心無憂膠囊藥學(xué)研究資料綜述

1、中藥注冊(cè)分類8 藥學(xué)研究資料 申報(bào)資料7藥學(xué)研究資料綜述 (心無憂膠囊)課題名稱 心無憂膠囊研究單位 xxxx制藥有限公司申報(bào)單位 xxxx制藥有限公司聯(lián) 系 人 xxxx聯(lián)系方式 Tel: Fax:藥學(xué)研究資料綜述一、工藝研究的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料(一) 藥材的分揀去雜及質(zhì)量檢收處方中各藥材，分別分揀去雜，黃楊木按企業(yè)內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn); 其余藥材按中國藥典20xx年一部檢驗(yàn)，符合規(guī)定的藥材備用。(二) 配料與摻混將符合規(guī)定的藥材按處方量配料，不同提取方法的藥材分別摻混，備提取工藝使用。(三) 提取工藝研究根據(jù)處方中各藥材有效成份的理化性質(zhì)，采用不同的提取方法。黃楊木、丹參采用乙醇提取，細(xì)辛、土

2、木香提取揮發(fā)油，射干、川芎、瓜蔞皮、茵陳采用水提取。1、細(xì)辛、土木香揮發(fā)油提取工藝研究將細(xì)辛25g、土木香37.5g加入1000ml燒瓶中，加水600ml加熱回流，分別在0.5小時(shí)、1小時(shí)、1.5小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)測(cè)定揮發(fā)油提取量，經(jīng)考察回流提取1小時(shí)后揮發(fā)油量不再增加，故細(xì)辛、土木香揮發(fā)油提取工藝為細(xì)辛、土木香加約10倍量水提取1小時(shí)。2、射干、川芎、瓜蔞皮、茵陳、細(xì)辛、土木香提取工藝考察取射干、川芎、瓜蔞皮、茵陳、細(xì)辛、土木香適當(dāng)粉碎，按處方量配伍，制備正交試驗(yàn)工作樣品，每正交試驗(yàn)工作樣品重175g，其中射干25g、川芎37.5g、瓜蔞皮12.5g、茵陳37.5g、細(xì)辛25 g、土木香3

3、7.5 g。表1、因素水平表 L9（34）正交表頭試驗(yàn)號(hào)因 素A加水量（倍）B煎煮次數(shù)（次）C煎煮時(shí)間（小時(shí)）123108612311.52表2、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表試驗(yàn)號(hào)因 素A加水量（倍）B煎煮次數(shù)（次）C煎煮時(shí)間（小時(shí)）12345678910101088866612312312311.521.521211.5取每正交樣品175g，按上述正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表設(shè)計(jì)加水量、煎煮次數(shù)、煎煮時(shí)間，分別煎煮提取，濾過，濾液合并，靜置，取上清液濃縮成稠膏，置烘箱內(nèi)干燥至恒重。以干膏作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。表3、正交試驗(yàn)結(jié)果分析表試驗(yàn)號(hào) 因素干膏重(g)ABC12345678910101088866612312312311.

4、521.521211.522.841.242.725.038.534.925.231.837.2K1106.773.089.5 K298.4111.5103.4K394.2114.8106.4k135.624.329.8k232.837.234.5k331.438.335.5R4.214.05.7以干膏量為考察指標(biāo)，由上表極差R值大小顯示，各因素作用主次為BCA; 以A1B3C3組合為佳。由于提取三次與提取二次相差很小，加熱2小時(shí)與加熱1.5小時(shí)亦相差不大，為了節(jié)時(shí)省能，并考慮到實(shí)際生產(chǎn)因素，故確定藥材加水煎煮二次，第一次加水10倍量煎煮2小時(shí)，第二次加水8倍量煎煮1.5小時(shí)。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：按處方

