yīng) 美國(guó)FDA數(shù)據(jù)：特異性97.1%(297/306) 國(guó)內(nèi)臨床數(shù)據(jù)：特異性94.1%(478/508) 靈敏度高靈敏度高基本不受免疫力低下/受抑制影響，在肺外結(jié)核患者中有很高的檢出率 美國(guó)FDA數(shù)據(jù)：靈敏度95.6%(175/183) 國(guó)內(nèi)臨床數(shù)據(jù)：靈敏度95.3%(624/655) 快速簡(jiǎn)便快速簡(jiǎn)便簡(jiǎn)單的血液檢測(cè)，隔天報(bào)告結(jié)果陰性預(yù)測(cè)值：陰性預(yù)測(cè)值：93.9%（478/509）陽(yáng)性預(yù)測(cè)值：陽(yáng)性預(yù)測(cè)值：95.4%（624/654）1616ReferenceSensitivityKobashi et al. J Infect. 2009; 58(3):197-204 9

8、0.0% (36/40) Domnguez et al. Diagn Microbiol Infect Dis. 2009; 63(1):43-51 84.2% (32/38) Bosshard et al. Respir Med. 2009; 103(1):30-4. 98.4% (62/63) Higuchi Med Microbiol Immunol. 2009; 198(1):33-795.9% (47/49) Kim et al. Am J Med 2009 ;122(2):189-9594.6% (53/56) Nicol et al. Pediatrics. 2009; 123:

9、38-43 50.0% (5/10) Markova et al. Biotechnol. & Biotechnol. 2009;23(1): 1103-110861.5% (8/13) Soysal et al IJTLD 2008 12(1):50-56*80.8% (80/99) Dominguez et al Clin Vacc Immunol 2008 15(1);168-71*85.7% (36/42) Chee et al J Clin Microbiol. 2008; 46(6):1935-4094.1% (254/270) Connell et al PLoS ONE

10、 2008. 3; 7:e2624*100.0% (9/9) Kobashi et al. Scand J Infect Dis 2008. 40; 8: 629-34*87.5% (42/48) Goletti et al. PLoS ONE. 2008. 3; 10: e3417.*89.9% (62/69) Kang et al Chest. 2007 Sep;132(3):959-65*92.2% (59/64) Janssens et al ERJ 2007 30(4):722-898.3% (57/58) Clarke et al Clin Exp Immunol 2007 150

11、(2):238-44.90.0% (27/30) Detjen et al CID 2007 1;45(3):322-8*92.9% (26/28) Ozekinci et al J Int Med Res 2007;35:696-70392.9% (26/28) Vincenti et al Clin Exp Immunol. 2007 Oct;150(1):91-8*84.6% (11/13) Wang et al Emerging Infect Dis 2007 13;4:553-887.2% (34/39) Losi et al Eur Respir J. 2007 Dec;30(6)

12、:1173-9100.0% (10/10) Kim et al Arch Intern Med 167;20:2255-2259100.0% (22/22) Jafari et al 2006 AJRCCM 174;9:1048-53100.0% (12/12) Ferrara et al Lancet 2006 376;1328-34*83.3% (20/24) Lee et al Eur Respir J 2006 28;24-30*96.6% (84/87) Goletti et al Clin Microbiol Infect 2006 12;6:544-50*91.3% (21/23

13、) Meier et al EJCMID 2005 24;529-53695.9% (70/73) TOTAL91.5% (1205/1317) 國(guó)外文獻(xiàn)匯總靈敏度17國(guó)外文獻(xiàn)匯總特異性18實(shí)驗(yàn)效果圖陰性結(jié)果陰性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果空白對(duì)照空白對(duì)照抗原抗原AESAT-6抗原抗原BCFP10陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照（PHA）19報(bào)告單20根據(jù)抗原A或/和抗原B孔的反應(yīng)判斷結(jié)果:檢測(cè)結(jié)果為“有反應(yīng)性”，參照以下標(biāo)準(zhǔn)： 空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)為0-5個(gè)時(shí)且（抗原A或抗原B孔的斑點(diǎn)數(shù)）-（空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)）6 空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)大于6個(gè)時(shí)且（抗原A或抗原B孔的斑點(diǎn)數(shù)）2（空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)）如果上述標(biāo)準(zhǔn)不符合且陽(yáng)性質(zhì)控

