細(xì)胞融合技術(shù)

1、.細(xì)胞融合技術(shù) 第三節(jié).本節(jié)目標(biāo) 1通過閱讀了解通過閱讀了解細(xì)胞融合技術(shù)的一般原理細(xì)胞融合技術(shù)的一般原理，知道，知道細(xì)胞融合的幾種誘導(dǎo)方法細(xì)胞融合的幾種誘導(dǎo)方法。2掌握細(xì)胞融合技術(shù)掌握細(xì)胞融合技術(shù)在育種上的應(yīng)用在育種上的應(yīng)用，比較細(xì)胞，比較細(xì)胞融合技術(shù)育種與常規(guī)的雜交育種的優(yōu)缺點(diǎn)。融合技術(shù)育種與常規(guī)的雜交育種的優(yōu)缺點(diǎn)。3提出自己的提出自己的單克隆抗體的制備方案單克隆抗體的制備方案，通過討論，通過討論和相互評(píng)價(jià)，在自主探究中，掌握單克隆抗體的和相互評(píng)價(jià)，在自主探究中，掌握單克隆抗體的制備技術(shù)及應(yīng)用，體驗(yàn)科學(xué)家的科學(xué)探索過程。制備技術(shù)及應(yīng)用，體驗(yàn)科學(xué)家的科學(xué)探索過程。 4、植物體細(xì)胞雜交及應(yīng)用植物

2、體細(xì)胞雜交及應(yīng)用 【重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)、難點(diǎn)】 1、細(xì)胞融合技術(shù)的一般原理，知道細(xì)胞融合的幾、細(xì)胞融合技術(shù)的一般原理，知道細(xì)胞融合的幾種誘導(dǎo)方法。種誘導(dǎo)方法。2、單克隆抗體的制備方案。、單克隆抗體的制備方案。3、植、植物體細(xì)胞雜交及應(yīng)用物體細(xì)胞雜交及應(yīng)用.一一.細(xì)胞融合技術(shù)細(xì)胞融合技術(shù)閱讀課本第30-31頁內(nèi)容，回答問題：1.什么叫細(xì)胞融合技術(shù)？什么叫細(xì)胞融合技術(shù)？ 2.常用的人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有哪幾種？哪常用的人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有哪幾種？哪一種重復(fù)性強(qiáng)，對(duì)原生質(zhì)體傷害小，方法簡單，一種重復(fù)性強(qiáng)，對(duì)原生質(zhì)體傷害小，方法簡單，可控性強(qiáng)？可控性強(qiáng)？用人工方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，并在一定條件下使融合細(xì)

3、胞用人工方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，并在一定條件下使融合細(xì)胞分化再生，形成新物種或新品種的過程。分化再生，形成新物種或新品種的過程。物理法物理法：離心、振動(dòng)、：離心、振動(dòng)、電融合技術(shù)（電刺激。傷害小，電融合技術(shù)（電刺激。傷害小，可控性強(qiáng)）可控性強(qiáng)）化學(xué)法化學(xué)法：用聚乙二醇（）誘導(dǎo)：用聚乙二醇（）誘導(dǎo)滅活的病毒滅活的病毒：仙臺(tái)病毒、：仙臺(tái)病毒、皰疹病毒皰疹病毒等等（適合動(dòng)物）（適合動(dòng)物）.動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）2個(gè)或多個(gè)動(dòng)個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病

4、毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒.用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過程細(xì)胞核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核. 細(xì)胞電融合儀.？.讀下面一段文字資料，思考以下問題：讀下面一段文字資料，思考以下問題：長期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種長期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清從動(dòng)物血清中分離出所需抗體的方法中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得。用這種方法獲得的抗體，不僅的抗體，不僅產(chǎn)量低產(chǎn)量低，而且抗體的，而且抗體的特異性差，特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏純度低，反應(yīng)不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在

5、。人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B B細(xì)胞可以細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是，但是每每個(gè)個(gè)B B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)用單個(gè)B B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。. 1、請(qǐng)從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念、請(qǐng)從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念用單個(gè)用單個(gè)B B細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分泌細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗

6、體，這種抗體一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。就叫做單克隆抗體。.1 1、如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？、如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？問題討論問題討論提示：提示：.B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合融合（只考慮兩兩融合）（只考慮兩兩融合）培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾種類型？融合細(xì)胞種類型？融合細(xì)胞幾種幾種類型類型？骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞- B- B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞多種多種雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞在具