5、量配伍兩份藥材，每份藥材為射干25g、川芎37.5g、瓜蔞皮12.5g、茵陳37.5g、細(xì)辛25 g、土木香37.5 g，分別于3000ml燒瓶中回流提取二次，第一次加水1750ml，回流提取2小時(shí); 第二次加水1400ml，回流提取1.5小時(shí)，濾過，濾液合并，靜置，取上清液濃縮成稠膏，置烘箱內(nèi)干燥至恒重。以干膏作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。表4、驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析表批次投料量干膏量(g)出膏率1175042.524.3%2175042.724.4%平均175042.624.3%由上表數(shù)據(jù)看出，射干、川芎、瓜蔞皮、茵陳、細(xì)辛、土木香加水煎煮二次，第一次加水10倍量煎煮2小時(shí)，第二次加水8倍量煎煮1.5小時(shí)，所得

6、干膏量與正交試驗(yàn)結(jié)果吻合，重復(fù)性好。說明工藝可行。3. 丹參、黃楊木提取工藝研究由于丹參藥材中既含有丹參酮等脂溶性成分，又含有丹參素、原兒茶醛、原兒茶酸等水溶性成分；故擬采用選用95%乙醇作為第一次提取溶劑，用50%乙醇作為第二次提取溶劑，回收乙醇，藥渣加水進(jìn)行第三次提取。黃楊木藥材中主要含有黃楊星D等脂溶性有效成份，還含有部分水溶性有效成份，擬先選用95%乙醇提取，再用水提取。由于丹參、黃楊木均是先用乙醇提取，再用水提取，為節(jié)約能源，降低生產(chǎn)成本，擬將丹參、黃楊木藥材共同提取。取丹參、黃楊木適當(dāng)粉碎，按處方量配伍，制備正交試驗(yàn)工作樣品，每正交試驗(yàn)工作樣品重175g，其中黃楊木50g、丹參12

7、5g。 表5、因素水平表 L9（33）正交表頭試驗(yàn)號(hào)因 素A加95%乙醇量（倍）B回流次數(shù)（次）C回流時(shí)間（小時(shí)）12310861230.512表6、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表試驗(yàn)號(hào)因 素A（倍）B（次）C（小時(shí)）12345678910101088866612 31231230.512120.520.51取每正交樣品175g，按上述正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表設(shè)計(jì)加乙醇量、回流次數(shù)、回流時(shí)間，分別提取，濾過(xxxx目篩)，濾液合并，靜置，回收乙醇濃縮成稠膏，置真空干燥烘箱內(nèi)干燥至恒重。取干膏適量,研細(xì),取約0.1g，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至近刻度，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，混勻，濾過，

8、取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密吸取20l，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。以干膏中含丹參酮A的總量為評(píng)價(jià)指標(biāo)。表7、正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)表正交號(hào)干膏量（g）丹參酮A含量（mg/g）丹參酮A總量（mg）14.918.57 90.99212.47.74 95.98314.58.28 120.06 48.510.35 87.9859.111.64 105.92612.17.02 84.94710.49.42 97.97810.96.98 76.0899.48.12 76.33表8、正交試驗(yàn)結(jié)果分析表試驗(yàn)號(hào) 因素丹參酮A (mg)A（倍）B（次）C（小時(shí)）123456789101010888666123123

9、1230.512120.520.51 90.99 95.98 120.06 87.98 105.92 84.94 97.9776.0876.33K1307.03 276.94252.01K2278.84277.98260.29K3250.38281.33323.95k1102.3492.3184.00k292.9592.6686.76k3 83.4693.78107.98R18.881.4723.98以干膏中含丹參酮A的量為考察指標(biāo)，由上表極差R值大小顯示，各因素作用主次為CAB; 以A1B3C3組合為佳。由于提取三次與提取二次及一次相差很小， 為了節(jié)時(shí)省能，以及實(shí)際生產(chǎn)因素，故確定藥材加95

