0201嗜堿性粒細胞比率.docx

1、DocumentName文件名嗜堿性粒細胞比率測定一一BAS0%測定操作規(guī)程Code&Version編號及版本XJ-LAB-CG-0201-V1Page頁碼共10頁Drafted/Revised起草/修訂者劉巧妹CommitteeApproved委員會審批CEOApproved總裁審批DraftDate起草日期2017-07-15EffectiveDate生效/執(zhí)行日期2017-07-15ModificationDate修改日期2018-02-01嗜堿性粒細胞比率測定一一BASO%測定操作規(guī)程1、檢驗?zāi)康模?.1 參考值：0.2-2.0%1.2臨床意義：作為輔助診斷骨髓外增殖性疾病、骨

2、髓纖維化、原發(fā)性血小板增多癥及血液病等的參考指標。2、檢驗程序原理：2.1使用半導(dǎo)體激光器的流式細胞計數(shù)方法使用流式細胞計數(shù)法檢測細胞和其它生物粒子的物理和化學(xué)性質(zhì)。使用流式細胞計數(shù)法只需很少的樣品就可對這些細胞和粒子進行檢測。一個血液樣品經(jīng)過吸液和定量、稀釋至指定的稀釋比，并進行染色。然后將該樣品送入流動池中。這種鞘流裝置改進了細胞計數(shù)的準確性和重現(xiàn)性。同時，由于血細胞顆粒成行通過該流動池的中心，故而防止產(chǎn)生異常血液脈沖并可減少流動池的污染。一個半導(dǎo)體激光束通過該流動池照射到血細胞上。前向散射光市光電二極管接收，側(cè)向散射光和側(cè)向熒光則由光電倍增管接收。光信號被轉(zhuǎn)化為電脈沖，從而可以得到有關(guān)血

3、液細胞的信息。2.2前向散射光和側(cè)向散射光當(dāng)一束激光照射到血細胞顆粒上時，就產(chǎn)生光散射。XS-500i檢測前向散射光和側(cè)向散射光，前向散射光的強度反映血液細胞體積大小。側(cè)向散射光的強度反映細胞內(nèi)部（如細胞核的中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志2007中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司全國臨床檢驗操作規(guī)程第3版體枳大?。┑男畔?。2.3側(cè)向熒光當(dāng)光照射到經(jīng)過熒光染色的血液細胞上時，就產(chǎn)生比入射光波長更長的光。隨著染色集團濃度的增加，熒光強度也增加。通過測量熒光強度，可以得到有關(guān)血細胞染色的信息，XS-500I檢測側(cè)向熒光。2.4公式如下：BASO%=BASO/WBCX100%3、性能參數(shù)：3.1精度（可重現(xiàn)性）全血模式，4

4、0.0%或更低，3.2準確度做白細胞分類手工和儀器分類方式的比對，選取高、中、低值各兩份樣本，制備血片染色鏡檢并進行手工分類比對結(jié)果查Rumke表4、原始樣品系統(tǒng)4.1受檢者的準備：病人避免采血前劇烈活動。4.2用含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管，肘靜脈果血lml,輕輕混勻，室溫4小時內(nèi)完成檢測。4.3注意事項：4.3.1防止溶血：混勻時不可用力震蕩，避免產(chǎn)生大量氣泡。4.3.2避免淤血：止血帶壓迫時間不宜過長，最好不超過半分鐘。43.3標本不能從輸液管中或輸液手的同側(cè)靜脈采集。4.3.4穿刺時須防止穿刺針刺扎采血員，以避免血液中傳染性病原如肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病

5、成分污染采血員。43.5抗凝管應(yīng)貼有標簽，并清楚注明病人姓名。5、容器和添加物類型：含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管，有條形碼的貼上條形碼。乳膠手套、試管架6、要求的設(shè)備和試劑6.1 設(shè)備：Sysmex公司XS-500i6.2試劑廠商：Sysmex公司XS-500I試劑包6.2.1試劑及包裝：試劑名稱簡寫樣品數(shù)每盒容量CELLPACKEPK50020LSTROMATOLYSER-4DLFFD25005LSTROMATOLYSER-4DSFFS105042mlSULFOLYSERSLS1000500mlSTROMATOLYSER-FBFBA25005LSTROMATOLYSER-NRSNR-L

