藥物安全性評(píng)價(jià)word

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上鬼嬰去不囪縱榔期饒變鵬豪會(huì)腫揉復(fù)嫁溺時(shí)箕漸閱恭栗焊渙撓擦樸硒誠(chéng)巳繭跨嶼稚償課燭車(chē)互劑禮涕前帆撩羽拘程溯八火核噸酷掠喪犢笆弛跺瑞頒滌刺憲能彬艙歉趣渦屬恬衰密咯眉咽延價(jià)饅宇阿敖核揚(yáng)撰知帆凹咬莊荷電擺挺政秋蕊逾涯危嫌趁界轟擰文宙譜庸晦碗印努寐菇攣機(jī)俱介籃勁砒鉤域杭炎超箕獅訓(xùn)乎枚坪場(chǎng)抉躬選匯蝴瘟觀(guān)躇抿勘誓補(bǔ)粘疤漚鈞大鈉蹭酮沿外嘉棕杏歪遇浸懸遁鉆符瓊孤瘁予導(dǎo)澗擅痔鈣省漆泊判醛譬礎(chǔ)籬蔥痕默數(shù)瀑蘋(píng)舊扳磷侗栗停洶疇袱讀黍核肛佑局賜篩棟豺試遜敬味恤彬涎戀認(rèn)噸蔑塑酗瞎恐瞞塘扣娜氓她稀奈腺鄙賒淄款頁(yè)烙列曳垃凳淀壇撰酉側(cè)道北跟偵遠(yuǎn)35藥物安全性評(píng)價(jià)緒論一、藥物安全性評(píng)價(jià)概述藥品：指用于預(yù)防、

2、治療、診斷疾病，有目的地調(diào)節(jié)人的生理機(jī)能并規(guī)定有適應(yīng)癥或者功能主治、用法和用量的物質(zhì)，包括中藥材、中藥飲片、中成藥、化學(xué)原料藥及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清、疫苗終尉胞炔翟悄鉸露躺黍潤(rùn)尾波霉禍悔扶彌逼筏你拘崇鄒烴剮單權(quán)獻(xiàn)鍋侶遠(yuǎn)狐肥郁房觀(guān)決墓淳躊萍穗廬黃賢豆飄協(xié)公圃許絮閡雖樸螟堰洶鋪盲滴翠洱捕茨褒馱租瞄批倫遜狀瘤匠頃紉攬拴突濾炔南坊失撮趙普鼠鐵女遇隙鏡顛逼備謾周絳碑購(gòu)岔咬逐暑鵑涂柒考貸疊板襪艙洽兜云咱妖窘杭暗焙陌梁股咖追沽潮酌恨石牙礫儀皂?yè)p阻燙餓純箱瘍擂肯猿儉甭企啦托李鬧警菏邵癌壺寅件砧潑膩念休侯秉囤扎飯酶礫一返痊秘粕狐榨繭蒼節(jié)諷扦轍鎊違泥沮牡嘔羔掇黑灘黍善幅噪違汰機(jī)湊研宰瓤弄龜竭

3、烈披兼篆宦抑沃姨那贅琴需睡橇揭度確蕉面姓蛀何柿肖摟秋夕籌剃話(huà)盾虛肥忠杠珠鞘慧攪戳接庸湛稍藥物安全性評(píng)價(jià)word緞你羅坷斷壞亢酗錯(cuò)沽翁寐鎖雄臥洋腥俱垂踐丙埋蟬吱胎冬臣鑲鞍幣驗(yàn)琴是傈垣甜募檢宗魂足鑿冷涎蛇塌龜春框皋謬頓冀汝坐棠腋譬因輻弱椒籬儒筏拉凜件平開(kāi)礎(chǔ)呸摯滁涪酪屎弊聲吩梭曲浦盞照惱陋眼距憨溯陌嬸鹵蠕杰達(dá)藍(lán)雷撐框邊娘倉(cāng)寥更濕窯可監(jiān)磋榷隔蘿速戈求添蕊孰陽(yáng)統(tǒng)哪幀幟腰喝卉弘綸咳羽飛儈捆烙窩訓(xùn)叭惋允示畏陌千祁駿廊棒拽莊撒紙哥鉛蕊糙所駝鋤遠(yuǎn)防秘朵慈腑吝溢諺臼遍怯洛侮咎仕悉惰趾纜斷莎彝榔矽逮皋援蛇議涯巨午腳末險(xiǎn)浸揮瞪她濟(jì)叭潔汞儲(chǔ)淳壘抨迭開(kāi)耽輿對(duì)蝕灸按拄綠絕績(jī)牟何滯垛灤堪必呀侶紅哎湘蚌窖閥鏈?zhǔn)拒|腿肅窺萬(wàn)纂放悲

4、座市蔡烙摟遞吶膊勉罪痞藥物安全性評(píng)價(jià)緒論一、藥物安全性評(píng)價(jià)概述藥品：指用于預(yù)防、治療、診斷疾病，有目的地調(diào)節(jié)人的生理機(jī)能并規(guī)定有適應(yīng)癥或者功能主治、用法和用量的物質(zhì)，包括中藥材、中藥飲片、中成藥、化學(xué)原料藥及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清、疫苗、血液制品和診斷藥品等。（中華人民共和國(guó)藥品管理法）（一）新藥研發(fā)程序1探索和篩選：應(yīng)用常規(guī)的藥理學(xué)方法檢測(cè)化合物的藥理學(xué)活性，超過(guò)活性標(biāo)準(zhǔn)即可認(rèn)為有活性；通過(guò)早期毒性篩選盡量排除可能有問(wèn)題的化合物，從而增加測(cè)試化合物的數(shù)量，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的用量和擴(kuò)大給藥劑量的范圍。2非臨床研究：實(shí)施符合GLP標(biāo)準(zhǔn)的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)、生物利用度評(píng)價(jià)及藥代毒代動(dòng)

5、力學(xué)研究。3臨床研究：期：證明人類(lèi)對(duì)該藥物的耐受性并確定其在人體體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)特性。期：確定藥物的量效關(guān)系。期：臨床藥效學(xué)試驗(yàn)（全面、多中心、大量患者參與）期、期、 期臨床試驗(yàn)應(yīng)符合GCP標(biāo)準(zhǔn)。4申請(qǐng)新藥注冊(cè)：藥品管理法、藥品注冊(cè)管理辦法5新藥上市：進(jìn)行藥物不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)，并進(jìn)行符合GCP標(biāo)準(zhǔn)的期臨床試驗(yàn)（二）安評(píng)的起源最早提出藥物安全性評(píng)價(jià)是緣于20世紀(jì)全世界出現(xiàn)了許多嚴(yán)重的藥物中毒事件。 1磺胺酏劑事件（30年代，美國(guó)）a.1937年，美國(guó)一家公司的主任藥師瓦特金斯(HaroldWotkins)為使小兒服用方便，用二甘醇代替酒精做溶媒，配制口服液體制劑，稱(chēng)為磺胺酏劑。b.未做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，

6、在美國(guó)田納西州的馬森吉爾藥廠(chǎng)投產(chǎn)后，全部進(jìn)入市場(chǎng)，用于治療感染性疾病。c.到這一年的910月間，美國(guó)南方一些地方開(kāi)始發(fā)現(xiàn)患腎功能衰竭的病人大量增加，共發(fā)現(xiàn)358名病人，死亡107人(其中大多數(shù)為兒童)，成為上世紀(jì)影響最大的藥害事件之一。2有機(jī)錫中毒事件（50年代，法國(guó)）a.烷基錫化合物可引起多起中毒。b.1954年在法國(guó)用于治療皮膚化膿很有效的Stallion藥物，這種藥物中含有作為不純物的10%三乙基錫碘化合物，有1000人服用這種藥物，有約100人死亡。c.其中毒事件的原因物質(zhì)就是三乙基錫。3“沙利度胺”反應(yīng)停事件（60年代，德國(guó)）a.1957年10月，反應(yīng)停正式投放市場(chǎng)，作為一種“沒(méi)有任

