HPV疫苗研究進(jìn)展

1、HPV疫苗爭(zhēng)辯進(jìn)展 天津市靜海縣醫(yī)院 王彥 徐雅會(huì)摘要：宮頸癌致病因素是高危型人乳頭瘤病毒（HPV）的持續(xù)感染。高危型HPV基因組編碼三個(gè)蛋白，E5，E6和E7，E6和E7主要在高級(jí)別病變和宮頸癌中表達(dá)，并是宮頸癌惡性表型發(fā)生和形成的必要條件。疫苗的靶點(diǎn)是全部早期癌蛋白，因此癌蛋白E6、E7是HPV疫苗治療的主要干預(yù)靶點(diǎn)。目前，國(guó)際上已有多種HPV相關(guān)疫苗進(jìn)入動(dòng)物和臨床試驗(yàn)階段，HPV疫苗將在預(yù)防HPV感染及治療由HPV感染所引起的相關(guān)疾病方面發(fā)揮重要作用。 關(guān)鍵詞： 人乳頭瘤病毒；疫苗；進(jìn)展Progress in research on human papillomavirus vaccin

2、eXU Ya-hui ,WANG Yan. Tianjin Jinghai Hospital , Tianjin 301600 ,ChinaAbstract: The risk factors of cervical cancer is the persistent infection of high-risk human papilloma virus. High-risk HPV genome encode three proteins, E5, E6 and E7. E6 and E7 are mainly expressed in high level lesions and cerv

3、ical cancer.they are the necessary condition for the occurrence and formation of malignancy. The targets of vaccine are all early oncoproteins, thus oncoprotein E6 and E7 are the main intervention targets in HPV vaccine treatment. At present, there have been a variety of HPV vaccine into animal and

4、clinical trials in the world. HPV vaccine will play an important role in prevention HPV infection and treatment the related diseases of HPV infection. Key words: human papillomavirus；vaccine； development        宮頸癌發(fā)病率居?jì)D科惡性腫瘤首位，但由于宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查的普及，宮頸癌前病變及宮頸癌得到及早發(fā)覺(jué)與治療，尤其是發(fā)達(dá)國(guó)家

5、還開(kāi)展了人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）疫苗的接種，使浸潤(rùn)癌發(fā)病率明顯削減。子宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）的診斷大大提高宮頸癌患者的生存率以及改善患者對(duì)治療的反應(yīng)1。持續(xù)的HPV感染增加癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化風(fēng)險(xiǎn)，持續(xù)高危型HPV感染可轉(zhuǎn)變細(xì)胞周期，使細(xì)胞易消滅基因不穩(wěn)定和致癌基因突變。在大多數(shù)狀況下，免疫細(xì)胞可以清除這些感染，然而，只有一小部分的HPV感染者會(huì)進(jìn)展為宮頸癌。因此免疫缺失，突變或內(nèi)在的基因組不穩(wěn)定性可能是導(dǎo)致宮頸癌的進(jìn)展?，F(xiàn)在，可以通過(guò)檢測(cè)E6和E7 mRNA的表達(dá)評(píng)估宮頸癌1,2。目前已確定

6、的HPV型別有170種3。國(guó)際癌癥爭(zhēng)辯機(jī)構(gòu)（IARC）進(jìn)行的一項(xiàng)爭(zhēng)辯顯示，有超過(guò)30000的宮頸癌患者參與此項(xiàng)爭(zhēng)辯，感染型別的調(diào)查結(jié)果顯示：主要型別是16，18，58，33，45，31，59，39，52，35，51，56，其中HPV 16型感染> 50%，HPV 16和18感染者> 70% 1 ，說(shuō)明HPV 16和18是宮頸浸潤(rùn)癌最常見(jiàn)的類型4。疫苗治療是通過(guò)刺激細(xì)胞毒性T細(xì)胞作用于靶細(xì)胞、上調(diào)MHC-I的表達(dá)來(lái)消退或削減感染HPV的細(xì)胞，疫苗介導(dǎo)的免疫治療是經(jīng)過(guò)至少兩個(gè)階段直接作于癌變細(xì)胞，預(yù)防性疫苗旨在通過(guò)HPV抗體抑制HPV粘附細(xì)胞或進(jìn)入細(xì)胞，從而阻擋細(xì)胞感染HPV。治療性疫