6、YSE5001LLyseSTROMATOLYSER-NRSNR-Dye50012mlDyeRETSEARCH-IIDilutionRED-Dilu5001LRETSEARCH-IIStainRED-Dye50012ml(RED)STROMATOLYSER-IMSIM300010LCELLSHEATHESE50020L6.3試劑穩(wěn)定性：6.3.1原包裝試劑儲存在15-30°C,至標簽所示失效日期。6.3.2試劑如出現(xiàn)混濁或絮狀物則失效。7. 校準程序（計量學(xué)溯源性）7.1校準品商品名稱：SCS-10007.2校準前檢查：7.2.1確認SCS-1000校準品瓶上批號和有效期于靶值表一致，

7、沒有過期。7.2.2確認是否按廠家建議進行儀器保養(yǎng)。盡可能不要再進行保養(yǎng)或試劑更換的當(dāng)天進行校準或校準校驗。7.2.3瀏覽最近的質(zhì)控數(shù)據(jù)，確保分析儀性能穩(wěn)定。7.2.4在儀器上登記試劑的批號和有效期。7.2.5進行自動清洗，確認空白表示沒有超出規(guī)定范圍。7.3校準準備：請嚴格遵守以下步驟，這對于保證SCS-100。校準品的性能正確非常重要。從冰箱或包裝取出1瓶SCS-1000,放置30分鐘使其溫度升至室溫（18-25'C）。保持瓶子直立的狀態(tài)將其放在雙手掌中輕輕滾動20秒，然后將其顛倒后再滾動20秒以上。輕輕來回倒轉(zhuǎn)12次使其混合均勻，確保所有細胞都己經(jīng)懸浮起來。進行分析前在平面上靜置

8、瓶子15秒，使泡沫散去。7.4校準步驟：注意：SCS-1000的分析必須在開放模式進行，此時儀器設(shè)定為維修程序-“特殊模式”-菜單的“質(zhì)控血模式”。使用質(zhì)控血模式可防止出現(xiàn)WBC通道錯誤。關(guān)于進入維修程序的方法，請咨詢技術(shù)服務(wù)代表。7.4.1在開放模式下連續(xù)進行6次分析。在分析當(dāng)中不要混勻校準品。7.4.2每次分析結(jié)束后，使用潔凈無屑的紙巾或紗布拭凈瓶子及瓶蓋螺紋，之后蓋上瓶蓋。7.5平均值的計算及校核數(shù)據(jù)7.5.1排除第1次分析結(jié)果。7.5.2計算其余5次分析結(jié)果的平均值，確認各參數(shù)的平均值都在可接受極限范圍內(nèi)。7.5.3如果某個參數(shù)的平均值超出了可接受極限范圍，并內(nèi)部質(zhì)控和/或室間質(zhì)控的結(jié)

9、果也顯示出類似偏差，表示需要重新校準分析儀。7.5.4計算新的校準設(shè)定系數(shù)。7.6校準的頻率：7.7.1 一般情況：每年校準2次上半年一次下半年一次。7.7.2其他情況：試劑商更改，排除各種原因后的質(zhì)控未能通過，主要部件更換后，儀器遠距離搬動，或嚴重故障須重新校準。儀器進行維修和保養(yǎng)校準后需做質(zhì)控，校準后比對失敗，工程師應(yīng)驗證質(zhì)控品是否變質(zhì)，在市內(nèi)質(zhì)控歷史數(shù)據(jù)和室間質(zhì)控數(shù)據(jù)表示良好時校準品可能變質(zhì)，需更換重新校準，直至通過校準。7.8校準驗證：校準后及時進行驗證，內(nèi)容包括：精密度、線性、校準前后病人標本結(jié)果比對、新鮮血close和open進樣模式結(jié)果比對、質(zhì)控、白細胞分類手工和儀器分類方式的比

10、對，由實驗室操作人員完成。8程序步驟8.1開機前檢查：試劑是否夠用，所有電源線連接穩(wěn)妥，打印紙是否夠用，進樣器上確保無試管架，倒掉廢液，防逆流容器里有無液體。8.2打開電源，按以下順序開機：開打印機，啟動電腦IPU,啟動XE-series程序并登錄，啟動主機，儀器進行自檢，空白確認通過后進入待機狀態(tài)。8.3分析樣品：8.3.1手動模式進樣器模式準備就緒（屏幕顯示準備就緒（READY）信息，READYLED綠燈亮）按手動（MANUAL）鍵將樣品管放在樣品架上在數(shù)字鍵上輸入標本號將樣品架放在進樣器中按V鍵，激活“模式選擇（Mode）"按進樣器（Sampler）鍵按v和光標鍵選擇1.手動模

