電針內(nèi)關(guān)穴對AMI大鼠的保護作用及其與心自主神經(jīng)調(diào)節(jié)的相關(guān)性研究

1、    【摘要】  目的：觀察電針內(nèi)關(guān)穴對急性心肌缺血（AMI）大鼠心自主神經(jīng)調(diào)節(jié)的作用。方法：將18只SD大鼠隨機分為正常組、模型組、電針內(nèi)關(guān)組，觀察3組大鼠心交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)放電頻率及心電圖的變化。結(jié)果：模型組在3 min43 min各時刻心迷走神經(jīng)及交感神經(jīng)放電頻率與正常組比較有顯著差異（P0.05）；電針內(nèi)關(guān)組3 min8min心迷走神經(jīng)及交感神經(jīng)放電頻率與正常組比較有顯著差異（P0.05）；電針內(nèi)關(guān)組13 min43 min（電針治療后5min）心交感神經(jīng)及迷走神經(jīng)放電頻率與模型組比較有顯著差異（P0.05）。電針內(nèi)關(guān)組大

2、鼠通過電針內(nèi)關(guān)穴治療，心率增加，ST段高度降低，心迷走神經(jīng)放電頻率降低，心交感神經(jīng)放電頻率增加。結(jié)論：電針內(nèi)關(guān)穴能抑制AMI大鼠心迷走神經(jīng)放電頻率，增強交感神經(jīng)放電頻率，從而實現(xiàn)抗AMI損傷效應(yīng)。 【關(guān)鍵詞】  電針 內(nèi)關(guān) 急性心肌缺血 自主神經(jīng)    Abstract   Objective：To observe the effect of electroacupunctrue at Neiguan point on the regulation of autonomic nerve of rats with acute myoca

3、rdial ischemia. Methods：18 SD rats were randomly divided into normal group，model group and electroacupunctrue treatment group. The changes of diacharging frequence of vigus nerve and sympathetic nerve，and electrocardiogram of rats were observed and recorded. Results：There were significant difference

4、s in diacharging frequences of vigus nerve and sympathetic nerve between model group and normal group during 3 min43 min，between electroacupunctrue treatment group and normal group during 3 min8 min，and between electroacupunctrue treatment group and model group during 13 min43 min（5 min after treatm

5、ent）. Electroacupunctrue at Neiguan point could induce the increase of heart rate and diacharging frequence of vigus nerve，and the decrease of ST segment and diacharging frequence of sympathetic nerve. Conclusion：Electroacupunctrue at acupoint Neiguan can exert protective effects on acute myocardial

6、 ischemia injury through regulating the diacharging frequence of autonomic nerve.    Key words   electroacupunctrue；Neiguan；acute myocardium ischemia；autonomic nerve    內(nèi)關(guān)穴是治療心血管疾病的主要穴位，大量的臨床和實驗研究表明針刺內(nèi)關(guān)穴具有顯著抗心肌缺血損傷的作用12。心臟的功能活動接受自主神經(jīng)支配，支配心臟的傳出神經(jīng)為心迷走神經(jīng)和心交感神經(jīng)，二者對心臟的作用是相拮抗

7、的。本實驗旨在觀察電針內(nèi)關(guān)穴抗急性心肌缺血效應(yīng)與心自主神經(jīng)調(diào)節(jié)的相關(guān)性。    1   材料和方法    1.1   實驗材料    1.1.1   實驗動物   SD大鼠18只，體重180 g200 g，雌雄不拘，由華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院實驗動物學(xué)部提供。    1.1.2   實驗試劑  垂體后葉素（pituitary，Pit）注射液（蚌埠市宏業(yè)生化制藥廠生產(chǎn)，6 U/mL，批號：060420

8、）；20%烏拉坦（氨基甲酸乙酯）。    1.1.3   實驗儀器  手術(shù)刀，組織剪，血管鉗，玻璃分針，1 mL注射器，毫針（蘇州醫(yī)療用品廠生產(chǎn)，規(guī)格：0.38 mm×15 mm），縫合線，消毒棉球，手套，生理記錄儀（BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng)，成都儀器廠生產(chǎn)），電針儀（G6805-1型電針治療儀，上海醫(yī)療電子儀器廠生產(chǎn)）。    1.2   實驗方法    1.2.1   分組與造模   將18只SD大鼠隨機分為正常組