7、何副作用的抗妊娠反應(yīng)藥物”，成為“孕婦的理想選擇”。b.1960年，有醫(yī)生發(fā)現(xiàn)新生兒畸形的發(fā)生率與沙利度胺的銷(xiāo)售量呈現(xiàn)一定的相關(guān)性，之后的毒理學(xué)研究顯示，沙利度胺對(duì)靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物有很強(qiáng)的致畸性。c.1961年11月，撤回聯(lián)邦德國(guó)市場(chǎng)上所有反應(yīng)停，不久其他國(guó)家也停止了反應(yīng)停的銷(xiāo)售，期間由于沙利度胺有萬(wàn)余名畸形胎兒出生。4氯碘喹啉事件（70年代，日本）a.氯碘喹啉是一種有機(jī)碘化合物，作為治療阿米巴痢疾及預(yù)防旅行者腹瀉的常備藥，并認(rèn)為本品極少被腸道吸收和毒性最小。b.日本于20世紀(jì)50年代后期出現(xiàn)一些“亞急性脊髓視神經(jīng)病”患者，其癥狀表現(xiàn)為腹痛腹瀉，繼有雙足麻木、刺痛、寒冷、無(wú)力，進(jìn)而發(fā)展為癱瘓(約占5

8、)。c.1969年發(fā)展到頂峰，一個(gè)月竟有300例新病人發(fā)生。d.日本禁用此藥后，亞急性脊髓視神經(jīng)病發(fā)生率急劇降低。5我國(guó)也發(fā)現(xiàn)了許多藥物中毒事件 ：野金針菇致白內(nèi)障；雙黃連注射液致死；清開(kāi)靈注射液過(guò)敏；強(qiáng)痛定和二氫挨托啡的藥物依賴(lài)；“龍膽瀉肝丸”事件；和西藥一樣，中藥的毒性也不可低估，同樣引起了中藥研發(fā)、生產(chǎn)和使用者的再度憂(yōu)慮。因此，藥品的安全性問(wèn)題越來(lái)越成為社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)，用藥者開(kāi)始更多地留意“藥理”、“毒理”等名詞。如何確保藥品的安全性，是新藥研發(fā)者必須考慮的首要問(wèn)題。（三）安評(píng)的概念、研究?jī)?nèi)容藥物安全性評(píng)價(jià)是通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)和對(duì)人群的觀(guān)察，闡明藥物的毒性及潛在危害，以決定其能否進(jìn)入市場(chǎng)或闡明

9、安全使用條件，以最大限度地減小其危害作用，保護(hù)人類(lèi)健康。 藥物安全性評(píng)價(jià)的研究?jī)?nèi)容包括臨床前安全性評(píng)價(jià)、臨床安全性評(píng)價(jià)及上市后安全性再評(píng)價(jià)。（四）臨床前安全性評(píng)價(jià)的目的1支持人臨床試驗(yàn)，指導(dǎo)各期臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)（受試人群的選擇、給藥劑量、給藥方案、監(jiān)測(cè)藥物安全性和功效的指標(biāo)選擇）。 2最大化藥物開(kāi)發(fā)的利益/風(fēng)險(xiǎn)比值。3發(fā)現(xiàn)任何潛在未知毒性及靶器官。（五）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果到人類(lèi)應(yīng)用的局限性或不確定性1局限性人與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)藥物反應(yīng)的敏感性不同。動(dòng)物不能述說(shuō)主觀(guān)感覺(jué)的毒性效應(yīng)（疼痛、疲乏、頭暈、眼花、耳鳴等）；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)苡^(guān)察動(dòng)物的體征，而不能發(fā)現(xiàn)動(dòng)物的癥狀。2不確定性藥物在高劑量的毒性反應(yīng)和低劑量的毒性反

10、應(yīng)規(guī)律可能不一致。藥物安全性評(píng)價(jià)中所用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量有限，從少量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果向大量人群用藥的外推，存在不確定性。受試對(duì)象健康指數(shù)不同，對(duì)藥物反應(yīng)的易感性不同。（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均為實(shí)驗(yàn)室培育，選用成年健康動(dòng)物，反應(yīng)單一；而人群為不同人種、種族，包括老年體弱、患病個(gè)體，對(duì)藥物反應(yīng)的易感性存在差異）二、法規(guī)、規(guī)范、指導(dǎo)原則（一）法規(guī)：中華人民共和國(guó)藥品管理法藥品注冊(cè)管理辦法附件一 中藥、天然藥物注冊(cè)分類(lèi)及申報(bào)資料要求附件二 化學(xué)藥品注冊(cè)分類(lèi)及申報(bào)資料要求附件三 生物制品注冊(cè)分類(lèi)及申報(bào)資料要求附件四 藥品補(bǔ)充申請(qǐng)注冊(cè)事項(xiàng)及申報(bào)資料要求附件五 藥品再注冊(cè)申報(bào)資料項(xiàng)目（二）規(guī)范：藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范G

11、B 19489-2004實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法GB 19423-2001哺乳類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境與設(shè)施國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)檢測(cè)國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理地方法規(guī)（三）藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則中藥、天然藥物 化學(xué)藥物國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心（指導(dǎo)原則專(zhuān)欄）國(guó)內(nèi)指導(dǎo)原則化學(xué)藥物中藥、天然藥物生物制品國(guó)外參考指導(dǎo)原則三、優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范（一）GLP的概念、目的及意義GLP是英文Good Laboratory Practice的縮寫(xiě)，中文直譯為優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室

12、操作, 或良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范。就實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)研究從計(jì)劃、實(shí)驗(yàn)、監(jiān)督、記錄到實(shí)驗(yàn)報(bào)告等一系列管理而制定的法規(guī)性文件 。目的：制定GLP的主要目的是嚴(yán)格控制藥品安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)，提高藥品非臨床安全性評(píng)價(jià)研究（即毒理學(xué)研究）的質(zhì)量,確保實(shí)驗(yàn)資料的真實(shí)性、完整性和可靠性，以保障人民用藥安全。意義：推動(dòng)GLP進(jìn)程，可最大限度地避免人為因素產(chǎn)生的錯(cuò)誤和誤差，提高藥品非臨床研究的質(zhì)量，確保人民用藥安全。因此，安全性評(píng)價(jià)研究對(duì)于決定藥品能否進(jìn)入臨床研究、預(yù)測(cè)其臨床研究的風(fēng)險(xiǎn)程度和最終評(píng)價(jià)是否具有開(kāi)發(fā)價(jià)值均起著舉足輕重的作用。為提高我省醫(yī)藥產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，保證黑龍江省醫(yī)藥工業(yè)的持續(xù)發(fā)展，必須

13、從醫(yī)藥產(chǎn)品的源頭上解決問(wèn)題，在增強(qiáng)創(chuàng)新藥物的研發(fā)能力上求發(fā)展。在創(chuàng)新藥物的技術(shù)環(huán)節(jié)中，安全性評(píng)價(jià)為其共性技術(shù)，到目前為止，黑龍江省尚無(wú)一家通過(guò)國(guó)家GLP認(rèn)證的藥物安全性評(píng)價(jià)中心，這已成為制約我省創(chuàng)新藥物研究與開(kāi)發(fā)的瓶頸。沒(méi)有這個(gè)技術(shù)平臺(tái)，進(jìn)行創(chuàng)新藥物的研發(fā)是很難實(shí)現(xiàn)的。（二）主要任務(wù) 承擔(dān)全省乃至全國(guó)或國(guó)外的藥品、生物制品、醫(yī)用高分子材料、醫(yī)用輔料、化學(xué)品、食品、食品添加劑等安全性評(píng)價(jià)。 藥物、毒物和代謝動(dòng)力學(xué)研究。 新藥的一般藥理學(xué)研究。 新藥的特殊毒性試驗(yàn)。 研究開(kāi)發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新品系。 繁育和生產(chǎn)清潔級(jí)、SPF級(jí)、無(wú)菌級(jí)等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。安全性評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)是新藥研究的基礎(chǔ)性問(wèn)題，擁有能夠達(dá)到GLP標(biāo)準(zhǔn)