11、式（Manual）在數(shù)字鍵上輸入標本號顛倒試管，徹底混勻樣品取下蓋子按V鍵，激活“樣品架編號一管位置號（Rack-Tube）"將樣品管放在取樣針中在數(shù)字鍵上輸入樣品架號和管位置號按開始鍵按Sampler鍵當(dāng)READYLED燈滅、連續(xù)兩次發(fā)出短促的蜂鳴聲，取下樣品管儀器進行檢測準備就緒（屏幕顯示準備就緒（READY）信息，READYLED綠燈亮）準備下一個/批樣品，重復(fù)以上步驟進行檢測8.3.2插入急診標本：按進樣器（Sampler）鍵終止進樣器運行-屏幕顯示“STATREADY”-按手動（MANUAL）鍵一在數(shù)字鍵上輸入標本號-手工模式分析樣木-分析完畢，屏幕顯示“STATREADY

12、按進樣器（Sampler）鍵，恢復(fù)進樣器操作。注：在此過程中請勿移動試管架，因為電腦知道下一次應(yīng)該分析哪個樣品。8.4分析結(jié)果顯示和輸出：啟動數(shù)據(jù)瀏覽器，數(shù)據(jù)瀏覽屏上會顯示分析數(shù)據(jù)，如己設(shè)置了自動打印功能，作完一個標本，結(jié)果將自動從圖形打印機打出或傳送至電腦。8.5關(guān)機：使用了進樣器，執(zhí)行關(guān)機程序前，將CELLCLEAN放入兩只試管，按進樣器方式操作。執(zhí)行關(guān)機程序：根據(jù)電腦上的提示將CELLCLEAN放在吸樣針下方，按綠色“START”開關(guān)，程序結(jié)束后關(guān)閉主機電源，關(guān)閉IPU,關(guān)閉打印機。9、質(zhì)量控制程序：9.1質(zhì)控品：9.1.1質(zhì)控品品牌：XX臨檢中心（1個）、Sysmex（高、中、低值3個

13、水平e-CHECK）9.1.2儲存條件：218二（每日須復(fù)核一次冰箱溫度）。9.1.3使用期限：臨檢中心質(zhì)控開瓶后XX天；Sysmexe-CHECK質(zhì)控開瓶后14天。9.1.4質(zhì)控品開啟后應(yīng)注明開啟口期，失效期并簽名。9.2質(zhì)控頻率：每天開機后在標本檢測前進行一次質(zhì)控品的分析（至少做兩個水平質(zhì)控）。9.3質(zhì)控操作：從冰箱中取出e-CHECK,使用前檢查有效期及狀況（如極度溶血或失效，應(yīng)及時更換），在室溫環(huán)境下（1830）靜置15分鐘。保持瓶子直立狀態(tài)在雙掌中輕輕滾動20次，將其顛倒再滾動20次，再將質(zhì)控品上下顛倒20次混勻至紅細胞完全混合，在QC上選擇相應(yīng)批號質(zhì)控文件，然后選擇“OK”：將質(zhì)控

14、物混勻后置于手工吸樣針下方，按綠色“START”開關(guān);分析完成后，檢查IPU屏上的數(shù)據(jù)并按“APPLY”,接受數(shù)據(jù);在IPU中單擊“QC”,查看質(zhì)控圖。9.4質(zhì)控期望值：至少滿足2個e-CHECK在靶值士極限值內(nèi)，記錄質(zhì)控結(jié)果后開始做標本。9.5失控時應(yīng)采取的措施：質(zhì)控結(jié)果超出期望值時，需查找原因，檢查質(zhì)控品是否在有效期內(nèi)，過期或近過期需更換新的質(zhì)控品，檢查試劑情況，是否需更換。再檢查儀器的各項參數(shù)是否在控，如各項檢查操作后質(zhì)控仍失控則聯(lián)系工程師，責(zé)任人需通知組長。與此同時聯(lián)系急癥病人相關(guān)醫(yī)生，如為急診標本及時送往門急診化驗室檢測。直至質(zhì)控通過，開始做標本。9.6每次失控必須分析原因，記錄處理

15、過程并簽名。失控記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存，保存期為二年。9.7更換批號后靶值設(shè)定：取開始10次QC結(jié)果，計算均值，為靶值，靶值應(yīng)落在廠商提供的范圍內(nèi)，以累計6個月CV%均值（或近兩個月CV%較大值）,通過均值乘以CV%=1SD,質(zhì)控范圍設(shè)定為2.7SDO由組長或組長指定人員負責(zé)計算。9.8定期打印質(zhì)控曲線，曲線上注明使用質(zhì)控品的批號和效期，并簽上責(zé)任人姓名。9.9所有室內(nèi)質(zhì)控打印及記錄夾入指定的文件夾內(nèi)保存，保存期為二年。9.10每日由操作員記錄質(zhì)控狀況與X-barm記錄于記錄本。10、干擾（如乳糜血、溶血、膽紅素血）和交叉反應(yīng)10.1嚴重的黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高。10.2紅細胞冷