7、有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽性專一抗體檢驗(yàn)陽性克隆上述雜交細(xì)胞克隆上述雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞檢驗(yàn)陽性細(xì)胞單克隆抗體單克隆抗體注射到小鼠體內(nèi)注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng) 該細(xì)胞繼承該細(xì)胞繼承雙親細(xì)胞雙親細(xì)胞的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能產(chǎn)生專產(chǎn)生專一抗體一抗體又能又能無限增殖無限增殖。雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？特異性強(qiáng)，靈敏度高特異性強(qiáng)，靈敏度高.腹腔注射法腹腔注射法.（三）單克隆抗體的應(yīng)用（三）單克隆抗體的應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡易、快速準(zhǔn)確、高效、簡易、快速（導(dǎo)向作用，導(dǎo)向作用，作

8、為載體，作為載體，生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈=單克隆抗體單克隆抗體+藥物，藥物，治療腫瘤）治療腫瘤）診斷乳腺癌單克隆抗體診斷乳腺癌單克隆抗體.兩個(gè)過程兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程“一二三一二三”二次篩選二次篩選篩選雜交瘤細(xì)胞、能篩選雜交瘤細(xì)胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞三個(gè)優(yōu)勢三個(gè)優(yōu)勢產(chǎn)量大、特異性產(chǎn)量大、特異性強(qiáng)、靈敏度高強(qiáng)、靈敏度高(理化性質(zhì)單一理化性質(zhì)單一)的優(yōu)勢的優(yōu)勢.三、三、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與作物育種與作物育種.雜交的兩個(gè)細(xì)胞雜交的兩個(gè)細(xì)胞用纖維素酶、果膠酶處用纖維素

9、酶、果膠酶處理細(xì)胞壁（酶解法）理細(xì)胞壁（酶解法）原生質(zhì)體、原生質(zhì)體、經(jīng)離心、振經(jīng)離心、振動(dòng)、電刺激動(dòng)、電刺激用聚乙二醇用聚乙二醇（）（）誘導(dǎo)誘導(dǎo)融合后的原生質(zhì)體融合后的原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁再生細(xì)胞壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞脫分化脫分化細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株再分化再分化（植物體細(xì)胞植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)融合完成的標(biāo)志志）植植物物細(xì)細(xì)胞胞融融合合植物植物組織組織培養(yǎng)培養(yǎng).植物體細(xì)胞雜交意義？p33細(xì)胞融合技術(shù)可以避免細(xì)胞融合技術(shù)可以避免受精過程，受精過程，在在親緣關(guān)系親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的物種間實(shí)現(xiàn)基因較遠(yuǎn)的物種間實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移，創(chuàng)造出自然界沒轉(zhuǎn)移，創(chuàng)造出自然界沒有的新物種。有的新物種。意義

10、：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，實(shí)現(xiàn)種間遺傳物質(zhì)的重組實(shí)現(xiàn)種間遺傳物質(zhì)的重組.動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這與它們動(dòng)植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這與它們雜交或融合過程有什么影響？雜交或融合過程有什么影響？問題討論問題討論動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁，動(dòng)物細(xì)胞融合過程中不動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁，動(dòng)物細(xì)胞融合過程中不須去除細(xì)胞壁和再生出細(xì)胞壁。須去除細(xì)胞壁和再生出細(xì)胞壁。.問題討論問題討論、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同？原理是否相同？相同，都是細(xì)胞膜的流動(dòng)性相同，都是細(xì)胞膜的流動(dòng)性.問題討論問題討論.免疫小鼠免疫小鼠培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞培

11、養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合融合B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體專一抗體檢驗(yàn)陽性檢驗(yàn)陽性專一抗體專一抗體檢驗(yàn)陽性檢驗(yàn)陽性注射到小鼠體內(nèi)注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)單克隆抗體單克隆抗體克隆雜交細(xì)胞克隆雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞，克隆分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞多種雜交細(xì)胞多種雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？本過程利用的那些技術(shù)？本過程利用的那些技術(shù)？動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是否注射抗原是否注射抗原（只考慮兩兩融合）培養(yǎng)（只考慮兩兩融合）培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾種