10、%乙醇10倍量回流提取2小時(shí)；考慮到其他有效成份的提取利用，第二次加50%的乙醇8倍量回流提取1小時(shí)，藥渣加10倍量水再煎煮2小時(shí)。故確定將藥材提取工藝暫定為：回流提取二次，第一次加95%乙醇10倍量回流提取2小時(shí)，第二次加50%乙醇8倍量回流提取1小時(shí)；藥渣加10倍量水再煎煮2小時(shí)。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：按處方量配伍兩份藥材，每份藥材為黃楊木50g、丹參125g，分別于2500ml燒瓶中回流提取二次，第一次加95%乙醇1750ml，回流提取2小時(shí); 第二次加50%乙醇1500ml，回流提取1小時(shí)；合并兩次回流提取液，濾過，濾液回收乙醇，藥渣加水1750 ml再煎煮2小時(shí)，濾過，濾液與上述藥液合并，濃縮成

11、稠膏；干燥至恒重。取干膏適量,研細(xì),取約0.1g，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至近刻度，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，混勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密吸取20l，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。以干膏中含丹參酮A的總量為評(píng)價(jià)指標(biāo)。 表9、正交驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表批次投料量（g）干膏量（g）出膏率丹參酮A含量（mg/g）丹參酮A總量（mg）丹參酮A量（mg/粒）117523.413.3%5.14120.280.120217523.713.6%5.07120.160.120 由上表數(shù)據(jù)看出，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)與正交試驗(yàn)結(jié)果吻合，重復(fù)性好，工藝可行。(四) 成型工藝研究1、膠囊劑工藝

12、篩選心無憂膠囊應(yīng)符合心無憂膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)和中華人民共和國藥典20xx年版一部的規(guī)定，主要檢測(cè)【鑒別】，【檢查】（項(xiàng)目有水分、裝量差異、崩解時(shí)限、微生物限度），【含量測(cè)定】等項(xiàng)目。根據(jù)藥劑學(xué)、實(shí)用藥物制劑技術(shù)等教科書，及我公司生產(chǎn)膠囊劑的多年經(jīng)驗(yàn)，擬選用淀粉、預(yù)膠化淀粉為稀釋劑，與提取的兩種稠膏混合，干燥，粉碎，噴入土木香和細(xì)辛的揮發(fā)油，外加硬脂酸鎂混勻，裝入膠囊，鋁塑泡罩包裝，即得。（1）藥粉的制備A、按處方量的2倍投料、按上述工藝制備浸膏，兩種稠膏混合后，稱重（360g）均分為10等份，每2份為一組，分別攤在烘盤中，厚度約5mm,放至熱風(fēng)循環(huán)烘箱中，分別在60、70、80、90、100

13、干燥。 經(jīng)考察，浸膏中丹參酮A的含量隨溫度的升高而下降，細(xì)粉色澤加深。為保證產(chǎn)品質(zhì)量，溫度控制在80以下，但干燥時(shí)間太長(zhǎng)，無法工業(yè)化生產(chǎn)，結(jié)合我公司多年生產(chǎn)中藥制劑的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，擬采用浸膏與輔料混合后80以下共同干燥的方法。B、按處方量投料、按上述工藝制備浸膏，兩種稠膏混合后稱重（約180g），加入適量淀粉，制成適宜軟材，（經(jīng)實(shí)驗(yàn)加入約100g淀粉，制備的軟材較適宜，“手握成團(tuán)，輕壓即散”）。均分為6等份，每2份為一組，分別攤在烘盤中，厚度約10mm,放至熱風(fēng)循環(huán)烘箱中，分別在60、70、80干燥，經(jīng)考察浸膏與輔料混合后80以下共同干燥的方法能夠保證藥品質(zhì)量，考慮到生產(chǎn)勞效、能耗等因素，決定采用

