鮮凍肉的檢驗(yàn)程序

1、鮮凍肉的檢驗(yàn)程序編號(hào)：一、檢驗(yàn)產(chǎn)品鮮凍豬肉、牛肉、兔肉、鵝肉、鴨肉、雞肉二、使用標(biāo)準(zhǔn)GB 16869-2005 鮮、凍禽產(chǎn)品GB 2707-2005 鮮(凍)畜肉衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.1-2010 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 總則GB 4789.2-2010 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定GB 4789.3-2010 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)GB 4789.17-2003 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)肉與肉制品檢驗(yàn)GB/T 5009.17-2003 食品中總汞的測(cè)定方法GB/T 5009.44-2003 肉與肉制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法三、檢驗(yàn)流程鮮/凍肉類微生物檢驗(yàn)抽取微生物檢驗(yàn)試樣 剩余樣品檢驗(yàn)解凍（凍

2、肉） 檢驗(yàn)組織狀態(tài)、色澤、氣味、淤血、硬桿毛、異物抽取揮發(fā)性鹽基氮、加熱肉湯、總汞等分別檢驗(yàn)報(bào)告四、 樣品的采取1、現(xiàn)場(chǎng)采樣用品1.1、采樣箱。1.2、帶蓋搪瓷盤。1.3、溫度計(jì)。1.4、編號(hào)牌或蠟筆、紙。2、生肉及臟器檢樣：如系屠宰場(chǎng)宰后的畜肉，可于開腔后，用無(wú)菌刀采取兩腿內(nèi)側(cè)肌肉150克（或劈半后采取兩側(cè)背最長(zhǎng)肌各150克)；如系冷藏或售賣之生肉，可用無(wú)菌刀取腿肉或其他部位之肌肉250克。檢樣采取后，放入滅菌容器內(nèi)，立即送檢；如條件不許可時(shí)，最好不超過(guò)3小時(shí)，送檢樣時(shí)應(yīng)注意冷藏，不得加人任何防腐劑。檢樣送往化檢驗(yàn)室應(yīng)立即檢驗(yàn)或放置冰箱暫存。3.禽類（包括家禽和野禽）：鮮、凍家禽采取整只，放

3、滅菌容器內(nèi)。帶毛野禽可放清潔容器內(nèi)，立即送檢。以下處理同2。五、菌落總數(shù)測(cè)定： GB/T 4789.2-20101、原理：食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。2. 設(shè)備和材料除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：2.1、恒溫培養(yǎng)箱：36 ±1 ，30 ±1 。2.2、冰箱：2 5 。2.3、恒溫水浴箱：46 ±1 。2.4、天平：感量為0.1 g。2.5、均質(zhì)器。2.6、無(wú)菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸頭

4、。2.7、無(wú)菌錐形瓶：容量250 mL、500 mL。2.8、無(wú)菌培養(yǎng)皿：直徑90 mm。2.9、PH 計(jì)或pH 比色管或精密pH 試紙。2.10、放大鏡或/和菌落計(jì)數(shù)器。3、培養(yǎng)基和試劑3.1、平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基：、成分：胰蛋白胨5.0g；酵母浸膏2.5g；葡萄糖1.0g；瓊脂15.0g；蒸餾水1000 mL；pH 7.0±0.2。制法：將上述成分加于蒸餾水中，煮沸溶解，調(diào)節(jié)pH，分裝試管或錐形瓶，121高壓滅菌15min。3.2、磷酸鹽緩沖液、成分：磷酸二氫鉀（KH2PO4）34.0g；蒸餾水500mL；pH 7.2。、制法：貯存液：稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500mL蒸餾水

5、中，用大約175 mL的1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH，用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液：取貯存液1.25mL，用蒸餾水稀釋至1000mL，分裝于適宜容器中，121高壓滅菌15min。3.3、無(wú)菌生理鹽水、成分：氯化鈉8.5g；蒸餾水1000mL、制法“稱取8.5氯化鈉溶于1000mL蒸餾水中，121高壓滅菌15 min。4、檢驗(yàn)程序：5、操作步驟5.1、樣品的稀釋5.1.1、稱取25g樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min10000r/min均質(zhì)1min2min，或放入盛有225mL 稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2m

