ABI7500校正步驟

1、ABI7500校正軟件版本：SDS2.0.4或1.4.校準(zhǔn)前準(zhǔn)備A.原校準(zhǔn)文件備份到SDSDocuments中把原校準(zhǔn)文件拷出來進(jìn)行備份，以防如果本次校準(zhǔn)某個(gè)環(huán)節(jié)沒通過，還可以使用原校準(zhǔn)文件，以保證機(jī)器的運(yùn)行。B.校正試劑板融化回復(fù)到室溫C.準(zhǔn)備96孔反應(yīng)盤托1 .校準(zhǔn)1.ROI(regionofinterest)校準(zhǔn)試劑板采用ROI(含各種熒光染料)，先后校正五個(gè)通道。進(jìn)入1.4software中點(diǎn)擊instrument,在下拉菜單中選擇calibrate；A.首先點(diǎn)擊blockup讓熱蓋升起B(yǎng).點(diǎn)擊Snapshot照相，如果96孔沒有全呈現(xiàn)白色，調(diào)節(jié)ExposureTime然后再點(diǎn)擊Sna

2、pshot進(jìn)行照相，直到96孔剛好到都呈現(xiàn)白色和極個(gè)別孔有一點(diǎn)點(diǎn)紅色之間的臨界狀態(tài)，然后點(diǎn)擊GenerateCalibration查看校正的結(jié)果，當(dāng)WeelsFound顯示數(shù)值為96,SaveCalibration顯示為可點(diǎn)擊狀態(tài)時(shí)這個(gè)通道校正成功，然后點(diǎn)擊SaveCalibration保存校正結(jié)果，此時(shí)下面的通道符號后對應(yīng)顯示為OK。依次將5個(gè)通道校正完畢。C.如果因燈光強(qiáng)度不足造成校正通過不了，可清潔燈泡或更換鹵素?zé)?，然后再做校?.背景校準(zhǔn):A.原理：7500使用背景校正文件去除以后實(shí)驗(yàn)中的背景熒光，主要檢測通道是否有污染存在，試劑盤里為純水B.判斷標(biāo)準(zhǔn)：A-D通道不能超過72000;E

3、通道不能超過900001.4版本軟件和2.04版本軟件適用這同一標(biāo)準(zhǔn)C.校正步驟C.11.4軟件在NewDocument中的Assay的下拉菜單中選擇Background,2.04軟件在InstumentMaintenanceManage用選擇BackgroundC.2放入Background試劑盤，運(yùn)行程序C.3結(jié)果分析：A-D通道不能超過72000;E通道不能超過90000C.4BLOCK清潔處理：對于Background數(shù)值超過標(biāo)準(zhǔn)的孔用純水處理BLOCK,無紡布擦干，再用10%乙醇處理BLOCK,無防布擦干。C.5清潔過后再次進(jìn)行Background校正，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后點(diǎn)擊Extract將

4、數(shù)據(jù)結(jié)果提取到文件中。圖1為09年6月17日做的背景校正，各孔線均勻整齊，都在范圍之內(nèi)。圖2為10年11月3日做的背景校正，孔A6A通道熒光值超過72000此儀器目前使用09年的校準(zhǔn)數(shù)據(jù)，因孔的不正，有所偏移，各別孔的熒光值無法準(zhǔn)確讀取，直接影響到CT值。3.光學(xué)校正:A.原理：7500軟件產(chǎn)生五通道對于7500系統(tǒng)物理影響的數(shù)據(jù)補(bǔ)償。B.試劑盤：ROI試劑盤C.校正步驟C.11.4軟件在NewDocument中的Assay的下拉菜單中選擇Calibration,2.04軟件在InstumentMaintenanceManage用選擇OpticalCalibrationC.2放入ROI試劑盤，

5、運(yùn)行程序，60度5minC.3結(jié)果：5個(gè)通道都有一定的數(shù)值范圍。C.4點(diǎn)擊Extract將數(shù)據(jù)結(jié)果提取到文件中一1j*XfaHJ,w*41rdrmDitWmWt*Mvi*-3713-ewrJrFADI皿*.-3!fl，E.era.WRWE?BOJRVj=nw室3-1-BuwfaAAWnacfiina.孑EKOTTrn?Bii!FWU7HETt=rt產(chǎn)*aTWEq，im,aixnhiLZY至一jZXHUhEr-0jt*rT.iaFIu3y.H.一m、R立1*vuTE.1*!a-aWF2MHI*A-:WKC-.VK-L-丁、A4-%3u.jnriM*MS力?KLV一-U.-LrfinLj.lMM1

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8、正：A.原理：使用96孔純熒光反應(yīng)板運(yùn)行程序，獲得純熒光數(shù)據(jù)，以確定儀器中所使用的純熒光特征。對以下十種熒光進(jìn)行校正。B.試劑盤：dye試劑盤C.校正步驟C.11.4軟件在NewDocument中的Assay的下拉菜單中選擇PureSpectra2.04軟件在InstumentMaintenanceManage用選擇PureSpectraC.2放入dye試劑盤，依次完成10個(gè)染料的校正，每個(gè)程序運(yùn)行，60度5min每個(gè)染料校正完應(yīng)進(jìn)行提取保存。1. CY3CY5CBN980+/口;l汝心門劃創(chuàng)口與E依+MW，.小師”，?itrJ:一二；3or000平口l/IVdtilld/加陋廣SOICOOrwitamniMM”*auujojVdlAIVl8qa人SFEaK-R。XOd9*Hd一二-Mg(IM