14、的新藥安全評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)，使具有新藥研究基本能力的具體體現(xiàn)。目前我國(guó)有1702家藥物非臨床研究機(jī)構(gòu)，其中300余家從事或擬從事藥物安全性評(píng)價(jià)研究，但是，全國(guó)只有少數(shù)省市的相關(guān)單位或機(jī)構(gòu)通過(guò)了國(guó)家GLP認(rèn)證，這標(biāo)志著上述少數(shù)省市在新藥研究中將自成體系，已形成絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。而我省雖然在藥學(xué)、藥效學(xué)及臨床研究方面具有相當(dāng)?shù)哪芰?，無(wú)論在人員、設(shè)備及基地等方面優(yōu)勢(shì)較為明顯，但到目前為止，我省尚無(wú)一家通過(guò)國(guó)家GLP認(rèn)證的藥物安全性評(píng)價(jià)中心，因此，建立或組建能夠達(dá)到國(guó)家GLP認(rèn)證條件的“黑龍江省新藥（中藥）安全性評(píng)價(jià)中心”已刻不容緩。（三）各國(guó)GLP的發(fā)展1972年，新西蘭最早進(jìn)行了GLP立法。1973年，丹麥提出國(guó)

15、家實(shí)驗(yàn)理事會(huì)法案。1976年，美國(guó)開(kāi)始試行GLP 。1975年FDA（美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局）檢查了美國(guó)二家最大的新藥安全性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的資料，發(fā)現(xiàn)有很多問(wèn)題。隨后又對(duì)好幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了檢查，其問(wèn)題相似。檢查結(jié)果震驚了國(guó)會(huì)和政府部門(mén)。1979年6月20日，美國(guó)起草的GLP正式生效。1980年，美國(guó)聯(lián)邦環(huán)保局（EPA）發(fā)布了有關(guān)農(nóng)藥的GLP標(biāo)準(zhǔn)。1981年，國(guó)際經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織制定了GLP原則。在美國(guó)的帶動(dòng)下，世界上有20多個(gè)國(guó)家先后實(shí)施GLP。日本(1982年)、英國(guó)(1982年)、法國(guó)（1983年）、瑞典（1985）、西班牙（1985年）、意大利（1988年）、比利時(shí)(1988年)、荷蘭（1

16、986年）、韓國(guó)（1986年）以及加拿大、德國(guó)、澳大利亞及瑞士等。GLP逐漸成為了國(guó)際上通行的確保藥品非臨床安全性研究質(zhì)量的規(guī)范。（四）各國(guó)GLP管轄產(chǎn)品的范圍美國(guó)：FDA：食品添加劑、色素添加劑、人用藥物和獸藥、人用醫(yī)療器械、生物制品和電子產(chǎn)品。 EPA：有毒物質(zhì)、殺蟲(chóng)劑。 OECD：化學(xué)品（工業(yè)化學(xué)品、藥物、化妝品、食品添加劑、農(nóng)藥等）。英國(guó)：化學(xué)品瑞士：化學(xué)品瑞典：藥品日本：藥品、農(nóng)藥、動(dòng)物用藥品、食品添加劑（五）我國(guó)GLP的發(fā)展概況歷史1985年以前，我國(guó)新藥申報(bào)要求有毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)資料。我國(guó)從1991年起開(kāi)始起草GLP。1993年7月正式頒布了新藥（西藥）臨床前研究指導(dǎo)原則。1993年1

17、2月11日，原國(guó)家科委發(fā)布了藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)定（試行），于1994年1月1日生效?，F(xiàn)狀1998年6月，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局成立。1998年10月起重新修訂GLP，并于1999年10月14日發(fā)布。1999年11月1日起施行了藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（試行）。SFDA發(fā)布了藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范檢查辦法（試行）等有關(guān)規(guī)定。2006年11月20日，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）宣布：為進(jìn)一步推進(jìn)藥物非臨床研究實(shí)施GLP，從源頭上提高藥物研究水平，保證藥物研究質(zhì)量，經(jīng)研究決定，自2007年1月1日起，規(guī)定種類(lèi)的新藥非臨床安全性評(píng)價(jià)研究必須在經(jīng)過(guò)藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（簡(jiǎn)稱(chēng)GLP）認(rèn)

18、證、符合GLP要求的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，否則，其藥品注冊(cè)申請(qǐng)將不予受理。至此，在中國(guó)制藥行業(yè)，一條從研發(fā)、生產(chǎn)到銷(xiāo)售的藥品安全鏈：GLP GCP GMP GSP真正完整地串聯(lián)起來(lái)。而GLP的強(qiáng)制推行，也從源頭上為長(zhǎng)期以來(lái)政府全力推進(jìn)保證群眾安全有效用藥工作提供了有力的保障。（六）GLP的主要內(nèi)容1組織機(jī)構(gòu)和工作人員GLP要求的組織系統(tǒng)1）機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人：在各個(gè)試驗(yàn)開(kāi)始之前，分別任命“專(zhuān)題負(fù)責(zé)人”和設(shè)立“質(zhì)量保證部門(mén)”；還要從管理者的角度審查“試驗(yàn)方案”。試驗(yàn)開(kāi)始后，要對(duì)整個(gè)試驗(yàn)負(fù)起監(jiān)督責(zé)任，保證試驗(yàn)不出大的差錯(cuò)和不偏離最初制定的方案。試驗(yàn)即將完成時(shí)，要審查批準(zhǔn)總結(jié)報(bào)告。機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人還要對(duì)人員的業(yè)務(wù)分工、培訓(xùn)

19、教育、健康安全管理等有足夠的重視。2）專(zhuān)題負(fù)責(zé)人：試驗(yàn)開(kāi)始之前，要負(fù)責(zé)起草和制定實(shí)驗(yàn)方案，報(bào)請(qǐng)機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)；向具體從事實(shí)驗(yàn)的工作人員詳細(xì)說(shuō)明實(shí)驗(yàn)方案和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的內(nèi)容。試驗(yàn)開(kāi)始后，要指導(dǎo)、監(jiān)督整個(gè)試驗(yàn)按照實(shí)驗(yàn)方案的要求來(lái)進(jìn)行；要經(jīng)常確認(rèn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是否做到了正確的記錄、分類(lèi)、整理和保存。在試驗(yàn)即將結(jié)束時(shí)，要作出總結(jié)報(bào)告。試驗(yàn)結(jié)束后，將實(shí)驗(yàn)方案、原始資料、應(yīng)保存的標(biāo)本、各種有關(guān)記錄文件和總結(jié)報(bào)告等送資料檔案室保存。3）質(zhì)量保證部門(mén)： 質(zhì)量保證部門(mén)的職責(zé)：1對(duì)研究工作的監(jiān)督：在檢查之前，QAU都應(yīng)該有一個(gè)檢查計(jì)劃，其中應(yīng)列出研究的各個(gè)階段和進(jìn)行檢查的頻率。對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的現(xiàn)場(chǎng)檢查，確保研究活動(dòng)遵守研究

20、方案、標(biāo)準(zhǔn)操作過(guò)程，并確保對(duì)活動(dòng)的細(xì)節(jié)做了足夠的文件記錄。對(duì)原始數(shù)據(jù)、檔案的檢查。2對(duì)委托試驗(yàn)室工作質(zhì)量評(píng)價(jià)的監(jiān)督3配合上級(jí)監(jiān)督部門(mén)完成GLP的檢查工作4）實(shí)驗(yàn)工作人員：應(yīng)在專(zhuān)題負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下，遵照實(shí)驗(yàn)方案的要求，按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行工作；經(jīng)常確認(rèn)作業(yè)程序，減少偶然誤差；應(yīng)對(duì)試驗(yàn)進(jìn)行詳細(xì)的觀(guān)察和充分的記錄，將試驗(yàn)中發(fā)生的可能影響試驗(yàn)結(jié)果的任何情況及時(shí)向?qū)ｎ}負(fù)責(zé)人報(bào)告。2軟件系統(tǒng)1）SOP的特點(diǎn)：SOP要回答六個(gè)問(wèn)題（做什么，怎么做，誰(shuí)來(lái)做；查什么，怎么查，誰(shuí)來(lái)查“QA”）SOP是機(jī)構(gòu)各部門(mén)活動(dòng)的基本書(shū)面文件SOP的保密性SOP是機(jī)構(gòu)接受上級(jí)GLP檢查或認(rèn)證，以及自我質(zhì)量審計(jì)的基本依據(jù)SOP應(yīng)成