7、苗旨在通過(guò)細(xì)胞免疫和體液免疫，削減或消退體內(nèi)已受HPV感染的細(xì)胞甚至腫瘤細(xì)胞，并防止癌前病變連續(xù)惡化5。疫苗的靶點(diǎn)是全部早期癌蛋白，E6、 E7蛋白是 HPV 陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞表達(dá)的癌蛋白，因此癌蛋白E6、E7是HPV疫苗治療的主要干預(yù)靶點(diǎn)6。HPV E6、E7癌蛋白是目前臨床爭(zhēng)辯的熱點(diǎn)7、8。在此，對(duì)目前疫苗爭(zhēng)辯狀況進(jìn)行簡(jiǎn)潔闡述。1.蛋白質(zhì)類或肽類疫苗迄今為止，幾種蛋白質(zhì)或肽的疫苗正在處于臨床試驗(yàn)階段。蛋白或肽類HPV 疫苗比其他減毒活疫苗平安，尤其是對(duì)免疫力低下者，并且 MHC 特異性不受限制，但此類疫苗細(xì)胞免疫反應(yīng)弱、表達(dá)水平低。蛋白質(zhì)含有全部多個(gè)HLA抗原表位，肽類疫苗的作用是通過(guò)結(jié)合不

8、同的等位基因HLA分子，進(jìn)而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞毒性T細(xì)胞反應(yīng)。另一方面，蛋白質(zhì)類疫苗主要通過(guò)MHC-II加工抗原呈遞途徑，誘導(dǎo)初始CTL反應(yīng)。蛋白質(zhì)類或肽類疫苗抗原性弱，一般需要輔以佐劑，TLR感動(dòng)劑9作為蛋白疫苗的佐劑。肽類疫苗不僅可以提高患者的免疫力量，而且可以破壞MHC的限制性，提高細(xì)胞毒性T細(xì)胞的反應(yīng)強(qiáng)度。作為佐劑TLR感動(dòng)劑亦可激活先天免疫和適應(yīng)性免疫力量。目前，通過(guò)小鼠模型證明，肽類疫苗如TLR 9、TLR3和TLR4感動(dòng)劑為佐劑，將其注入已感染HPV16的小鼠，通過(guò)利用CTL抗原打算族融合到幫助T細(xì)胞抗原打算簇或泛DR抗原打算簇，誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生猛烈的細(xì)胞免疫應(yīng)答并抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。這

9、些結(jié)果表明，肽類疫苗以樹(shù)突狀細(xì)胞為幫助靶點(diǎn)是可行的。最新?tīng)?zhēng)辯，TLR感動(dòng)劑聚肌苷酸胞苷酸和CD8+T細(xì)胞表位的HPV 16 E7（aa49-57）通過(guò)調(diào)整單克隆性抗CD40共刺激分子，清除小鼠癌癥模型中HPV感染的腫瘤細(xì)胞10。Granadillo 等11爭(zhēng)辯證明，HPV 16 E7肽類疫苗可誘導(dǎo)小鼠猛烈的 T 細(xì)胞反應(yīng)并抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。很多臨床試驗(yàn)證明，蛋白質(zhì)類或肽類疫苗平安性良好，毒性低，但免疫反應(yīng)和臨床效果存在不全都性，疫苗需要加強(qiáng)進(jìn)一步改進(jìn)。此外，肽類疫苗穩(wěn)定，制備簡(jiǎn)潔，易于生產(chǎn)，且具有很高的平安性。爭(zhēng)辯的重點(diǎn)是解決肽類疫苗的主要限制性，即如何有效保持肽類疫苗的低抗原性，還能加強(qiáng)其