14、浸膏與輔料混合后80共同干燥的方法。（2）填充試驗(yàn)結(jié)合我公司多年生產(chǎn)膠囊的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，本品擬采用稠膏干燥后粉碎成細(xì)粉，噴入揮發(fā)油，混勻，密封4小時(shí)，加入適量輔料，半成品檢驗(yàn)后，將藥粉分裝至3號(hào)空心膠囊。由于淀粉和預(yù)膠化淀粉的吸濕性相似，25及相對(duì)濕度65%時(shí)，平衡吸濕量為13%，為增加藥物的穩(wěn)定性和粉末的流動(dòng)性，填充膠囊時(shí)多選用干預(yù)膠化淀粉、干淀粉（干淀粉或干預(yù)膠化淀粉的制備方法：稱取淀粉或預(yù)膠化淀粉100Kg，置GFG-120型沸騰干燥機(jī)中，控制進(jìn)風(fēng)溫度100±5、出風(fēng)溫度40±5，烘干30min, 控制水分6.0%）。藥粉的制備：按處方量的1倍量投料、按上述工藝制備浸膏，

15、兩種稠膏混合后加與一倍量的淀粉共同干燥后粉碎，得細(xì)粉160 g（測(cè)丹參酮A總量為120.14mg，每粒應(yīng)含丹參按丹參酮A(C19H18O3)為0.120mg），將藥粉分為四等份（250粒/份），按下表進(jìn)行填充實(shí)驗(yàn)。表10、填充試驗(yàn)水平表處方（1）處方（2）處方（3）處方（4）稱取藥粉40 g、干淀粉5g、干預(yù)膠化淀粉5g、過80目篩網(wǎng)，混合均勻稱取藥粉40 g、干淀粉5g、干預(yù)膠化淀粉5g、硬脂酸鎂0.2g過80目篩網(wǎng)，混合均勻稱取藥粉40 g、干淀粉2.5g、干預(yù)膠化淀粉7.5g、硬脂酸鎂0.2g過80目篩網(wǎng)，混合均勻稱取藥粉40 g、干淀粉7.5g、干預(yù)膠化淀粉2.5g、硬脂酸鎂0.2g過

16、80目篩網(wǎng)，混合均勻表11、填充實(shí)驗(yàn)結(jié)果表裝量差異含量備注處方（1） 0.1641g、0.1613g、0.1648g、0.1561g、0.1613g、0.1793g、0.1615g、0.1556g、 0.1798g、 0.1439g平均：0.1627g上限：0.1790g 下限：0.1464g每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，為0.098mg流動(dòng)性差裝量差異不符合規(guī)定崩解時(shí)限符合規(guī)定含量低于處方量處方（2）0.1802g、0.1823g、0.1753g、0.1892g、0.1756g、0.1829g、0.1757g、0.1881g、0.1802g、0.1832g平均：0.1813g上

17、限：0.1994g 下限：0.1632g每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，為0.108mg流動(dòng)性較好，裝量差異符合規(guī)定崩解時(shí)限符合規(guī)定含量低于處方量處方（3）0.2036g、0.1959g、 0.1955g、 0.2063g、0.2109g、0.2058g、 0.1997g、 0.1996g、0.2097g、0.2083g平均：0.2035g上限：0.2239g 下限：0.1832g每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，為0.121mg流動(dòng)性好，裝量差異符合規(guī)定崩解時(shí)限符合規(guī)定含量與處方量相當(dāng)處方（4）0.1793g、0.1944g、0.1798g、0.1824g、0.1902

18、g、0.1554g、0.1573g、0.1782g、0.1936g、0.1581g 平均：0.1769g上限：0.1946g 下限：0.1592g每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，為0.105mg流動(dòng)性差，裝量差異不符合規(guī)定崩解時(shí)限符合規(guī)定含量低于處方量填充實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：處方1、4，細(xì)粉的流動(dòng)性均較差，裝量差異均不符合規(guī)定，且丹參酮A的含量均低于處方量（0.120mg/粒），不予采用；處方2細(xì)粉的流動(dòng)性較好，裝量差異符合規(guī)定，但丹參酮A的含量為0.108mg/粒，略低于處方量（0.120 mg/粒），為保證產(chǎn)品質(zhì)量，不予采用；處方3細(xì)粉的流動(dòng)性好，裝量差異符合規(guī)定，丹參酮A的含量為0