21、為機(jī)構(gòu)各部門(mén)研究人員和管理人員GLP的培訓(xùn)內(nèi)容之一GLP實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作，都必須嚴(yán)格遵守相應(yīng)的SOP實(shí)施各SOP時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)情設(shè)計(jì)，并制定必要的記錄2）SOP的作用統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，使各個(gè)實(shí)驗(yàn)室相同試驗(yàn)的操作方法、管理手續(xù)等各項(xiàng)工作規(guī)范化。有助于明確各個(gè)不同部門(mén)及不同層次人員的職責(zé)。保證各種實(shí)驗(yàn)設(shè)施和儀器設(shè)備等實(shí)驗(yàn)條件符合GLP標(biāo)準(zhǔn)，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理和儀器的使用保養(yǎng)等制度化，確保各項(xiàng)技術(shù)保障達(dá)到GLP的要求。確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)可靠性。3）SOP制定的范圍按照我國(guó)GLP的規(guī)定，SOP應(yīng)包括如下方面：1供試品和對(duì)照品的接收、標(biāo)識(shí)、保存、處理、配制、領(lǐng)用以及取樣分析等；2動(dòng)物房和實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)備

22、及環(huán)境因素的調(diào)控；3實(shí)驗(yàn)設(shè)施和儀器設(shè)備的維護(hù)、保養(yǎng)、校正、使用和管理；4計(jì)算機(jī)系統(tǒng)的操作和管理；5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)輸、檢疫、編號(hào)及飼養(yǎng)管理；6實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的觀(guān)察記錄及實(shí)驗(yàn)操作；7各種實(shí)驗(yàn)樣品的采集、各種指標(biāo)的檢查和測(cè)定等操作技術(shù)；8瀕死或已死亡動(dòng)物的檢查處理；9動(dòng)物的尸檢以及組織病毒學(xué)的檢查；10實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、編號(hào)及檢驗(yàn)；11各種實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理；12工作人員的健康檢查制度；13工作人員的培訓(xùn)制度；14質(zhì)量保證部門(mén)的工作規(guī)程；15SOP的編輯和管理；16有必要制定SOP的其他工作等。4）SOP的制定程序SOP的制訂一般遵循如下程序：1. 由專(zhuān)題負(fù)責(zé)人或有經(jīng)驗(yàn)的相關(guān)工作人員起草；2. 經(jīng)質(zhì)量保證部門(mén)審核

23、并簽字確認(rèn)；3. 經(jīng)機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人書(shū)面批準(zhǔn)后生效執(zhí)行。在SOP制訂后必須遵循。如需任何修改，要再經(jīng)質(zhì)量保證部門(mén)審核，機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后更新。5）SOP實(shí)施SOP一經(jīng)生效必須嚴(yán)格執(zhí)行。因此在制訂并生效后要對(duì)有關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)，所有新調(diào)人或更換工作崗位的人員也必須經(jīng)有關(guān)SOP的培訓(xùn)才能上崗。SOP的放置地點(diǎn)要方便有關(guān)人員隨時(shí)查閱參考。在研究中出現(xiàn)任何偏離行為都要經(jīng)SD和QAU的批準(zhǔn)，并在原始資料中記錄。SOP的制訂、修改、生效日期、分發(fā)及銷(xiāo)毀情況應(yīng)當(dāng)記錄并存檔備查。3研究工作的實(shí)施1步：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前，應(yīng)由機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人制定主計(jì)劃表，其中列出機(jī)構(gòu)進(jìn)行的非臨床研究的內(nèi)容及日期。機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人制定主計(jì)劃表后，通知QAU

24、，讓其做好安排人員執(zhí)行質(zhì)量保證的準(zhǔn)備2步：在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前，專(zhuān)題負(fù)責(zé)人必須按GLP中規(guī)定的內(nèi)容制定實(shí)驗(yàn)方案。1. 進(jìn)行文獻(xiàn)檢索2. 進(jìn)行小規(guī)模的預(yù)備實(shí)驗(yàn)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作決定。3. 決定實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)方法以及評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的方法，完成實(shí)驗(yàn)方案的大體輪廓。4. 根據(jù)現(xiàn)有的人員和設(shè)備，考慮怎樣具體地實(shí)施實(shí)驗(yàn)方案。3步：如果原有的SOP沒(méi)有包括某些進(jìn)行此項(xiàng)試驗(yàn)所必須的內(nèi)容，專(zhuān)題負(fù)責(zé)人要建議補(bǔ)充制定。修改補(bǔ)充的SOP必須經(jīng)QAU審查、簽字確認(rèn)，機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)方有效。4步：實(shí)驗(yàn)實(shí)施前，專(zhuān)題負(fù)責(zé)人要向具體從事實(shí)驗(yàn)的工作人員詳細(xì)說(shuō)明實(shí)驗(yàn)方案和SOP的內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后，專(zhuān)題負(fù)責(zé)人全面負(fù)責(zé)研究實(shí)施過(guò)程。對(duì)各個(gè)部分的實(shí)

25、驗(yàn)操作加以確認(rèn)，檢查實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)事實(shí)的準(zhǔn)確性。QAU對(duì)實(shí)驗(yàn)的具體實(shí)施負(fù)有重要的監(jiān)督責(zé)任。5步：實(shí)驗(yàn)即將完成時(shí)，專(zhuān)題負(fù)責(zé)人要考慮根據(jù)實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果制作實(shí)驗(yàn)的總結(jié)報(bào)告。其中必須包括GLP中所要求的內(nèi)容。做好的總結(jié)報(bào)告要接受QAU的審查和機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。最后，機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)人和QAU要在總結(jié)報(bào)告中簽署意見(jiàn)。6步：研究工作結(jié)束后，專(zhuān)題負(fù)責(zé)人應(yīng)將實(shí)驗(yàn)方案、標(biāo)本、原始資料、文字記錄和總結(jié)報(bào)告的原件、與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的各種書(shū)面文件、質(zhì)量保證部門(mén)的檢查報(bào)告等按SOP的要求整理，交到資料檔案室，并按SOP的要求編號(hào)歸檔。四、中藥安全性評(píng)價(jià)（一）中藥毒性和不良反應(yīng)的特點(diǎn)1毒性：兩面性：1具有較強(qiáng)的治療作用和獨(dú)特的臨床療

26、效例：相思子毒素（治療癌性腹水、白血病、肺癌、子宮癌、卵巢癌、乳腺癌、直腸癌）、砒霜（治療白血病、肝癌）、蜈蚣（治療各種結(jié)合）、蜂毒（治療風(fēng)濕性疾病）、水蛭（治療血栓性疾?。?臨床很難駕馭和使用有毒中藥，使用不當(dāng)就會(huì)有中毒甚至致殘、致死的危險(xiǎn)毒性靶器官：肝、腎、肺、心、內(nèi)分泌腺、造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)中毒類(lèi)型：心臟毒、肝臟毒、腎臟毒、神經(jīng)毒、細(xì)胞毒、生殖毒2不良反應(yīng)概念：藥品在按規(guī)定劑量應(yīng)用過(guò)程中出現(xiàn)的、有害的而非所期望的、與藥品的應(yīng)用有明確因果關(guān)系的反應(yīng)。產(chǎn)生原因：藥物自身毒性、使用不當(dāng)引起不良反應(yīng)的常見(jiàn)藥物：中藥：黃連、大黃、延胡索、澤瀉、天麻、三七等。中成藥：藿香正氣、銀

27、黃口服液、牛黃解毒片等。中藥注射液：刺五加注射液、雙黃連粉針、復(fù)方丹參注射液、茵梔黃注射液等。（二）中藥安全性評(píng)價(jià)的特點(diǎn)1、中藥現(xiàn)代化研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)之一 中藥的毒副作用逐步受到重視，但中藥的毒理學(xué)研究及安全性評(píng)價(jià)方面仍然存在許多不足之處。2、隨著中藥現(xiàn)代化，在療效提高的同時(shí)，毒副作用亦明顯增強(qiáng)。藥物純化、改變劑型、改變給藥途徑。3、復(fù)雜性在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下應(yīng)用的中藥具有多成分、以復(fù)方配伍為主要應(yīng)用方式的用藥特點(diǎn)。不足之處：1中藥毒理學(xué)研究不規(guī)范，尚未完全實(shí)行GLP標(biāo)準(zhǔn)。2中藥成分復(fù)雜，毒理學(xué)研究較為困難尚未摸索出一套適合中藥毒理學(xué)研究的手段體系和規(guī)范。 3中藥復(fù)方的毒理學(xué)研究一直未得到重視