6、in，制成1:10的樣品勻液。5.1.2、用1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無(wú)菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成1:100 的樣品勻液。5.1.3 、按5.1.2 操作程序，制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1 次1mL無(wú)菌吸管或吸頭。5.1.4、根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2個(gè)3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí)，吸取1mL樣品勻液于無(wú)菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取1mL空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)作空白對(duì)

7、照。5.1.5、及時(shí)將15mL20mL 冷卻至46的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46±1恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。5.2、 培養(yǎng)5.2.1、待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36±1培養(yǎng)48 h±2 h。水產(chǎn)品30±1培養(yǎng)72 h±3 h。5.2.2、如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長(zhǎng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約4 mL），凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按5.2.1 條件進(jìn)行培養(yǎng)。5.3、菌落計(jì)數(shù)：可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位（colony-

8、forming units，CFU）表示。5.3.1、選取菌落數(shù)在30CFU300CFU 之間、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU 的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300 CFU 的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。5.3.2、其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。5.3.3、當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無(wú)明顯界線的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。6、結(jié)果與報(bào)告6.1、菌落總數(shù)的計(jì)算方法。6.1.1、若只

9、有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g（mL）樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。6.1.2、若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按公式（1）計(jì)算：式中：N樣品中菌落數(shù)；C平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和；n1第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；n2第二稀釋度（高稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；d稀釋因子（第一稀釋度）。6.1.3、若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU，則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.1.4、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU，則應(yīng)按稀釋

10、度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.1.5、若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1 乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.1.6、若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU300CFU 之間，其中一部分小于30 CFU 或大于300CFU時(shí)，則以最接近30CFU 或300CFU 的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.2 菌落總數(shù)的報(bào)告6.2.1、菌落數(shù)小于100CFU時(shí)，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報(bào)告。6.2.2、菌落數(shù)大于或等于100CFU 時(shí)，第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前2位數(shù)字，后面用0代替位數(shù)；也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示，按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效

11、數(shù)字。6.2.3、若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù)，則報(bào)告菌落蔓延。6.2.4、若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。6.2.5、稱重取樣以CFU/g為單位報(bào)告，體積取樣以CFU/mL為單位報(bào)告。7、報(bào)告稀釋度1:1001:10001:10000CFU/g平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品六、大腸菌群 GB 4789.3-2010 大腸菌群MPN計(jì)數(shù)法1、原理：在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。最可能數(shù)，MPN基于泊松分布的一種間接計(jì)數(shù)方法。2、設(shè)備和材料：除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：2.1、恒溫培養(yǎng)箱：36±1 。2

12、.2、冰箱：25。2.3、恒溫水浴箱：46±1。2.4、天平：感量0.1g。2.5、均質(zhì)器。2.6、無(wú)菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸頭。2.7、無(wú)菌錐形瓶：容量500 mL。2.8、pH 計(jì)或pH 比色管或精密pH 試紙。3、培養(yǎng)基和試劑3.1、月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯、成分胰蛋白胨或胰酪胨20.0g；氯化鈉5.0g；乳糖5.0g；磷酸氫二鉀(K2HPO4)2.75 g；磷酸二氫鉀(K2HPO4)2.75g；月桂基硫酸鈉0.1g；蒸餾水1000mL；pH 6.8±0.2；、制法：將上述成分溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié)p

13、H，分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10mL。121高壓滅菌15min。3.2、煌綠乳糖膽鹽肉湯“、成分：蛋白胨10.0g；乳糖10.0g；牛膽粉（oxgall或oxbile）溶液200mL；0.1%煌綠水溶液13.3mL；蒸餾水800mL；pH 7.2±0.1；、制法：將蛋白胨、乳糖溶于約500mL蒸餾水中，加入牛膽粉溶液200mL（將20.0g脫水牛膽粉溶于200mL蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH至7.07.5），用蒸餾水稀釋到975mL，調(diào)節(jié)pH，再加入0.1%煌綠水溶液13.3mL，用蒸餾水補(bǔ)足到1000mL，用棉花過(guò)濾后，分裝到有玻璃小倒管的試管中，每管10mL。121高壓滅菌15mi