12、類型？幾液中細(xì)胞有幾種類型？幾種融合細(xì)胞？種融合細(xì)胞？（二）、單克隆抗體制備過程（二）、單克隆抗體制備過程與傳統(tǒng)制備的抗體相與傳統(tǒng)制備的抗體相比具有什么特點(diǎn)？比具有什么特點(diǎn)？.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較細(xì)胞工程細(xì)胞工程植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)質(zhì)內(nèi)容實(shí)質(zhì)內(nèi)容改變遺傳物質(zhì)、產(chǎn)生新的性狀，獲得細(xì)胞產(chǎn)品改變遺傳物質(zhì)、產(chǎn)生新的性狀，獲得細(xì)胞產(chǎn)品(使后代具有雙親使后代具有雙親的特性的特性)理論基礎(chǔ)理論基礎(chǔ)細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性;植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性;細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖誘導(dǎo)手段誘導(dǎo)手段物理法：離心

13、、振動(dòng)、電激物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇化學(xué)法：聚乙二醇物理法：離心、振動(dòng)、電激物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇化學(xué)法：聚乙二醇生物法：滅活的病毒生物法：滅活的病毒誘導(dǎo)過程誘導(dǎo)過程去細(xì)胞壁去細(xì)胞壁(纖維素酶、果膠酶纖維素酶、果膠酶)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合(獲得雜種原生質(zhì)體獲得雜種原生質(zhì)體)植物細(xì)胞培養(yǎng)植物細(xì)胞培養(yǎng)(獲得植株獲得植株)獲得分離的單個(gè)動(dòng)物細(xì)胞獲得分離的單個(gè)動(dòng)物細(xì)胞(胰蛋白酶處理胰蛋白酶處理)誘導(dǎo)融合誘導(dǎo)融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(細(xì)胞產(chǎn)品細(xì)胞產(chǎn)品)應(yīng)用應(yīng)用獲得白菜獲得白菜甘藍(lán)等雜種植物甘藍(lán)等雜種植物主要用于單克隆抗體的制備主要用于單克隆抗體的制備(雜交瘤細(xì)胞

14、雜交瘤細(xì)胞). 1.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實(shí)驗(yàn)方案抗體實(shí)驗(yàn)方案2、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？、該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中、圖中B為為_過程，常用過程，常用_作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承承_的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能_,又能又能_。1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是_3、A是從小鼠的脾臟中取得是從小鼠的脾臟中取得_,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_培養(yǎng)和培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個(gè)階段，其培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中中_

15、代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。制備單克隆抗體制備單克隆抗體B細(xì)胞細(xì)胞抗體抗體細(xì)胞融合細(xì)胞融合滅活病毒滅活病毒雙親細(xì)胞雙親細(xì)胞分泌抗體分泌抗體無限增殖無限增殖原代原代傳代傳代50B骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群足夠數(shù)量的細(xì)胞群A體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔C體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)不能，未對(duì)小鼠免疫處理不能，未對(duì)小鼠免疫處理.2.人人CD20單克隆抗體是治療一些惡性腫瘤的特效藥物，目前主要是通過培養(yǎng)單克隆抗體是治療一些惡性腫瘤的特效藥物，目前主要是通過培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方式生產(chǎn)。我國科學(xué)家已哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方式生產(chǎn)。我國科學(xué)家已 培育出世界上

16、第一頭轉(zhuǎn)入了培育出世界上第一頭轉(zhuǎn)入了CD20抗體基因的轉(zhuǎn)基因牛，可以從它產(chǎn)抗體基因的轉(zhuǎn)基因牛，可以從它產(chǎn) 的牛奶中直接提取的牛奶中直接提取CD20抗體。這項(xiàng)技術(shù)抗體。這項(xiàng)技術(shù)成熟后，有望使這一特效藥成熟后，有望使這一特效藥 的生產(chǎn)成本降至現(xiàn)在的的生產(chǎn)成本降至現(xiàn)在的1/10。請(qǐng)回答：。請(qǐng)回答： (1)單克隆抗體的制備過程需先將單克隆抗體的制備過程需先將_和和 _融合，這一過程的誘導(dǎo)方法與植物體細(xì)胞雜融合，這一過程的誘導(dǎo)方法與植物體細(xì)胞雜交不同的是交不同的是_。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在含動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在含_混合氣體的培混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，培養(yǎng)液中通常需加入養(yǎng)箱中進(jìn)行，培養(yǎng)液中通常需加入_等