14、對(duì)照孔正常時(shí)檢測(cè)結(jié)果為“無(wú)反應(yīng)性”實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷21斑點(diǎn)數(shù)的意義活動(dòng)性or潛伏性 多少個(gè)斑點(diǎn)是活動(dòng)性結(jié)核？多少個(gè)斑點(diǎn)是活動(dòng)性結(jié)核？結(jié)果陽(yáng)性說(shuō)明患者結(jié)核感染，是潛伏性還是活動(dòng)性需要結(jié)合臨床癥狀。因個(gè)體差異，沒有具體的斑點(diǎn)數(shù)字可以依據(jù)。但斑點(diǎn)數(shù)越多越傾向于活動(dòng)性結(jié)核Chee et al Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2008)（IF=3.02）活動(dòng)性與潛伏性結(jié)核感染患者中，T-SPOT.TB斑點(diǎn)數(shù)比較Janssens et al ERJ (2007)（IF=6.35）活動(dòng)性與潛伏性患者中T-SPOT.TB斑點(diǎn)數(shù)的比較(TST+和 TST-)22斑點(diǎn)數(shù)的意義現(xiàn)癥感染

15、 之前得過結(jié)核治愈了，之前得過結(jié)核治愈了，T-SPOT結(jié)果如何？結(jié)果如何？T-SPOT檢測(cè)的是現(xiàn)癥感染。如果徹底治愈，體內(nèi)無(wú)結(jié)核分枝桿菌，則結(jié)果陰性；如果結(jié)果是陽(yáng)性，則說(shuō)明患者體內(nèi)還存在結(jié)核分枝桿菌，還在結(jié)核感染中 陳舊性結(jié)核體內(nèi)會(huì)存在記憶T細(xì)胞，但記憶T細(xì)胞在全血中的數(shù)量非常少，而且抗原再次激活孵育時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過24h，不會(huì)因?yàn)橛洃浖?xì)胞的存在而產(chǎn)生斑點(diǎn) 文獻(xiàn)顯示，大概只有38%左右的活動(dòng)性結(jié)核患者經(jīng)過治療，T-SPOT結(jié)果會(huì)轉(zhuǎn)陰Chee et al. , AJRCCM (2006)（IF=11.04）23Ribeiro S, Dooley K, et al. BMC Infect Dis, 2

16、009 （IF=3.02）方法：在肺結(jié)核治療中，用T-SPOT.TB方法評(píng)估治療效果。在治療開始前，治療16周和24周后，分別計(jì)數(shù)ESAT-6和CFP-10刺激產(chǎn)生的斑點(diǎn)數(shù)圖1. 所有研究對(duì)象ESAT-6, CFP-10和總RD1在治療前，16周后和24周后的平均斑點(diǎn)數(shù)（n=58）在24周完整療程后，ESAT-6, CFP-10和總RD1產(chǎn)生的平均SFCs分別從42.7, 41.2和83.8降到23.3, 23.2和46.5 ，有顯著性差異結(jié)論：結(jié)論：T-SPOT.TB試驗(yàn)中檢測(cè)的由試驗(yàn)中檢測(cè)的由RD1特異特異T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞產(chǎn)生的-干擾素與干擾素與肺結(jié)核患者在治療中的結(jié)核桿菌量肺結(jié)核患者在治

17、療中的結(jié)核桿菌量直接相關(guān)直接相關(guān)斑點(diǎn)數(shù)的意義治療前后變化24注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)采血量：采血量：6-10ml采血管：采血管：肝素抗凝樣本保存：樣本保存：當(dāng)天送樣，常溫運(yùn)輸注意：注意：PET-CT與輸血25方法學(xué)優(yōu)點(diǎn) 特異性95%左右，不受卡介苗（BCG）接種與環(huán)境分枝桿菌影響 靈敏度95%左右，幾乎不受個(gè)體免疫功能低下影響 快速，24小時(shí)報(bào)告結(jié)果 國(guó)內(nèi)外指南推薦，多篇文獻(xiàn)數(shù)據(jù)支持 斑點(diǎn)數(shù)意義：斑點(diǎn)越多越傾向活動(dòng)性結(jié)核、現(xiàn)癥感染、能反應(yīng)療效 送樣的注意事項(xiàng)26方法學(xué)缺點(diǎn) 不能夠提示臨床患者的病變部位，需要結(jié)合臨床的判斷 目前還不能夠根據(jù)斑點(diǎn)數(shù)量的多少來(lái)判斷患者是活動(dòng)性結(jié)核病或是潛伏感染者27內(nèi)容內(nèi)容