14、n。3.3、磷酸鹽緩沖液：、成分：磷酸二氫鉀(K2HPO4)34.0g；蒸餾水500mL；pH 7.2。、制法：貯存液：稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500mL蒸餾水中，用大約175mL的1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH，用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液：取貯存液1.25mL，用蒸餾水稀釋至1000mL，分裝于適宜容器中，121高壓滅菌15min。3.4、無(wú)菌生理鹽水:稱取8.5氯化鈉溶于1 000 mL蒸餾水中，121 高壓滅菌15 min。3.5、無(wú)菌1 mol/L NaOH：稱取40g氫氧化鈉溶于1000mL蒸餾水中，121高壓滅菌15min。3.6、無(wú)菌1 mol/L

15、HCl：移取濃鹽酸90mL，用蒸餾水稀釋至1000mL，121高壓滅菌15min。4、檢驗(yàn)程序：5、操作步驟5.1、樣品的稀釋5.1.1、稱取25g樣品,放入盛有225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi),8000r/min10000r/min 均質(zhì)1min2min,或放入盛有225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min，制成1:10的樣品勻液。5.1.2、樣品勻液的pH值應(yīng)在6.57.5之間，必要時(shí)分別用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調(diào)節(jié)。5.1.3、用1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1mL，沿管壁緩緩注入9 mL磷

16、酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支1mL無(wú)菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成1:100 的樣品勻液。5.1.4、根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換用1支1mL 無(wú)菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過(guò)程不得超過(guò)15min。5.2、初發(fā)酵試驗(yàn)：每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯，每管接種1mL（如接種量超過(guò)1mL，則用雙料LST肉湯），36±1培養(yǎng)24h±2h，觀察倒管

17、內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生，24h±2h產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48h±2h，產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。5.3、復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）管中，36±1培養(yǎng)48h±2h，觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者，計(jì)為大腸菌群陽(yáng)性管。5.4、大腸菌群最可能數(shù)（MPN）的報(bào)告按5.3確證的大腸菌群LST陽(yáng)性管數(shù)，檢索MPN表，報(bào)告每g（mL）樣品中大腸菌群的MPN值。 6. 報(bào)告稀釋度1:1001:10001:10000CFU/g平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品七、感官檢驗(yàn) GB/T 500

18、9.44-20031、組織形態(tài)、色澤、氣味將抽取的微生物檢驗(yàn)試驗(yàn)后的全部樣品，置于自然光或相當(dāng)于自然光的感官。評(píng)定時(shí)，用觸覺(jué)鑒別組織形態(tài)，視覺(jué)鑒別色澤，嗅覺(jué)鑒別氣味。2、煮沸后肉湯的檢查稱取20g絞碎的試樣，置于200mL燒杯中，加入100mL水，用表面皿蓋上加熱5060，開蓋檢查氣味，繼續(xù)加熱煮沸20min30min，檢查肉湯的氣 味，滋味和透明度，以及脂肪的氣味和滋味，并參見衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。3、肉眼可見異物：用視覺(jué)鑒別，與鑒別組織狀態(tài)、色澤、氣味同時(shí)進(jìn)行。4、報(bào)告項(xiàng)目鮮產(chǎn)品凍產(chǎn)品組織狀態(tài)色澤氣味加熱后肉湯淤血以淤血面積（S）計(jì)/cm² 硬桿毛（長(zhǎng)度超過(guò)12mm的羽毛，或直徑超過(guò)2mm的