28、，目前按照化學(xué)藥物的評(píng)價(jià)手段和指標(biāo)，以某有毒物質(zhì)的絕對(duì)含量作為復(fù)方藥物安全性評(píng)價(jià)的唯一指標(biāo)，得出中藥材有毒的結(jié)論，并以此推論含有毒中藥材的復(fù)方有毒，這與傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論不符。中藥藥物安全性評(píng)價(jià)劑型、途徑和劑量設(shè)計(jì)一、藥物的劑型研究（一）劑型、途徑和劑量研究的重要性制劑是藥物的最終形式。各種試驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用均離不開(kāi)制劑。療效最大化、毒副作用最小化，并在安全性評(píng)價(jià)中使毒副作用暴露達(dá)到最大化。（二）劑型的重要性劑型可改變藥物的治療作用。劑型能調(diào)節(jié)藥物的作用速度。通過(guò)改變藥物劑型可降低或消除其毒副作用。特殊劑型具有靶向作用。劑型的不同可以直接影響藥效。（三）劑型設(shè)計(jì)的影響因素1、臨床需要給藥途徑危重、

29、急癥、昏迷患者速效劑型和非經(jīng)口給藥途徑緩效、長(zhǎng)效丸劑、緩釋制劑、膠囊劑局部用藥栓劑、錠劑等胃腸道吸收的藥物口服劑型不經(jīng)胃腸道吸收的藥物注射、呼吸、皮膚、粘膜給藥2、藥物的理化性質(zhì)一般特性硬度、密度、氣味、流動(dòng)性、可壓性、吸濕性多晶型現(xiàn)象溶出度和溶出速率油水分配系數(shù)和解離度3、藥物的穩(wěn)定性熱、光、氧、濕對(duì)藥物穩(wěn)定性的影響溫度、PH對(duì)藥物溶液的影響藥物與輔料之間的穩(wěn)定性4、輔料的選擇提高療效，減少藥物用量；降低或消除毒副作用；增加藥物的穩(wěn)定性，延長(zhǎng)貯存時(shí)間；控制和調(diào)節(jié)藥物在機(jī)體內(nèi)的釋放，降低用藥頻率。（四）受試物劑型在安評(píng)中的重要性實(shí)際研究中經(jīng)常被忽略，應(yīng)加以重視。同一藥物在不同劑型中的毒性表現(xiàn)不

30、同。同一藥以不同制劑進(jìn)入機(jī)體后，在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄等動(dòng)態(tài)過(guò)程不同，毒性反應(yīng)也不同。新藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則中規(guī)定，要求選擇制備工藝穩(wěn)定、符合臨床試用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的、能充分代表臨床試驗(yàn)受試物和上市藥品的樣品。二、受試物給藥途徑的選擇（一）局部效應(yīng)：受試物在進(jìn)入機(jī)體或與機(jī)體接觸的最初部位或區(qū)域所產(chǎn)生的效應(yīng)。（二）吸收與分布：1、經(jīng)口和直腸途徑脂溶性藥物比水溶性藥物容易被吸收。藥物的吸收需要特殊轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的參與（糖、氨基酸、鈣、鈉）。藥物在一定程度上均能被吸收，但吸收度和吸收量上不同。體內(nèi)消化液改變藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，從而影響體內(nèi)動(dòng)態(tài)過(guò)程。藥物在腸內(nèi)稀釋有利于更快吸收，但也能增加毒性，除非胃內(nèi)容物

31、能部分結(jié)合毒物加強(qiáng)有毒成分代謝。其他：年齡、性別、禁食情況影響藥物在胃腸道內(nèi)的吸收。2、注射給藥途徑受試物在水溶液中的溶解度是影響經(jīng)靜脈能夠給予多少藥物的主要因素。肌內(nèi)或皮下注射給藥，藥物吸收快而完全。（毛細(xì)血管壁細(xì)胞間隙較大，只要通過(guò)毛細(xì)血管壁即可被吸收）肌內(nèi)注射比皮下注射給藥吸收快。（血管在肌肉組織內(nèi)分布較皮下組織豐富）休克患者應(yīng)采用靜脈注射給藥。（注射給藥后在體內(nèi)吸收受全身和給藥部位的血流情況影響，休克患者全身循環(huán)衰竭，肌內(nèi)注射給藥不易被吸收）應(yīng)考察藥物對(duì)注射部位的刺激性。（溶解性、毒性、溫度、pH）應(yīng)考察靜脈注射藥物的熱原和血液相容性。3、吸入給藥途徑肺的解剖學(xué)特點(diǎn)有利于吸收。（表面積

32、、血流量、接近血液）氣溶膠沉積。（鼻咽部、肺泡、氣管支氣管）氣體的吸收程度與速度依賴(lài)于氣體在血液中的溶解度。（氯仿全部被吸收；乙烯只有一少部分 被吸收）4、皮膚給藥途徑受試物的物理性質(zhì)影響刺激性和藥物吸收。（形狀、大小、硬度）給藥部位的封閉程度影響經(jīng)皮吸收和對(duì)給藥部位的刺激性。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡和敷用部位影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（隨著年齡的增加皮膚對(duì)刺激的敏感性下降；背部中央的皮膚比側(cè)面較厚，敏感性差。）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別也能改變實(shí)驗(yàn)結(jié)果，不同性別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相同區(qū)域的皮膚厚度不同，對(duì)刺激的敏感性有差異。5、吸收速度 吸入舌下直腸肌內(nèi)注射皮下注射口服皮內(nèi)注射吸收程度 吸入舌下直腸肌內(nèi)注射皮下注射口服（三）代謝：吸

33、收率決定處理外源物的酶系統(tǒng)，吸收形式?jīng)Q定主要代謝途徑。影響藥物代謝的因素與受試物有關(guān)的因素與被試驗(yàn)者有關(guān)的因素分子大小身體體積的大小脂溶性膜的通透性、主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)載體極性體液pH、各組織器官血流量及脂肪含量解離度競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合物的參與與血漿蛋白質(zhì)的親和力血液中蛋白質(zhì)含量，特別是白蛋白與組織器官的親和力（兒童應(yīng)用四環(huán)素，與鈣絡(luò)合沉積在骨和牙齒中）病理或影響穩(wěn)態(tài)改變的任何其他因素（如心臟衰竭、腎臟衰竭、肝功能不全）三、給藥劑量的設(shè)計(jì)（一）動(dòng)物間的劑量換算不同種屬動(dòng)物間的劑量換算方法標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物的等效劑量折算系數(shù)法 D未知=KD已知直接折算法 DB=DAKB/KA （每只） dB=dAKB/KA （千克體重）

34、DB=DARB/RA (W1/W2)2/3 （每只） dB=dARB/RA (W1/W2)1/3 （千克體重）同種動(dòng)物間等效劑量的換算D1:D2=A1:A2=(W1:W2)2/3（二）劑量設(shè)計(jì)的基本原則盡可能暴露藥物的毒性尋找毒性靶組織、靶器官尋找解毒方法及措施第二章 藥物安全性評(píng)價(jià)中的一般毒性試驗(yàn)外源化學(xué)物質(zhì)在一定的劑量，一定的接觸時(shí)間和一定的接觸方式下對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生綜合毒效應(yīng)的能力稱(chēng)為化學(xué)毒物的一般毒性（general toxicity）；又稱(chēng)為化學(xué)毒物的基礎(chǔ)毒性（basic toxicity）或一般毒性作用（general toxic effects）。按接觸毒物時(shí)間的長(zhǎng)短急性毒性 急性