19、.121mg/粒，與處方量（0.120 mg/粒）相當(dāng)，予以采用。 驗(yàn)證試驗(yàn)：取藥粉制備B實(shí)驗(yàn)所得的細(xì)粉160g，（丹參酮A計(jì)0.122 mg/粒），噴入揮發(fā)油0.6ml混合均勻，密封4小時(shí)；然后分成兩份，每份細(xì)粉80g。按以下處方進(jìn)行填充試驗(yàn):細(xì)粉 80.0g 干淀粉 5.0g干預(yù)膠化淀粉 15.0g硬脂酸鎂 0.4g 制成 500粒表12、填充驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表批次裝量差異含量備注1 0.2058g、0.2102g、0.2062g、0.2017g、0.2094g、0.2093g、0.1991g、0.2038g、0.2042g、0.1965g平均：0.2046g上限：0.2251g 下限：0.1

20、841g每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，為0.123mg流動(dòng)較好，裝量差異符合規(guī)定崩解時(shí)限符合規(guī)定含量與處方量相當(dāng)20.2034g、0.2023g、0.2056g、0.1982g、0.2046g、0.xxxx2g、0.2050g、0.2126g、0.1992g、0.2091g 平均：0.2040 g上限：0.2244g 下限：0.1836g每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，為0.122mg流動(dòng)性較好，裝量差異符合規(guī)定崩解時(shí)限符合規(guī)定含量與處方量相當(dāng)由上表可以看出，細(xì)粉的流動(dòng)性較好，裝量差異符合規(guī)定，丹參酮A的含量與處方量（0.122 mg/粒）相當(dāng)，重復(fù)性也較好，說明該處

21、方該工藝可行。心無憂膠囊的規(guī)格暫定為: 每粒裝0.2g，每粒含丹參按丹參酮A(C19H18O3)計(jì)，應(yīng)不低于0.10mg 。2、處方藥物細(xì)粉 160.0g 揮發(fā)油 0.6ml干淀粉 10.0g干預(yù)膠化淀粉 30.0g硬脂酸鎂 0.8g制成 1000粒3、工藝規(guī)程:(1)、稱取預(yù)膠化淀粉100Kg，置GFG-120型沸騰干燥機(jī)中，控制進(jìn)風(fēng)溫度100±5、出風(fēng)溫度30±5，烘干30min，控制干淀粉的水分6.0%。得干預(yù)膠化淀粉。（2）、稱取淀粉100Kg，置GFG-120型沸騰干燥機(jī)中，控制進(jìn)風(fēng)溫度100±5、出風(fēng)溫度30±5，烘干30min，控制干淀粉的

22、水分6.0%,得干淀粉。（3）、藥粉、干預(yù)膠化淀粉、干淀粉、硬脂酸鎂分別過80目篩網(wǎng)。（4）、稱取藥粉，噴入揮發(fā)油混勻，密封4小時(shí)。（5）、按處方量，將上述藥粉與干預(yù)膠化淀粉、干淀粉、硬脂酸鎂混合均勻。（6）、半成品檢驗(yàn)后，用NCJ-800型全自動(dòng)膠囊填充機(jī)將藥粉分裝至3號(hào)空心膠囊，控制裝量為0.2g±5%。（7）、鋁塑泡罩包裝即得。 由以上試驗(yàn)可總結(jié)本品制法為：以上八味，黃楊木粉碎成粗粉，丹參切片，混合加熱回流提取二次，第一次用10倍量乙醇加熱回流2小時(shí)，第二次用8倍量50%乙醇加熱回流1小時(shí)，合并兩次回流提取液，濾過，濾液回收乙醇，藥渣加10倍量水煎煮2小時(shí)，濾過，濾液與上述藥液