19、羽毛根)異物注：1.鮮凍禽肉需做淤血和硬桿毛的感官檢驗(yàn) 2.淤血面積指單一整禽，或單一分割肉禽的一片淤血面積。八、揮發(fā)性鹽基氮（半微量定氮法） GB/T 5009.44-20031、原理：揮發(fā)性鹽基氮是指動(dòng)物性食品由于酶和細(xì)菌的作用。在腐敗過(guò)程中，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氮以及胺類等堿性含氮物質(zhì)。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，在堿性溶液中蒸出來(lái)后，用標(biāo)準(zhǔn)酸溶液滴定計(jì)算含量。2、試劑：2.1、氧化鎂混懸液（10g/L）：稱取1.0g氧化鎂，加100mL水，振搖成混懸液。2.2、硼酸吸收液（20g/L）。2.3、鹽酸c(HCl)=0.010mol/L或硫酸c(1/2H2SO4) =0.010mol/L的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶

20、液。2.4、甲基紅-乙醇指示劑（2g/L）。2.5、次甲基藍(lán)指示劑（1g/L）。臨用時(shí)將上述兩種指示液等量混合為指示液。3、儀器：3.1、半微量定氮器。3.2、微量滴定管：最小分度0.01mL。4、分析步驟：4.1、試樣處理：將試樣除去脂肪、骨及腱后，絞碎攪勻，稱取10.0g,置于錐 形瓶中，加100mL水，不時(shí)振搖，浸漬30min后過(guò)濾，濾液置冰箱備用。4.2、蒸餾滴定：將盛有10mL吸收液及5滴6滴混合指示液的錐形瓶置于冷凝管下端，并使其下端插入吸收液的液面下，準(zhǔn)確吸取5.0mL上述試樣濾液于蒸餾器反應(yīng)室內(nèi)，加5mL氧化鎂混懸液（10g/L），迅速蓋塞，并加水以防漏氣，通入蒸汽，進(jìn)行蒸餾，

21、蒸餾5min即停止，吸收液用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.010mol/L）或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，終點(diǎn)至紫色。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。5、結(jié)果結(jié)算：試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量按式（2）進(jìn)行計(jì)算。 （V1-V2）×c×14 X= ×100 （2） m×5/100式中：X-試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量，單位為毫克每百克（mg/100g）;V1-滴定用樣液消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升（Ml）;V2-試劑空白消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升（Ml）;C-鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的實(shí)際濃度，單位為摩爾每升（mol/L）;14-與1.00mL鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(HCl)=0.

22、010mol/L或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(1/2H2SO4) =0.010mol/L相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量，單位為毫克（mg）；m-試劑質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。6、精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算數(shù)平均值的10%。7、實(shí)驗(yàn)記錄:V1V2CX平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品九、總汞的測(cè)定 GB/T 5009.17-2003 二硫腙法1、原理：樣品經(jīng)消化后，汞離子在酸性溶液中可與雙硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯 佐烷，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。2、試劑與儀器：2.1、硝酸。2.2、硫酸。2.3、氨水。2.4、三氯甲烷：不應(yīng)含有氧化物。 2.5、硫酸（1+35）

23、：量取5m1硫酸、緩緩倒入l5Oml水中，冷卻后加水至180ml。2.6、硫酸（1+19）：量取5ml硫酸，緩緩倒入90ml水中，冷卻后加水至98ml。2.7、鹽酸羥胺溶液（200g/L）：吹清潔空氣，可使含有的微量汞揮發(fā)除去。2.8、溴麝香草酚藍(lán)-乙醇溶液指示液（1g/L）。2.9、二硫腙-三氯甲烷溶液（0.5g/L），保存冰箱中，必要時(shí)用下述方法純化。2.10、二硫腙使用液：吸取1.0mL二硫腙溶液，加三氯甲烷至10mL，混勻，用1cm比色杯，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)510nm處測(cè)吸光度（A），用式（3）算出配制100mL二硫腙使用液（70%透光率）所需二硫腙溶液的毫升數(shù)（V)。 （3）

24、2.11、汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.1354克經(jīng)干燥器干燥過(guò)的二氯化汞，加硫酸（1+35） 使其溶解后，移入lOOml容量瓶中，并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1ml汞。2.12、汞標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.Oml汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于lOOml容量瓶中，加硫酸（1+35）稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于lOug汞。再吸取此液5.Oml于50ml容量瓶中，加硫酸（1+35）硫酸稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于1ug汞。2.13、消化裝置2.14、分光光度計(jì)3.操作方法：3.1、樣品消化：稱取20克搗碎混勻樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45ml硝酸，15ml硫酸，裝上冷凝管后小火加熱，待開始發(fā)泡即停止