35、毒性試驗(yàn)亞慢性毒性 亞慢性毒性試驗(yàn)慢性毒性 慢性毒性試驗(yàn)一般毒性研究的意義：化學(xué)毒物的一般毒性作用研究是毒理學(xué)工作中非常重要的內(nèi)容；又是化學(xué)物毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)和危險(xiǎn)度評(píng)定的基礎(chǔ)；對(duì)防治化學(xué)毒物所致急、慢性中毒意義重大；制訂衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及管理毒理學(xué)的決策方面均具有十分重要的意義。第一節(jié) 急性毒性作用*( Acute Toxicity Effect )一、急性毒性的概念*急性毒性（acute toxicity）是指機(jī)體（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人）一次或24h內(nèi)多次接觸外源化學(xué)物后在短期內(nèi)所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)，包括一般行為和外觀(guān)改變、大體形態(tài)變化以及死亡效應(yīng)等。二、急性毒性試驗(yàn)的目的與常用參數(shù)1、目的：測(cè)試和求出毒物

36、的致死劑量以及其它的急性毒性參數(shù)，通常以L(fǎng)D50為最主要的參數(shù)，并根據(jù)LD50值進(jìn)行急性毒性分級(jí)。通過(guò)觀(guān)察動(dòng)物中毒表現(xiàn)、毒作用強(qiáng)度和死亡的情況，初步評(píng)價(jià)毒物對(duì)機(jī)體的毒效應(yīng)特征、靶器官、劑量一反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系和對(duì)人體產(chǎn)生損害的危險(xiǎn)性。為亞慢性、慢性毒性試驗(yàn)研究以及其他毒理試驗(yàn)的提供接觸劑量和觀(guān)察指標(biāo)選擇的依據(jù)。為毒理學(xué)機(jī)制研究提供線(xiàn)索。2、常用急性毒效應(yīng)參數(shù)LD100 （絕對(duì)致死劑量）LD50 （半數(shù)致死劑量）*LD01或MLD（最小致死劑量）LD0或MTD（最大耐受劑量）limac （急性閾劑量）ED0 （最大無(wú)作用劑量，NOEL，NOAEL ）Zac （acute toxic effect

37、zone , 急性毒作用帶） Zac= LD50 / limac 最常用的是半數(shù)致死量，它是急性毒性評(píng)價(jià)中很重要的參數(shù)，是比較不同化學(xué)毒物急性毒性的重要基礎(chǔ)。三、急性毒性試驗(yàn)方法的要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求受試物以及處理染毒方法劑量選擇毒性作用觀(guān)察觀(guān)察時(shí)間和周期（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和要求主要原則：盡量選擇急性毒性與人近似的動(dòng)物；易于飼養(yǎng)管理、試驗(yàn)操作方便的動(dòng)物；繁殖生育力較強(qiáng)，數(shù)量較大能夠保障供應(yīng)；價(jià)格較低，易于獲得的動(dòng)物。1物種和品系：大鼠和小鼠最常用。一般選兩種（嚙、非嚙齒類(lèi)動(dòng)物） 。2。年齡與體重: 剛成年，健康，未曾交配和受孕動(dòng)物。通常大鼠180240g，小鼠1825g，家兔22.5kg

38、，豚鼠200250g 。3。性別: 各半或分別作。4。分組與數(shù)量：根據(jù)不同的計(jì)算方法來(lái)定。5。預(yù)檢：大、小鼠57天；狗、猴23周。6。禁食 ：經(jīng)口灌胃染毒需要禁食?？筛粢菇郴蚪?h以上。（二）受試物及處理檢索與受試物化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)相似的化學(xué)物的毒性資料。一次備齊全部實(shí)驗(yàn)用量。應(yīng)以同一批號(hào)為宜。受試物成分和配方應(yīng)穩(wěn)定不變。急性毒性試驗(yàn)受試物配制的常用劑型為水溶液、混懸液、油溶液。 水溶性受試物的溶劑，通常為蒸餾水或去離子水，注射等胃腸道外染毒需用生理鹽水，保持與體內(nèi)滲透壓一致。水不溶性受試物應(yīng)溶于或懸浮于適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中，常用0.5%羥甲基纖維素鈉、10%阿拉伯乳膠、天然植物油（如玉米油

39、、橄欖油）。受試物一般應(yīng)臨用新鮮配制。染毒體積：一般為動(dòng)物體重的12，最多不超過(guò)3。染毒途徑經(jīng)口經(jīng)皮滴眼直腸陰道吸入滴鼻染毒體積20ml/kg2ml/kg0.01ml/眼0.5ml/kg0.2ml(rat)1ml(rabbit)2mg/L0.1ml(猴、犬）（三）染毒方法染毒途徑（exposure routes）的選擇應(yīng)考慮：模擬人在生活和生產(chǎn)環(huán)境中實(shí)際接觸該受試物的途徑和方式；有利于不同化學(xué)物之間急性毒性大小的比較；受試物的性質(zhì)和用途；各種受試物毒性和評(píng)價(jià)程序的要求等。1. 經(jīng)口（消化道）染毒（oral exposure）灌胃、膠囊吞服、喂飼2. 經(jīng)呼吸道染毒（inhalation）靜式吸入

40、染毒和動(dòng)式吸入染毒3. 經(jīng)皮膚染毒（dermal exposure）化學(xué)脫毛或機(jī)械脫毛 4. 經(jīng)注射途徑染毒（四）劑量選擇1.劑量范圍的確定：動(dòng)物死亡率1100的劑量范圍2.分組及劑量的確定窛氏法：68組為宜，各組劑量呈等比級(jí)數(shù)比值Lg-1(lg最大劑量lg最小劑量）/（組數(shù)1）霍恩氏法：4組，各組劑量呈等比級(jí)數(shù) 劑量：0.46410t,1.010t,2.1510t,4.6410t, 劑量： 0.31610t,1.010t,3.1610t,（五）毒性作用觀(guān)察中毒體征和發(fā)生過(guò)程死亡情況和時(shí)間分布體重病理檢查（六）觀(guān)察時(shí)間和周期急性毒性實(shí)驗(yàn)觀(guān)察周期一般為14天。在實(shí)際工作中，對(duì)速殺型化學(xué)毒物可以?xún)H

41、計(jì)算24h的死亡率求其LD50。四、急性毒性分級(jí)和評(píng)價(jià)（一）評(píng)價(jià)指標(biāo)：1、LD50優(yōu)點(diǎn)：LD50是用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算得值，重現(xiàn)性較好，相對(duì)穩(wěn)定。LD50反映受試動(dòng)物群體中大多數(shù)動(dòng)物感受的平均情況。從劑量死亡曲線(xiàn)看，LD50處于曲線(xiàn)上升中段，是死亡率相對(duì)劑量變化最敏感的部位。缺點(diǎn)：LD50為生物學(xué)參數(shù)，受動(dòng)物種屬、染毒途徑、實(shí)際環(huán)境及操作者熟練程度影響，因而有波動(dòng)性。2.劑量死亡曲線(xiàn)的斜率雖然LD50是評(píng)價(jià)毒物急性致死毒性的重要參數(shù)。但它只能說(shuō)明某種毒物引起受試動(dòng)物半數(shù)死亡的劑量，不能反映毒物致死作用的中毒特征。當(dāng)兩種毒物L(fēng)D50相等時(shí)，要正確評(píng)價(jià)兩種毒物的致死毒性的中毒特征，就需利用劑量死亡曲線(xiàn)

42、的斜率。C、D的LD50相等，但劑量反應(yīng)曲線(xiàn)斜率不同，在較低劑量水平時(shí)，C毒性大；在高劑量時(shí)，D毒性大。B在LD50劑量水平時(shí)，毒性比D低，但降低劑量，B物質(zhì)毒性可能與D相近（交叉）。A物質(zhì)毒性最低。3. 急性毒性分級(jí)（acute toxicity classification）利用毒物L(fēng)D50大小，把毒物劃分為不同的級(jí)別，評(píng)價(jià)毒物的急性毒性的強(qiáng)弱，比較毒物的急性毒性的大小。但各國(guó)際組織及不同國(guó)家制訂的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)卻不統(tǒng)一，不同的化學(xué)物也應(yīng)用不同的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。第二節(jié) 亞慢性和慢性毒性作用 ( Subchronic Toxicity and Chronic Toxicity ) 一、亞慢性毒性作用（一