23、合并，濃縮成稠膏；土木香、細(xì)辛提取揮發(fā)油，藥渣與其余射干等四味加10倍量水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮成1.35的稠膏；將以上兩種稠膏混勻，加入適量輔料混勻干燥，粉碎，噴入土木香和細(xì)辛的揮發(fā)油，加入適量輔料，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。 (六)經(jīng)三批中試生產(chǎn)考核工藝穩(wěn)定性 取處方十倍量藥材，在中試設(shè)備上試驗(yàn)，考核工藝穩(wěn)定性，三批數(shù)據(jù)表明，工藝穩(wěn)定，具可重復(fù)性。根據(jù)中試制成品量，確定本品每處方量制成1000粒。二、質(zhì)量研究試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料心無憂片收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑十三冊(cè)（WS3-B-2491-97）, 心無憂膠囊是根據(jù)心無憂片改變劑型的

24、中藥8類新藥（減免臨床研究），現(xiàn)將質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明報(bào)告如下：【名稱】 心無憂膠囊【處方】 與原標(biāo)準(zhǔn)一致?！局品ā?#160;以上八味，黃楊木粉碎成粗粉，丹參切片，混合加熱回流提取二次，第一次用10倍量乙醇加熱回流2小時(shí)，第二次用8倍量50%乙醇加熱回流1小時(shí)，合并兩次回流提取液，濾過，濾液回收乙醇，藥渣加10倍量水煎煮2小時(shí)，濾過，濾液與上述藥液合并，濃縮成稠膏；土木香、細(xì)辛提取揮發(fā)油，藥渣與其余射干等四味加10倍量水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮成稠膏；將上述兩種稠膏混勻，加入適量輔料，混勻，干燥，粉碎，噴入土木香和細(xì)辛的揮發(fā)油，混勻，裝入膠囊，制成1000粒

25、，即得。 本品工藝與原工藝無質(zhì)的改變，按新的工藝實(shí)際條件描述?！拘誀睢恳匀性嚠a(chǎn)品的實(shí)際性狀描述。除劑型外，與原標(biāo)準(zhǔn)一致?！捐b別】(1) 為處方中丹參的薄層鑒別，經(jīng)與丹參酮A對(duì)照品、缺丹參陰性對(duì)照樣品對(duì)照，斑點(diǎn)顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強(qiáng)。予以采用。(2) 為處方中川芎的薄層鑒別，經(jīng)與阿魏酸對(duì)照品、缺川芎陰性對(duì)照樣品對(duì)照，斑點(diǎn)顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強(qiáng)。予以采用。(3)還進(jìn)行了黃楊木的薄層鑒別，參考文獻(xiàn) 取本品5g，置分液漏斗中，加水和氫氧化鈉試液各10ml，搖勻后，加氯仿20ml，振搖提取10分鐘，靜置，分取氯仿層，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取環(huán)維黃楊星D對(duì)照品，加氯

26、仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典20xx年版一部附錄B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-二乙胺(25：20：2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。經(jīng)試驗(yàn)，樣品加入水和氫氧化鈉試液各10ml，搖勻后溶液呈膠體狀，無法萃取及過濾，故改用氯仿超聲處理30分鐘制備供試品，按上述方法展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，樣品沒有顯示與對(duì)照品相同的斑點(diǎn)。暫沒有找到合適的方法。(4)還進(jìn)行了處方中射干的薄層鑒別，參考文獻(xiàn) 取本品10g，加甲醇3

27、0ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取射干對(duì)照藥材1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典20xx年版一部附錄B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲醇(3：1：1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。經(jīng)試驗(yàn)，樣品中沒有顯示與對(duì)照藥材相應(yīng)的斑點(diǎn)，改用GF254薄層板，以氯仿-丙酮-甲醇(3：1：1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，缺射干陰性對(duì)照樣品中，亦顯示與樣品

28、及對(duì)照藥材相應(yīng)位置上的相同斑點(diǎn)，不予采用，暫無合適方法?！緳z查】依照中國藥典20xx年版一部附錄 L的有關(guān)規(guī)定對(duì)三批中試產(chǎn)品檢查，均符合藥典有關(guān)規(guī)定。 重金屬 取本品2.0g，精密稱定，置己熾灼至恒重的坩鍋中，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml使恰濕潤(rùn)，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在590熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（xxxxH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（