25、加熱，發(fā)泡停止后加熱回流2小時(shí)。如加熱過(guò)程中溶液變棕色，再加5ml硝酸，繼續(xù)回流2小時(shí)，放冷，用適量水洗滌冷凝管，洗液并入消化液中，取下錐形瓶，加水至總體積為150ml。取與消化樣品相同量的硝酸，硫酸按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。3.2、測(cè)定：、取消化液(全量)，加20ml水，在電爐上煮沸10分鐘，除去二氧化氮等，放冷。、于樣品消化液及試劑空白液中各加5高錳酸鉀溶液至溶液呈紫色，然后再加20鹽酸羥胺溶液使紫色褪去，加2滴麝香草酚藍(lán)指示液，用氨水調(diào)節(jié)PH，使橙紅色變?yōu)辄S色(PHl2)定量轉(zhuǎn)移至125m1分液漏斗中。、吸取0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oml汞標(biāo)準(zhǔn)使用液(

26、相當(dāng)于0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oug汞)，分別置于125m1分液漏斗中，加lOmll5硫酸，再加水至40ml混勻。再各加lml20鹽酸羥胺溶液，放置20分鐘并時(shí)時(shí)振搖。3.2.4、于樣品消化液，試劑空白液及標(biāo)準(zhǔn)液振搖放冷后的分液漏斗中加5.Oml雙硫腙使用液，劇烈振搖2分鐘，靜置分層后，經(jīng)脫脂棉將三氯甲烷層濾人1cm比色杯中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)。在波長(zhǎng)490nm處測(cè)光度，標(biāo)準(zhǔn)管吸光度減去零管吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、結(jié)果計(jì)算：試樣中汞的含量按式（4）進(jìn)行計(jì)算  （4） 式中：X-試樣中汞的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；A1 -試樣消化液中汞

27、的質(zhì)量，單位為微克（g）：A2-試樣空白液中汞的質(zhì)量，單位為微克（g）：M-試樣質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。5、精密度：在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)計(jì)算平均值的10%。6、報(bào)告：MA1A2X平均值第一個(gè)樣品第二個(gè)樣品十、肉制品指標(biāo)1、感官指標(biāo)：項(xiàng)目鮮產(chǎn)品凍產(chǎn)品組織狀態(tài)肌肉富有彈性，指壓后凹陷部位立即恢復(fù)原狀肌肉指壓后部位恢復(fù)較慢，不易完全恢復(fù)原狀色澤表皮和肌肉切面有光澤，具有應(yīng)有的色澤氣味具有應(yīng)有的氣味，無(wú)異味加熱后肉湯透明澄清，脂肪團(tuán)聚于液面，具有應(yīng)有的滋味淤血以淤血面積（S）計(jì)/cm²S10.5S1S0.5不得檢出片數(shù)不得超過(guò)抽樣量的2%忽略不計(jì)硬桿毛(長(zhǎng)度超過(guò)12mm的羽毛，或直徑超過(guò)2mm的羽毛根)/(根/10kg)1異物不得檢出注：1.鮮凍禽肉需做淤血和硬桿毛的感官檢驗(yàn) 2.淤血面積指單一整禽，或單一分割肉禽的一片淤血面積。2、理化指標(biāo)項(xiàng) 目指標(biāo)發(fā)揮性鹽基氮/(mg/100g) 15汞（Hg）/(mg/kg) 0.053、微生物指標(biāo)指標(biāo)項(xiàng)目鮮肉凍肉菌落總數(shù)/(CFU/g) 1×1045×103大腸菌群（MPN/100g） 1×1045×103十一、原始記錄產(chǎn)品名稱取樣數(shù)量檢驗(yàn)依據(jù)GB 4789.17-2003GB 47