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文檔簡介

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上氨基酸自動分析儀氨基酸分析儀是進行氨基酸分離、衍生和檢測的自動化分析系統(tǒng),廣泛用于制藥、食品、飼料、農(nóng)業(yè)、育種、醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷和地質(zhì)考察等領(lǐng)域。儀器類別:儀器儀表 /成份分析儀器 /氨基酸分析儀 指標信息: 分辨率:THR-Ser Ile-leu 98% 保留時間重現(xiàn)性:RSD0.5% (水解,所有峰) 峰面積重現(xiàn)性:RSD1% (水解,所有峰) 1原理測定原理是利用樣品各種氨基酸組分的結(jié)構(gòu)不同、酸堿性、極性及分子大小不同,在陽離子交換柱上將它們分離,采用不同pH值離子濃度的緩沖液將各氨基酸組分依次洗脫下來,再逐個以另一流路的茚酮試劑混合,然后共同流至螺旋反應(yīng)管中

2、,于一定溫度下(通常為115120)進行顯色反應(yīng),形成在570nm有最大吸收的藍紫色產(chǎn)物。其中的羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)生成黃色產(chǎn)物,其最大吸收在440nm。這些有色產(chǎn)物對570nm、440nm光的吸收強度與洗脫出來的各氨基酸的濃度(或含量)之間的關(guān)系符合比耳定律,可與標準氨基酸比較作定性和定量測定。2操作方法 樣品處理:測定樣品中各種游離氨基酸含量,可以除去脂肪雜質(zhì)后,直接上柱進行分析。測定蛋白質(zhì)的氨基酸組成時樣品必須經(jīng)酸水解,使蛋白質(zhì)完全變成氨基酸后才上柱進行分析。樣品分析:經(jīng)過處理后的樣品上柱進行分析。上柱的樣品量根據(jù)所用自動分析儀的靈敏度來確定。一般為每種氨基酸0.1mol 左右(水解樣品

3、干重為0.3mg 左右)。測定必須在pH55.5、100下進行,反應(yīng)進行時間為1015min,生成的紫色物質(zhì)在570nm 波長下進行比色測定。而生成的黃色化合物在440nm 波長下進行比色測定。做一個氨基酸全分析一般只需1h 左右,同時可將幾十個樣品一起裝入儀器,自動按序分析,最后自動計算給出精確的數(shù)據(jù)。儀器精確度在13%。用陽離子交換柱分離及測定氨基酸所的如下圖自動分析儀氨基酸分離圖譜3.結(jié)果計算帶有數(shù)據(jù)處理機的儀器,各種氨基酸的定量結(jié)果能自動打印出來,否則,可用尺子測量峰高或用峰高乘以半峰寬確定峰面積進而計算出氨基酸的精確含量。另外,根據(jù)峰出現(xiàn)的時間可以確定氨基酸的種類。4.說明 顯色反應(yīng)

4、用的茚三酮試劑,隨著時間推移發(fā)色率會降低,故在較長時間測樣過程中應(yīng)隨時采用已知濃度的氨基酸標準溶液上柱測定以檢驗其變化情況。 近年出現(xiàn)的采用反相色譜原理制造的氨基酸分析儀,可使蛋白質(zhì)水解出的17 種氨基酸在12min 內(nèi)完成分離,且具有靈敏度高(最小檢出量可達1pmol)、重現(xiàn)性好以及一機多用等優(yōu)點。5.應(yīng)用舉例(一)醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用 氨基酸代謝異常角度闡述了氨基酸與肝性腦病的關(guān)系血清中11種游離氨基酸的降低可直接影響人體組織的正常發(fā)育、生長必需氨基酸在創(chuàng)傷愈合中的關(guān)系腫瘤組織氨基酸代謝的變化規(guī)律(二)飼料上的應(yīng)用質(zhì)量控制 各種飼料必需氨基酸的含量和它們之間的比例必須恰當,測定原料和產(chǎn)品中的氨基酸

5、含量,以達到保證質(zhì)量的目的。真?zhèn)舞b別 魚粉氨基酸組成特點是賴氨酸、蛋氨酸含量高,氨基酸分析結(jié)果很容易就可以辨別真?zhèn)?。(三)農(nóng)業(yè)、食品、飲料及其它對玉米、大豆、小麥等農(nóng)作物的氨基酸含量進行檢測對果汁、飲料進行真?zhèn)蔚蔫b別檢驗測定茶氨酸來鑒別真?zhèn)尾枞~對醬油級別的認定6.儀器推薦代表廠家: 德國曼默博爾A300、德國sykam、日本hitachi等儀器名稱:全自動氨基酸分析儀(High Speed Amino Acid Analyzer)儀器型號:L-8900生產(chǎn)廠家:日本Hitachi公司主要配置: 色譜柱:尺寸:4.6mm60mm,粒度:3m,裝填日立離子交換樹脂 輸液泵:微量型串聯(lián)式雙柱塞往復(fù)泵,壓力:0-20 MPa, 流量:0.000-0.999 mL/min 自動進樣器:進樣量:0.1-100 L 柱溫箱:方式:半導(dǎo)體制冷加熱,溫度設(shè)定:20-85 反應(yīng)單元:方式:電子加熱。溫度設(shè)置范圍:50 - 140(步進1) 可見光度計:光譜:消象差凹面衍射光柵,波長:570nm、440nm性能指標: (以蛋白質(zhì)水解液標準分析為例,共進樣5次): 凈分析時間:約30分鐘,53min/循環(huán) 保留時間重現(xiàn)性:CV 0.3%(精氨酸) 峰面積重現(xiàn)性:CV 1.0%(甘氨酸、組氨

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