29、xxxxH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1ml，再用水稀釋成25ml，上述兩管中各加硫代乙酰胺試液各2ml,搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，樣品管中顯示出的顏色與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液管比較，不得更深。三批中試產(chǎn)品重金屬含量均低于百萬分之五，暫不設(shè)定重金屬檢查項(xiàng)。砷鹽檢查 取本品2.0g，精密稱定，置己熾灼至恒重的坩鍋中，緩緩熾灼至完全炭化，在590熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸3ml與適量水使成30ml，分取溶液10ml，依中國藥典20xx年版一部(附錄 H第二法)檢查,三批中試產(chǎn)品砷鹽含量均低于百萬分之二，暫不設(shè)定砷鹽檢查項(xiàng)。表13、重金屬及砷鹽檢查結(jié)

30、果表批號(hào)重金屬xxxxxxxxm砷鹽xxxxxxxxmxx021511xx021601xx021710【含量測(cè)定】原標(biāo)準(zhǔn)未收載含量測(cè)定項(xiàng)，新標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)試驗(yàn)確定采用高效液相色譜法，樣品制備方法簡(jiǎn)便，靈敏度高，能滿足本品質(zhì)量控制要求?！竞繙y(cè)定】采用高效液相色譜法（中國藥典20xx年版一部附錄VI D）測(cè)定。根據(jù)本方藥味及配伍,選丹參作為【含量測(cè)定】的評(píng)價(jià)指標(biāo)。參考中國藥典20xx年版一部丹參藥材含量測(cè)定項(xiàng)下高效液相色譜法的測(cè)定方法，配制流動(dòng)相甲醇-水（15：5）試用，檢測(cè)波長(zhǎng)仍選270nm,結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參酮A峰保留時(shí)間過長(zhǎng),調(diào)整流動(dòng)相為甲醇-水 (4：1),結(jié)果丹參酮A峰保留時(shí)間20分鐘左右，并且樣品

31、峰獲得基線分離，故用此法控制本品質(zhì)量。（見附后譜圖）丹參酮A對(duì)照品 中國藥品生物制品檢定所 0766-20xx10儀器與試劑高效液相色譜儀 XXXX xxxx 型高壓恒流泵 UVxxxx紫外可見波長(zhǎng)檢測(cè)器xxxx色譜數(shù)據(jù)工作站色 譜 柱 Scienhome Kromasil C18,5u 250×4.6mmXXXX/N: 91182545色譜甲醇 上海陸忠試劑廠標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密稱取丹參酮A對(duì)照品適量,加甲醇制成每1ml含90g的溶液,即得。以90g/ml的對(duì)照品溶液為母液，分別配制成45g/ml、22.5g/ml、18g/ml、9g/ml的對(duì)照品溶液 。 分別精密吸取上述各對(duì)照品溶液2

32、0l,注入液相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算，即得。 回歸曲線為Y(峰面積)= 50.0246X(濃度)+1.1696 r=0.9994 線性范圍為990g/ml,標(biāo)準(zhǔn)曲線過圓點(diǎn),采用外標(biāo)一點(diǎn)法定量。供試品溶液制備方法的選擇：1.取本品適量,研細(xì),取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，密塞，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.取本品適量,研細(xì),取約1g，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇至近刻度，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇稀釋至刻度，混勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密吸取上述兩種供試品溶液各20l，注入液相色

33、譜儀，測(cè)定，結(jié)果兩種溶液的峰面積相近，表明超聲處理方法簡(jiǎn)單，雜質(zhì)少，故選用超聲處理30分鐘方法制備供試品溶液。精密度 同一樣品連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.74%,小于3.0%。穩(wěn)定性 同一樣品,制備后在30分鐘、1小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)后分別測(cè)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%，小于5.0%,樣品放置24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。重現(xiàn)性 同一樣品，取5份，各約1g，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至近刻度，超聲處理30分鐘, 放冷 ,用甲醇稀釋至刻度,混勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，精密吸取上述供試品溶液各20l，注入液相色譜儀，測(cè)定。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.17%，小于5.0%。加樣回收率 取已知含量的樣品5份