18、 結(jié)核病基礎(chǔ)概念結(jié)核病基礎(chǔ)概念 T-SPOT.TB 產(chǎn)品知識(shí)產(chǎn)品知識(shí) T-SPOT.TB 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用 病例分享病例分享28肺外結(jié)核結(jié)核分枝桿菌能侵染全身大部分器官，其中有20%發(fā)生在肺外29臨床應(yīng)用科室科室應(yīng)用應(yīng)用呼吸科呼吸科/結(jié)核科結(jié)核科呼吸系統(tǒng)疾病和結(jié)核的鑒別診斷；胸水/心包積液鑒別診斷；2周以上的不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排篩；菌陰肺結(jié)核的輔助診斷；特殊人群（矽肺等）的結(jié)核排篩傳染傳染/感染科感染科2周以上的不明原因發(fā)熱病人的肺結(jié)核排篩血液科血液科血液病治療前后的結(jié)核篩查內(nèi)分泌科內(nèi)分泌科糖尿病患者結(jié)核的排篩神經(jīng)內(nèi)科神經(jīng)內(nèi)科結(jié)核性腦膜炎的輔助診斷30臨床應(yīng)用科室科室應(yīng)用應(yīng)用風(fēng)濕免疫科

19、風(fēng)濕免疫科生物制劑/免疫抑制劑治療前后的篩查；劑量激素治療前后的結(jié)核篩查；自身免疫性疾病與結(jié)核病的鑒別診斷；發(fā)熱待查患者的結(jié)核排篩兒科兒科兒童肺結(jié)核的輔助診斷；兒童肺外結(jié)核的輔助診斷消化科消化科腹水（結(jié)核性腹膜炎）待查；CD（克羅恩?。┡c腸結(jié)核的鑒別診斷；生物制劑治療患者的結(jié)核篩查；發(fā)熱待查31國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)舉例 T-SPOT.TB的靈敏度為94.7%(71/75)，肺疾病組和肺外疾病組中分別為95.6%和93.3%，特異性為84.1%(90/107)，肺疾病組和肺外疾病組中分別為69.2%和88.9%。馮云, 張文宏等. PLOS ONE, 2012（IF=3.73） 北京協(xié)和醫(yī)院感染內(nèi)科200

20、4年至2010年收治的997例不明原因發(fā)熱患者的病因分析顯示，感染性疾病一直是最主要的病因，占479例(48.0%)，其中結(jié)核病占45.3%(217/479)侍效春, 劉曉清等. Chin Med J, 2013（IF=0.901）32國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)舉例 在84例CD或ITB患者中，T-SPOT是診斷ITB一個(gè)很好的指標(biāo)，其靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別是84.2%、75.4%、50.0%和94.2%。李玥, 錢家鳴等. J Crohns Colitis, 2012（IF=2.566） 在60 例CD 以及34 例ITB 患者中，T-SPOT.TB 和PCR 方法的鑒別診斷效能：雷媛,

21、 夏冰. Journal of Digestive Diseases, 2013（IF=1.853）敏感性敏感性%特異性特異性%PPV%NPV%T-SPOT88.293.388.293.3PCR52.990.075.077.133國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)舉例 293例懷疑結(jié)核病的非洲兒童，T-SPOT在年齡小于3歲、HIV感染和營(yíng)養(yǎng)不良的兒童中靈敏度分別是85%、73%和78%。如果結(jié)合TST的結(jié)果，T-SPOT的靈敏度達(dá)到91%Liebeschuetz S, et al. Lancet, 2004（IF=39.06） 在77名結(jié)核病和51名健康兒童中，T-SPOT靈敏度為89.2%，特異性為94.1%，明顯高于TST（靈敏度77.0%，特異性70.6%），卡介苗是否接種對(duì)結(jié)果沒有顯著影響。孫琳, 申阿東等. Chin Med J, 2010（IF=0.901）34消化科-國(guó)內(nèi)外指南 IBD診斷：在結(jié)核高流行區(qū)域要排除腸結(jié)核，方法包括PPD和-干擾素測(cè)定（T-SPOT.TB試驗(yàn)） CD排除腸結(jié)核的相關(guān)檢查：胸部X線片，PPD試驗(yàn)，有條件時(shí)可行IFN-釋放試驗(yàn)（T-SPOT.TB試驗(yàn)）World Ga