16、凝集可使紅細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低，白細胞假性增高（電阻抗法）或假性減低（激光法）和MCV假性增高。10.3冷凝球蛋白增高使白細胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高。10.4有血小板凝集者可使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。11結(jié)果計算程序的原理，包括測量不確定度SysmexXS-500i檢測參數(shù)的結(jié)果自動傳入計算機中，不需要計算不確定度。12、生物參考區(qū)間參考區(qū)間（正常人群參考范圍）是XS-500I用正常個體得出的。每一個參數(shù)的范圍用95%可信區(qū)間計算而得。參數(shù)女性范圍n=133男性范圍n=182Baso%0.2-2.00.2-1.8*女性的年齡范圍為21-41歲，平均年齡為24.5歲.13、患者檢驗結(jié)果

17、的可報告區(qū)間BASO%：14、警告/危機值14.1危機值：如遇以下危急值，應(yīng)上報臨床科室，并記錄在危急值報告記錄表（電話上報時接聽者需復(fù)述）：WBC<1.0x109/L或WBC>40.0x109/L,14.2XS-500I異常報警信息：WBC異常：WBCAbnScattergramWBC散射圖異常NRBCAbnScattergramNRBC散射圖異常Neutropenia嗜中性粒細胞減少Neutrophilia嗜中性粒細胞增加Lymphopenia淋巴細胞減少Lymphocytosis淋巴細胞增加Monocytosis單核細胞增加Eosinophilia嗜酸性粒細胞增加Basoph

18、ilia嗜堿性粒細胞增加Leukocytopenia白細胞減少Leukocytosis白細胞增加NRBCpresent有核紅細胞增加WBC懷疑：Blasts?原始細胞ImmatureGran?未成熟粒細胞LeftShift?左移AtypicalLympho?異形淋巴細胞Abn異常淋巴/原始NRBC有核紅細胞Lympho/L-Blasts?淋巴RBCLyseresistance紅細胞溶解不全15、安全防護措施15.1使用時的特殊要求XS-500I僅適用于人血或人工質(zhì)控血的體外分析，無其它指定用途。使用條件還包括按規(guī)定拆卸清潔和保養(yǎng)。15.2通用要求XS-500I操作前先閱讀本手冊。弄清手冊和儀器

19、上有應(yīng)注意的標志。妥善保管手冊以備今后參考。必須按照手冊說明啟動儀器。15.2.1長發(fā)、手指和衣服必須與旋轉(zhuǎn)部件保持一定距離；如果儀器發(fā)出異味或冒煙，立即關(guān)掉總開關(guān)，拔掉電源線。15.2.2不要讓儀器中的血樣或試劑濺出，也不要讓其它東西掉入儀器。否則，會引起短路。如果發(fā)生上述情況，請立即關(guān)掉總開關(guān)，拔掉電源線，并與Sysmex代理商聯(lián)系。15.23請勿觸摸儀器的電路，尤其不能用濕手，否則會有觸電危險。15.2.4儀器必須連接在電壓正確的電源插座上，并注意接地。1525避免損壞電源線。勿將任何設(shè)備壓在電源線上。不能拉電源線。15.2.6在連接其它設(shè)備（主計算機、打印機）之前必須將儀器電源關(guān)閉。1

20、5.3安裝15.3.1儀器必須在干燥、無灰塵的地方安裝。15.3.2防止水濺到儀器上。15.33勿將儀器暴露于溫差大和太陽直射的地方。15.3.4避免震蕩和振動。15.3.5安裝地點必須通風(fēng)良好。15.3.6避免在發(fā)出噪音的設(shè)備旁安裝儀器，如錄音機、離心機等。153.7不能在貯存化學(xué)品和產(chǎn)生氣體的地方安裝儀器。15.4防止感染15.4.1 一般說來，儀器所有的部件和表血都有潛在的傳染性。15.4.2操作、保養(yǎng)、服務(wù)或修理儀器時必須穿防護衣，戴橡皮手套。工作完畢后，用消毒液洗手。15.4.4勿徒手接觸廢棄物，以及接觸過廢棄物的部件。15.4.5如果不小心接觸了有傳染性的物質(zhì)或表面，立即用水徹底清洗皮膚，然后按照實驗室消毒規(guī)程操作。15.4.6即使是質(zhì)控品，也是有傳染性的。進行