9、、模型組、電針內(nèi)關(guān)組，每組6只。將除正常組外的其余大鼠用20%烏拉坦腹腔注射麻醉（5 mL/kg），然后股靜脈注射垂體后葉素注射液6 U/kg。觀察心電圖，若在1 min內(nèi)出現(xiàn)心率明顯減慢、T波顯著高聳或ST段抬高0.1 mV為造模成功。    1.2.2   頸部迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)分離與放電記錄   將大鼠麻醉后手術(shù)臺仰臥固定，頸部剪毛，碘伏消毒。自大鼠頜骨下緣至胸骨上窩正中線切開約2 cm的切口，在右側(cè)胸鎖乳突肌下尋找頸總動脈，于頸內(nèi)動脈、頸總動脈與頸內(nèi)靜脈之間用玻璃分針沿血管走向輕輕分離迷走神經(jīng)，將細線從神經(jīng)下方引出備用；在左側(cè)

10、胸鎖乳突肌下將頸總動脈、頸內(nèi)靜脈一起輕輕牽向外側(cè)，于椎前肌淺面、椎體旁，將椎前筋膜用玻璃分針縱向剝離，找出頸交感干，沿交感干向下找出頸下神經(jīng)節(jié)，將細線從神經(jīng)下方引出備用。    啟動BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng)，設(shè)置相應(yīng)參數(shù)，速度均為80.00毫秒/div。毫針刺入右上肢、左右下肢皮下，以相應(yīng)導(dǎo)聯(lián)連接毫針記錄心電圖；將分離的右側(cè)迷走神經(jīng)、左側(cè)交感神經(jīng)分別掛上生理儀銀絲電極，記錄神經(jīng)放電情況，分別于0 min、3 min、8 min、13 min、23 min、33 min、43 min、53 min標記，記錄中用石蠟油點滴神經(jīng)保持濕潤。模型組和電針內(nèi)關(guān)組于第3 min股

11、靜脈注射垂體后葉素注射液6 U/kg造模，電針內(nèi)關(guān)組于造模后5 min針刺左上肢內(nèi)關(guān)穴（參照華興邦“大鼠穴位圖譜”，于尺骨、橈骨縫間離腕關(guān)節(jié)約3 mm處取“內(nèi)關(guān)”穴）并接電針治療儀，疏密波治療（8 Hz80 Hz，疏密波轉(zhuǎn)換14 次/min，電壓1.5 V，電流強度1 mA），治療5 min后去電針治療儀，繼續(xù)留針至15 min起針。    1.2.3   觀察指標   觀察上述各時間點迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)放電頻率（Hz），各時間點后1 min內(nèi)采樣10次，每次時長1秒，累加取平均值3。依據(jù)國外文獻報道，當所記錄的峰電位波幅大于基礎(chǔ)干擾

12、波波幅2倍以上時，可認為是有效放電。    1.2.4   統(tǒng)計方法   各組實驗數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，組內(nèi)比較、組間比較采用SPSS12.0軟件進行處理。    2   結(jié)   果    2.1   各組大鼠心迷走神經(jīng)放電頻率比較    結(jié)果見表1和圖1。    從表1可以看出，模型組在3 min43 min各時刻迷走神經(jīng)放電頻率與造模前及正常組比較有顯著差異（P0.05），說明Pi

13、t引起大鼠心肌缺血時迷走神經(jīng)放電頻率增加,自行恢復(fù)時間約50 min。電針內(nèi)關(guān)組3min8min放電頻率與造模前比較有顯著差異（P0.05），電針內(nèi)關(guān)組在造模后5 min進行電針內(nèi)關(guān)治療，電針5 min后（造模后13 min43 min）迷走神經(jīng)放電頻率明顯降低，與模型組同時刻比較有顯著差異（P0.05），提示電針內(nèi)關(guān)對迷走神經(jīng)放電頻率增加有抑制效應(yīng)，推測電針內(nèi)關(guān)穴對心肌急性缺血的保護作用與抑制迷走神經(jīng)興奮有關(guān)。    2.2   各組大鼠心交感神經(jīng)放電頻率比較    結(jié)果見表2和圖2。    從表2可以看出，模型