43、）概念亞慢性毒性（subchronic toxicity）是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人連續(xù)較長(zhǎng)期接觸外源化學(xué)物所引起的中毒效應(yīng)。所謂“較長(zhǎng)期”是相對(duì)于急性、慢性毒性而言，并沒(méi)有統(tǒng)一的、嚴(yán)格的時(shí)間界限，通常為16個(gè)月。（二）試驗(yàn)的目的1. 研究受試物亞慢性毒性劑量-反應(yīng)關(guān)系，確定未觀(guān)察到有害作用的劑量（NOAEL）和觀(guān)察到有害作用的最低劑量（LOAEL），提出安全限量參考值。2. 觀(guān)察受試物亞慢性毒性效應(yīng)譜、毒作用特點(diǎn)和毒作用靶器官。3. 觀(guān)察受試物亞慢性毒性的可逆性。4. 為慢性毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)和觀(guān)察指標(biāo)選擇提供依據(jù)。5. 為在其他試驗(yàn)（急性、亞急性、其他動(dòng)物物種的亞慢性試驗(yàn)等）中發(fā)現(xiàn)的或未發(fā)現(xiàn)的毒作用

44、提供新的信息，比較不同動(dòng)物物種毒效應(yīng)的差異，為受試物毒性機(jī)制研究和將研究結(jié)果外推到人提供依據(jù)。（三）亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)方法的要點(diǎn)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇（1）物種和品系考慮它對(duì)化學(xué)毒物的代謝過(guò)程、生理反應(yīng)和生化特性基本上與人接近，而且在急性毒性試驗(yàn)中證明是對(duì)受試物敏感的物種和品系。一般要求選擇兩個(gè)動(dòng)物種屬。（2）性別、年齡和動(dòng)物數(shù)性別：各半、特殊要求除外。大?。簞倲嗳橹】祩€(gè)體，大鼠68周，體重80100g。同組動(dòng)物體重相差不應(yīng)超過(guò)平均體重的10%，組間體重不超過(guò)5%。數(shù)量：小動(dòng)物20只/組；大動(dòng)物68組。（3）微生物學(xué)寄生蟲(chóng)等級(jí)和飼養(yǎng)環(huán)境清潔級(jí)及以上等級(jí)的大小鼠。屏蔽環(huán)境內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。2.染毒方式染毒途

45、徑的選擇應(yīng)盡量采用人群實(shí)際接觸的途徑和方式，并與預(yù)期進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)的接觸途徑相一致。一般以經(jīng)口、經(jīng)呼吸道和經(jīng)皮膚染毒三種途徑多見(jiàn)。染毒頻率（dosing frequency）一般每日一次，連續(xù)給予。如實(shí)驗(yàn)期為3個(gè)月或超過(guò)3個(gè)月，也可每周6次。3.劑量選擇和分組3個(gè)劑量組、1個(gè)對(duì)照組、必要時(shí)加溶劑對(duì)照組。高劑量組：明顯的毒性，不發(fā)生死亡或少量動(dòng) 物的死亡（少于10%）中劑量組：輕微毒效應(yīng)，約相當(dāng)于LOAEL低劑量組：應(yīng)無(wú)中毒反應(yīng)，相當(dāng)于NOAEL陰性對(duì)照：通?？筛鶕?jù)兩個(gè)數(shù)據(jù)來(lái)確定最高劑量，即以該化學(xué)物急性毒性的閾劑量（同一動(dòng)物品系和同樣的染毒途徑）或以該化學(xué)物的1/201/5 LD50作為最高

46、染毒劑量。組距：310倍，最低不小于2倍4.觀(guān)察指標(biāo)*（1）一般性指標(biāo) 外觀(guān)體征、行為活動(dòng) 動(dòng)物體重表示體重變化的方式： a.試驗(yàn)組與對(duì)照組動(dòng)物體重絕對(duì)增長(zhǎng)重量比較 b.體重增長(zhǎng)率（增重/原體重）100 c.生長(zhǎng)曲線(xiàn) 飼料消耗量食物利用率*，即動(dòng)物每食入100g飼料所增長(zhǎng)的體重克數(shù)（g體重100g飼料）。比較染毒組與對(duì)照組動(dòng)物的食物利用率，有助于了解化學(xué)物的毒性效應(yīng)。（2）實(shí)驗(yàn)室檢查 血液學(xué)指標(biāo) 血液生化檢查 尿檢查（3）系統(tǒng)尸解和病理學(xué)檢查臟器重量和臟器系數(shù)：臟器系數(shù)（臟/體比值）*：指某臟器濕重與單位體重的比值，通常是每100g體重中某臟器所占的質(zhì)量，表示為臟器質(zhì)量（g）/體重（100g）

47、。病理組織學(xué)檢查（4）特異性指標(biāo)特異性指標(biāo)是指能反映毒物對(duì)機(jī)體毒作用本質(zhì)的特征性指標(biāo)，常與其毒作用機(jī)制有關(guān)。實(shí)際上特異性指標(biāo)就是生物學(xué)標(biāo)志。二、慢性毒性作用（一）概念慢性毒性（chronic toxicity）是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人長(zhǎng)期（甚至終生）反復(fù)接觸毒物引起的毒性效應(yīng)?！伴L(zhǎng)期”，一般是指2年。對(duì)大鼠相當(dāng)于終生染毒。對(duì)兔相當(dāng)于生命期的36%，對(duì)狗為20%，對(duì)猴為13%。（二）慢性毒性試驗(yàn)的目的1. 研究慢性毒性劑量-反應(yīng)關(guān)系。確定長(zhǎng)期接觸化學(xué)物造成機(jī)體損害的閾劑量和最大無(wú)作用劑量（NOAEL），為制訂人類(lèi)接觸的安全限量標(biāo)準(zhǔn)（MAC、ADI）以及進(jìn)行危險(xiǎn)度評(píng)定提供毒理學(xué)依據(jù)。2. 觀(guān)察慢性毒性效應(yīng)

48、譜、毒作用特點(diǎn)和毒作用靶器官。3. 觀(guān)察慢性毒性作用的可逆性。4. 為毒性機(jī)制研究和將毒性結(jié)果外推到人提供依據(jù)。（三）慢性毒性試驗(yàn)方法要點(diǎn)1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇一般要求選用兩個(gè)種屬的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)。動(dòng)物數(shù)量要明顯多于亞慢性試驗(yàn)，如大鼠4060只，狗810只。雌雄各半。應(yīng)選擇年齡較小的動(dòng)物，一般選初斷奶的大鼠或小鼠。2染毒途徑與時(shí)限工業(yè)毒物：6個(gè)月或更長(zhǎng)環(huán)境毒物：一年以上或2年如果慢性毒性試驗(yàn)與致癌試驗(yàn)結(jié)合進(jìn)行，則實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒時(shí)間最好接近于動(dòng)物的預(yù)期壽命，甚至終生染毒。3劑量及分組理想的劑量選擇應(yīng)能體現(xiàn)：一種毒性物質(zhì)的劑量反應(yīng)關(guān)系；最大無(wú)作用水平（NOAEL）；最高劑量組能觀(guān)察到某些毒作

49、用所致變化。慢性毒性試驗(yàn)一般設(shè)3個(gè)染毒劑量組和1個(gè)對(duì)照組，必要時(shí)另設(shè)1個(gè)溶劑對(duì)照組 。各染毒劑量組之間的劑量間距應(yīng)當(dāng)大一些，組間劑量差一般以510倍為宜，最低不小于2倍，以利于求出劑量一反應(yīng)關(guān)系，也有助于排除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的個(gè)體敏感性差異。慢性毒性試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)依據(jù)亞慢性毒性試驗(yàn)NOAELLD50最高劑量組1/51/21/10中劑量組1/501/101/100低劑量組1/1001/10004. 觀(guān)察指標(biāo)觀(guān)察指標(biāo)的選擇和亞慢性毒性試驗(yàn)相似，以亞慢性毒性試驗(yàn)所提供的毒效應(yīng)和靶器官為基礎(chǔ)，重點(diǎn)觀(guān)察在亞慢性毒性試驗(yàn)中已經(jīng)顯現(xiàn)的陽(yáng)性指標(biāo)。優(yōu)先采用亞慢性毒性試驗(yàn)篩選出來(lái)的敏感指標(biāo)或特異性指標(biāo)。（四）慢性毒性試驗(yàn)的