10、抗原呈遞力量，增加免疫應(yīng)答。爭(zhēng)辯證明，肽類疫苗免疫耐受的HPV16感染細(xì)胞，CD4+、CD25+、Foxp3+調(diào)整性T細(xì)胞的數(shù)目明顯增多12，而Foxp3+T細(xì)胞的存在與腫瘤免疫受損有關(guān)，因此，可通過(guò)干擾免疫系統(tǒng)的負(fù)調(diào)整機(jī)制來(lái)增加免疫應(yīng)答。一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)比臨床試驗(yàn)II期爭(zhēng)辯表明，HPV16型高級(jí)別CIN患者經(jīng)這種疫苗治療后，特異性T細(xì)胞數(shù)目明顯增多，證明白肽類疫苗的有效性13。2.細(xì)菌或病毒載體疫苗細(xì)菌，如乳酸乳球菌，干酪乳桿菌，沙門氏菌和芽孢桿菌卡介苗；病毒載體包括牛痘病毒（VV），腺病毒，腺相關(guān)病毒，-病毒載體，和它的衍生物，都已被作為活載體，此類活載體疫苗可引起較強(qiáng)的抗原特異性免疫反應(yīng)。病毒

11、載體用于HPV抗原的表達(dá)中，如腺病毒，-病毒和牛痘病毒。牛痘病毒是歷史上第一個(gè)治療性HPV疫苗的病毒載體。最近禽病毒已經(jīng)進(jìn)展成為疫苗開(kāi)發(fā)的新載體。雖然禽病毒的復(fù)制被限制在鳥(niǎo)類體內(nèi)，但大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞允許禽病毒進(jìn)入，并可轉(zhuǎn)基因表達(dá)禽病毒，而且其疫苗具有免疫的非交叉反應(yīng)，因此避開(kāi)了與既往感染天花的患者發(fā)生交叉免疫反應(yīng)。禽痘病毒具有較好的免疫原性，爭(zhēng)辯證明，禽痘病毒載體疫苗可以抑制C57BL6小鼠宮頸癌細(xì)胞HPV16 E7的表達(dá)，并可誘導(dǎo)特異性的 CTL 反應(yīng)14，進(jìn)而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。在另一項(xiàng)爭(zhēng)辯中，表達(dá)E6和E7抗原、IL-2的重組牛痘病毒疫苗（TG4001/R3484）對(duì)CIN 23進(jìn)行療效評(píng)

12、價(jià)，結(jié)果顯示，觀看6個(gè)月有10例受試者（48%）病變減輕，觀看12個(gè)月，8例CIN 2 / 3的患者的宮頸上皮內(nèi)瘤變消逝，而且也檢測(cè)不出HPV16感染15。3.聯(lián)合疫苗高危型HPV持續(xù)感染，導(dǎo)致HPV-DNA整合到宿主基因，是引起宮頸腫瘤的重要緣由16，然而，只有一小部分的HPV感染者會(huì)進(jìn)展為宮頸癌。在大多數(shù)狀況下，免疫細(xì)胞可以清除這些感染，說(shuō)明患者局部微環(huán)境在病情進(jìn)展中有重要作用，聯(lián)合疫苗就是旨在轉(zhuǎn)變病變局部免疫反應(yīng)，增加HPV的清除力量，阻斷HPV感染，其主要通過(guò)放療或化療，使病變局部細(xì)胞處于同一細(xì)胞周期，增加免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。Tseng等17在臨床前爭(zhēng)辯中建立了試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，利用H

13、PV疫苗聯(lián)合低劑量放療有效治療了腫瘤。此外，還有臨床前模型證明18,19,20，利用化療藥物與DNA疫苗聯(lián)合有效的治療HPV感染，如低劑量的環(huán)磷酰胺可轉(zhuǎn)變局部免疫力量，消退持續(xù)低危型HPV感染。此疫苗主要適應(yīng)人群為健康人，從發(fā)病的源頭入手，有期望成為預(yù)防宮頸癌的首選疫苗。因此，HPV疫苗的研制已轉(zhuǎn)向放療和化療的聯(lián)合方法。展望近10年，HPV疫苗光輝的應(yīng)用前景使HPV疫苗的爭(zhēng)辯進(jìn)展迅猛，很多疫苗已完成/期臨床試驗(yàn)，預(yù)備進(jìn)行更深化的爭(zhēng)辯。但其臨床副作用、對(duì)環(huán)境的平安性，如何優(yōu)化載體等，是目前爭(zhēng)辯亟待解決的問(wèn)題。因此，要研制出一種抱負(fù)的HPV治療疫苗并在臨床廣泛應(yīng)用尚需時(shí)日。參考文獻(xiàn)1.Woodma

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