17、一些天等一些天然成分。然成分。 (3)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心是轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心是_。該過程。該過程用到的工具酶有用到的工具酶有 _和和_。經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞用滅活的病毒誘導(dǎo)用滅活的病毒誘導(dǎo)95%O2加加5%CO2動(dòng)物血清動(dòng)物血清重組載體的構(gòu)建重組載體的構(gòu)建限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶限制酶)DNA連接酶連接酶.3. 野生馬鈴薯品種的植株具有較強(qiáng)的抗病、抗蟲、抗鹽堿、抗野生馬鈴薯品種的植株具有較強(qiáng)的抗病、抗蟲、抗鹽堿、抗寒能力，但塊莖不能食用。俄、德、芬蘭專家共同做實(shí)驗(yàn)研究，寒能力，但塊莖不能食用。俄、德、芬蘭專家共同做實(shí)驗(yàn)研究， 用野生馬鈴薯與馬鈴

18、薯的體細(xì)胞進(jìn)行雜交，培育出了生活能力強(qiáng)用野生馬鈴薯與馬鈴薯的體細(xì)胞進(jìn)行雜交，培育出了生活能力強(qiáng)的雜交系馬鈴薯。據(jù)圖分析回答問題：的雜交系馬鈴薯。據(jù)圖分析回答問題：(1)過程植物細(xì)胞原生質(zhì)體的分離需經(jīng)過酶解，其中過程植物細(xì)胞原生質(zhì)體的分離需經(jīng)過酶解，其中“酶解酶解”所用的酶應(yīng)該包括所用的酶應(yīng)該包括_。(2)過程可用聚乙二醇過程可用聚乙二醇(PEG)，其目的是，其目的是_。纖維素酶、果膠酶纖維素酶、果膠酶誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合.(3)請(qǐng)用文字和箭頭表示出技術(shù)過程的實(shí)驗(yàn)流程：請(qǐng)用文字和箭頭表示出技術(shù)過程的實(shí)驗(yàn)流程：_。由此過程可以看出植物細(xì)胞有形成完整個(gè)體的可能性，這是由此過程可以看出植物

19、細(xì)胞有形成完整個(gè)體的可能性，這是_的表現(xiàn)。的表現(xiàn)。(4)在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，原生質(zhì)體會(huì)再生出細(xì)胞壁。可在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，原生質(zhì)體會(huì)再生出細(xì)胞壁?？梢匀樱ㄟ^以取樣，通過_實(shí)驗(yàn)來鑒別細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來鑒別細(xì)胞壁是否已經(jīng)再生。壁是否已經(jīng)再生。(5)請(qǐng)說明運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交法的最大好處：請(qǐng)說明運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交法的最大好處：_。融合細(xì)胞融合細(xì)胞 愈傷組織愈傷組織 幼苗幼苗植物細(xì)胞具有全能性植物細(xì)胞具有全能性植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原可以克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙可以克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙.4下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請(qǐng)據(jù)圖回答：下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，

20、請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)若若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用_處理，除去處理，除去_；A、B到細(xì)胞到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是的過程中，常用的物理方法是_。融。融合完成的標(biāo)志是合完成的標(biāo)志是_.(2)若若A、B是植物細(xì)胞，則形成的是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用細(xì)胞還要應(yīng)用_技術(shù)把技術(shù)把D培養(yǎng)培養(yǎng)成植株。成植株。(3)若若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自_,然后然后用用_使其分散開來，使其分散開來，A、B到到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞的的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞的手段是手段是_，所形成的，所形成的D稱為稱為_(4)若該過程是制備單克隆

21、抗體，若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了小鼠已被注射了_，注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的，注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的_，生成了，生成了_。圖中。圖中B為為_。(5)若該過程仍是制備單克隆抗體，在若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到到C的過程中，所形成的的過程中，所形成的C有有_種，用來培養(yǎng)的種，用來培養(yǎng)的D的細(xì)胞應(yīng)該是的細(xì)胞應(yīng)該是_。從中選擇出它的方法是。從中選擇出它的方法是_培養(yǎng)，獲得培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是后，常用的培養(yǎng)方法是_和和_。纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶細(xì)胞壁細(xì)胞壁電刺激、振動(dòng)、離心電刺激、振動(dòng)、離