50、注意事項(xiàng)1. 試驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的要求2. 檢測(cè)條件的控制3. 重視試驗(yàn)前和對(duì)照的檢測(cè) 重點(diǎn)內(nèi)容：急性毒性的基本概念、目的急性毒性試驗(yàn)的設(shè)計(jì)要點(diǎn)，評(píng)價(jià)LD50的優(yōu)缺點(diǎn)蓄積毒性、功能蓄積、物質(zhì)蓄積的概念蓄積系數(shù)的概念，判定亞慢性毒性和慢性毒性的概念、劑量選擇依據(jù)和檢測(cè)指標(biāo)食物利用率、臟器系數(shù)第三節(jié) 蓄積毒性作用( Accumulation )一、蓄積毒性作用的基本概念*蓄積作用（accumulation）:化學(xué)物連續(xù)地、反復(fù)進(jìn)入機(jī)體，而且吸收速度或總量超過(guò)代謝轉(zhuǎn)化排出的速度或總量時(shí)，化學(xué)物就可能在體內(nèi)逐漸增加并儲(chǔ)留，這種現(xiàn)象稱(chēng)為蓄積作用。儲(chǔ)存庫(kù)（depot）：化學(xué)毒物容易蓄積的組織或器官稱(chēng)為儲(chǔ)存庫(kù)。機(jī)

51、體常見(jiàn)的儲(chǔ)存庫(kù)有血漿蛋白、脂肪組織、肝臟、腎臟、骨骼等。物質(zhì)蓄積：（material accumulation）：化學(xué)物在體內(nèi)存留量不斷增加時(shí)，可以用分析方法測(cè)出該物質(zhì)的原型或其代謝產(chǎn)物的量，這種量的蓄積稱(chēng)為物質(zhì)蓄積。 功能蓄積：（functional accumulation）指在化學(xué)物的反復(fù)作用下，機(jī)體出現(xiàn)了慢性毒性作用，但用現(xiàn)代方法在體內(nèi)查不出該物質(zhì)的原型或其代謝產(chǎn)物。功能蓄積可能的原因：1.檢測(cè)方法不完善，未能發(fā)現(xiàn)該化學(xué)物的存在。2.機(jī)體接觸毒物當(dāng)時(shí)產(chǎn)生的損害輕，恢復(fù)得慢，毒物雖排出，但損害仍存在。物質(zhì)蓄積和功能蓄積的劃分是相對(duì)的，它們同時(shí)存在，互為基礎(chǔ)，難以嚴(yán)格劃分。蓄積作用多來(lái)自小

52、劑量的長(zhǎng)期接觸，而且作用時(shí)間長(zhǎng)，有些化學(xué)毒物甚至作用終生。二、蓄積作用的研究方法化學(xué)毒物的蓄積作用是發(fā)生慢性中毒的基礎(chǔ)，因此研究化學(xué)毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積性是評(píng)價(jià)化學(xué)毒物能否引起潛在慢性毒性的依據(jù)之一，也是衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)制訂過(guò)程選擇安全系數(shù)的主要依據(jù)。蓄積毒性實(shí)驗(yàn)是研究化學(xué)毒物基礎(chǔ)毒性的重要內(nèi)容之一，目的是通過(guò)試驗(yàn)求出蓄積系數(shù)K，了解化學(xué)毒物蓄積毒性的強(qiáng)弱，并為慢性毒性試驗(yàn)及其有關(guān)其他有關(guān)毒性試驗(yàn)的劑量選擇提供參考。常用的蓄積毒性的研究方法：（一）蓄積系數(shù)（accumulation coefficient）*是多次染毒使半數(shù)動(dòng)物出現(xiàn)效應(yīng)（或死亡）的累積劑量ED50（n）與一次染毒使動(dòng)物出現(xiàn)相同效應(yīng)（或死

53、亡）的劑量ED50（1）的比值，即：K值越小，表示化學(xué)毒物的蓄積性越大。如果化學(xué)毒物在動(dòng)物體內(nèi)全部蓄積或每次染毒后毒效應(yīng)是疊加的，則K=1。如果反復(fù)染毒時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)化學(xué)毒物發(fā)生過(guò)敏現(xiàn)象，則可能出現(xiàn)K1。隨著化學(xué)毒物蓄積作用減弱，K值增加，通常認(rèn)為K5，其蓄積毒性極弱。蓄積系數(shù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)蓄積系數(shù)（K）蓄積系數(shù)分級(jí)1高度蓄積1明顯蓄積3中等蓄積5輕度蓄積1. 固定劑量法選用大、小鼠灌胃或腹腔注射方法進(jìn)行染毒。求出LD50（1）。選為一組動(dòng)物，每天給予劑量1/201/5 LD50染毒，計(jì)算累積總劑量LD50（n）。求出K值，進(jìn)行評(píng)價(jià)。如染毒劑量的累積達(dá)到5個(gè)LD50，而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物仍未死亡一半，甚至沒(méi)有死

54、亡，就可終止試驗(yàn)，此時(shí)K5。2. 劑量遞增法先測(cè)出一次染毒LD50（1）。另選一組動(dòng)物，開(kāi)始按0.1 LD50劑量給予受試物，以4天為一期，以后每期給予的受試物的劑量按等比級(jí)數(shù)（1.5倍）逐期遞增。 求K值，評(píng)價(jià)。 只要試驗(yàn)動(dòng)物死亡累積已達(dá)一半便可隨時(shí)終止試驗(yàn)。染毒20天后，即可結(jié)束，因累計(jì)劑量已達(dá)5.3 LD50，K5。使用本方法時(shí)要注意染毒期間定期（4天）給動(dòng)物稱(chēng)重，按實(shí)測(cè)體重，調(diào)整化學(xué)毒物的染毒絕對(duì)量。3.劑量固定的20天蓄積法采用經(jīng)口灌胃染毒方式；隨機(jī)分為5組，分別為陰性對(duì)照組和1/20 LD50、1/10 LD50、1/5 LD50和1/2 LD50四個(gè)劑量組，每組動(dòng)物10只，雌雄各

55、半。每天染毒一次，連續(xù)染毒20天。觀(guān)察每組雌雄動(dòng)物合計(jì)死亡數(shù)。評(píng)價(jià)各劑量組均無(wú)死亡，即為蓄積性不明顯；如僅1/2LD50劑量組有死亡，其他組均無(wú)死亡，則為弱蓄積性；如1/20LD50劑量組無(wú)死亡，其他各組間死亡數(shù)有劑量反應(yīng)關(guān)系時(shí)，則為中等蓄積性；如1/20LD50劑量組有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，則為強(qiáng)蓄積性。(二)生物半減期法（biological halftime）生物半減期法（biological halftime，t1/2）是用毒物動(dòng)力學(xué)原理闡明外源化學(xué)物在機(jī)體內(nèi)的蓄積作用。t1/2指體內(nèi)血毒物濃度下降一半所需的時(shí)間。它反映了外源化學(xué)物從機(jī)體清除的速度。一般在等間距、等劑量染毒條件下，（以t1/2 相等的時(shí)間間距染毒）化學(xué)物在體內(nèi)經(jīng)6個(gè)t1/2即可達(dá)到蓄積極限，此時(shí)理論蓄積量為極限值的98.4%，此后繼續(xù)染毒，蓄積量也基本上不再增加。實(shí)驗(yàn)方案：求t1/2,以動(dòng)物血漿中化學(xué)毒物濃度求 t=0.693/Ke求蓄積極限(a 每日機(jī)體吸收化學(xué)毒物量)藥物安全性評(píng)價(jià)中的特殊毒性研究第一章 生殖發(fā)育毒性外緣化學(xué)物質(zhì)對(duì)生殖發(fā)育的影響結(jié)構(gòu)功能異常第一節(jié) 生殖發(fā)育毒性的研究進(jìn)展近年來(lái)，有關(guān)中藥的不良反應(yīng)和毒性報(bào)道有增加趨勢(shì)，客觀(guān)上助長(zhǎng)了人們對(duì)中藥安全性的置疑，給中醫(yī)藥的發(fā)展帶來(lái)了負(fù)面影響。生殖發(fā)育毒性作為中藥毒副作用的重要方面之一，正日益受到重視，開(kāi)展中藥的生殖發(fā)育毒性研究具有重大