14、組在3  min43 min各時刻交感神經(jīng)放電頻率與造模前及正常組比較有顯著差異（P0.05），電針內(nèi)關(guān)組3 min8 min交感神經(jīng)放電頻率與造模前及正常組比較有顯著差異（P0.05），提示垂體后葉素引起大鼠心肌缺血與交感神經(jīng)放電頻率降低有關(guān)。電針內(nèi)關(guān)組在造模后5 min進行電針內(nèi)關(guān)穴治療，電針開始后5 min（造模后13 min43 min）交感神經(jīng)放電頻率明顯增加，與模型組同時刻比較有顯著差異（P0.05），提示電針內(nèi)關(guān)穴對交感神經(jīng)放電有興奮作用，推測電針內(nèi)關(guān)穴對心肌急性缺血的保護作用與交感神經(jīng)興奮放電頻率增加有關(guān)。     2.3  &

15、#160;電針內(nèi)關(guān)穴對急性心肌缺血大鼠心電圖及心自主神經(jīng)調(diào)節(jié)的影響    見圖3圖5。其中圖4顯示電針內(nèi)關(guān)組大鼠在急性心肌缺血期心率減慢，ST段抬高，迷走神經(jīng)放電頻率增加，交感神經(jīng)放電頻率降低；圖5顯示電針內(nèi)關(guān)組大鼠通過電針內(nèi)關(guān)穴治療，心率增加，ST段高度降低，迷走神經(jīng)放電頻率降低，交感神經(jīng)放電頻率增加，推測電針內(nèi)關(guān)穴對急性心肌缺血大鼠的保護效應(yīng)與對心自主神經(jīng)的調(diào)節(jié)有關(guān)。    3   討   論    近年來，用辣根過氧化酶法證明內(nèi)關(guān)穴的傳入節(jié)段為C8T1，而心臟的傳入節(jié)段為C8T10，內(nèi)關(guān)及

16、心臟傳入在C8T1有相互交匯與重疊。Allens4用雙標記法證明在C8T2節(jié)段存在聯(lián)系上肢內(nèi)側(cè)與心臟的雙標記細胞。心交感神經(jīng)節(jié)前纖維起源于胸脊髓（15）節(jié)灰質(zhì)的側(cè)角神經(jīng)元，在脊椎旁的頸、胸交感神經(jīng)節(jié)中主要與星狀神經(jīng)節(jié)中的節(jié)后神經(jīng)元形成突觸。心交感神經(jīng)節(jié)后纖維經(jīng)由心上、心中和心下神經(jīng)到達并支配心肌，當交感神經(jīng)興奮時，其末梢膨體釋放去甲腎上腺素與心肌細胞膜上的-腎上腺素能受體結(jié)合，使心肌細胞的活動增強。有實驗觀察到電針心經(jīng)或小腸經(jīng)可顯著拮抗垂體后葉素對心交感神經(jīng)放電活動的抑制作用。針刺可直接提高交感神經(jīng)的興奮性，表明交感神經(jīng)是針刺抗心肌缺血的外周傳出途徑，而適當提高交感神經(jīng)興奮性對心肌缺血具有保護

17、作用，與本實驗觀察結(jié)論相同5?！緟⒖嘉墨I】  1曹建萍. 近10年針灸治療冠心病臨床研究概況J. 中國針灸， 2001，21（1）:57. 2李容，王友京. 針灸改善心肌缺血作用機理研究概況J. 中國針灸，2002，22（8）:566. 3Shindo K，Tsunoda S，Shiozawa Z. Decreased sympathetic outflowto muscles in patients with cervical spondylosisJ. Acta NeurolScand，1997，96:241-246. 4Alles A，Dom R M. Peripheral sensory nerve